发布日期:2024-06-10 浏览次数:次
本发明涉及农业,更具体的说是涉及一种叶用型辣木嫩芽无菌快繁再生成苗培养基及培养方法。背景技术:1、辣木(moringa oleifera)属辣木科辣木属植物,别名油辣木、辣根树、鼓槌树、洋椿树等,系多年生热带速生小乔木,原产印度、非洲等国,因其根有辛辣味,得名辣木。辣木含有丰富的营养物质,具有独特的食用与药用价值,也被誉为“神奇之树”。辣木生长快,耐干旱,适生面广,目前在我国的云南、海南、广东、福建、湖南和广西等地均有规模化种植,其中云南种植面积最大,占全国的40%左右。2、辣木栽培和作为药用的历史在2000年以上,具有退热、消炎、排石、利尿等功能。印度和非洲国家常常将辣木用于治疗糖尿病、高血压、心血管病、肥胖症、皮肤病等疾病。3、但是,生产上种植的辣木有90%以上是采用种子育苗,存在性状不稳定、抗病差、产量低等问题,有极少部分用扦插、高压苗,但需要材料多不能大批量运用推广。4、因此,提供一种叶用型辣木嫩芽无菌快繁再生成苗培养基及培养方法是本领域技术人员亟需解决的问题。技术实现思路1、有鉴于此,本发明提供了一种叶用型辣木嫩芽无菌快繁再生成苗培养基及培养方法。可保证优良单株的稳定性及品质,对促进辣木良种单株的种苗工厂化大批量快繁、推广具有重要意义。2、为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:3、一种叶用型辣木嫩芽无菌快繁再生成苗培养基组合,包括:4、无菌腋芽诱导生长培养基:1/2ms、iba0.5~0.7mg/l、naa0.15~0.25mg/l、蔗糖20~25g/l、琼脂4.5~6.5g/l,ph:6.3~6.5;5、分化丛生芽诱导培养基:ms、6ba0.5~0.8mg/l、naa0.05~0.1mg/l、iaa0.05~0.1mg/l、tdz0.003~0.008mg/l、蔗糖25~30g/l+琼脂4.5~6.5g/l,ph:6.3~6.5;6、稳定分化丛生芽培养基:ms、6ba0.5~0.7mg/l、naa0.03~0.07mg/l、蔗糖25~30g/l、琼脂4.5~6.5g/l,ph:6.3~6.5;7、生根培养基:1/2ms、lba0.1~0.6mg/l、naa0.05~0.2mg/l、蔗糖15~20g/l+琼脂6~7g/l、新鲜七孔藕8~12g/l,ph;5.8~6.0;8、稳定生根培养基:1/2ms、iba0.1~0.6mg/l、naa0.05~0.2mg/l、蔗糖15~20g/l、琼脂5~7g/l、新鲜七孔藕8~12g/l、炭0.5~0.6g/l,ph:5.6~5.8。9、优选的:包括:10、无菌腋芽诱导生长培养基:1/2ms、iba0.6 mg/l、naa0.2 mg/l、蔗糖20g/l、琼脂5g/l,ph:6.5;11、分化丛生芽诱导培养基:ms、6ba0.6 mg/l、naa0.1 mg/l、iaa0.1 mg/l、tdz0.003mg/l、蔗糖25g/l+琼脂5g/l,ph:6.5;12、稳定分化丛生芽培养基:ms、6ba 0.5mg/l、naa0.03 mg/l、蔗糖30g/l、琼脂5g/l,ph:6.5;13、生根培养基:1/2ms、lba0.2 mg/l、naa0.1 mg/l、蔗糖20g/l+琼脂6.5g/l、新鲜七孔藕8~9g/l,ph;5.8;14、稳定生根培养基:1/2ms、iba0.2 mg/l、naa0.1 mg/l、蔗糖20g/l、琼脂6g/l、新鲜七孔藕8~9g/l、炭0.6g/l,ph:5.6。15、本发明还提供了基于上述的培养基组合的培养方法,包括以下步骤:16、(1)外植体采集与处理;17、(2)转接培养,得无菌腋芽;18、(3)无菌腋芽分化丛生芽,得稳定丛生芽;19、(4)将稳定丛生芽,接种培养,得稳定生根苗;20、(5)配制移栽基质;21、(6)炼苗移栽;22、(7)幼苗驯化管理。23、优选的:步骤(1)具体为:选择嫩芽茎段作为外植体;去除叶片,切成3~4cm带腋芽的茎段,洗净,取出全部单芽在切口处再切去0.5~0.7cm,消毒,得消毒后的带腋芽茎段,备用;24、洗净:将带腋芽的茎段,放入小筛盆内利用水的冲力不断滚动冲洗20min,10g洗衣粉兑水0.8l漂洗3~5min,自来水下冲洗40min;25、消毒:用75%酒精灭菌30s后用无菌水冲洗2次,再用0.1%的升汞灭菌8min,无菌水冲洗3次后滤干水。26、进一步的,选择嫩芽茎段的具体标准为:生长健壮,腋芽饱满,无病虫害的。27、优选的:步骤(2)具体为:将步骤(1)消毒后的带腋芽茎段接种到无菌腋芽诱导生长培养基上,培养条件为每天光照10h,温度为25~27℃,光照强度为1500~2000lx,接种培养20~23天抽生出无菌腋芽。28、优选的:步骤(3)具体为:把无菌腋芽切成一芽一段1~1.5cm,用形态学下端倾斜浅插在分化丛生芽诱导培养基上;培养获得丛生芽;将丛生芽接种到稳定分化丛生芽培养基,培养获得稳定丛生芽;29、培养的条件均为每天光照10h,温度为25~27℃,光照强度为1500~2000lx,接种培养20~23天。30、优选的:步骤(4)具体为:将3cm以上稳定丛生芽接种到生根培养基,培养得生根苗:待生根苗长至8~10cm,取中上部茎芽一芽一段接入稳定生根培养基,多个单芽段/瓶,培养得稳定生根苗;31、培养的条件均为每天光照10h,温度为25~27℃,光照强度为1500~2000lx,培养20~23天。32、优选的:步骤(5)具体为:移栽前10天在大棚内按园林土:细沙:腐熟坚果皮重量比为5:3:2的比例配制得到基质,用代森锰锌按重量比1:3000与基质混合搅拌均匀,制得移栽基质,消毒后装营养袋,整齐分行摆放在透光保湿棚内的苗床上浇透水备用。33、优选的:步骤(6)具体为:将稳定生根苗移至室内炼苗架上自然光培养4天,其中第1天要把瓶盖全松而不开,第2、3、4天开盖1/3进行炼苗;移栽:栽前3天,步骤(5)移栽基质先浇透水,栽前1天翻移栽基质备用;移栽时间:下午17点后,将练苗栽至100株,及时浇500倍液的代森锰锌溶液定根消毒水,量为100ml/袋,栽好后及时盖上保湿棚,得组培苗;34、步骤(7)具体为:组培苗置于透光保湿棚内全封盖7天后半开棚1/5,驯化温度22~34℃,相对湿度75%~90%;35、其中,前5天每天上午8:00~9:00、下午17:00~18:00各喷浇1次清水,第6天营养袋底部灌浇一次水;移栽后10d,新根开始生长,15d后新叶开始长出,老叶趋于稳定,全开棚,增加透光度并做好后期肥水管理。棚内移栽60天下地定植。36、步骤(6)有益效果在于:辣木组培苗移栽时所需湿度高,是阻碍扩繁成苗的一大难点。若不采用适宜的炼苗方法,辣木组培苗的叶片、茎尖在短暂30分钟)的较低空气湿度(<80%)条件下就会萎蔫干瘪。37、步骤(7)有益效果在于:移栽后必须立即喷雾并用塑料膜密封保湿措施加以保护,以提高移栽植株的成活率。38、本发明还提供了基于上述培养基组合或上述任一培养方法在辣木种植、辣木新种培养、辣木加工中的应用。39、经由上述的技术方案可知,与现有技术相比,本发明公开提供了一种叶用型辣木嫩芽无菌快繁再生成苗培养基及培养方法,取得的技术效果:为辣木叶用型良种扩繁节约大量时间。苗木生长表现达到整齐一致,并可保证全年工厂化批量供苗,满足生产需要。