具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物的

本发明涉及具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物的制备，属于谷物深加工。背景技术：1、高尿酸血症是一种以血清尿酸水平持续升高为标志的代谢性疾病，体内尿酸盐的浓度取决于摄入、合成和排泄的嘌呤量，是代谢失调的结果，因此降低尿酸水平是抑制尿酸盐生成的关键治疗策略。2、尿酸是内源性和膳食嘌呤的最终产物，相关代谢途径由多种酶催化的多步反应组成，包括腺苷脱氨酶(ada)、嘌呤核苷磷酸化酶(pnpase)和黄嘌呤氧化酶(xod)。其中，黄嘌呤氧化酶催化次黄嘌呤转化为黄嘌呤，然后又将黄嘌呤转化为尿酸。尿酸是嘌呤代谢的主要产物，黄嘌呤氧化酶是一种在嘌呤降解过程中起关键作用的酶，是尿酸生成过程中的限速酶。迄今为止，如何抑制黄嘌呤氧化酶活性仍然是缓解高尿酸血症和降低患者血清尿酸水平的主要疗法，如别嘌呤醇，作为一种有效的xod抑制剂，在临床上用于治疗高尿酸血症和痛风，通过阻断尿酸生物合成的终末步骤，从而降低血清尿酸水平。然而，别嘌呤醇的各种副作用已有报道，包括肾毒性、肝炎和过敏反应。一些患者还表现出荨麻疹、皮疹、瘙痒等症状。因此，寻求天然存在的植物化学物质，来替代黄嘌呤氧化酶抑制剂类药物，是食品生物科技工作者一直追求的目标，现在，有研究发现，植物来源的黄酮类化合物，如山奈酚和槲皮素，在体外和/或体内具有显著的xod抑制作用。为从天然产物中寻找高效、安全、无毒的xod抑制剂，以替代抗痛风药物提出了新的思路。3、谷物麸皮中含有多种活性化合物，包括槲皮素、山奈酚、对香豆酸、阿魏酸、杨梅素和芦丁等。据报道，这些黄酮类化合物具有潜在的抗氧化、抗炎和抑制黄嘌呤氧化酶，降低尿酸生成量的功能。目前，没有关于谷物皮层中黄嘌呤氧化酶抑制活性物质的相关报道，主要难点在于，结合酚类物质是发挥黄嘌呤氧化酶抑制作用的主要物质，而谷物麸皮中含有大量的膳食纤维，且结合酚类物质主要与木质素以及多糖等物质相连接而存在于谷物麸皮中，因此需要打断结合酚类物质与木质素、多糖之间的连接键，才能释放谷物皮层中的结合态多酚。技术实现思路1、[技术问题]2、本发明要解决的问题是从谷物皮层中富集黄嘌呤氧化酶抑制活性物质(结合酚类物质)时，由于谷物麸皮中含有大量的膳食纤维，而结合酚类物质主要和木质素以及多糖等物质相连接而存在于谷物麸皮中，需要打断结合酚类物质与木质素、多糖之间的连接键，释放谷物皮层中的结合态多酚。3、[技术方案]4、为了解决上述问题，本发明提供了一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物的制备方法，本发明采用的原料为经过清理后的大米、小麦、燕麦、玉米麸、青稞五种谷物皮层，优先选用玉米麸皮，经超微粉碎后通过超声结合酶法处理释放结合态多酚，碱水解，乙酸乙酯萃取，蒸发脱溶后获得，得到的产品为具有xod抑制活性的谷物皮层结合态多酚提取物，包括如下步骤：5、s1、将谷物皮层使用超微粉碎机进行粉碎，过筛；6、s2、称取粉碎过筛后的谷物皮层，加入超纯水，采用超声波振荡处理，利用超声波的空化效应，使谷物皮层原料在水中充分水化；超声处理后的谷物皮层进行离心，去除上清液后用乙醇浸提，重复浸提3-5次直至浸提液澄清透明，保留沉淀；7、s3、将s2得到的沉淀中用磷酸缓冲液调节ph后，再加入纤维素酶或木聚糖酶进行酶解；酶解后，离心，将收集的酶解残渣，加入乙醇，超声浸提，重复浸提3-5次后弃掉含有自由态多酚的上清液，保留含有结合态多酚的沉淀；8、s4、在s3得到的沉淀中加入naoh溶液水解，在液氮保护下水浴震荡水解，然后加盐酸调节ph，加入乙酸乙酯进行萃取，重复萃取3-5次，得到有机相；9、s5、将s4中多次萃取得到的有机相合并，用旋转蒸发仪旋转蒸发至干后，即得到谷物皮层结合态多酚提取物。10、在本发明的一种实施方式中，s1中的谷物皮层粉碎后，过80-120目筛。11、在本发明的一种实施方式中，s2中加入的谷物皮层：超纯水的比为1:10～1:20(w/v)，超声波振荡处理的处理功率为150-300w、超声温度为50-80℃，超声处理时间为25-50min。12、在本发明的一种实施方式中，s3中采用磷酸缓冲液调节的ph范围为4.0～6.0。13、在本发明的一种实施方式中，s3中的纤维素酶活力为15000u/g,纤维素酶的添加量为0.3％～1.5％(相对于加入的超纯水量，w/w)；木聚糖酶活力为600万u/g,木聚糖酶的添加量为0.3％～1.5％(相对于加入的超纯水量，w/w)。14、在本发明的一种实施方式中，s3中乙醇浓度为80％。15、在本发明的一种实施方式中，s4中naoh溶液的浓度为2-4mol/l；水浴震荡的时间为4-6h，震荡速度为200rpm；s4中的盐酸浓度为6mol/l，加盐酸调节后的ph为2.0-3.0。16、在本发明的一种实施方式中，s6中旋转蒸发仪的温度为45℃，真空度为50-110mpa。17、[有益效果]18、1.本发明采用超声波处理协同纤维素酶/木聚糖酶对谷物皮层进行处理，可以有效释放谷物皮层中的结合态多酚，提高阿魏酸等酚类物质在提取物中的浓度，经纤维素酶解处理后阿魏酸的提取量由原来的2.99±0.087mg/g提升至3.38±0.15mg/g，经木聚糖酶处理后的阿魏酸提取量为3.17±0.035mg/g；结合酚提取物的总酚含量比不加酶的提高了1.17倍(木聚糖酶)、1.38倍(纤维素酶)，提取得到谷物皮层提取物中结合态酚类物质含量和xod抑制效率较高，且安全无污染；19、2.本发明从谷物皮层中提取结合态多酚类成分，并发挥其黄嘌呤氧化酶抑制效果，以达到采用天然谷物提取物降低血液尿酸水平的效果，且简单易行、成本低廉，为降尿酸类药物替代提供了新的思路和健康安全的解决方案。技术特征：1.一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：2.根据权利要求1所述的一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物的制备方法，其特征在于，s1所述的谷物皮层为玉米麸皮、大米麸皮、小麦麸皮、燕麦麸皮、青稞麸皮中的一种。3.根据权利要求1所述的一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物的制备方法，其特征在于，s1中的谷物皮层粉碎后，过80～120目筛。4.根据权利要求1所述的一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物的制备方法，其特征在于，s2中加入的谷物皮层的质量：超纯水的体积比为1:10～1:20g/ml。5.根据权利要求1所述的一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物的制备方法，其特征在于，s2中超声波振荡处理的处理功率为150～300w、超声温度为50～80℃，超声处理时间为25～-50min。6.根据权利要求1所述的一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物的制备方法，其特征在于，s3中用于浸提的乙醇浓度为80％。7.根据权利要求1所述的一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物的制备方法，其特征在于，s4中naoh溶液的浓度为2～4mol/l；水浴震荡的时间为4～6h，震荡速度为200rpm；s4中的盐酸浓度为6mol/l。8.根据权利要求1所述的一种具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物的制备方法，其特征在于，s6中旋转蒸发仪的温度为45～55℃，真空度为50～100mpa。9.根据权利要求1-8任一所述方法制备的具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物。10.权利要求9制备的具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物在制备治疗高尿酸血症的药物中的应用。技术总结本发明涉及具有黄嘌呤氧化酶抑制活性的谷物皮层提取物的制备，属于谷物深加工技术领域。本发明采用的原料为经过清理后的大米、小麦、燕麦、玉米麸、青稞五种谷物皮层，优先选用玉米麸皮，经超微粉碎后通过超声结合酶法处理释放结合态多酚，碱水解，乙酸乙酯萃取，蒸发脱溶后获得，得到的产品为具有XO抑制活性的谷物皮层结合态多酚提取物。本发明方法简单易行、成本低廉、得率高且对人体危害小，提取得到谷物皮层提取物中结合态酚类物质含量和XO抑制效率较高，且安全无污染；达到采用天然谷物提取物降低血液尿酸水平的效果，为降尿酸类药物替代提供了新的思路和健康安全的解决方案。技术研发人员：钱海峰,楼烨,王立,李言,樊铭聪,张晖,朱玲受保护的技术使用者：江南大学技术研发日：技术公布日：2024/8/16