使用异源二聚体松弛素融合物进行的治疗的制作

本发明涉及使用异源二聚体松弛素融合物的治疗方法。特别地，本发明涉及使用松弛素-2融合物的治疗方法。背景技术：1、松弛素是属于胰岛素超家族的肽激素。在人类中，该松弛素肽家族包括具有高结构相似性但是低序列相似性的七种肽：松弛素1、2和3以及胰岛素样肽insl3、insl4、insl5和insl6。天然存在的松弛素由以下组成：通过两个链间二硫键共价连接的a多肽链和b多肽链。a链具有另外的链内二硫键。松弛素基因编码具有结构b-c-a(由c肽连接的b多肽链和a多肽链)的激素原。激素原经历通过pc1和pc2酶进行的内切蛋白水解切割，从而去除c肽，之后是成熟松弛素的分泌。2、松弛素是已知在妊娠期间介导全身血液动力学改变和肾脏适应性改变的多效激素。还证明松弛素具有抗纤维化特性并且在心力衰竭(例如急性失代偿性心力衰竭(adhf))中具有有益效果。心力衰竭与显著的发病率和死亡率相关。其特征在于复杂的组织重塑，涉及增加的心肌细胞死亡和间质纤维化。松弛素激活大量信号传导级联，已证明这些信号传导级联在缺血-再灌注和心力衰竭的环境中是有益的。这些信号传导途径包括激活磷酸肌醇3-激酶途径和激活一氧化氮信号传导途径(bathgate ra等人(2013)physiol.rev.[生理学评论]93(1):405-480；mentz rj等人(2013)am.heartj.[美国心脏杂志]165(2):193-199；tietjens j等人(2016)heart[心脏]102:95-99；wilson ss等人(2015)pharmacology[药理学]35:315-327)。3、心力衰竭患者中很大一部分还患有肺动脉高压(hf+ph患者)。据估计，大约50％的射血分数保留的心力衰竭患者也患有肺动脉高压，射血分数降低的心力衰竭患者的这一比例增加到60％(guazzi,(2014)circheartfail.[循环：心力衰竭],7:367-377；miller等人,(2013)jacc heartfail.[美国心脏病学会杂志：心力衰竭],1(4):290-299)。已证明与无肺动脉高压的心力衰竭患者相比，患有心力衰竭合并肺动脉高压的患者的存活率降低(barnett和de marco,(2012)heartfail.clin.[心力衰竭临床]8:447–459)。在心力衰竭患者中，估计肺动脉舒张压(epad)增加或减少3mmhg(相当于平均肺动脉压(mpap)增加或减少大约4mmhg)分别与心血管疾病死亡率增加24％或降低19％相关(zile mr等人(2017)circheart fail.[循环：心力衰竭],10:e003594)。mpap降低4mmhg还与患有心力衰竭和肺动脉高压的患者的呼吸困难改善相关(solomonica a等人(2013)circ heart fail.[循环：心力衰竭],6:53-60)。4、已经使用未修饰的重组人松弛素-2，即塞松弛素(serelaxin)进行了临床试验。向住院患者连续静脉内施用塞松弛素改善了心脏、肾脏和肝脏损伤及充血的标志物(felkergm等人(2014)j.am.coll.cardiol.[美国心脏病学会杂志]64(15):1591-1598；metra m等人(2013)j.am.coll.cardiol.[美国心脏病学会杂志]61(2):196-206；teerlink jr等人(2013)lancet[柳叶刀]381(9860):29-39)。通过大约20小时的连续输注，塞松弛素还显示出这些患者在肺动脉压、心输出量以及全身和肺血管阻力方面的改善(ponikowski等人,(2014)european heartjournal[欧洲心脏杂志]35:431–441)。然而，由于塞松弛素从患者循环中快速清除，治疗效果是受限的，并且一旦静脉内注射停止，正面效果迅速消失。另外，在静脉内接受塞松弛素后，大约三分之一的患者经历了显著的血压降低(>40mmhg)，因此必须将剂量减少一半或甚至更多。5、wo 2013/004607和wo 2018/138170描述了重组松弛素多肽，其中松弛素a和松弛素b与接头肽单链融合。wo2013/004607描述了具有至少5个氨基酸并且少于15个氨基酸的接头肽的重组松弛素。wo 2018/138170描述了具有至少15个氨基酸的接头肽的重组松弛素。6、鉴于目前用未修饰的重组松弛素进行的临床研究颇有希望，仍然需要另外的重组松弛素，这些重组松弛素保留了松弛素的生物活性并提供了例如延长的半衰期、方便的施用途径和方便给药等优点。技术实现思路1、本发明涉及具有松弛素活性的异源二聚体融合物在治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压(hf+ph)的受试者中的用途。特别地，hf+ph受试者的治疗仍存在显著未满足的需求。2、因此，在一个方面，本发明提供了治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压的受试者的方法，该方法包括向该受试者施用有效量的异源二聚体融合物，该异源二聚体融合物包含：3、(i)与至少一种松弛素a链多肽或其变体连接的第一异源二聚体化结构域；和4、(ii)与至少一种松弛素b链多肽或其变体连接的第二异源二聚体化结构域，5、其中该第一异源二聚体化结构域与该第二异源二聚体化结构域异源二聚体化，并且其中该异源二聚体融合物具有松弛素活性。6、类似地，本发明提供了用于在治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压的受试者中使用的异源二聚体融合物，该异源二聚体融合物包含：7、(i)与至少一种松弛素a链多肽或其变体连接的第一异源二聚体化结构域；和8、(ii)与至少一种松弛素b链多肽或其变体连接的第二异源二聚体化结构域，9、其中该第一异源二聚体化结构域与该第二异源二聚体化结构域异源二聚体化，并且其中该异源二聚体融合物具有松弛素活性。10、类似地，本发明提供了异源二聚体融合物在制造用于治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压的受试者的药物中的用途，该异源二聚体融合物包含：11、(i)与至少一种松弛素a链多肽或其变体连接的第一异源二聚体化结构域；和12、(ii)与至少一种松弛素b链多肽或其变体连接的第二异源二聚体化结构域，13、其中该第一异源二聚体化结构域与该第二异源二聚体化结构域异源二聚体化，并且其中该异源二聚体融合物具有松弛素活性。14、在一些实施例中，将异源二聚体融合物的松弛素a链和松弛素b链通过一个或多个(例如两个)链间键、优选地一个或多个(例如两个)链间二硫键共价结合。在一些实施例中，松弛素a链和松弛素b链并不通过氨基酸接头来彼此共价连接。15、在一些实施例中，松弛素a链是松弛素-2a链并且松弛素b链是松弛素-2b链。16、在优选的实施例中，第一和第二异源二聚体化结构域源自免疫球蛋白fc区，例如免疫球蛋白g(igg)fc区(“第一fc区”和“第二fc区”)。第一和第二fc区可以包含恒定结构域ch2和/或ch3。优选地，第一和第二fc区包含ch2和ch3。17、在替代性实施例中，第一和第二异源二聚体化结构域源自免疫球蛋白fab区。18、在又另外的替代性实施例中，第一和第二异源二聚体化结构域异源二聚体化，从而形成平行卷曲螺旋。19、在一些实施例中，将松弛素a链经由连接子连接至第一异源二聚体化结构域(例如第一fc区)，并且将松弛素b链经由连接子连接至第二异源二聚体化结构域(例如第二fc区)。在优选的实施例中，一个或优选地两个连接子是多肽。20、在一些实施例中，至少一个连接子是长度为6至40个氨基酸的多肽。优选地，两个连接子均是长度为6至40个氨基酸的多肽。在优选的实施例中，至少一个连接子是长度为21个氨基酸的多肽。在特别优选的实施例中，两个连接子均是长度为21个氨基酸的多肽。在某些实施例中，两个连接子均具有序列ggggsggggsggggsgggggs[seq id no:5]。21、在优选的实施例中，将第一异源二聚体化结构域(例如第一fc区)的c-末端连接至松弛素a链的n-末端，并且将第二异源二聚体化结构域(例如第二fc区)的c-末端连接至松弛素b链的n-末端。在替代性实施例中，将第一异源二聚体化结构域(例如第一fc区)的n-末端连接至松弛素a链的c-末端，并且将第二异源二聚体化结构域(例如第二fc区)的n-末端连接至松弛素b链的c-末端。22、在一些实施例中，第一和第二异源二聚体化结构域(例如第一和第二fc区)包含促进异源二聚体化的氨基酸突变和/或修饰，优选地，促进非对称异源二聚体化的氨基酸突变和/或修饰。在优选的实施例中，促进异源二聚体化的氨基酸突变是“fc杵”和“fc臼”突变。在特别优选的实施例中，“fc杵”和“fc臼”突变存在于ch3结构域中。在优选的实施例中，第一fc区包含“fc杵”突变，并且第二fc区包含“fc臼”突变。可替代地，第一fc区具有“fc臼”突变，并且第二fc区具有“fc杵”突变。优选地，促进异源二聚体化的氨基酸突变包含在一个ch3结构域中的“fc臼”突变y349c、t366s、l368a和y407v或其保守性取代；以及在另一个ch3结构域中的“fc杵”突变s354c和t366w或其保守性取代，其中氨基酸编号是根据如kabat中的eu索引进行的。23、在本发明的任何方面的实施例中，松弛素-2a链多肽包含如seq id no:1所示的序列或其变体，并且松弛素-2b链多肽包含如seq id no:2所示的序列或其变体。在一些实施例中，松弛素-2a链多肽包含氨基酸突变k9h、k17m或k17i，优选k9h。24、本发明还提供了治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压的受试者的方法，该方法包括向该受试者施用有效量的异源二聚体融合物，该异源二聚体融合物包含：25、(i)fcx-con-a融合多肽；和26、(ii)fcy-con-b融合多肽，27、其中：28、a是松弛素a链或其变体，例如松弛素-2a链或其变体；29、b是松弛素b链或其变体，例如松弛素-2b链或其变体；30、fcy是具有“fc臼”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变y349c:t366s:l368a:y407v或其保守性取代的ch3结构域；31、fcx是具有“fc杵”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变s354c:t366w或其保守性取代的ch3结构域；并且32、con是连接子，例如优选地具有序列ggggsggggsggggsgggggs[seq id no:5]的连接子多肽，33、其中氨基酸编号是根据如kabat中的eu索引进行的，其中fcx与fcy异源二聚体化，并且其中该异源二聚体融合物具有松弛素活性。34、类似地，本发明提供了用于在治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压的受试者的方法中使用的异源二聚体融合物，该异源二聚体融合物包含：35、(i)fcx-con-a融合多肽；和36、(ii)fcy-con-b融合多肽，37、其中：38、a是松弛素a链或其变体，例如松弛素-2a链或其变体；39、b是松弛素b链或其变体，例如松弛素-2b链或其变体；40、fcy是具有“fc臼”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变y349c:t366s:l368a:y407v或其保守性取代的ch3结构域；41、fcx是具有“fc杵”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变s354c:t366w或其保守性取代的ch3结构域；并且42、con是连接子，例如优选地具有序列ggggsggggsggggsgggggs[seq id no:5]的连接子多肽，43、其中氨基酸编号是根据如kabat中的eu索引进行的，其中fcx与fcy异源二聚体化，并且其中该异源二聚体融合物具有松弛素活性。44、类似地，本发明提供了异源二聚体融合物在制造用于治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压的受试者的药物中的用途，该异源二聚体融合物包含：45、(i)fcx-con-a融合多肽；和46、(ii)fcy-con-b融合多肽，47、其中：48、a是松弛素a链或其变体，例如松弛素-2a链或其变体；49、b是松弛素b链或其变体，例如松弛素-2b链或其变体；50、fcy是具有“fc臼”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变y349c:t366s:l368a:y407v或其保守性取代的ch3结构域；51、fcx是具有“fc杵”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变s354c:t366w或其保守性取代的ch3结构域；并且52、con是连接子，例如优选地具有序列ggggsggggsggggsgggggs[seq id no:5]的连接子多肽，53、其中氨基酸编号是根据如kabat中的eu索引进行的，其中fcx与fcy异源二聚体化，并且其中该异源二聚体融合物具有松弛素活性。54、在特别优选的实施例中，异源二聚体融合物包含具有seq id no:11的氨基酸序列的融合多肽和具有seq id no:20的氨基酸序列的融合多肽。55、在本发明的任何方面的一些实施例中，异源二聚体融合物进一步包含一个或多个fab，任选地其中该异源二聚体融合物包含与第一异源二聚体化结构域(例如第一fc区)的n-末端连接的一个fab和与第二异源二聚体化结构域(例如第二fc区)的n-末端连接的第二fab。56、在本发明的任何方面的一些实施例中，异源二聚体融合物进一步包含与第一异源二聚体化结构域(例如第一fc区)的n-末端连接的第二松弛素a链多肽或其变体和与第二异源二聚体化结构域(例如第二fc区)的n-末端连接的第二松弛素b链多肽或其变体，任选地其中将该第二松弛素a链经由连接子多肽连接至该第一异源二聚体化结构域(例如第一fc区)，并且将该第二松弛素b链经由连接子多肽连接至该第二异源二聚体化结构域(例如第二fc区)。57、在另一方面，本发明提供了治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压的受试者的方法，该方法包括向该受试者施用有效量的异源二聚体融合物，该异源二聚体融合物包含：58、(i)fcx-b-l-a和fcy，任选地fcy-b-l-a；或59、(ii)fcy-b-l-a和fcx，任选地fcx-b-l-a；60、其中：61、fcy是具有“fc臼”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变y349c:t366s:l368a:y407v或其保守性取代的ch3结构域；62、fcx是具有“fc杵”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变s354c:t366w或其保守性取代的ch3结构域；63、b是松弛素b链或其变体，例如松弛素-2b链或其变体；64、a是松弛素a链或其变体，例如松弛素-2a链或其变体；并且65、l是接头多肽，优选地具有氨基酸序列gggsgggsgg[seq id no:60]，66、其中氨基酸编号是根据如kabat中的eu索引进行的，其中fcx与fcy异源二聚体化，并且其中该异源二聚体融合物具有松弛素活性。可替代地，fcx和fcy是如本文所述的非fc异源二聚体化结构域。在一些实施例中，将松弛素b链经由连接子，任选地长度为6至40个氨基酸、例如长度为21个氨基酸的连接子多肽连接至fcx和/或fcy。67、类似地，本发明提供了用于在治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压的受试者的方法中使用的异源二聚体融合物，该异源二聚体融合物包含：68、(i)fcx-b-l-a和fcy，任选地fcy-b-l-a；或69、(ii)fcy-b-l-a和fcx，任选地fcx-b-l-a；70、其中：71、fcy是具有“fc臼”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变y349c:t366s:l368a:y407v或其保守性取代的ch3结构域；72、fcx是具有“fc杵”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变s354c:t366w或其保守性取代的ch3结构域；73、b是松弛素b链或其变体，例如松弛素-2b链或其变体；74、a是松弛素a链或其变体，例如松弛素-2a链或其变体；并且75、l是接头多肽，优选地具有氨基酸序列gggsgggsgg[seq id no:60]，76、其中氨基酸编号是根据如kabat中的eu索引进行的，其中fcx与fcy异源二聚体化，并且其中该异源二聚体融合物具有松弛素活性。可替代地，fcx和fcy是如本文所述的非fc异源二聚体化结构域。在一些实施例中，将松弛素a链经由连接子，任选地长度为6至40个氨基酸、例如长度为21个氨基酸的连接子多肽连接至fcx和/或fcy。77、类似地，本发明提供了异源二聚体融合物在制造用于治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压的受试者的药物中的用途，该异源二聚体融合物包含：78、(i)fcx-b-l-a和fcy，任选地fcy-b-l-a；或79、(ii)fcy-b-l-a和fcx，任选地fcx-b-l-a；80、其中：81、fcy是具有“fc臼”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变y349c:t366s:l368a:y407v或其保守性取代的ch3结构域；82、fcx是具有“fc杵”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变s354c:t366w或其保守性取代的ch3结构域；83、b是松弛素b链或其变体，例如松弛素-2b链或其变体；84、a是松弛素a链或其变体，例如松弛素-2a链或其变体；并且85、l是接头多肽，优选地具有氨基酸序列gggsgggsgg[seq id no:60]，86、其中氨基酸编号是根据如kabat中的eu索引进行的，其中fcx与fcy异源二聚体化，并且其中该异源二聚体融合物具有松弛素活性。可替代地，fcx和fcy是如本文所述的非fc异源二聚体化结构域。在一些实施例中，将松弛素a链经由连接子，任选地长度为6至40个氨基酸、例如长度为21个氨基酸的连接子多肽连接至fcx和/或fcy。87、在又另一方面，本发明提供了治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压的受试者的方法，该方法包括向该受试者施用有效量的异源二聚体融合物，该异源二聚体融合物包含：88、(i)fcx-a-l-b和fcy，任选地fcy-a-l-b；或89、(ii)fcy-a-l-b和fcx，任选地fcx-a-l-b；90、其中：91、fcy是具有“fc臼”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变y349c:t366s:l368a:y407v或其保守性取代的ch3结构域；92、fcx是具有“fc杵”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变s354c:t366w或其保守性取代的ch3结构域；93、a是松弛素a链或其变体，例如松弛素-2a链或其变体；94、b是松弛素b链或其变体，例如松弛素-2b链或其变体；并且95、l是接头多肽，优选地具有氨基酸序列gggsgggsgg[seq id no:60]，96、其中氨基酸编号是根据如kabat中的eu索引进行的，其中fcx与fcy异源二聚体化，并且其中该异源二聚体融合物具有松弛素活性。可替代地，fcx和fcy是如本文所述的非fc异源二聚体化结构域。在一些实施例中，将松弛素a链经由连接子，任选地长度为6至40个氨基酸、例如长度为21个氨基酸的连接子多肽连接至fcx和/或fcy。97、类似地，本发明提供了用于在治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压的受试者的方法中使用的异源二聚体融合物，该异源二聚体融合物包含：98、(i)fcx-a-l-b和fcy，任选地fcy-a-l-b；或99、(ii)fcy-a-l-b和fcx，任选地fcx-a-l-b；100、其中：101、fcy是具有“fc臼”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变y349c:t366s:l368a:y407v或其保守性取代的ch3结构域；102、fcx是具有“fc杵”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变s354c:t366w或其保守性取代的ch3结构域；103、a是松弛素a链或其变体，例如松弛素-2a链或其变体；104、b是松弛素b链或其变体，例如松弛素-2b链或其变体；并且105、l是接头多肽，优选地具有氨基酸序列gggsgggsgg[seq id no:60]，106、其中氨基酸编号是根据如kabat中的eu索引进行的，其中fcx与fcy异源二聚体化，并且其中该异源二聚体融合物具有松弛素活性。可替代地，fcx和fcy是如本文所述的非fc异源二聚体化结构域。在一些实施例中，将松弛素a链经由连接子，任选地长度为6至40个氨基酸、例如长度为21个氨基酸的连接子多肽连接至fcx和/或fcy。107、类似地，本发明提供了异源二聚体融合物在制造用于治疗患有心力衰竭合并肺动脉高压的受试者的药物中的用途，该异源二聚体融合物包含：108、(i)fcx-a-l-b和fcy，任选地fcy-a-l-b；或109、(ii)fcy-a-l-b和fcx，任选地fcx-a-l-b；110、其中：111、fcy是具有“fc臼”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变y349c:t366s:l368a:y407v或其保守性取代的ch3结构域；112、fcx是具有“fc杵”氨基酸突变和/或修饰的免疫球蛋白(例如igg1)fc区，优选地包含具有氨基酸突变s354c:t366w或其保守性取代的ch3结构域；113、a是松弛素a链或其变体，例如松弛素-2a链或其变体；114、b是松弛素b链或其变体，例如松弛素-2b链或其变体；并且115、l是接头多肽，优选地具有氨基酸序列gggsgggsgg[seq idno:60]，116、其中氨基酸编号是根据如kabat中的eu索引进行的，其中fcx与fcy异源二聚体化，并且其中该异源二聚体融合物具有松弛素活性。可替代地，fcx和fcy是如本文所述的非fc异源二聚体化结构域。在一些实施例中，将松弛素a链经由连接子，任选地长度为6至40个氨基酸、例如长度为21个氨基酸的连接子多肽连接至fcx和/或fcy。117、根据本发明的所有方面，心力衰竭可以是射血分数降低的心力衰竭、射血分数中间值的心力衰竭或射血分数保留的心力衰竭。118、根据本发明的所有方面，受试者可以具有约25mmhg或更高的平均肺动脉压和/或约40mmhg或更高的右心室收缩压。典型地，这是在用本发明的异源二聚体融合物进行治疗之前。119、根据本发明的所有方面，受试者可以具有小于3.0个伍德单位(woodunits)的肺血管阻力。可替代地，受试者可以具有3.0或更多个伍德单位的肺血管阻力。典型地，这是在用本发明的异源二聚体融合物进行治疗之前。120、根据本发明的所有方面，受试者可能已配备有血压监测设备，优选地肺动脉压监测设备。优选地，肺动脉压监测设备是cardiomems压力监测设备。121、在本发明的任何方面的一些实施例中，异源二聚体融合物的松弛素活性与参考松弛素蛋白的松弛素活性的比率为约0.001至约10。122、根据本发明的所有方面，异源二聚体融合物可以作为包含本发明的异源二聚体融合物的药物组合物施用。123、本文还描述了编码本发明的异源二聚体融合物的核酸分子(例如dna分子)、包含核酸分子的载体、包含载体或核酸的宿主细胞、以及通过以下方式产生本发明的异源二聚体融合物的方法：培养宿主细胞以及收集融合蛋白。124、在所附权利要求书中陈述了本发明的多个方面和实施例。本文还描述了本发明的这些和其他的方面和实施例。125、附图和序列表的简要说明126、图1示出了根据本发明一些实施例的异源二聚体融合物的示例性格式。异源二聚体融合物的每种融合多肽的格式以fcx、fcy、a、b、con和l给出，其中fcx(“fc杵”)和fcy(“fc臼”)是两个包含促进异源二聚体化的氨基酸突变和/或修饰的fc区；a(“rlx a”)和b(“rlxb”)是松弛素a链和松弛素b链多肽；“con”是连接子多肽；l是接头多肽，hc x和hc y-抗体的重链，lc-抗体的轻链，铰链-抗体的铰链区，并且fab是抗体的fab片段。127、图2示出了relax0019和relax0023的lc-ms分析a)示出了完整分子的质量的relax0019和relax0023去糖基化和非还原分析；b)示出了单独的fc融合链(杵-松弛素a链和臼-松弛素b链)的质量的relax0019和relax0023去糖基化和还原分析。128、图3示出了通过使用lc-ms的非还原肽作图，relax0019和relax0023的c-末端肽的分析。在顶部小图中示出了具有由线代表的预测二硫键的c-末端肽的氨基酸序列。小图a和e-在不存在还原剂(-dtt)的情况下，c-末端肽的提取离子色谱图。小图c和g-在不存在还原剂的情况下，c-末端肽的解卷积质谱。小图b和f-在存在还原剂(+dtt)的情况下的提取离子色谱图，以及小图d和h-在存在还原剂的情况下的解卷积质谱。图3按出现顺序分别披露了seq id no 75、77和76。129、图4示出了在表达重组人rxfp1的细胞中通过camp诱导测量的本发明一些异源二聚体融合物的体外生物活性。130、图5示出了来自一系列elisa实验的体内药代动力学(pk)曲线，其中将本发明的异源二聚体融合物静脉内施用至小鼠。将数据归一化为在5min时间点(t1)处的％cmax。131、图6示出了在用relax0019和relax0023治疗的小鼠中，异丙肾上腺素诱导的心脏纤维化和肥大的逆转。示出了以下的纤维化和肥大的水平：(1)媒介物(基线)、(2)异丙肾上腺素、(3)异丙肾上腺素+松弛素-2、(4)异丙肾上腺素+relax0019和(5)异丙肾上腺素+relax0023。132、图7示出了在杆状病毒(bv)elisa测定中，本发明的异源二聚体融合物的体外非特异性结合。133、图8示出了储存后溶液中relax0023、relax0127和relax0128的纯度损失、聚集和片段化的百分比。134、图9示出了通过还原lc-ms分析评估的溶液中relax0023、relax0127和relax0128随时间的稳定性。a)总离子色谱图b)还原分子的质谱135、图10示出了在静脉内和皮下注射后食蟹猴中relax0023的pk曲线。136、图11示出了编码本发明多肽中的一些的核苷酸序列(按出现顺序分别是seq idno 80-140)。137、图12示出了relax0023在患有心力衰竭和左心室射血分数(lvef)降低的食蟹猴(食蟹猕猴(macaca fascicularis))中的长期功效研究的结果。在用相对低、中或高剂量的relax0023或媒介物对照治疗20周，随后是观察期的所述猴中，分别在(a)、(b)和(c)中示出了relax0023对lvef、心率(hr)和平均动脉压(map)的影响。每个数据点代表该组的平均值(治疗组n＝8，媒介物组n＝14)。(a)、(b)和(c)各自的x轴代表从治疗期开始后的周数。138、图13a-13f示出了施用relax0023后mad队列的心脏功能、全身血管阻力和器官灌注：图6a示出了hfpef受试者的射血分数(ef)，图6b示出了hfref受试者的ef，图6c示出了合并受试者的心输出量，图6d示出了合并受试者的全身血管阻力(svr)，图6e示出了合并受试者的心搏出量(sv)，图6f示出了合并受试者的估计肾小球滤过率(egfr)。hfpef＝射血分数保留的心力衰竭。hfref＝射血分数降低的心力衰竭。与安慰剂相比具有显著性(p<0.1)。139、表1：序列表上铰链区以斜体表示，松弛素a以下划线表示，松弛素b以双下划线表示，fc区以粗体表示。140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、