颅内动脉瘤破裂诊断标志物及其应用

本发明涉及颅内动脉瘤破裂诊断标志物领域，特别涉及颅内动脉瘤破裂诊断标志物及其应用。背景技术：1、颅内动脉瘤(intracranial aneurysms,ia)是颅内动脉血管由于先天异常或后天损伤等因素导致局部的血管壁损害，动脉壁内弹力层破坏，在血流动力学负荷和其他因素作用下，逐渐扩张形成的异常膨出，是造成蛛网膜下腔出血(sah)的重要原因之一。颅内动脉瘤是非常常见的脑血管病，在世界范围内的发病率为3.2％，中国的发病率略高于世界水平约为7％。在患病的人群中，约有0.25％的人会发生动脉瘤破裂。一旦破裂出血，致残致死率极高。研究表明，由动脉瘤首次破裂引起蛛网膜下腔出血造成的死亡率达到30％-40％，第二次破裂出血的死亡率增加至60-70％，如果第三次破裂出血几乎造成100％的死亡，而且，幸存者也可能遗留有不同程度的残疾。预测颅内动脉瘤破裂出血的风险对于高危ia的识别至关重要，造成动脉瘤破裂的可能原因有年龄、性别、高血压、吸烟、压力、先天性血管脆性、病理状况、炎症和血管壁破损等以及遗传因素和血管功能相关基因表达的改变。因此，了解ia的破裂机制和危险因素极其重要，寻找到一个快速、准确可靠的预测颅内动脉瘤破裂的诊断标志物，有助于临床治疗决策的制定、早期干预以降低动脉瘤破裂引起的严重后果。2、自噬是一个高度保守的分解代谢过程，保护细胞免受各种应激源的影响。自噬能够维持细胞稳态，但自噬的无规则激活可能导致细胞损伤和细胞死亡。各种应激条件都可激活自噬，如缺氧、氧化应激、内质网应激等。既往的研究表明，自噬不仅仅在正常的生理中起作用，在病理的过程中也起关键作用。血管平滑肌细胞作为血管壁的主要成分，其功能(表型转化、凋亡等)调节在颅内动脉瘤发病中发挥了重要的作用。自噬可通过参与细胞功能调控进而参与血管功能的调节。在颅内动脉瘤发生起始阶段，自噬的激活促使血管平滑肌细胞发生表型转化，并抑制其凋亡；随着颅内动脉瘤的发展，自噬的激活与细胞的凋亡由最初的对抗关系转化为协同或促进关系，血管平滑肌细胞大量凋亡导致颅内动脉瘤破裂。由此可推测自噬相关基因通过调控血管平滑肌功能在颅内动脉瘤的发生、发展和破裂过程中起着至关重要的作用，深入挖掘自噬相关基因，为理解颅内动脉瘤的形成和破裂机制以寻找预测颅内动脉瘤破裂的分子标志物提供理论基础。3、因此我们基于生物信息学方法鉴定了自噬相关基因在颅内动脉瘤破裂高风险预测的诊断标志基因。技术实现思路1、为解决上述现有技术存在的问题，本发明的目的在于提供颅内动脉瘤破裂诊断标志物及其应用。2、为达到上述目的，本发明的技术方案为：3、颅内动脉瘤破裂诊断标志物及其的应用，所述标志物为自噬相关基因hgs、nlrc4、ulk1，其序列分别如seq id no.1-seq id no.3所示。4、颅内动脉瘤破裂风险预测快速诊断标志物的应用，当自噬相关基因hgs、nlrc4、ulk1的pcr检测的ct值分别高于21.775，22.195，24.32及以上,判断为颅内动脉瘤破裂高危患者。5、一种颅内动脉瘤破裂风险预测快速诊断试剂盒，该试剂盒包含检测自噬相关基因hgs、nlrc4、ulk1的pcr引物。6、进一步的，当引物检测到自噬相关基因hgs、nlrc4、ulk1 pcr检测的ct值分别高于21.775，22.195，24.32及以上时，则存在颅内动脉瘤破裂风险。7、相对于现有技术，本发明的有益效果为：8、经生物信息学分析及实验验证，确定自噬相关基因hgs、nlrc4、ulk1具有成为颅内动脉瘤破裂高风险预测的诊断标志物的潜力。联合检测较单基因诊断效能高，该基因组合在临床实践中具有潜在的重要作用。9、颅内动脉瘤的诊断严重依赖于影像学技术，而对高危动脉瘤的临床评估很大程度上依赖于临床医生的经验，主要根据临床因素、血流动力学和动脉瘤的形态。目前作为诊断颅内动脉瘤金标准的数字减影血管造影(dsa)，由于其检查的有创性和形态学参数的宽泛性并不适合精准医学的要求，而针对具有破裂风险的颅内动脉瘤尚无可用的标志物。另一方面，如高血压、血脂水平、饮酒、吸烟等也是引起动脉瘤破裂的风险因素。基于这些风险因素，临床上已提出了各种评估风险的方法，但预测性能仍有待提高。因此，临床上迫切需要找到一批适合颅内动脉瘤破裂风险预测的生物标志物，用于快速、准确地鉴别出颅内动脉瘤破裂的高危患者，辅助未破裂颅内动脉瘤的临床决策制定、早期干预以改善患者临床结局。本发明提供了有预测颅内动脉瘤破裂潜能的血清生物标志物，为临床上颅内动脉瘤的精准诊治提供了新思路，具有较高的灵敏度、特异度和准确性。同时，这些血清标志物方便制备成相应的诊断试剂盒，能够满足快速、准确评估的效果，使之更适合精准医疗的临床应用。技术特征：1.颅内动脉瘤破裂诊断标志物，其特征在于，所述标志物为自噬相关基因hgs、nlrc4、ulk1，其序列分别如seq id no.1-seq idno.3所示。2.颅内动脉瘤破裂风险预测快速诊断标志物的应用，其特征在于，当自噬相关基因hgs、nlrc4、ulk1的pcr检测的ct值分别高于21.775，22.195，24.32及以上,判断为颅内动脉瘤破裂高危患者。3.一种颅内动脉瘤破裂风险预测快速诊断试剂盒，其特征在于，该试剂盒包含检测自噬相关基因hgs、nlrc4、ulk1的pcr引物。4.根据权利要求3所述试剂盒，其特征在于，当引物检测到自噬相关基因hgs、nlrc4、ulk1 pcr检测的ct值分别高于21.775，22.195，24.32及以上时，则存在颅内动脉瘤破裂风险。技术总结颅内动脉瘤破裂诊断标志物及其应用，利用生物信息学手段对颅内动脉瘤(intracranial aneurysms,IA)相关数据进行挖掘，将与颅内动脉瘤破裂(rupture intracranial aneurysms,RIA)相关性高的差异表达基因与自噬基因取交集，筛选出与RIA相关性高的自噬相关基因，并实施分子生物学实验在生物样本中对候选基因的表达情况进行验证，评估其作为预测颅内动脉瘤破裂高风险的诊断标志物的可行性，以期为颅内动脉瘤破裂高危患者的早期识别和精准诊断提供参考。技术研发人员：闵晓黎,曾勇受保护的技术使用者：昆明医科大学第二附属医院技术研发日：技术公布日：2024/8/16