用于治疗耳感染的药物组合物的制作方法

背景技术：1、外耳炎是外耳道(包括耳廓)炎性疾病。外耳炎可为急性或慢性(持续性或复发性耳炎，持续3个月或更长时间)，并且可涉及一种或多种病因。从患耳炎的犬的耳道中最常分离的细菌是葡萄球菌属物种。其他通常与耳炎相关的细菌包括假单胞菌属、变形杆菌属、肠球菌属、链球菌属和大肠杆菌。某些细菌(例如葡萄球菌属和假单胞菌属)可能会产生生物被膜，尽管进行了充分的治疗，生物被膜仍可能导致持续感染，因为任何抗微生物治疗都需要破坏生物被膜才能有效清除感染。马拉色菌属酵母是犬外耳炎的另一常见成分。一些犬似乎对马拉色菌属物种产生过敏反应，导致严重不适和瘙痒。耳部感染的有效治疗包括治疗感染和炎性变化，以及首先确定导致发生耳炎的潜在因素。虽然系统性使用抗炎疗法和/或抗微生物疗法可能适用于个别患者，但局部治疗是外耳炎的主要治疗方法。大多数患耳炎的犬，无论其原因如何，都将受益于抗炎疗法。可短期使用糖皮质激素以帮助减轻疼痛和肿胀，从而有助于提高耳朵清洁和药物治疗的依从性。糖皮质激素还有助于破坏生物被膜的形成并防止慢性耳部变化的发展。除非有必要，否则不鼓励长期或依赖糖皮质激素治疗耳疾病。通常，不鼓励将系统性抗生素疗法作为治疗外耳炎的一线疗法。参见j.bajwa,canvet j.2019jan；60(1):97–99,the merck veterinary manual,8th edition,1998,pp372-376和aziz等人,asian pacific journal of tropical biomedicine,volume 6,issue 5,2016,pp 390-395。2、(硫酸庆大霉素、倍他米松戊酸酯和克霉唑软膏)适用于治疗与对庆大霉素敏感的酵母(厚皮马拉色菌)和/或细菌相关的犬急慢性外耳炎。每克耳用软膏含有硫酸庆大霉素，usp相当于3mg庆大霉素碱；倍他米松戊酸酯，usp相当于1mg倍他米松；和10mg克霉唑，usp在包含增塑的烃凝胶的矿物油基体系中。每天分两剂给药7天。参见1993年6月9日批准的nada 140-8963、耳用混悬剂(硫酸庆大霉素、糠酸莫米松一水合物和克霉唑，耳用混悬剂)适用于治疗由酵母(厚皮马拉色菌)和细菌(假单胞菌属物种[包括铜绿假单胞菌]、凝固酶阳性葡萄球菌属、粪肠球菌、奇异变形杆菌和β-溶血性链球菌)的敏感菌株引起的犬外耳炎。每克耳用混悬剂含有硫酸庆大霉素，相当于3mg庆大霉素碱；糠酸莫米松一水合物，相当于1mg糠酸莫米松；和10mg克霉唑，在包含增塑的烃凝胶的矿物油基体系中。每日一剂给药7天。参见产品说明书和2003年1月9日的nada 141-177freedom of information summary。4、耳用混悬剂(奥比沙星、糠酸莫米松一水合物和泊沙康唑混悬剂)是一种兽用药品，用于治疗与酵母(厚皮马拉色菌)和细菌(凝固酶阳性葡萄球菌属、铜绿假单胞菌和粪肠球菌)的敏感菌株相关的犬外耳炎。每克耳用混悬剂含有10mg奥比沙星；糠酸莫米松一水合物，相当于1mg糠酸莫米松；和1mg泊沙康唑。每日一剂给药7天。参见2010年2月18日的nada 141-266foi和wo 2006/020689。5、(在美国被称为)是用于治疗由两种微生物引起的短暂或复发性耳感染(外耳炎)的兽用药物，这两种微生物是：伪中间葡萄球菌(细菌)和厚皮马拉色菌皮炎(酵母)。含有三种活性物质：氟苯尼考、特比萘芬和莫米松。一剂(1ml)neptra含有：16.7mg氟苯尼考、16.7mg盐酸特比萘芬(相当于14.9mg特比萘芬碱)和2.2mg糠酸莫米松。还含有碳酸丙烯酯、丙二醇、乙醇(96％)、聚乙二醇8000和纯水作为辅料。产品装在一次性密封管中，装有1ml溶液。的推荐剂量为每只受感染的耳朵一个单剂量容器(即1ml溶液)。被认为对动物和人都具有严重的眼睛刺激潜力。参见ema/560411/2019、emea/v/c/004735、2019年10月更新的european medicines agency，以及2021年9月24日访问的noah compendium(http://www.noahcompendium.co.uk)。也被称为耳溶液。参见2015年9月20日的nada 141-440freedom ofinformation summary。6、是一种兽用药物，其含有三种活性物质：特比萘芬、氟苯尼考和倍他米松醋酸酯。用于治疗由伪中间葡萄球菌(细菌)和厚皮马拉色菌皮炎(酵母)引起的短暂或复发性耳感染(外耳炎)。耳用凝胶每ml含有10mg氟苯尼考、10mg特比萘芬和1mg倍他米松醋酸酯(相当于0.9mg倍他米松碱)，呈灰白色至微黄色透明凝胶。该产品含有丁羟甲苯(e 321)、羟丙甲纤维素、卵磷脂、油酸、碳酸丙烯酯和甘油缩甲醛作为辅料。用治疗需间隔七(7)天分两剂给药。参见ema/315814/2014、emea/v/c/003753、2014年6月的european medicines agency。7、和用于治疗与细菌(伪中间葡萄球菌)和酵母(厚皮马拉色菌)的敏感菌株相关的犬外耳炎。这些兽用药物的一个缺点是，它们的一些活性化合物不是对抗引起外耳炎的细菌或真菌的最佳药物。8、需要一种用于在动物中治疗耳炎的安全的组合物，其具有广泛的抗微生物功效，并且每只感染的耳朵给药一次。技术实现思路1、本发明人确定了所选活性化合物的组合，其形成了显示出多个有利特性的药物组合物。因此，本发明涉及：2、一种用于在动物中治疗耳感染的药物组合物，其包含3、a)有效量的庆大霉素或其药学上可接受的盐；4、b)有效量的泊沙康唑；5、c)有效量的莫米松或其药学上可接受的盐；和6、d)药学上可接受的载体。7、本发明涉及包含庆大霉素、泊沙康唑和莫米松的药物组合物。该组合物可用于在动物中，尤其是在犬中治疗耳感染。8、这三种活性成分(庆大霉素、糠酸莫米松、泊沙康唑)以更高的浓度与辅料的独特组合，形成了一种稳定、有效的产品，可通过单剂量给药治疗耳感染。9、与用于治疗耳感染的已知药物相比，要求保护的药物组合物提供多个优势。10、优势11、要求保护的包含三种活性化合物的组合物的主要优势在于，其仅需要一次给药来在动物/犬中治疗或治愈耳感染。此外，要求保护的组合物可以配制成稳定的混悬剂，在处理该组合物时不存在潜在的不利安全问题。12、与之前的需要多剂量给药才能实现治疗的耳用治疗(例如和)相比，要求保护的组合物可作为单剂量治疗进行给药。13、当要求保护的组合物施用于动物的耳朵时，足够的庆大霉素保留在耳道中，以防止庆大霉素抗性细菌的传播。14、庆大霉素(在所要求保护的组合物中使用的抗生素)具有比氟苯尼考(在&中使用的抗生素)更宽的抗微生物谱。糠酸莫米松具有比倍他米松(的抗炎成分)更大的抗炎效力和更长的持续时间。15、要求保护的药物组合物是自防腐制剂，因此不需要防腐剂。它在货架上长时间保持稳定。基于加速老化研究，已确定该药物组合物将在货架上保持稳定36个月。该药物组合物也可储存在可多次打开和关闭的多剂量瓶内。已经证明，一旦被用户打开，该药物组合物在3个月内是稳定的。这一特点为兽医在施用制剂时提供了方便。该多剂量容器最多可治疗20只动物，同时减少了每只动物治疗过程中产生的包装废弃物。16、要求保护的制剂的临床反应迅速(在7天内)，并持续至少1个月。17、活性药物成分(api)在治疗后45天仍残留在耳中。18、庆大霉素、糠酸莫米松和泊沙康唑耳用混悬剂用于在犬中治疗与庆大霉素敏感细菌(链球菌属物种、伪中间葡萄球菌、β-溶血性犬链球菌、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、变形杆菌属物种、奇异变形杆菌、肠球菌属物种)和泊沙康唑敏感真菌(厚皮马拉色菌)的敏感菌株相关的外耳炎。要求保护的制剂对由多种细菌和真菌引起的耳感染有效。19、庆大霉素是一种由绛红小单孢菌或棘孢小单孢菌发酵产生的广谱氨基糖苷类抗生素。庆大霉素是由四种主要成分(c1、c1a、c2和c2a)和几种次要成分组成的抗生素复合物。该试剂不可逆地与细菌30s核蛋白体亚单位结合。具体而言，该抗生素位于30s亚单位内的16s rrna和s12蛋白之间。这导致对翻译起始复合物的干扰、对mrna的错译，从而阻碍蛋白质合成并导致杀菌效果。参见pubchem https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/gentamicin。20、莫米松是糖皮质激素家族中的一种合成类固醇激素。糖皮质激素是有效的抗炎剂。它还具有止痒和收缩血管的作用。它被局部用于治疗皮质类固醇反应性皮肤疾病，例如银屑病和特应性皮炎。糠酸莫米松是一种抗炎皮质类固醇，其化学名称为9,21-二氯-11(β),17-二羟基-16(α)-甲基孕甾-1,4-二烯-3,20-二酮17-(2糠酸酯)。它几乎不溶于水；微溶于甲醇、乙醇和异丙醇；溶于丙酮和三氯甲烷；并且可自由溶于四氢呋喃。其在辛醇与水之间的分配系数大于5000。莫米松可以以各种水合、结晶和对映异构体形式存在，例如一水合物。21、泊沙康唑是具有抗真菌活性的广谱第二代三唑化合物。泊沙康唑强烈抑制14-α去甲基化酶(一种细胞色素p450依赖性酶)。抑制14-α-去甲基化酶可防止羊毛甾醇转化为麦角固醇，麦角固醇是真菌细胞壁的重要组成部分。麦角固醇合成的抑制改变了真菌细胞膜的组成和完整性，改变了膜的渗透性，并最终导致真菌细胞裂解。与其他唑类抗真菌药物相比，泊沙康唑是一种显著更强效的固醇14-α去甲基化酶抑制剂。参见pubchem。22、有效量的活性成分，(即庆大霉素、泊沙康唑或莫米松)是以单剂量在动物的耳朵中治疗耳感染所需的活性成分的量。23、药学上可接受的载体是能够将活性成分运输至患者身上或体内需要的位置并与制剂的其他成分相容的材料。药学上可接受的载体的示例为矿物油、十四酸异丙酯甘油、二甲基乙酰胺、硫代甘油、聚山梨醇酯、丙二醇、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、三乙酸甘油酯、乙酸纤维素、十四酸异丙酯、二氧化硅、硬脂醇、二甘醇单乙醚、油、水或其混合物。24、矿物油是一种透明、无气味的液体，是各种化妆品和个人护理产品的常见成分。矿物油由高度精炼、纯化和加工的石油制成。参见美国药典参考1443952和cas#8012-95-1。矿物油也称为液体石蜡油(例如，cas编号：8042-47-5，通常以6vr(penreco)、52(exxon mobile)和(sonneborn)的形式提供)。25、可以加入到根据本发明的组合物中的增稠剂(也称为增粘剂)包括但不限于羧乙烯聚合物、卡拉胶、羟乙基纤维素、锂皂石和纤维素醚的水溶性盐(例如羧甲基纤维素钠和羧甲基羟乙基纤维素钠)、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、海藻酸钠、卡波姆和聚维酮。也可以使用天然胶，例如阿拉伯胶(acacia)、刺梧桐胶、黄原胶、阿拉伯胶(gumarabic)和黄蓍胶。其他增稠剂包括胶态硅酸镁铝或细二氧化硅，其可用作增稠剂的一部分以进一步改善质地。本发明的组合物可包含25％至45％w/v的增稠剂。26、优选的增稠剂是50w(bristol-myers squibb)，一种增塑的烃凝胶。50w含有95％矿物油中的5％聚乙烯。聚乙烯是一种具有高分子量和高熔点的惰性碳氢化合物。它被用作增稠剂，以增加矿物油的粘度，从而增加药品的粘度。另一种优选的增稠剂是plw增塑烃凝胶(hansen&rosenthal)。27、最低抑制浓度(mic)被定义为抑制培养物中可见细菌生长的抗微生物剂的最低浓度。从治疗角度而言，该值用于推断抗微生物剂在感染部位被视为有效必须超过的浓度。28、“敏感”mic折点是一个体外确定的值(单位：μg/ml)，应用于临床微生物学，以表明细菌分离物对特定的抗微生物剂敏感。敏感类别是指由该生物体引起的感染可通过推荐的给药方案进行适当治疗的类别。兽医使用对于抗微生物药的敏感性来指导适当的药物选择。29、在本发明的实施方案中，庆大霉素或其药学上可接受的盐的有效量为约0.40％至约1.00％w/v的量。30、在本发明的实施方案中，泊沙康唑的有效量为约0.15％至约0.35％w/v的量。31、在本发明的实施方案中，莫米松或其药学上可接受的盐的有效量为约0.15％至约0.35％w/v的量。32、在本发明的实施方案中，药物组合物进一步包含增稠剂或增粘剂。33、在本发明的实施方案中，增稠剂是增塑的烃凝胶。34、在本发明的实施方案中，增塑的烃凝胶是95％矿物油中的5％聚乙烯。35、在本发明的实施方案中，增稠剂的量为约25％至40％w/v、约25％至45％w/v、约28％至35％w/v或约40％。36、在本发明的实施方案中，药物组合物为混悬剂。37、在本发明的实施方案中，药学上可接受的载体为矿物油。38、在替代实施方案中，药学上可接受的载体为甘油、二甲基乙酰胺、硫代甘油或其混合物。39、在替代实施方案中，药学上可接受的载体为甘油、聚山梨醇酯、丙二醇、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠、水或其混合物。40、在替代实施方案中，药学上可接受的载体为三乙酸甘油酯、乙酸纤维素、硫代甘油或其混合物。41、在替代实施方案中，药学上可接受的载体为十四酸异丙酯、二氧化硅、硬脂醇、二甘醇单乙醚或其混合物。42、在本发明的实施方案中，庆大霉素为硫酸庆大霉素。43、在本发明的实施方案中，莫米松是糠酸莫米松一水合物。44、在本发明的实施方案中，药物组合物在多剂量容器中长时间储存时是稳定的。45、在本发明的上下文中，长时间为约36个月。46、在本发明的另一实施方案中，药物组合物储存在多剂量容器中。47、在本发明的实施方案中，多剂量容器含有约10剂至约100剂，优选至少20剂。48、本发明的替代实施方案是在动物中治疗耳感染的方法，其包括向动物的耳朵施用任何一种上述药物组合物。49、在本发明的实施方案中，药物组合物给药一次。50、在本发明的实施方案中，动物是犬。51、在本发明的实施方案中，动物是猫。52、在本发明的实施方案中，耳感染由伪中间葡萄球菌、β-溶血性链球菌属物种、铜绿假单胞菌、大肠杆菌、变形杆菌属物种、肠球菌属物种或厚皮马拉色菌中的一种或多种引起。53、实施例54、实施例1-药物组合物的制备55、按照以下工艺生产一批次175l(153kg)的药物制剂：56、1.将约80％的石蜡液体加入主配料罐。57、2.将约8％的石蜡液体加入预混合容器。58、3.将所需量的硫酸庆大霉素加入步骤2的预混合罐。用均质器混合约5分钟。59、4.添加莫米松60、a)称出所需量的糠酸莫米松一水合物加入5l瓶中。61、b)向瓶中加入2kg矿物油(石蜡液体)并摇晃，直至糠酸莫米松一水合物充分分散。62、c)将瓶子的内容物转移至预混合容器。63、d)用1kg矿物油(石蜡液体)冲洗瓶子三次，并将冲洗液转移至预混合容器。64、e)用均质器将预混合罐的内容物混合约5分钟。65、5.将所需量的泊沙康唑加入预混合容器中。用均质器混合约5分钟。66、6.在混合的同时将预混合物加入主配料罐。用部分石蜡液体冲洗预混合罐，并将冲洗液加入主配料罐。67、7.用在线再循环均质器将主配料罐均质化至少60分钟。68、8.在混合的同时，向批次产品中连续加入所需量的增塑烃凝胶。持续混合约18分钟。在主配料罐中保持产品温度≤35℃69、9.继续用低剪切搅拌器混合本体混悬剂，同时用在线再循环均质器开始均质化至少70分钟。70、10.完成步骤9之后，在填充过程中继续用低剪切搅拌器混合本体混悬剂。71、11.将批次产品填入hdpe瓶内，并用盖子封口。72、所得制剂见表1。73、表174、75、a基于纯度调整加入的硫酸庆大霉素，以达到每ml产品8.6mg庆大霉素碱。76、b 2.1的糠酸莫米松相当于每ml产品2.2mg糠酸莫米松一水合物77、实施例2-试验性耳清除研究中的庆大霉素浓度78、根据在美国开展的庆大霉素最低抑制浓度(mic)研究，庆大霉素抗性铜绿假单胞菌的最高mic为64μg/ml。进行了一项耳清除研究，以评估耳垢中庆大霉素的浓度。确定了耳垢中检测到的庆大霉素浓度足够高，足以有效对抗庆大霉素抗性铜绿假单胞菌。79、表280、81、实施例3-药物组合物在犬中治疗耳感染的效果82、本研究的目的是评估单剂量(0.8ml)的试验性兽用产品(ivp)的有效性和安全性，该试验性兽用产品是一种耳用混悬剂药物组合物(按照实施例1所述制备)，其含有8.6mg/ml庆大霉素、2.1mg/ml糠酸莫米松和2.6mg/ml泊沙康唑，可在客户所拥有的犬的多个位点治疗细菌性和/或真菌性外耳炎。将该功效与注册产品(elanco europe ltd.)(对照产品)进行比较。83、材料和方法84、本项符合gcp标准的多中心现场研究为阳性对照研究，并对研究人员设盲。在316只患外耳炎的客户拥有的狗身上进行研究。153只动物接受了ivp治疗，另有163只动物接受了对照产品治疗。每个治疗组的动物平均年龄为5.7岁，体重分别为24.1kg(ivp组)和22.4kg(cp组)。在研究日(sd)第0天，至少一只耳朵表现为使用otis-3评分标准(参见nuttall和bensignor,vet dermatol 2014；25:530)的耳检查评分至少为5分的动物符合入选资格。在sd 0进行体检、耳检查(耳评分)、拭子取样和发炎耳的治疗。在sd 7、14±2、28±2和42±2进行体检和耳评分。对照组的动物也根据制造商的说明在sd 7接受治疗。在sd 28±2采集耳拭子样本。在sd 7和sd 14，仅在治疗失败的情况下采集耳拭子样本，在sd 42仅在复发的情况下采集耳拭子样本。如果耳炎恶化，也可在sd 7后的任何时间点采集耳拭子样本。85、主要疗效标准为治疗成功率，其定义如下：在sd 14总分≤4，并在sd 28总分≤3。在sd 28未成功治疗或在sd 28之前退出研究(因为需要对耳炎进行替代治疗)的狗被归类为“治疗失败”。次要疗效标准为中间治疗成功率(在sd 14评分≤4)、复发率(在sd 42评分≥5)和sd28的微生物治愈率。86、结果87、用庆大霉素、糠酸莫米松和泊沙康唑耳用混悬剂治疗的犬在sd 28的治疗成功率为89.5％。与使用治疗的犬的治疗成功率(87.2％)相比，该比率显著非劣(p<0.0001)。用庆大霉素、糠酸莫米松和泊沙康唑耳用混悬剂治疗的犬在sd 14的中间治疗成功率为93.7％。与使用治疗的犬的中间治疗成功率(90.2％)相比，该比率显著非劣(p<0.0001)。在sd 28用庆大霉素、糠酸莫米松和泊沙康唑耳用混悬剂治疗成功的犬在sd 42的复发率为4.7％。与使用治疗的犬的复发率(1.7％)相比，该比率显著非劣(p＝0.0002)。在sd 28，用庆大霉素、糠酸莫米松和泊沙康唑耳用混悬剂治疗的犬对厚皮马拉色菌的微生物治愈率为81.1％，对伪中间葡萄球菌的微生物治愈率为73.5％。在sd28，在间隔7天用治疗两次的犬中，厚皮马拉色菌的微生物治愈率为83.8％，伪中间葡萄球菌的微生物治愈率为90％。铜绿假单胞菌、大肠杆菌、犬链球菌和奇异变形杆菌的微生物治愈率在ivp组中为60％至100％，在cp组中为42.9％至100％。88、结论89、以0.8ml的单剂量给药的含有8.6mg/ml庆大霉素、2.1mg/ml糠酸莫米松和2.6mg/ml泊沙康唑的新的耳用混悬剂对犬外耳炎有效，且在测试剂量下具有良好的耐受性和安全性。与在sd 0和sd 7使用的两种治疗相比，在sd 28的治疗成功率、在sd 14的中间治疗成功率和在sd 42的整体治疗成功率均表现出显著的非劣效性。90、仅用一剂含有庆大霉素、莫米松和泊沙康唑的ivp药物组合物就可获得这些结果，而对照产品的结果需要两剂，间隔7天。91、实施例3-稳定性92、评估实施例1的药物组合物(见上文表1)在加速条件下的长期稳定性。将组合物包装在35ml白色hdpe瓶内，并加盖ldpe帽。每瓶的填充量不少于24ml，因此从每瓶可取出至少20剂0.8ml。使用1.0ml注射器，通过ldpe压入式瓶适配器(piba)移除每一剂。93、瓶子在加速条件(40℃/75％相对湿度(rh))、冷藏条件(5℃/环境湿度)和长期储存条件(30℃/65％rh和30℃/75％rh)下保存12个月。94、在0、6和12个月的时间点从每一瓶中取样。分析样品的外观、密度、粘度、含水量、颗粒大小分布、重量变化以及庆大霉素、糠酸莫米松和泊沙康唑的鉴定和分析。还对样品进行了api颗粒形态(即颗粒是否仍为晶体)和api颗粒凝聚的评估。95、样品剂量的外观最初被描述为平滑、均匀的白色至灰白色粘性混悬剂。在整个测试过程中，稳定性测试中的每个样品在适用的每个条件下保持这种外观。96、样品的初始密度值为0.850g/ml和0.900g/ml(根据ph.eur.2.2.5在20℃下测量)，在整个稳定性研究中在所有条件下始终保持不变。97、粘度(用brookfield viscometer测定)最初被确定为800至2200厘泊。在整个稳定性测试过程中，所有条件下的粘度均保持在该范围内。98、通过karl fischer法评估水含量，初步确定为低于1.0％。在加速和长期条件下，水含量略有提高，从0.1％到0.4％。数据表明，组合物在保质期内未吸收足以影响组合物的功效和安全性的水。99、通过激光衍射测量颗粒尺寸。在加速、冷藏和长期条件下，在d10、d50和d90下测得的颗粒尺寸分布在12个月内保持一致。数据表明，在冷藏、长期和加速条件下，d50下的颗粒尺寸分布在整个测试期间保持稳定。100、光学显微数据测量颗粒是否为晶体(大部分≤10μm)和团聚体的数量(即颗粒>250μm)。所有样品均符合结晶度标准，在加速、冷藏和长期条件下，12个月内均未发现任何团聚体。这些数据表明，即使在加速条件下也不会形成团聚体。101、在加速、冷藏和长期条件下，12个月内重量变化＜0.5％。重量没有变化表明容器封闭系统作为包装材料是足够的。102、泊沙康唑和糠酸莫米松的鉴定和降解通过与uv检测器耦合的超高压液相色谱uplc/uv进行。追踪的泊沙康唑的降解产物是甲酸酯。就糠酸莫米松而言，追踪了17-醇和化合物e。在加速、冷藏和长期条件下，12个月内未观察到特定或非特定的糠酸莫米松和泊沙康唑降解产物。103、庆大霉素的鉴定和检测采用微生物滴定法。在加速、冷藏和长期条件下，庆大霉素含量在12个月内保持在90％-105％。104、现有数据表明，化合物在关键质量属性方面未发生任何显著变化；不需要特殊的存储条件。105、实施例4-使用中稳定性研究106、进行了使用中稳定性研究，以评估实施例1的制剂在模拟使用条件下长达3个月的稳定性。样品瓶的初始填充量为24ml。为了给药正确数量的产品，将压入式瓶适配器(piba)插入瓶的颈部，以便通过注射器给药。每瓶摇匀后，用注射器将0.8ml产品分十等份(总计＝8ml)取出。然后将瓶子储存在30℃/65％rh下，并在3个月时进行测试。表2总结了初始样本和3个月样本的结果。107、108、还对实施例1制剂的老化样品(即在24个月的建议保质期结束时)进行了使用中稳定性研究。该批次的样品瓶遵循与前一批次相同的使用程序。每瓶摇匀后，用注射器将0.8ml产品分十等份(总计＝8ml)取出。然后将瓶子在30℃/65％rh下储存24个月，并在建议的24个月保质期后最多3个月进行测试。结果总结于表3。109、110、111、尽管在老化样品中观察到庆大霉素含量较低(92.5％ lc)，但仍在该产品的预期保质期范围内。研究表明，庆大霉素、糠酸莫米松和泊沙康唑耳用混悬剂在首次使用后最长3个月内以及产品在建议的长期储存条件(30℃/65％rh)下储存在hdpe瓶内的保质期结束时是稳定的。112、根据加速稳定性数据，预计保质期为36个月。