一种灵长类动物出血模型的构建方法与流程

本发明属于生物医药，涉及一种动物模型的构建方法，特别是涉及一种灵长类动物出血模型的构建方法。背景技术：1、抗凝药物是一类可以延长凝血时间、阻止血液凝固形成血栓的药物，这些药物在预防和治疗心脑血管疾病、血栓性疾病方面发挥重要作用，如中风、心肌梗死、深静脉血栓形成、肺栓塞等。然而传统的抗凝药物存在较高的出血风险，需要经常检测和调节剂量，为了开发疗效更好、安全性更高的新型抗凝剂是药物研发的重点方向。2、目前关于临床前药效学评价的动物模型中缺乏良好的评价抗凝血药效果的动物模型，最常用的是大小鼠断尾模型，此模型通过切断动物尾巴记录断尾处的出血时间，不仅动物福利标准低下，结果重复性差，计时容易出现偏差，并且断尾创伤与临床出血检测方法相距较远，同时动物断尾后不能重复利用。本发明出血模型不仅创伤极小，结果重复性高，且双侧上肢多位点可以多次利用，极大的节约动物、人力、物力、及时间成本，有效降低新药的研发费用。技术实现思路1、针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种非人灵长类动物模型的构建方法；灵长类动物在解剖结构、生理功能、基因结构、凝血机制等方面与人类具有高度的一致性，因此需建立有效的评价凝血功能的猴动物模型，同时抗凝药在猴模型中的研究结果也容易推广到人，对血液系统药物的开发具有重要意义。2、本发明第一个方面公开了一种灵长类动物出血模型的构建方法，本发明采用创新设计的针头插入静脉引起出血，结合智能计时器记录出血时间，具有创伤极小、恢复快、自动准确计时、操作简单、重复性高、符合临床出血测定方法，同时可以自动测定出血量（体积或重量）。包括以下步骤：3、s1：利用出血装置的采血针插入灵长类动物的静脉，经连接针头的导管引导出血，并利用出血装置的固定机构对灵长类动物的肢体进行固定；4、s2：同时用计时器记录出血时间，利用出血时间的延长变化进行对凝血功能、血小板功能、凝血功能障碍、抗凝血药药理功能进行评价。5、本发明第二个方面创新设计了一种出血装置，可以根据动物实际体型大小，对动物手臂自然弯曲的姿势进行调节，避免了压迫等情况造成体位性血压变化，降低出血时间误差；此外恒温功能也有利于减少出血时间误差，提高测量的准确度；6、所述出血装置包括滑动安装在平台上的移动臂，以及通过滑块滑动安装在移动臂上的手臂收缩固定带，利用手臂收缩固定带对灵长类动物的手臂进行固定；7、平台还设置有采血机构，包括采血针以及采血臂，采血针可转动地安装在采血臂上，采血臂固定在平台上；8、滑块通过同步传动结构连接采血针，当滑块与手臂收缩固定带上升时，带动采血针位置的上升以及转动。创新设计的出血装置，其中采血针具有固定和方向调节功能，可以适应左右上肢各种体位以及避免针头移动或针头脱落从而影响出血时间。9、优选地，在采血臂中设置有齿条，采血针通过啮合在齿条上的齿轮进行上下移动，在齿轮进行上下移动的同时，会带动采血针进行转动，从而实现采血针在高度和方向上的调节。10、所述同步传动结构包括第一连接臂和第二连接臂，第一连接臂与第二连接臂之间通过轴承式转动副相连接，第一连接臂的另一端可转动地安装在移动臂上，第二连接臂的另一端与采血针可转动地连接。11、实际工作时，灵长类动物将手臂穿过手臂收缩固定带，利用手臂收缩固定带对动物手臂进行固定，将采血针插入动物静脉，对移动臂进行位置调节，使得动物手臂处于自然的姿势；在采血开始后，动物应激手臂进行摆动时，同步传动机构的设置，会使得手臂在抬起或放平时，采血针能够较好地贴合动物的手臂进行采血，从而保证采血的稳定。12、其中出血装置中还装有温度控制单元，维持上肢周围的环境温度处于恒定。因为周围环境温度可以影响出血时间，本发明出血模型结合出血装置中的温度控制单元可以维持上肢周围的环境温度处于恒定，从而可以保证出血时间的重复性和稳定性。13、正常在小血管受损后引起的出血，在几分钟内就会自行停止，这种现象称为生理性止血(hemostasis)。临床上常用小针刺破人耳垂或指尖，使血液自然流出，然后测定出血持续的时间，这段时间称为出血时间(bleeding time)，正常人不超过9分钟（模板法）。出血时间的长短可反映生理性止血功能的状态。生理性止血功能减退时，可有出血倾向，发生出血性疾病; 而生理性止血功能过度激活，则可导致病理性血栓形成，本发明可以重复性测定灵长类动物食蟹猴的出血时间，本发明还利用临床抗凝药物华法林进而证明：食蟹猴的平均出血时间与人类似，并且随药物服用的天数变化；从而说明本发明出血模型可以用于临床生理凝血功能研究、用于评价血小板功能、凝血功能障碍（血友病a,b）、抗凝血药药理药效等，对新药开发和基础生理机制研究具有广泛应用价值。技术特征：1.一种灵长类动物出血模型的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：2.根据权利要求1所述的一种灵长类动物出血模型的构建方法，其特征在于，所述出血装置包括：3.根据权利要求2所述的一种灵长类动物出血模型的构建方法，其特征在于，所述同步传动结构包括第一连接臂和第二连接臂，第一连接臂与第二连接臂之间通过轴承式转动副相连接，第一连接臂的另一端可转动地安装在移动臂上，第二连接臂的另一端与采血针可转动地连接。4.根据权利要求2所述的一种灵长类动物出血模型的构建方法，其特征在于，出血装置中还装有温度控制单元，维持上肢周围的环境温度处于恒定。5.根据权利要求1所述的一种灵长类动物出血模型的构建方法，其特征在于，所述出血时间与出血量利用计时机器和计量容器可同时记录。技术总结本发明属于生物医药技术领域，涉及一种动物模型的构建方法，特别是涉及一种灵长类动物出血模型的构建方法，本发明使用采血针头插入动物上肢静脉，并经连接针头的导管引导出血，与人临床出血测定方法具有可比性，同时结合出血装置，控制动物大小，体姿、温度等影响测量因数，可以重复测定灵长类动物的出血时间和出血量，可以用于动物和人的凝血功能研究。本发明出血模型可以用于评价凝血功能、血小板功能、凝血功能障碍（血友病A,B）、抗凝血药药理药效等，对新药开发和基础生理机制研究具有广泛应用价值。技术研发人员：邓继林,宋之战受保护的技术使用者：上海浦灵生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/16