一种栎叶绣球的高效离体再生方法

本发明涉及植物组织培养，具体涉及一种栎叶绣球的高效离体再生方法。背景技术：1、栎叶绣球，又被称为橡叶绣球，属于绣球花科，是一种常绿或半常绿的灌木。栎叶绣球原产于北美，具有丰富的分枝和茂密的树冠，其花色和叶色随季节逐渐由深绿色变为深红色，能够增加景观的层次感和色彩变化，并且具有良好的耐寒性，目前已经逐渐被引种到其他国家和地区作为园艺观赏植物。然而，栎叶绣球的雄蕊极易退化，果实流产率高，阻碍了日益增长的育种需求。扦插和分株的无性繁殖方式周期长，并且容易受到母代病原体或虫害的侵袭。2、通过组织培养进行植物再生为遗传改良计划奠定了基础，也在特定基因型的大量繁殖以及种质保存中发挥着重要作用，近年来，绣球花属的再生体系常有报道，但栎叶绣球在外观、生长环境和栽培要求上与其他种属具有基因型特异性差异，并且鲜有报道。公开号为cn115868411a的中国专利申请文献公开了一种栎叶绣球组培快繁方法，其包括采集、诱导、增殖、生根等步骤，其提供的栎叶绣球组培快繁方法，可以让栎叶绣球育苗期间的发芽率和生根率以及生长表现明显提高，但所用外植体为茎段，种类单一；茎段的不定芽诱导率较低；增殖系数较低，仅为3。3、光是植物生长和发育中至关重要的环境因子之一。在加速植物光形态建成和生长发育的相关研究中，led发光二极管以光谱可控性以及低能耗的优势，成为了现代化农业的重要辅助工具，这在栎叶绣球中尚未有相关应用。技术实现思路1、本发明所要解决的技术问题在于如何高效离体再生栎叶绣球。2、本发明通过以下技术手段实现解决上述技术问题：3、一种栎叶绣球的高效离体再生方法，包括以下步骤：4、s1、将栎叶绣球的茎段进行消毒，并切割成带有腋芽的分段，接种到ms固体培养基上进行培养得到外植体；5、s2、将s1得到的外植体转接至诱导培养基中培养形成不定芽；其中，所述诱导培养基为添加6ba、kt、zt或tdz中的一种的ms培养基；6、s3、将形成的不定芽转接到增殖培养基中培养得到丛生芽；其中，所述增殖培养基为添加6ba的ms培养基；7、s4、将获得的丛生芽转接至不定根诱导培养基中培养诱导出根系得到完整植株；其中，所述不定根诱导培养基为添加iaa、iba或naa中的一种的1/2ms培养基。8、优选地，在s1中，切割成带有2个腋芽的分段；所述培养的时间为10-15d。9、优选地，在s2中，在诱导培养基中，6ba、kt、zt或tdz的浓度为0.5mg/l；在s3中，在增殖培养基中，6ba的浓度为0.5-2.0mg/l。10、优选地，在s3中，所述培养的时间为40d，从生芽的长度为4-5cm；在s2中，所述培养的时间为20d；在s4中，所述培养的时间为40d。11、优选地，在s4中，不定根诱导培养基中，iaa、iba或naa的浓度为0.25-1.0mg/l。12、优选地，在s4中，将获得的丛生芽转接至不定根诱导培养基中，于led白光下培养后，转至蓝光或红光或红蓝混合光的条件下培养。13、优选地，所述不定根诱导培养基为添加0.5mg/l iaa的1/2ms培养基，led光照强度为120-160μmol s-1m-2。14、优选地，还包括将获得的完整植株的叶柄和叶片切下，转接至不定芽诱导培养基中培养，叶柄和叶片分别诱导获得不定芽；重复s3和s4得到完整植株。15、优选地，所述不定芽诱导培养基为添加6ba、naa和蔗糖的ms培养基。16、优选地，不定芽诱导培养基中6ba浓度为2.0mg/l，naa浓度为0.1-0.5mg/l，蔗糖浓度为20g/l；不定芽诱导培养基中培养的时间为30天。17、优选地，所述栎叶绣球为栎叶绣球“和声”。18、本发明的优点在于：19、(1)栎叶绣球“和声”的不定芽增殖效率非常高，单个不定芽的增殖数为15；20、(2)除茎段外，叶片叶柄的再生率非常高，分别为75.4％，100％；且平均单个外植体的再生数很高，分别为4.2，8.5。21、(3)利用蓝光加速植株光形态建成，相同培养时间内，显著促进叶面积的伸展；22、(4)本发明利用不同光质缩短栎叶绣球光形态建成的周期。技术特征：1.一种栎叶绣球的高效离体再生方法，其特征在于：包括以下步骤：2.根据权利要求1所述的栎叶绣球的高效离体再生方法，其特征在于：在s1中，切割成带有2个腋芽的分段；所述培养的时间为10-15d。3.根据权利要求1所述的栎叶绣球的高效离体再生方法，其特征在于：在s2中，在诱导培养基中，6ba、kt、zt或tdz的浓度为0.5mg/l；在s3中，在增殖培养基中，6ba的浓度为0.5-2.0mg/l。4.根据权利要求1所述的栎叶绣球的高效离体再生方法，其特征在于：在s3中，所述培养的时间为40d，从生芽的长度为4-5cm；在s2中，所述培养的时间为20d；在s4中，所述培养的时间为40d。5.根据权利要求1所述的栎叶绣球的高效离体再生方法，其特征在于：在s4中，不定根诱导培养基中，iaa、iba或naa的浓度为0.25-1.0mg/l。6.根据权利要求1所述的栎叶绣球的高效离体再生方法，其特征在于：在s4中，将获得的丛生芽转接至不定根诱导培养基中，于led白光下培养后，转至蓝光或红光或红蓝混合光的条件下培养。7.根据权利要求6所述的栎叶绣球的高效离体再生方法，其特征在于：所述不定根诱导培养基为添加0.5mg/l iaa的1/2ms培养基，led光照强度为120-160μmol s-1m-2。8.根据权利要求1-7中任一项所述的栎叶绣球的高效离体再生方法，其特征在于：还包括将获得的完整植株的叶柄和叶片切下，转接至不定芽诱导培养基中培养，叶柄和叶片分别诱导获得不定芽；重复s3和s4得到完整植株。9.根据权利要求8所述的栎叶绣球的高效离体再生方法，其特征在于：所述不定芽诱导培养基为添加6ba、naa和蔗糖的ms培养基。10.根据权利要求9所述的栎叶绣球的高效离体再生方法，其特征在于：不定芽诱导培养基中6ba浓度为2.0mg/l，naa浓度为0.1-0.5mg/l，蔗糖浓度为20g/l；不定芽诱导培养基中培养的时间为30天。技术总结本发明公开了一种栎叶绣球的高效离体再生方法，包括：S1、将栎叶绣球的茎段进行消毒，切割成带有腋芽的分段，接种到MS固体培养基上进行培养得到外植体；S2、将得到的外植体转接至诱导培养基中培养形成不定芽；S3、将形成的不定芽转接到增殖培养基中培养得到丛生芽；S4、将获得的丛生芽转接至不定根诱导培养基中培养诱导出根系得到完整植株。本发明的方法不定芽的增殖效率非常高，发达的叶片和叶柄能够高效的进行再生，不同的LEDs光环境能在短时间内加速叶片的发育，为加速育种以及遗传改良奠定基础。技术研发人员：吴丽芳,苏鹏飞,侯金艳,王大成,王萍受保护的技术使用者：中国科学院合肥物质科学研究院技术研发日：技术公布日：2024/3/24