多环化合物注射剂及其制备方法与流程

本发明属于癌症药物制剂领域，具体涉及一种多环化合物的注射用制剂及其制备方法。背景技术：1、dhx33属于含有dead/h盒的rna解旋酶蛋白家族，其中dead/h代表氨基酸的缩写asp-glu-ala-asp/his，这一序列连同其他多个保守性氨基酸序列，出现在rna解旋酶家族成员的蛋白序列中，高度参与核酸底物结合以及atp水解。虽然这些家族成员共有这些相同的序列，但是每个rna解旋酶都有各自特定的专一性和独特的生物功能。人dhx33蛋白的分子量是72kda，具有解旋核酸的功能，它利用atp水解所释放的生物能来驱动改变rna和蛋白质复合物的构象，进而参与多种rna的代谢活动，具体而言，从rna转录、剪切、编辑、翻译到降解等一系列生物过程。dhx33的功能并不仅仅局限于对rna分子的修饰，研究表明，除了解旋rna双链之外，dhx33也参与dna的代谢。具体而言，dhx33可以解开dna的双链结构，并在基因表达过程中起重要作用。在体外的酶反应体系中，还发现dhx33可以解开dna/rna的杂合双链结构。2、研究表明，dhx33通过结合在多种癌症相关的基因启动子，影响了dna的甲基化状态，进而在基因组水平调控多种癌症基因的表达和肿瘤发展相关的信号通路，对细胞生长、增殖、迁移、凋亡、糖代谢等多种细胞活动有至关重要的作用。此外，发现dhx33可以感受外来双链rna分子的侵入并在细胞的先天免疫中发挥重要作用。dhx33作为十分重要的细胞生长调控基因，在多种癌症中高度表达。多种癌症的发生发展依赖于dhx33蛋白的高度表达。dhx33的遗传敲除可以显著抑制ras癌基因驱动的肺癌发生发展；体内和体外实验证实，抑制dhx33蛋白后，多种癌症如乳腺癌、结肠癌、脑胶质瘤、淋巴瘤等癌症的发生发展都受到明显抑制。3、研究表明，dhx33的蛋白功能依赖于其解旋酶活力。dhx33的解旋酶活力缺失突变体不具有dhx33蛋白的功能，无法替代野生型dhx33基因的功能。4、中国专利zl 202110724793.1以及中国专利申请202211413921.1、202211486053.x和202211486081.1都公开了dhx33的抑制剂，例如多环化合物ky386。但多环化合物ky386水溶性较差，在水中24小时的平衡溶解度小于0.01mg/ml，属难溶型化合物。因此，如何提高该抑制剂的水溶性，并具有满足临床试验需求的各方面性质，包括稳定，易于生产，制剂成本低、机体耐受性高、易于运输储存等，是目前亟需解决的问题。技术实现思路1、有鉴于此，本发明的目的在于提供多环化合物注射剂及制备方法，以解决现有技术中多环化合物水溶性差的问题，同时提供稳定、机体耐受高的即用型注射剂。2、一方面，本发明提供了多环化合物注射剂，该注射剂含有式i所示多环化合物、低黏度聚乙二醇、吐温80(也称为聚山梨醇酯80)以及聚氧乙烯(35)蓖麻油，其中式i所示多环化合物的浓度为0.1-15mg/ml，3、4、在本发明的实施方案中，该注射剂含有约14.28mg/ml的式i所示多环化合物。5、在本发明的实施方案中，低黏度聚乙二醇、吐温80以及聚氧乙烯(35)蓖麻油的体积比或者质量比为约2:2:1。6、在本发明的实施方案中，低黏度聚乙二醇为peg300、peg400或其混合物。7、在本发明的实施方案中，聚氧乙烯(35)蓖麻油可以为聚氧乙烯(35)蓖麻油el或者聚氧乙烯(35)蓖麻油elp。8、在本发明优选的实施方案中，该注射剂含有式i所示多环化合物、peg300、吐温80以及聚氧乙烯(35)蓖麻油，其中式i所示多环化合物的浓度为0.1-15mg/ml，优选14.28mg/ml，所述peg300、吐温80以及聚氧乙烯(35)蓖麻油的体积比或质量比为约2:2:1。9、在本发明的实施方案中，该注射剂不添加水或其水含量控制在质量比1％内。10、在第二方面，本发明提供了制备多环化合物注射剂的方法，该方法包括以下步骤：11、s1.将低黏度聚乙二醇加热至60±5℃后，保持温度恒定，保持鼓氮(0.03mpa)至少20分钟；12、s2.在搅拌条件下，加入式i所示多环化合物，搅拌直至充分溶解；13、s3.加入吐温80，保持鼓氮(0.03mpa)并充分搅拌10分钟；和14、s4.加入聚氧乙烯(35)蓖麻油，继续搅拌并充氮30分钟，直至混合均一，即得多环化合物注射剂。15、在本发明第二方面的实施方案中，式i所示多环化合物的浓度为约0.1-15mg/ml。16、在本发明第二方面的的实施方案中，低黏度聚乙二醇、吐温80以及聚氧乙烯(35)蓖麻油的体积比或者质量比为约2:2:1。17、在本发明第二方面的的实施方案中，低黏度聚乙二醇为peg300、peg400或其混合物。18、在本发明第二方面的的实施方案中，聚氧乙烯(35)蓖麻油可以为聚氧乙烯(35)蓖麻油el或者聚氧乙烯(35)蓖麻油elp。19、在第三方面，本发明提供了即用型多环化合物注射剂，其含有水、多环化合物注射剂以及渗透压调节剂。20、在本发明第三方面的实施方案中，式i所示多环化合物的浓度为约0.1-0.5mg/ml，即用型多环化合物注射剂的ph为3.2-6.5，且是等渗的。21、在第四方面，本发明提供了针对上述多环化合物注射制剂的式i所示多环化合物含量和杂质的分析分离方法，其中，色谱条件为：用十八烷基键合硅胶为填充剂(phenomenex gemini c18，4.6×250mm，5μm或效能相当的色谱柱)；以0.1％甲酸为流动相a，甲醇为流动相b，按下表进行梯度洗脱；柱温为30℃；检测波长为246nm；流速为每分钟1.0ml；进样体积10μl，梯度洗脱时间设为37分钟。22、借由上述实施方案可知，本发明提供了多环化合物注射剂，其以低黏度聚乙二醇、吐温80以及聚氧乙烯(35)蓖麻油为溶剂，提高了式i所示多环化合物的溶解度，同时提高了该注射剂的稳定性和耐储存性，适用于临床实验研究。技术特征：1.多环化合物注射剂，其特征在于，所述注射剂含有式i所示多环化合物、低黏度聚乙二醇、吐温80以及聚氧乙烯(35)蓖麻油，其中所述式i所示多环化合物的浓度为0.1-15mg/ml，2.根据权利要求1所述的注射剂，其特征在于，所述注射剂含有约14.28mg/ml的所述多环化合物。3.根据权利要求1所述的注射剂，其特征在于，所述低黏度聚乙二醇、吐温80 以及聚氧乙烯(35)蓖麻油的体积比或质量比为约2:2:1。4.根据权利要求3所述的注射剂，其特征在于，所述低黏度聚乙二醇为peg300、peg400或其混合物。5.根据权利要求1所述的注射剂，其特征在于，所述注射剂不添加水或其水含量控制在质量比1％内。6.制备权利要求1-5中任一项所述多环化合物注射剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述低黏度聚乙二醇、吐温80以及聚氧乙烯(35)蓖麻油的体积比或质量比为约2:2:1，所述多环化合物的浓度为0.1-15mg/ml，8.即用型多环化合物注射剂，其特征在于所述注射剂含有水、权利要求1-5中任一项所述的多环化合物注射剂以及渗透压调节剂，其中所述即用型多环化合物注射剂的ph为3.2-6.5，且是等渗的，优选所述多环化合物的浓度为0.1-0.5mg/ml。9.针对权利要求1-5中任一项所述多环化合物注射制剂的式i所示多环化合物含量和杂质的分析分离方法，其特征在于，色谱条件为：用十八烷基键合硅胶为填充剂(phenomenex gemini c18，4.6×250mm，5μm或效能相当的色谱柱)；以0.1％甲酸为流动相a，甲醇为流动相b，按下表进行梯度洗脱；柱温为30℃；检测波长为246nm；流速为每分钟1.0ml；进样体积10μl，梯度洗脱时间设为37分钟：技术总结本发明属于癌症药物制剂领域，公开了多环化合物注射剂及其制备方法。多环化合物注射剂含有式I所示多环化合物、低黏度聚乙二醇、吐温80以及聚氧乙烯(35)蓖麻油，其中式I所示多环化合物的浓度为0.1‑15mg/mL。此外还公开了即用型多环化合物注射剂，其含有水、多环化合物注射剂以及渗透压调节剂，其中即用型多环化合物注射剂的pH为3.2‑6.5，且是等渗的。本发明的多环化合物注射剂提高了式I所示多环化合物在水溶液中的溶解度，同时具有良好的稳定性、辅料的机体耐受性或安全性、低成本、易于生产及耐储存性，适用于大规模临床实验研究，技术研发人员：张严冬受保护的技术使用者：深圳开悦生命科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/8/16