药用级玫瑰红的光动力抗革兰氏阳性菌活性的制

背景技术：1、耐多药(mdr)革兰氏阳性菌的不断出现是主要的公共卫生威胁之一[1-3]。特别是葡萄球菌(staphylococcus)、肠球菌(enterococcus)和链球菌属的几个种(streptococcusspp.)的mdr菌株对发病率和死亡率有显著影响[4]。这些病原体对至关重要的抗菌剂(例如β内酰胺、大环内酯类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类、糖肽、恶唑烷酮类、环肽和缩肽类)的不断上升的耐药率令人十分担忧[5]。迄今为止，在后期临床研究中，很少有新的化学实体被用于治疗由mdr细菌病原体引起的感染[6]。2、天然和合成染料已被用作抗菌剂或抗原虫剂[7]。例如，亚甲蓝和氯法齐明仍被视为重要的孤儿药[8,9]。3、商业级玫瑰红(rb)4、玫瑰红(rb)是一种明亮的玫瑰红色呫吨衍生物化合物，于19世纪首次合成为羊毛染料，随后在日本用作食用染料(食用红105号)[28]。更具体地，rb是呫吨化合物荧光素的衍生物。与荧光素相比，rb有两种类型的额外卤素：四个氯和四个碘取代基。5、1914年首次描述了使用rb进行人类眼表损伤的视觉诊断(通过眼部滴注)[29]。rb后来被引入作为一种静脉施用的相对快速的诊断辅助手段，用于评估单次100毫克剂量后人体肝脏的功能能力[30]。1971年，131i rb(玫瑰红钠131i注射液usp)获得美国食品药品管理局(fda)批准，用作确定肝功能的诊断辅助手段[31,32]。6、2009年，robengatope的制造商bracco diagnostics inc.正式将rb产品从美国市场撤回，因为出现了更新的肝脏成像方法，例如计算机断层扫描。1974年，barnes-hindpharmaceuticals inc.(barnes-hind)推出了在水溶液中1％rb的医疗器械产品用于披露角膜损伤、诊断角膜炎、角结膜炎和干燥症，以及检测眼内异物[33]。1981年，barnes-hind推出了用于相同适应症的相同浓度的眼科试纸条。尽管这两种产品都已获得美国食品药品监督管理局(fda)的上市许可，但由于它们的上市时间早于fda的正式审查和批准，因此溶液和试纸条装置及其各自的权利要求均未获批准。7、商业级rb(市售染料含量可能在80％至95％rb之间变化，包含总污染物和物质相关杂质)采用gnehm在19世纪80年代开发的历史工艺制造。人们认为，用于诊断应用的rb是含有一些杂质的商业级rb[34]。美国药典(usp)此前将rb列为分析标准。rb于2019年从usp中删除。因此，商业级rb在现代诊断和治疗环境中缺乏相关性。因此，验证rb是否适用于治疗人类疾病带来了重大的监管挑战。8、玫瑰红(rb)染料(4,5,6,7-四氯-2',4',5',7'-四碘荧光素)已被临床研究用于治疗黑色素瘤和其他实体癌[10-14]。rb的光动力抗菌特性曾被零星报道[15-27和70]。例如，dees等人[75]教导使用1-10μm的rb结合500-600nm波长带的绿光照射对抗革兰氏阳性菌和革兰氏阴性抗生素耐药菌，但未具体说明光源、其强度或照射持续时间。该公开内容确实报告了使用rb和200mw/cm2强度的532nm光的100j/cm2的光来治疗肿瘤(表3)。9、在这里，我们报告了纯形式的rb的抗菌活性及其作为抗菌剂在有光和无光的情况下治疗mdr革兰氏阳性细菌感染的范围和限制。技术实现思路1、本发明考虑与用波长约500nm至约600nm的光照射细菌约1至约10分钟结合的玫瑰红衍生物的组合使用，以处理和杀死被照射的细菌。在一个方面，在一种方法中处理革兰氏阳性菌，所述方法包括以下步骤：将细菌与含有以约0.2至约3.1μg/ml的浓度溶解或分散在其中的下述式i的玫瑰红(rb)化合物的水性药物组合物接触；和用波长约500nm至约600nm的光照射那些接触的细菌约1至约10分钟的时间段，以提供约0.7至约7.2j/cm2的光剂量。式i的rb化合物如下所示：2、3、其中x为氧或氮，“n”为零或1，使得当x为氧时，n为零且r2不存在，和当x为氮时，n为1且r2存在。当x为氧时，r1选自氢(h)、m+(其为药学上可接受的阳离子)、c1-c4烷基和下文定义的含芳香环取代基。当x为氮时，r1和r2相同或不同，且选自氢、c1-c4烷基或与酰胺氮原子一起形成5-或6-元环和芳香环取代基。芳香环取代基是含有5-或6-元的单环、或5,6-或6,6-稠合芳香环体系，并且芳香环或环体系取代基可以含有0、1或2个独立地为氮、氧或硫的杂环原子。4、示例性芳香环取代基的结构式如下所示：5、6、其中是分别提供酯或单取代胺。7、示例性的所处理的革兰氏阳性菌包括药物敏感和耐药的金黄色葡萄球菌(s.aureus)、表皮葡萄球菌(s.epidermis)、粪肠球菌(e.faecalis)和屎肠球菌(e.faecium)中的一种或多种，以及枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)、蜡状芽孢杆菌(bacillus cereus)和唾液链球菌(streptococcus salivarius)中的一种或多种。革兰氏阳性菌在接触时存在于哺乳动物细胞内或细胞上或作为生物膜存在。优选地，对细菌照射约2至约5分钟的时间段，以提供约1.4至约3.6j/cm2的光剂量。8、还考虑了类似的方法来处理革兰氏阴性菌，其是伯克霍尔德菌(burkholderia)、沙门氏菌(salmonella)和变形杆菌(proteus)中的一种或多种。在这里，上述rb化合物以约2至约15μm的浓度溶解或分散在水性药物组合物中。技术特征：1.一种处理革兰氏阳性菌的方法，包括以下步骤：2.根据权利要求1所述的方法，其中所述rb化合物为玫瑰红二钠。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述革兰氏阳性菌为药物敏感和药物耐药的金黄色葡萄球菌(s.aureus)、表皮葡萄球菌(s.epidermis)、粪肠球菌(e.faecalis)和屎肠球菌(e.faecium)中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的方法，其中所述革兰氏阳性菌是枯草芽孢杆菌(bacillussubtilis)、蜡状芽孢杆菌(bacillus cereus)和唾液链球菌(streptococcus salivarius)中的一种或多种。5.根据权利要求1所述的方法，其中所述革兰氏阳性菌在接触时存在于哺乳动物细胞内或哺乳动物细胞上。6.根据权利要求1所述的方法，其中所述革兰氏阳性菌以生物膜形式存在。7.根据权利要求1所述的方法，其中所述革兰氏阳性菌被照射约2至约5分钟以提供约1.4至约3.6j/cm2的光剂量。8.根据权利要求1所述的方法，其中所述芳香环取代基选自由以下的一种或多种组成的组的一种或多种：9.一种处理革兰氏阴性菌的方法，所述革兰氏阴性菌选自伯克霍尔德菌、沙门氏菌和变形杆菌中的一种或多种，所述方法包括以下步骤：10.根据权利要求9所述的方法，其中所述革兰氏阳性菌在接触时存在于哺乳动物细胞内或哺乳动物细胞上。11.根据权利要求9所述的方法，其中所述革兰氏阳性菌被照射约2至约5分钟以提供约1.4至约3.6j/cm2的光剂量。技术总结本发明涉及玫瑰红(RB)衍生物与用光照射细菌的组合使用以处理和杀死被照射的细菌。在一个方面，在一种方法中处理革兰氏阳性菌，其中使细菌与含有以约0.2至约3.1μg/mL的浓度溶解或分散在其中的本文讨论的式I的玫瑰红(RB)化合物的水性药物组合物接触。使那些接触的细菌与波长约500nm至约600nm的光接触约1至约10分钟的时间段以提供约0.7至约7.2J/cm2的光剂量。考虑了类似的方法来用于使用含有约2至约15μM浓度的RB化合物的药物组合物处理革兰氏阴性菌，所述革兰氏阴性菌是伯克霍尔德菌、沙门氏菌和变形杆菌中的一种或多种。技术研发人员：M·库若苏,D·罗德里格斯,E·V·皮尔星,B·霍洛维茨,J·莱西三世,E·A·沃奇特受保护的技术使用者：普罗维克图斯药品技术公司技术研发日：技术公布日：2024/8/16