一种提升高海拔雪茄烟叶品质的发酵方法

本发明实施例涉及生物、食品加工，具体涉及一种提升高海拔雪茄烟叶品质的发酵方法。背景技术：1、随着我国经济不断发展，越来越多的人开始接触并享受雪茄。雪茄烟叶香气馥郁、风味独特，其感官品质受综合因素的影响，海拔高度是重要影响因素之一。同时，有别于烤烟的是雪茄烟叶品质稳定必须经过特殊的发酵环节，发酵能提高雪茄烟叶品质、彰显雪茄风格特色，是改善雪茄烟叶理化性质，外观及吸食品质的关键，而微生物在发酵过程中扮演着重要的角色，不同的种植海拔高度，将会导致雪茄烟叶表面微生物菌群不同，影响雪茄烟叶发酵，从而进一步影响雪茄烟叶发酵品质。2、烟叶发酵过程中，微生物生长繁殖将消耗烟叶中诸如蛋白质，纤维素及淀粉等大分子分解为小分子物质，可改善烟草香味，发酵过程中，有的微生物代谢产物本身就是香气物质，有的代谢物对烟叶化学成分变化起催化作用，间接促进大分子物质的分解、转化和增香化合物的产生。3、本项目团队将种植海拔高度作为为单一变量，确保雪茄烟叶品种、部位、等级、发酵条件完全相同情况下，考查了我国主要雪茄品种云雪39号在低海拔和高海拔的种植条件下的感官质量及微生物群落结构的具体情况。研究发现高海拔地区雪茄样品感官质量最差，而低海拔地区雪茄样品香气量足、香韵丰富、杂气少、刺激弱、余味好，并进一步分析其微生物群落结构。发现不同海拔高度雪茄烟叶的表面细菌群落结构组成和相对丰度有所差异，低海拔雪茄样品otu总数目最多，细菌群落多样性最丰富(见图1)。未命名菌属、金黄杆菌属是造成烟叶细菌群落结构差异的关键菌属；不同种植海拔高度样品代谢通路集中在信号转导和细胞过程、氨基酸代谢、脂肪酸代谢、遗传信息处理、碳水化合物代谢，但同种代谢通路丰度在不同海拔高度存在着差异(见图2-3)。4、因此，进一步证实了不同的种植海拔高度，将会导致雪茄烟叶表面微生物菌群不同，影响雪茄烟叶发酵，从而进一步影响雪茄烟叶发酵品质，导致高海拔地区雪茄烟叶微生物菌落多样性较低海拔地区雪茄烟叶微生物菌落多样性低，菌落存在差异，微生物参与雪茄烟叶发酵过程中发挥功能有限，综合感官质量差。现有技术中未见利用本发明方法提升高海拔雪茄烟叶品质的发酵方法的报道。技术实现思路1、为此，本发明实施例提供一种提升高海拔雪茄烟叶品质的发酵方法。本发明针对雪茄烟叶品种、部位、等级、发酵条件完全相同情况下，高海拔雪茄烟叶感官品质低于低海拔雪茄烟叶感官品质的技术难题，通过本发明可以将低海拔雪茄烟叶表面丰富的微生物菌群迁移到高海拔雪茄烟叶表面，同时进一步补充外源性的微生物，促进高海拔雪茄烟叶的发酵效能，提升综合感官质量。2、为了实现上述目的，本发明实施例提供如下技术方案：3、本发明提供一种提升高海拔雪茄烟叶品质的发酵方法，所述方法包括：4、使用蒸馏水将外源性微生物上清液进行稀释，所得稀释液均匀喷洒至高海拔雪茄烟叶和低海拔雪茄烟叶表面；5、高海拔雪茄烟叶同低海拔雪茄烟叶隔片依次层叠，然后置于人工发酵房中进行堆积发酵，其中，6、所述外源性微生物上清液由体积比为0.1-1：0.1-1的短小芽胞杆菌cicc 9014上清液和恶臭假单胞菌nbrc 14164上清液组成。7、其中，短小芽胞杆菌cicc 9014上清液能改变烟叶自身微生物菌群系统，可发酵葡萄糖、木糖、阿拉伯糖和甘露醇，水解淀粉，直接或者间接参与烟叶生物代谢过程，促进大分子向小分子香气物质转化。恶臭假单胞菌nbrc 14164上清液能改变烟叶自身微生物菌群系统，直接或者间接参与烟叶生物代谢过程，促进大分子向小分子香气物质转化，同时该菌种可产生类似香兰素香气。8、本发明采用上述外源性微生物上清液，并将高海拔烟叶同低海拔烟叶进行混合发酵，所获得的高海拔发酵烟叶中主要的中性致香成分总量显著提升，同时还具有较优的感官质量。9、在一些优选的实施例中，所述短小芽胞杆菌cicc 9014上清液或所述恶臭假单胞菌nbrc 14164上清液的制备方法如下：10、将短小芽胞杆菌cicc 9014或恶臭假单胞菌nbrc 14164分别接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基斜面，28℃恒温培养2d，倒入无菌水将菌苔洗下，充分震荡后将细胞浓度调至108cfu/ml，以悬浮液1/100的量接种到牛肉膏蛋白胨液体培养基中，摇床150rpm，30℃培养2d，将得到的菌悬液于4℃、11000rpm离心10min，弃湿菌体，得到所述短小芽胞杆菌cicc9014上清液或恶臭假单胞菌nbrc 14164上清液。11、其中，牛肉膏蛋白胨琼脂培养基为本领域常用培养基，其组成为：牛肉膏5g/l，蛋白胨10g/l，氯化钠5g/l，琼脂20g/l，ph7.2。同样地，牛肉膏蛋白胨液体培养基为本领域常用培养基，其组成为：牛肉膏5g/l，蛋白胨10g/l，氯化钠5g/l，ph7.2。12、在一些优选的实施例中，所述外源性微生物上清液与蒸馏水的体积比为1:25-30；所述稀释液的质量与低海拔雪茄烟叶和高海拔雪茄总质量的比值为1:30-60。13、在一些优选的实施例中，所述人工发酵房的温度为40-50℃，相对湿度为85-95％；所述发酵的时间为30-40天。14、本发明实施例具有如下优点：15、本发明提供的提升高海拔雪茄烟叶品质的发酵方法，所获得的发酵烟叶中主要的中性致香成分总量、感官质量评分均有提升；感官质量方面主要表现在香气量更为充足，香韵丰富性提升(奶香、坚果香凸显)，高海拔地区的木质杂气降低，口腔的余味和舒适性改善，有回甜感。技术特征：1.一种提升高海拔雪茄烟叶品质的发酵方法，其特征在于，所述方法包括：2.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，所述短小芽胞杆菌cicc 9014上清液或所述恶臭假单胞菌nbrc 14164上清液的制备方法如下：3.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，4.根据权利要求1所述的发酵方法，其特征在于，所述人工发酵房的温度为40-50℃，相对湿度为85-95％；所述发酵的时间为30-40天。技术总结本发明实施例公开了一种提升高海拔雪茄烟叶品质的发酵方法。所述方法包括：使用蒸馏水将外源性微生物上清液进行稀释，所得稀释液均匀喷洒至低海拔雪茄烟叶和高海拔雪茄烟叶表面；高海拔雪茄烟叶同低海拔雪茄烟叶隔片依次层叠，然后置于人工发酵房中进行堆积发酵，其中，所述外源性微生物上清液由体积比为0.1‑1：0.1‑1的短小芽胞杆菌CICC 9014上清液和恶臭假单胞菌NBRC 14164上清液组成。本发明提供的高海拔雪茄烟叶品质的发酵方法，烟叶中主要的中性致香成分总量、感官质量评分较对照均有提升；感官质量方面主要表现在香气量更为充足，香韵丰富性提升(奶香、坚果香凸显)，高海拔地区的木质杂气降低，口腔的余味和舒适性改善，有回甜感。技术研发人员：周潇,陆欣,徐峥嵘,李佳,何福英,禹紫云,王冰冰,李田,刘妍受保护的技术使用者：玉溪农业职业技术学院（云南省玉溪烟草栽培学校）技术研发日：技术公布日：2024/7/4