发布日期:2024-08-21 浏览次数:次
本发明属于发酵,具体涉及一种高产有助于维持正常血小板聚集功能的纳豆发酵物及其制备方法。背景技术:1、纳豆在发酵过程中会产生多种生理活性物质,包括蛋白质、维生素、矿物质和益生菌。其中最为人所知的就是发酵过程中由纳豆芽孢杆菌分泌生成的具有高效溶血栓效果的纤维蛋白酶-纳豆激酶,又叫枯草菌蛋白酶,它具有不同程度的溶血栓、抗凝血、降压降脂等作用,同时还能减少酒精对肝脏的损伤,并具有一定的减毒作用,还能够提高机体淋巴细胞的增殖,激活巨噬细胞,从而提高机体免疫力。由于纳豆本身安全、无毒的优势,在医疗与食品领域有很大的应用空间。2、专利cn 117431172a公开了一种直投式纳豆菌发酵剂及其制备方法和应用,该专利利用薏仁米糖化液浸泡黄豆,经纳豆菌发酵,冻干、粉碎即为所述直投式纳豆菌发酵剂。该直投式发酵剂发酵的薏仁米糖化液浸泡的黄豆所得纳豆中的纳豆激酶活力高于150fu/g、感官评分高于81。专利cn 117158543 a公开一种混菌发酵的薏仁米纳豆及其制备方法,该发明将清洗干净后的大豆用薏仁米糖化液浸泡,浸泡后加入氯化钠并灭菌,在灭菌所得物料中接种纳豆芽孢杆菌和双歧杆菌,混合发酵,得到发酵的纳豆。该发明通过工艺优化改善了纳豆的风味,增加了其营养,得到一款新颖独特、口感丰富、风味良好的高纳豆激酶活力的风味纳豆。3、但是,目前纳豆的发酵过程中大多数都是用整粒豆进行发酵,这样会造成纳豆的有效成分含量偏低、资源利用率不高的问题。且发酵纳豆的保质期短,有效成分不稳定。4、基于现有技术中存在的问题,研发一种高效的纳豆发酵工艺,提高纳豆有效成分含量并延长其保存时间,对于扩大纳豆的应用具有重要意义。技术实现思路1、针对现有技术中存在的不足,本发明提供了一种高产有助于维持正常血小板聚集功能的纳豆发酵物及其制备方法,本发明中的制备方法对原料的利用率较高,且制备出的纳豆发酵物活性成分含量极高,稳定性好,具有较长的保存时间。2、为实现上述目的,本发明采用的技术方案如下:3、本发明第一方面提供了一种高产有助于维持正常血小板聚集功能的纳豆发酵物的制备方法,包括以下步骤:4、(1)将泡发后的混合豆进行粉碎,加入混合豆质量10-20倍的纯水,搅拌均匀,得到混合豆浆;5、(2)向步骤(1)得到的混合豆浆中加入功能酶,在40-50℃下酶解4-6h,得到酶解物;6、(3)将步骤(2)得到的酶解物进行灭菌后,加入混合菌种子液和儿茶素,在有氧环境中进行发酵,得到发酵混合物;7、(4)将步骤(3)得到的发酵混合物进行干燥,得到纳豆发酵物。8、本发明选择液态发酵方式,将纳豆芽孢杆菌、德氏乳杆菌和嗜热链球菌组成的混合菌在一定环境条件下对酶解后的混合豆浆进行发酵,再通过喷雾干燥得到纳豆发酵物,该纳豆发酵物的有效活性成分含量较高,且稳定性较好。此外,在发酵过程中加入儿茶素,能够显著降低纳豆发酵物的氨味,改善其口感。9、在一些实施方式中,所述混合豆包含鹰嘴豆、黑豆和豇豆。10、优选地,所述混合豆包含质量比为3:2:1的鹰嘴豆、黑豆和豇豆。11、不同品种的豆类其包含的重要功能活性成分不同。申请人发现将一定比例的鹰嘴豆、黑豆和豇豆作为原料进行发酵,得到的纳豆发酵物中的纳豆激酶、多酚、纳豆多糖和γ-氨基丁酸含量高于单一豆类发酵物。12、在一些实施方式中,所述步骤(2)中功能酶为混合豆质量的0.5-3.5%。13、优选地,所述步骤(2)中功能酶为混合豆质量的2.5%。14、在一些实施方式中,所述功能酶为纤维素酶、果胶酶和中性蛋白酶的至少一种。15、优选地,所述功能酶包含质量比为3:1:1的纤维素酶、果胶酶和中性蛋白酶。16、申请人发现在混合菌对混合豆浆进行发酵前用功能酶进行处理,有利于提高原料利用率和发酵物中的活性成分含量。这是因为豆类中存在一部分纤维素、果胶和蛋白不能被微生物直接利用,这会造成原料利用率下降,使用一定质量比的纤维素酶、果胶酶和中性蛋白酶进行前处理能够促进这部分物质发生分解,降解为微生物可直接利用的小分子,再通过微生物的发酵作用转化为纳豆发酵物中的活性成分。17、在一些实施方式中,所述混合菌种子液的加入量为酶解物的1-3wt%;所述混合菌种子液包含培养至生长稳定期的纳豆芽孢杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液和嗜热链球菌种子液。18、优选地,所述混合菌种子液的加入量为酶解物的2wt%。19、在一些实施方式中,所述混合菌种子液包含的纳豆芽孢杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液和嗜热链球菌种子液的质量比为(5-10):(1-3):1。20、优选地,所述混合菌种子液包含的纳豆芽孢杆菌种子液、德氏乳杆菌种子液和嗜热链球菌种子液的质量比为8:2:1。21、不同的菌种对纳豆的发酵有较大的影响,目前很多研究都选择芽孢杆菌作为发酵菌,但单一菌落发酵得到的纳豆发酵物活性成分含量不高,使得发酵物的效果相对较弱。本发明选择将一定比例的纳豆芽孢杆菌、德氏乳杆菌和嗜热链球菌作为发酵菌共同进行发酵,三种菌可以产生协同作用,显著提高发酵物中纳豆激酶的活性和多酚、多糖的含量,提升纳豆发酵物的综合效果。此外,嗜热链球菌不仅可以产生特殊风味物质,且由于自身缺乏蛋白酶或酶活较弱,可与纳豆芽孢杆菌竞争含氮蛋白质水解产物,在一定程度上降低氨的产生。22、在一些实施方式中,所述发酵的温度为30-45℃,时间为20-30h,发酵过程中ph为6.5-8。23、优选地,所述发酵的发酵温度为40℃,发酵时间为25h,发酵过程中ph为7.5。24、申请人发现控制微生物发酵过程中的温度、ph和发酵时间可以提高纳豆发酵物中的活性成分含量。25、在一些实施方式中,所述步骤(3)中儿茶素的加入量为酶解物的0.03-0.05wt‰。26、优选地,所述步骤(3)中儿茶素的加入量为酶解物的0.04wt‰。27、优选地,所述儿茶素为发酵10h后再加入。28、在纳豆发酵的发酵过程中会产生严重的氨味,影响纳豆发酵物的口感,进而限制其应用范围。申请人发现在微生物发酵的过程中加入一定量的儿茶素在不影响纳豆激酶活性的同时,还能够显著降低发酵物的氨味,原因在于一定浓度的儿茶素不会影响微生物的正常生长,并能够透过微生物的细胞膜进入细胞内部,抑制胞内产生氨味的谷氨酸脱氢酶活性,减少氨的产生,改善纳豆发酵物的气味和口感。29、在一些实施方式中,所述干燥的方式为喷雾干燥。30、优选地,所述喷雾干燥的工艺参数为:以海藻糖为保护剂,进口温度为145-155℃,蠕动泵转速为350-390ml/h。31、申请人发现选择海藻糖作为保护剂的喷雾干燥方式相比与冷冻干燥方式,在节省成本的同时,干燥得到的纳豆发酵物中有效成分的稳定性也较好。32、本发明第二方面提供了一种以上所述的制备方法制备得到的高产有助于维持正常血小板聚集功能的纳豆发酵物。33、与现有技术相比,本发明的有益效果如下:34、1、本发明选择液态发酵方式,选择纳豆芽孢杆菌、德氏乳杆菌和嗜热链球菌组成混合菌在一定环境条件下对酶解后的混合豆浆进行发酵,再通过喷雾干燥得到纳豆发酵物,该纳豆发酵物的氨味低,有效活性成分含量较高,且稳定性较好。35、2、本发明使用一定质量比的纤维素酶、果胶酶和中性蛋白酶对混合豆浆进行酶解后再进行发酵,能够促进混合豆浆中的纤维素、果胶和蛋白降解为微生物可直接利用的小分子,提高原料的利用率和纳豆发酵物中的有效成分的含量。36、3、本发明在微生物发酵的过程中加入一定量的儿茶素,儿茶素在不影响微生物生长的同时,能够透过微生物的细胞膜进入细胞内部,抑制胞内产生氨味的谷氨酸脱氢酶活性,减少氨的产生,改善纳豆发酵物的气味和口感。