11-羰基-β-乙酰乳香酸在制备治疗和/或预防HCMV药

本发明属于生物医学，具体是一种11-羰基-β-乙酰乳香酸在制备治疗和/或预防hcmv药物中的新用途。背景技术：1、人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,hcmv)属于疱疹病毒β亚科，具有包膜结构，基因组由235kb双链dna(dsdna)组成，在细胞核内复制，编码165个以上的病毒蛋白。hcmv是一种普遍存在的病原体，在世界范围内广泛传播，人群中血清阳性率超过80％。hcmv一个显著特征是可以建立终身潜伏感染，当机体免疫力低下时就会迅速激活造成复发感染。hcmv是孕妇流产的主要原因之一；同时也是造成新生儿先天性出生缺陷的主要病原体，主要表现在小头畸形、认知障碍等。老年人由于增龄性免疫功能衰退，hcmv复发感染概率增加，再叠加老年基础性疾病，对老年人的生活质量造成很大影响。因此，积极有效的预防和治疗hcmv感染，既是提高出生人口素质的要求，也是提高免疫力低下老年人生活质量的重要手段。2、虽然hcmv感染带来了严重的疾病和社会负担，但是迄今为止还没有hcmv疫苗获准上市，抗病毒药物更昔洛韦(ganciclovir，gcv)、膦甲酸(foscarnet，fos或pfa)和西多福韦(cidofovir，cdv)是目前临床上的主要选择药物。它们的抗病毒靶点是病毒dna聚合酶，主要作用于病毒进入细胞后的复制翻译阶段。但是这些广谱抗病毒药物在长期使用过程中已经表现出明显的骨髓抑制、肾毒性和电解质紊乱等副作用和不良反应，而且也出现了一些耐药毒株，这些因素显著降低了这些药物使用的临床效果。所以，继续寻找低毒高效的预防和治疗hcmv感染的药物势在必行。3、乳香是橄榄科植物乳香及同属植物boswellia carterii birdw.及同属植物b.bhaw-dajiana biedw.树皮部渗出的油胶树脂，性微寒，其味辛、苦，性温。其中主要有效成分为萜类和挥发油。11-羰基-β-乙酰乳香酸(acetyl-11-keto-β-boswellic acid,akba)属于五环三萜酸，是最具生物活性的代表性萜类成分。akba具有良好的抗炎、抗氧化、抗纤维化以及保护血管内皮功能和改善心肌肥大等作用，主要用于非特异性炎症疾病，例如类风湿性关节炎、结肠炎和胶原性疾病以及冠心病的治疗；我国科学家2019年还揭示了akba干预银屑病治疗的靶点和机制。但是迄今为止，暂未见akba在制备治疗和/或预防hcmv药物中的应用。技术实现思路1、为了解决上述现有技术中的不足，本发明的目的是提供一种毒副作用小，安全有效的抑制hcmv的药物。2、本发明的目的是通过以下技术方案来实现：3、本发明提供了11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)在制备治疗和/或预防hcmv药物中的应用。4、本发明采用商品化的纯品11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)(cas no.67416-61-9，hplc assay：99.2％)，进行了系列的生物学实验，为11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)治疗和/或预防人巨细胞病毒感染的新用途提供了理论依据。5、所述的11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)在无明显细胞毒性的浓度下，可以明显缓解hcmv感染引起的细胞病变效应；可以显著抑制hcmv立即早期蛋白ie1/2和早期蛋白p52的表达；有效抑制hcmv基因包括立即早期基因ul123、早期基因ul44和晚期基因ul32的dna拷贝数，从而发挥抗hcmv感染的作用。6、本发明生物学实验的研究结果表明：7、1、11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)单独处理hcmv宿主细胞wi-38，在0.15625μm、0.3125μm、0.625μm、1.25μm、2.5μm、5μm、10μm的浓度梯度对wi-38没有表现出明显的细胞毒性，相反，高浓度(2.5μm、5μm、10μm)的akba处理能够促进细胞增殖(**p<0.01，***p<0.001)。8、2、11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)在5μm、10μm的浓度能够明显缓解hcmv感染引起的wi-38细胞病变效应，图3中红色圆圈标识。9、3、11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)在5μm、10μm的浓度都能够显著抑制hcmv立即早期蛋白ie1/2以及早期蛋白p52在wi-38中的表达，低浓度(0.625μm、1.25μm、2.5μm)对该两种蛋白的抑制作用不明显。与单独接种hcmv的组别相比较，5μm的浓度可以抑制ie1/2和p52表达水平分别至67.8％和66％，具有显著性差异(*p<0.05)；10μm的浓度可以抑制ie1/2和p52表达水平分别至19.5％和25.9％，差异及其显著(***p<0.001)。10、4、11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)在0.625μm浓度可以分别降低立即早期基因ul123、早期基因ul44和晚期基因ul32的dna拷贝数至56.87％11、(**p<0.01)、67.73％(p＝0.051)和57.7％(***p<0.001)；5μm的浓度可以显著降低hcmv立即早期基因ul123、早期基因ul44和晚期基因ul32的dna拷贝数至29.87％(***p<0.001)、34.8％(**p<0.01)和32.92％(***p<0.001)；10μm的浓度可以显著降低hcmv立即早期基因ul123、早期基因ul44和晚期基因ul32的dna拷贝数至11.53％(***p<0.001)、11.63％(**p<0.01)和10.39％(***p<0.001)。12、本发明所述的药物还包括药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂。药学上可接受的载体包括与药物施用相容的任意和所有物质，包括溶剂，分散介质，包衣，抗细菌和抗真菌剂，等渗和吸收延缓剂，和与药物施用相容的其它物质和化合物。除非到了某一常规介质或试剂与活性化合物不相容的程度，否则考虑其在本发明所述药物中的用途。补充的活性化合物也可以整合入所述药物。13、用于制备所述药物的有用的药物载体可以是固体，液体或气体；因此，所述药物可以采用片剂、丸剂、胶囊、栓剂、粉末剂、肠包衣的或其它保护的制剂(例如结合于离子交换树脂或包装在脂蛋白泡囊中)、缓释制剂、溶液、混悬剂、酏剂、气溶胶等的形式。所述载体可以选自不同油，包括石油、动物油、植物油或合成来源的油，例如，花生油，大豆油，矿物油，芝麻油等。水，盐水，含水葡萄糖，和乙二醇是优选的液体载体，特别是(当与血液等渗时)用于可注射溶液。例如，用于静脉施用的制剂包括活性成分的无菌水溶液，其通过将固体活性成分溶解于水来产生水溶液，并使得所述溶液无菌来制备。合适的药物赋形剂包括淀粉，纤维素，滑石，滑石，明胶，麦芽，大米，面粉，白垩，硅石，硬脂酸镁，硬脂酸钠，甘油单硬脂酸酯，氯化钠，无水脱脂乳，甘油，丙二醇，水，乙醇等。所述药物可以加入常规药物添加剂比如防腐剂、稳定剂、湿润剂或乳化剂、用于调节渗透压的盐、缓冲剂等。在任何情况中，所述药物将含有与合适的载体一起的有效量活性化合物，以制备适当剂型用于适当施用于接受者。14、可以以任何方便的施用形式施用本发明所述的药物，例如，片剂、粉末剂、胶囊、溶液、分散液、混悬剂、糖浆、喷雾、凝胶、乳状液、凝胶、贴片等。所述药物可以含有药物制剂中常规的成分，例如，稀释剂，载体，ph调节剂，甜味剂，填充剂和其它活性剂。15、为了以非肠道给药之外给予本发明的11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)，可能需要用防止其失活的材料对11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)包衣或与11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)一同给予。亦可以将补充的活性化合物加入组合物中。在具体实施时，将本发明11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)与一种或多种可以用于治疗疾病的其它治疗药物共配制和/或共给予。这种联合使用，可以优越地利用较低剂量给予的治疗药物，因此避免可能的毒性或与各种单一疗法相关的并发症。16、本发明的制剂可以制成液体制剂如水剂、油悬浮剂或其它液体制剂中的一种或多种，如糖浆或酏剂等中的一种或多种；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液剂、水剂或油性悬浮剂等中的一种或多种。17、以上所述的使用形式中，优选的形式是片剂、包衣片剂、胶囊、栓剂或注射剂等中的一种或多种，进一步优选片剂、胶囊或注射剂等中的一种或多种。18、作为一种可选择的方式，所述剂型可以是粉针剂，粉针剂一般采用常规的冷冻干燥法，以水作为溶媒，其步骤为：取11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)，加入赋形剂，加水溶解，加入活性炭，过滤除菌，灌装，半轧塞，冷冻干燥，压塞轧盖即可。所用的赋形剂选自甘露醇、水解明胶、葡萄糖、乳糖、右旋糖苷等中的一种或几种。19、作为一种可选择的方式，本发明制备粉针剂也可采用喷雾干燥法，以水作为溶媒，其步骤为：取11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)，加或不加赋形剂，加水溶解，加入活性炭，过滤除菌，喷雾干燥，无菌分装，压塞轧盖即可。20、作为本发明的一种可选择的方式，所述剂型可以是小针剂，小针剂的制备以注射用水作为溶媒配制即可，也可加适量辅料，辅料选自乙醇、丙二醇、甘油、聚乙二醇、苯甲酸苄酯、二甲基乙酰胺中的一种或几种。21、11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)的药物组合物一般必须无菌且在生产储存条件下稳定。可以将该组合物配制成溶液、微乳液、分散液、脂质体或其它适合于高药物浓度的有序结构。通过将所需量的该11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)与所需上述成分的一种或组合一起加入适当的溶剂中并接着进行除菌过滤制备无菌注射液。一般而言，通过将该11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)加入含有基本分散介质和所需的上述其它成分的无菌溶媒中制备分散液。在用于制备无菌注射液的无菌粉剂的情况下，推荐的制备方法是真空干燥和冷冻干燥剂。例如，通过诸如卵磷脂的包衣、在分散液的情况下通过保持所需颗粒大小和通过使用表面活性剂，可以保持溶液的适当流动性。通过在该组合物中包括延迟吸收的药剂(例如单硬脂酸盐或明胶)可以达到注射组合物的延长吸收。22、本发明的优点及有益效果如下：本发明提供了11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)在制备治疗和/或预防hcmv药物中的新用途，11-羰基-β-乙酰乳香酸(akba)能够显著缓解hcmv感染引起的细胞病变效应，对hcmv立即早期蛋白ie1/2，早期蛋白p52以及立即早期基因ul123、早期基因ul44和晚期基因ul32的dna拷贝数都有显著的抑制作用，对hcmv感染具有显著的预防和治疗作用，毒副作用小，安全有效，具有良好的应用前景，有望将其开发为一种理想的治疗和/或预防hcmv感染的药物。