一种包载小分子mTOR抑制剂的长循环纳米圆盘制剂

本发明涉及生物医药，具体涉及一种包载小分子mtor抑制剂的长循环纳米圆盘制剂及其制备方法与应用。背景技术：1、肿瘤的发生、发展与细胞信号转导通路关系密切，其异常活化通常导致肿瘤的产生，基于细胞信号转导通路中关键调控蛋白设计的药物，因其较高的靶向性和选择性，具有良好的体内安全性。因此，以信号通路中关键激酶为靶标的抗肿瘤药物成为近年来药物研究的重要方向。2、磷酸肌醇3激酶/蛋白激酶b/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(即pi3k/akt/mtor)通路的异常激活与多种人类癌症有关，包括乳腺癌、前列腺癌、肺癌、子宫内膜癌、结肠癌和卵巢癌等。美国fda已授予其潜在“first-in-class”pi3k/mtor抑制剂吉达他塞(gedatolisib，图中对应pt-1)突破性疗法认定，用于治疗hr阳性/her2阴性转移性乳腺癌患者。gedatolisib(pt-1)是辉瑞公司开发的一种mtor/pi3k双重抑制剂，在一项临床ⅱ研究中，吉达他塞在复发性子宫内膜癌患者中表现出良好的耐受性和中等活性。但是，吉达他塞(gedatolisib,pt-1)的亚型选择性较差，在临床试验中注意到不良事件的发生频率很高(约26％)，包括口腔炎、转氨酶炎和高血糖症。为了克服gedatolisib(pt-1)多靶点抑制剂带来的诸多副作用，本研究团队在前期基于gedatolisib(pt-1)进行结构优化，得到了选择性更高的单靶点抑制剂pt-88(通过增加凋亡和诱导自噬，阻止癌症生长，促进癌细胞死亡)，pt-88对mtor表现出最有效的抑制效率，ic50值为1.2nm，是对照gedatolisib(pt-1)的1.8倍，并且化合物pt-88对其他pi3k亚型没有明显的抑制作用，这表明pt-88是一种高效且具有亚型选择性的mtor抑制剂。基于pt-88对mtor激酶高选择活性的基础，我们推测pt-88可能获得具有更高的安全性。gedatolisib(pt-1)和pt-88的结构和活性数据见下表。3、小分子mtor抑制剂gedatolisib(pt-1)和pt-88的结构和活性数据4、5、虽然得到选了择性更高的单靶点抑制剂pt-88，但无论是gedatolisib(pt-1)还是pt-88，普通剂型的小分子mtor抑制剂在应用过程中存在体内循环时间短、药代动力学表现不够优异、肿瘤抑制效果不够理想等问题，还会增加临床管理难度以及降低患者的依从性。因此，如何保护药物有效成分、改善药物的药代动力学行为及组织分布，提高制剂稳定性和疗效，将会成为目前该类药物研究的一大重点。6、脂质体是一种由脂质双分子层形成的球形囊泡，由磷脂为骨架膜材及附加剂组成。其具有良好的生物相容性和可降解性，它可以通过对药物的包载、结构组成的调整和表面的修饰，提高药物的体内外稳定性、改变活性成分的体内过程，进而改善药物的药代动力学行为及组织分布，最终实现药物的增效、减毒。目前，用于制备脂质体的磷脂类包括天然磷脂和合成磷脂二类，天然磷脂以卵磷脂(磷脂酰胆碱，pc)为主，合成磷脂主要有二棕榈酰磷脂酰胆碱(dppc)、二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(dspe)、二硬脂酰磷脂酰胆碱(dspc)等；附加剂方面，包括胆固醇、十八胺、磷脂酸、盐类等，以及长循环脂质体中会用到peg脂质，比如dspe-mpeg2000等，在制备不同脂质体制剂中发挥不同的作用。7、已报道的长循环脂质体制剂相关专利申请有：cn202111654459.x共载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体的制备方法，其是将大豆卵磷脂、胆固醇、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000、多西他赛共同反应制成透明质膜，然后进行相应处理得到共同包载多西他赛和阿霉素的长循环脂质体；cn202110898374.x一种靶向birc6基因的sirna核酸脂质体及其制备方法和用途，所述脂质体组分包括dotap、chol、dppc和dspe-peg2000；cn202111477036.5一种含铂类药物纳米囊泡及其制备方法与应用，所述长循环脂质体为二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、磷脂酰胆碱-聚乙二醇、二硬脂酰磷脂酰胆碱-聚乙二醇中的一种或几种。上述专利虽然报道了采用磷脂和胆固醇等附加剂制成了长循环脂质体制剂，但未见有对pi3k或mtor抑制剂尤其是gedatolisib(pt-1)及pt-88进行长循环纳米圆盘改造的报道。技术实现思路1、为了解决现有技术中存在的上述技术问题，本发明提供一种包载小分子mtor抑制剂的长循环纳米圆盘制剂及其制备方法与应用，具体是通过以下技术方案得以实现的：2、1、一种包载小分子mtor抑制剂的长循环纳米圆盘制剂，包括长循环纳米圆盘组分和包裹于其中的药物活性组分，所述药物活性组分为如下述结构式的小分子mtor抑制剂pt-88；所述脂质体组分包括磷脂酰胆碱(popc)、胆固醇(cho)和mpeg2000-dspe，其中pt-88具体结构如下：3、4、进一步的，所述纳米圆盘组分和药物活性组分的质量比为5-15：1。5、优选地，所述纳米圆盘组分和药物活性组分的质量比为9：1。6、所述纳米圆盘组分按重量份计包括35份的popc，25份的cho和25份mpeg2000-dspe。7、进一步的，将所述pt-88成分制成脂质纳米圆盘snd/pt-88。8、2、前述包载小分子mtor抑制剂的长循环纳米圆盘制剂的制备方法，包括以下步骤：9、(1)将药物活性组分和纳米圆盘组分溶解于氯仿中，超声溶解得到氯仿相溶液；10、(2)将前述得到的氯仿相溶液37℃旋转蒸发，去除有机溶剂氯仿，形成脂质薄膜，然后烘干；11、(3)转移至4ml ep管中，2s on/1s off，20％强度探头超声，冰浴超声45min；0.22μm滤头过滤后，纯水稀释50倍后检测粒径、电位，得到包载小分子mtor抑制剂的长循环纳米圆盘制剂。12、进一步的，所述旋转蒸发，是在37℃、80rpm条件下进行。13、进一步的，所包载小分子mtor抑制剂的长循环纳米圆盘制剂(含有pt-88成分的脂质纳米盘snd/pt-88)的制备方法为：14、(1)将摩尔比为15:35:25:25的pt-88和popc、cho、mpeg2000-dspe溶解于氯仿中，超声溶解得到氯仿相溶液；15、(2)将前述得到的氯仿相溶液37℃旋转蒸发，去除有机溶剂氯仿，形成脂质薄膜，然后烘干；16、(3)转移至4ml ep管中，2s on/1s off，20％强度探头超声，冰浴超声45min；0.22μm滤头过滤后，纯水稀释50倍后检测粒径、电位，得到包载小分子mtor抑制剂的长循环纳米圆盘制剂。17、3、如前所述的包载小分子mtor抑制剂的长循环纳米圆盘制剂在制备治疗或预防癌症疾病的药物中的应用。18、进一步的，所述癌症疾病为乳腺癌，优选三阴性乳腺癌。19、与现有技术相比，本发明的技术效果体现在：20、(1)本技术采用薄膜水化和超声法，将药物活性成分gedatolisib/pt-88用脂质体组分popc、胆固醇cho、mpeg2000-dspe进行包载，得到长循环纳米圆盘(snd)，包载效率可达70％以上。由于snd引入了pfg化的磷脂，避免了单纯聚乙二醇化纳米载体的缺陷，使得脂质体中的peg可以与抗peg抗体相互作用(无论是预先存在的抗体还是在重复施用聚乙二醇化纳米药物后产生的抗体)，且不易进一步结合c1q并激活补体，实现体内长循环。21、(2)本技术所得到的长循环纳米圆盘制剂，显著延长了pt-88和pt-1在血液中的循环时间，显著增加gedatolisib(pt-1)和pt-88的半衰期(t1/2)和最大血浆浓度(cmax)值，清除率(cl)显著降低，表明本发明的纳米圆盘制剂通过规避抗peg抗体的干扰来有效递送，有效改善了普通gedatolisib(pt-1)和pt-88药物的药代动力学特征。22、(3)本技术所得到的长循环纳米圆盘制剂，稳定性良好，且将普通pt-88药物的最大耐受剂量提升了两倍。抗肿瘤试验研究表明，snd/pt-88能显著抑制肿瘤生长，肿瘤生长抑制率(tgi)值为64.1％，相比于普通gedatolisib(pt-1)和pt-88药物，具有更佳的对乳腺癌细胞、尤其是三阴乳腺癌细胞生长的抑制作用。相比普通pt-88药物，snd/pt-88将肿瘤生长抑制率(tgi)值从45.6％提升至64.1％，效果得到了显著提升；而相比普通gedatolisib(pt-1)药物，snd/gedatolisib(pt-1)则只从53.3％提升至55.9％，说明本技术的长循环纳米圆盘制剂与pt-88的适应性极好，是专门针对pt-88设计得到的长循环纳米圆盘制剂。23、(4)本技术所得到的长循环纳米圆盘制剂，具有良好的用药安全性，试验研究结果显示对各主要器官无明显影响，血液检测也未见异常。