基于胞外多糖riclin基卡泊三醇纳米乳剂的制备方

本发明涉及医药，尤其涉及基于胞外多糖riclin基卡泊三醇纳米乳剂的制备方法及应用。背景技术：1、银屑病是一种常见的慢性免疫介导的炎症性疾病，主要表现症状是表皮细胞异常增生出现大小不等的丘疹、红斑、表面覆盖着银白色鳞屑，边界清楚，常出现在头皮、四肢伸侧及背部。银屑病可以分为：寻常型银屑病、脓疱型银屑病、红皮病型银屑病、关节病型银屑病。2、银屑病的临床病理主要是角元细胞增生、血管增生和炎症反应，因此尚无根治的方法，也无特效方法。银屑病与多种疾病有关，例如银屑病关节炎、炎症性肠病、心血管疾病、糖尿病、感染、恶性肿瘤等。由于寻常型银屑病容易反复发作，且发病率有逐年上升的趋势，病人无法治愈，是当下医学界的一大难点。3、由于全身用药的危险性，因此局部治疗是银屑病治疗的基石。然而，常规外用药物制剂在增厚的角质层中的渗透作用并不令人满意。临床研究表明，卡泊三醇(ct)药物剂型中的乳膏更受患者的欢迎，并能有效提高患者的依从性。虽然ct显示出明显的抗银屑病作用和更高的依从性，但ct通常导致皮肤刺激的高发生率，限制了其长期临床使用。此外，鳞片和斑块的形成和角质层的增厚仍然是ct经皮给药的主要障碍。因此，进一步提高ct的透皮通透性和减少皮肤刺激仍然是优化局部疗效的关键。技术实现思路1、基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种基于胞外多糖riclin基卡泊三醇纳米乳剂的制备方法及应用，本发明所述riclin基卡泊三醇纳米乳剂稳定性好，抗银屑病作用强，吸收迅速，对机体刺激性小。2、本发明提出了一种riclin基卡泊三醇纳米乳剂，其原料包括：卡泊三醇、油、含有乳化剂的水溶液；其中，乳化剂由胞外多糖riclin与聚乙二醇按照重量体积比12.5mg：0-0.02ml组成；胞外多糖riclin的结构式如式(i)所示；3、4、r为-occh2ch2cooh或-h，n为大于0的整数。5、上述胞外多糖riclin的分子量为2.0×106-3.0×106da；优选乳化剂的分子量为2.5×106da。6、胞外多糖riclin是从土壤杆菌zcc3656中提取获得的。其分子链中含有大量的羟基和羧基，具有良好的生物相容性和生物降解性。7、当r＝h时，胞外多糖riclin的提取方法包括如下步骤：取土壤杆菌agrobacteriumsp.zcc3656，保藏编号为cctcc no:m 2018797，依次经活化、种子培养、发酵培养；向发酵液中加入乙醇水溶液进行醇沉，取沉淀干燥得到胞外多糖riclin粗品；取胞外多糖riclin粗品的水溶液，加入无机碱进行反应，然后取反应后的上清液，用乙醇水溶液进行醇沉，取沉淀得到胞外多糖riclin。8、上述胞外多糖riclin的提取方法中，发酵培养的温度为28-32℃，发酵培养的时间≥2天；发酵液与乙醇水溶液的体积比1:2.5-5；反应后的上清液与乙醇水溶液的体积比为1:2.5-5；乙醇水溶液中，乙醇的体积分数为90-98％；加入无机碱进行反应时，反应温度为100-110℃，反应时间为15-30min，反应的ph为8.8-9.2，反应压力为2-5.8kpa。9、上述胞外多糖riclin粗品中含有大量蛋白和其它杂质，加入无机碱进行反应可以去除蛋白，并同时去除琥珀酰基团，此法可以快速去除蛋白，缩短提纯时间，适合应用于工业化生产。10、当r＝occh2ch2cooh时，胞外多糖riclin可以从市场购得，也可以按照文献(yangy,sun x,zhao y,ge w,ding z,liu j,wang l,xu x,zhang j.anti-tumor activity andimmunogenicity ofa succinoglycan riclin.carbohydr polym.2021mar 1；255:117370.doi:10.1016/j.carbpol.2020.117370.epub 2020nov 12.pmid:33436203)中记载的方法对胞外多糖riclin粗品进行去蛋白纯化处理。11、优选地，水溶液中胞外多糖riclin的浓度为10-15mg/ml；更优选水溶液中胞外多糖riclin的浓度为12.5mg/ml。12、优选地，油和水溶液的体积比为5-7:3-5。13、优选地，聚乙二醇为聚乙二醇400。14、优选地，所述油为药学可接受的油。15、优选地，所述油为葵花籽油、大豆油、玉米油、橄榄油中的至少一种。16、优选地，riclin基卡泊三醇纳米乳剂中，液滴的粒径≤100nm；优选液滴的粒径≤75nm。17、优选地，riclin基卡泊三醇纳米乳剂中，卡泊三醇的终浓度为5-10mg/ml；优选卡泊三醇的终浓度为5mg/ml。18、上述水可以为去离子水、纯化水、无菌水等。19、本发明选用胞外多糖riclin和聚乙二醇作为共乳化剂，胞外多糖riclin为主乳化剂、聚乙二醇为辅助乳化剂，二者以适宜比例相互配合，并结合适宜比例的水、油形成riclin基卡泊三醇乳剂，将难溶于水的卡泊三醇均匀分散在乳剂体系中，乳剂中液滴粒径很小呈纳米级别，最小约10nm，几乎达到了分子尺度，纳米级别的乳剂有助于药物卡泊三醇渗透入银屑病角质层，提高治疗效率，同时能减少银屑病的炎症反应、降低药物卡泊三醇对皮肤的刺激性；riclin基卡泊三醇乳剂具有良好的生物相容性和优越的抗银屑病反应，满足临床需求，为银屑病的治疗带来更安全、更有效的制剂配方。20、本发明还提出了上述riclin基卡泊三醇纳米乳剂的制备方法，包括如下步骤：将含有乳化剂的水溶液与溶解有卡泊三醇的油混匀，超声均质得到riclin基卡泊三醇纳米乳剂。21、优选地，混匀温度为室温。22、优选地，混匀方式为搅拌混匀，搅拌速度为1000-3000rpm，搅拌时间为20-40min。23、优选地，超声均质的温度为0-10℃。24、优选地，超声均质的时间为4-10min，超声振幅为10-30％。25、本发明选用适宜的制备方法和工艺参数可以制得粒径很小的riclin基卡泊三醇纳米乳剂，且使得乳剂具有良好的乳化稳定性能。26、本发明还提出了上述riclin基卡泊三醇纳米乳剂在制备治疗银屑病药物中的应用；优选地，银屑病为寻常型银屑病。27、有益效果：28、1.本发明选用胞外多糖riclin和聚乙二醇作为共乳化剂，胞外多糖riclin为主乳化剂、聚乙二醇为辅助乳化剂，二者以适宜比例相互配合，并结合适宜比例的水、油，适宜的制备工艺制得riclin基卡泊三醇乳剂，创新性的将难溶于水的卡泊三醇均匀分散在乳剂体系中，乳剂中液滴粒径很小呈纳米级别，最小约10nm，几乎达到了分子尺度，纳米级别的乳剂有助于药物卡泊三醇渗透入银屑病角质层，提高治疗效率，同时能减少银屑病的炎症反应、降低药物卡泊三醇对皮肤的刺激性；riclin基卡泊三醇乳剂具有良好的生物相容性和优越的抗银屑病反应，满足临床需求，为银屑病的治疗带来更安全、更有效的制剂配方；29、2.本发明所述riclin基卡泊三醇乳剂的液滴为水包油型，且具有缓释作用；本发明所述riclin基卡泊三醇乳剂的乳化作用持久稳定；胞外多糖riclin生物相容性好，且对环境无不利影响。