一种高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方

本发明涉及中药，尤其涉及一种高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法。背景技术：1、西红花酸是名贵中药材西红花的有效活性成分之一，在脑部药理研究众多，包括治疗精神退化疾病、脑损伤、脑神经母细胞瘤、海马细胞氧化损伤等。然而，由于其提取率极低，在水及大多数有机溶剂中溶解度极差，原料制备成本极高，且缺乏组织靶向性，严重影响其体内药效分布和制剂开发。在先前的研究中，已经采用固体分散体技术将西红花酸与葡甲胺(1:2，w/w)进行球磨，得到西红花酸和葡甲胺的球磨增溶体系，该增溶体系显著提高了西红花酸在水中溶解度。脂质体具有与细胞膜相似性质的磷脂双分子层结构，其表面可以进行靶向配体的修饰，是近年来组织靶向的新剂型，很好地弥补了非靶向药物的组织靶向性能，有利于选择性控制药物在体内分布，大大提高药物的生物利用度。2、乳铁蛋白(l actoferr i n，lf)是具有80kda分子量的非血红素铁离子结合蛋白，属于转铁蛋白家族，存在于大多数生物液体中，包括泪液、唾液、鼻和支气管分泌物、乳汁等。lf受体(lfr)在脑神经元、神经胶质细胞、微血管和内皮细胞上高度表达，使其成为最常用的脑靶向配体之一。目前，lf修饰脂质体的方式为共价偶联法和静电吸附法。共价偶联法是将lf的胺基与含羧酸基团的化合物共价偶联，或将lf巯基化后与含酰胺基团的化合物共价偶联。此法在lf共价偶联过程中涉及多种化学试剂，残留试剂会提高脂质体毒性，且制备过程中巯基化乳铁蛋白收率不高，大大提高了制备成本。3、此外，共价偶联法需先将化合物连接至脂质体膜上，而连接至脂质体膜上的化合物由于嵌入脂质体膜内，降低了脂溶性药物的载药量。静电吸附法常采用外加法将lf连接至脂质体膜上。即先制备成含药脂质体，随后将制备成的脂质体与外加lf溶液进行混合，使带负电荷的脂质体膜通过静电吸附作用与带正电荷的lf进行静电吸附结合。外加法的lf连接率容易受脂质体膜上其他基团的电荷、空间位阻影响。其次，采用外加法制备，lf仅靠静电作用吸附在脂质体膜表面，连接不紧密，极易脱落。且外加法容易使lf在脂质体膜上分布不均匀而导致脂质体膜的板结，从而导致脂质体内药物的泄露。4、因此，现有技术中乳铁蛋白在脂质体膜上的连接率和连接稳定性较差，无法达到预期效果。技术实现思路1、本发明提供的一种高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，解决了现有技术中乳铁蛋白在脂质体膜上的连接率和连接稳定性较差的技术问题。2、解决上述技术问题采用的一些实施方案包括：3、一种高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，包括以下步骤：4、s10、取西红花酸与葡甲胺球磨增溶体系溶于纯化水中，得到内水相，其中，西红花酸与葡甲胺的重量比为1:2；5、s20、取大豆磷脂、麦角甾醇、冰片共同溶于乙酸乙酯中，得到油相，其中，所述大豆磷脂、麦角甾醇、冰片与乙酸乙酯的重量比为(0.25～2.5)：(0.04～0.4):(0.08～1.0):(0.08～1.0)；6、s30、取乳铁蛋白溶于纯化水中，得到外水相，其中，所述乳铁蛋白与纯化水的重量比为0.8～1.2:1.3～1.7；7、s40、将所述内水相滴加至所述油相中，得到初乳悬液，其中，所述内水相和油相体积比为0.35～3.0；8、s50、将所述初乳悬液滴加至所述外水相中，水浴搅拌挥发乙酸乙酯，得到脂质体悬液，其中，所述初乳悬液和外水相的体积比为0.35～3.0；9、s60、将所述脂质体悬液超声分散，制得乳铁蛋白共载冰片的西红花酸脂质体。10、作为优选，所述s40、将所述内水相滴加至所述油相中，将所述内水相缓慢滴加至呈搅拌状态的所述油相中。11、作为优选，所述油相的搅拌转速100rpm～3000rpm，搅拌时间1min～60min，温度10℃～60℃，滴入频率为每分钟1ml～10ml。12、作为优选，所述将所述初乳悬液滴加至所述外水相中，将所述初乳悬液缓慢滴加至呈搅拌状态的所述外水相中。13、作为优选，所述外水相的搅拌转速100rpm～3000rpm，搅拌时间1min～60min，温度10℃～60℃，滴入频率为每分钟1ml～10ml。14、作为优选，所述s60、将所述脂质体悬液超声分散中，将所述脂质体悬液进行探头超声分散。15、作为优选，所述探头超声频率为50hz～10000hz，超声时间为0min～30min。16、作为优选，所述s60、将所述脂质体悬液超声分散，制得乳铁蛋白共载冰片的西红花酸脂质体中，乳铁蛋白共载冰片的西红花酸脂质体的粒径为100nm～200nm。17、作为优选，所述s30、取乳铁蛋白溶于纯化水中，得到外水相，其中，所述乳铁蛋白与纯化水的重量比为6:7.6。18、作为优选，所述s20、取大豆磷脂、麦角甾醇、冰片共同溶于乙酸乙酯中，得到油相，其中，大豆磷脂20mg、麦角甾醇2.8mg、冰片8mg共同溶于5ml乙酸乙酯中。19、相对于现有技术，本发明具有如下优点：20、本发明通过冰片提高乳铁蛋白的脂溶性及其在脂质体膜中的嵌入程度，通过内加乳铁蛋白，简化乳铁蛋白修饰脂质体的制备工艺，提高乳铁蛋白在脂质体膜上的连接率和连接稳定性，为乳铁蛋白在脂质体材料上的连接提供技术支持。21、本发明采用冰片改变磷脂分子排列的性质，提高脂质体膜紧密程度，从而提高脂质体的包封率，降低脂质体粒径和存储过程的泄漏率。为西红花酸在体内药效分布靶向性提供制剂基础。技术特征：1.一种高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：2.根据权利要求1所述的高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，其特征在于：所述s40、将所述内水相滴加至所述油相中，将所述内水相缓慢滴加至呈搅拌状态的所述油相中。3.根据权利要求2所述的高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，其特征在于：所述油相的搅拌转速100rpm～3000rpm，搅拌时间1min～60min，温度10℃～60℃，滴入频率为每分钟1ml～10ml。4.根据权利要求1所述的高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，其特征在于：所述将所述初乳悬液滴加至所述外水相中，将所述初乳悬液缓慢滴加至呈搅拌状态的所述外水相中。5.根据权利要求4所述的高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，其特征在于：所述外水相的搅拌转速100rpm～3000rpm，搅拌时间1min～60min，温度10℃～60℃，滴入频率为每分钟1ml～10ml。6.根据权利要求1所述的高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，其特征在于：所述s60、将所述脂质体悬液超声分散中，将所述脂质体悬液进行探头超声分散。7.根据权利要求6所述的高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，其特征在于：所述探头超声频率为50hz～10000hz，超声时间为0min～30min。8.根据权利要求1所述的高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，其特征在于：所述s60、将所述脂质体悬液超声分散，制得乳铁蛋白共载冰片的西红花酸脂质体中，乳铁蛋白共载冰片的西红花酸脂质体的粒径为100nm～200nm。9.根据权利要求1所述的高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，其特征在于：所述s30、取乳铁蛋白溶于纯化水中，得到外水相，其中，所述乳铁蛋白与纯化水的重量比为6:7.6。10.根据权利要求1所述的高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，其特征在于：所述s20、取大豆磷脂、麦角甾醇、冰片共同溶于乙酸乙酯中，得到油相，其中，大豆磷脂20mg、麦角甾醇2.8mg、冰片8mg共同溶于5ml乙酸乙酯中。技术总结本发明涉及中药技术领域，尤其涉及一种高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法。本发明提供的一种高乳铁蛋白连接率的西红花酸脂质体制备方法，解决了现有技术中乳铁蛋白在脂质体膜上的连接率和连接稳定性较差的技术问题。本发明通过冰片提高乳铁蛋白的脂溶性及其在脂质体膜中的嵌入程度，通过内加乳铁蛋白，简化乳铁蛋白修饰脂质体的制备工艺，提高乳铁蛋白在脂质体膜上的连接率和连接稳定性，为乳铁蛋白在脂质体材料上的连接提供技术支持。本发明采用冰片改变磷脂分子排列的性质，提高脂质体膜紧密程度，从而提高脂质体的包封率，降低脂质体粒径和存储过程的泄漏率。为西红花酸在体内药效分布靶向性提供制剂基础。技术研发人员：王平,童哲仁,徐子金,冯佩诗受保护的技术使用者：浙江工业大学技术研发日：技术公布日：2024/8/16