炎性小体NLRP3作为靶点在诊断或治疗抑郁障碍相关

本发明涉及生物医药，涉及炎性小体nlrp3作为抑郁障碍相关生殖损伤疾病靶点标志物的应用，具体涉及炎性小体nlrp3在制备抑郁障碍相关生殖损伤疾病诊断或预后试剂盒，以及在制备其治疗药物组合物中的应用。背景技术：1、抑郁障碍(major depressive disorder,mdd)作为一种危害全球人类生活质量的精神疾病，具有高患病率、高疾病负担、高致残率的特点。世界卫生组织2017年数据显示，全球约有3.22亿人口受抑郁症困扰，患病率高达4.4％。2019年黄悦勤等报道，我国成人抑郁障碍终生患病率高达6.8％。由于新冠疫情，全球抑郁症发病率大幅上升了27.6％。目前，不孕不育在全球范围内大约对15％-20％的育龄夫妇造成了困扰，而一半原因来源于男性，其中男性不育症的主要原因是精子质量的下降。近年来，多项研究聚焦于抑郁症和生殖功能之间的联系，并提示抑郁症状与精液质量的下降存在相关性，包括精液体积、精液浓度、精子数量及精子活力等。2、临床研究显示，一线抗抑郁药物可能会对生殖功能造成进一步损伤。抑郁症的主要药物治疗手段为5-羟色胺再摄取抑制剂和5-羟色胺及去甲肾上腺素再摄取抑制剂，但仍然存在很大一部份患者对药物低反应性、无应答的问题，同时研究表明这类临床标准用药可能会对患者的生殖功能造成不良副作用，亟需提供新的治疗靶点和治疗策略。3、目前临床及动物研究都未对抑郁症中男性生殖损伤进行复现或者机制探索。深入研究抑郁症生殖功能损伤的潜在机制，将为抑郁症的新药研发和诊治策略提供新的思路，对改善抑郁症患者生活质量、促进抑郁症患者全面康复具有重要意义。4、nlrp3炎症小体是由nod样受体(nod-like receptor，nlr)家族蛋白nlrp3、胱冬肽酶(caspase-1)前体和构架蛋白组装而成的多蛋白复合体。nlrp3属于胞浆内模式识别受体，能识别宿主来源的危险信号分子，招募并激活caspase-1，活化的caspase-1可切割pro-il-1β，最终生成成熟的il-1β，并通过炎性级联效应导致炎症风暴。在男性生殖功能维系的复杂过程中，精原干细胞会逐渐分化成为各种雄性生殖细胞，包括精原细胞、精母细胞和精子细胞。该过程每一步都受到微环境的精准调节，如细胞因子、生长因子等。大量研究表明，炎症因子失调将引发男性不育。在附睾炎小鼠模型中，先天性免疫系统以病原体相关分子模式(pamp)特异性方式激活，导致细胞因子il-1β和tnf-α水平升高。在睾丸中，il-1β可诱导线粒体ros升高，通过氧化应激途径触发精子细胞凋亡过程，造成生殖功能下降。5、在这些病理过程中，nlrp3炎症小体同样有着不可替代的作用，而炎症小体介导的炎症反应不仅局限于巨噬细胞等抗原递呈细胞。在哺乳动物睾丸中，支持细胞作为精原干细胞生态位的关键组成部分，通过提供结构、免疫和营养支持维持精原干细胞发育分化。为响应损伤相关分子模式(damp)等应激源，其同样能够通过tlr4/nod/nfkb激活炎症小体反应，进一步增强睾丸组织的炎性损伤和细胞毒性作用，影响生精功能。而活化的caspase-1可剪切消皮素d(gasdermin,gsdmd)的n端序列，与膜结合产生孔径，引起细胞焦亡，并伴有大量促炎因子释放。6、mcc950是一种强效的nlrp3小分子抑制剂，能够有效选择性地靶向nlrp3的atp水解区域，抑制nlrp3水解功能，从而阻止nlrp3的典型和非典型激活，进而抑制下游il-1β的活化及分泌。mcc950作为一种小分子抑制剂，通常作为血液屏障透过剂，如可以透过血脑屏障及血睾屏障。7、综上，目前尚缺乏以nlrp3为药物靶点来治疗抑郁症相关生殖障碍的机制和药效探索。而利用mcc950作为工具药物探究nlrp3炎性小体在抑郁障碍相关生殖损伤疾病中的作用以及其作为治疗靶点的可行性先前也未有过报道。技术实现思路1、本发明依托上述研究进行，目的在于提供抑郁障碍相关生殖损伤疾病诊断、预后以及治疗的新靶点，也在于提供炎性小体nlrp3的新用途，即在制备抑郁障碍相关生殖损伤疾病诊断、预后试剂盒或治疗靶点中的应用。2、本发明的研究过程如下：构建抑郁小鼠模型并对其生殖功能进行检测后发现，抑郁小鼠的精子数量、移动精子数、平均路径运动速度、曲线运动速度、直线速度以及精子摆动振幅都显著降低，睾丸atp含量以及血清睾酮含量也下降。机理研究发现，nlrp3-il-1β通路在健康小鼠与抑郁小鼠海马区的蛋白表达水平差异及生殖损伤通路变化，在健康小鼠与抑郁小鼠睾丸中的mrna和蛋白表达水平也存在差异；效果研究显示，炎性小体nlrp3抑制剂mcc950可降低抑郁小鼠的抑郁样行为和体重改变，可改善抑郁小鼠的精子减少和精子移动度损伤表现，同时可改善抑郁小鼠睾丸精曲小管损伤和精细胞受损，可改善抑郁小鼠睾丸精细胞标志物和细胞增殖蛋白的减少。3、具体地，本发明提供了如下技术方案：4、本发明的第一方面，提供了炎性小体nlrp3抑制剂在制备治疗抑郁障碍相关生殖损伤疾病药物中的应用。5、优选的，炎性小体nlrp3抑制剂选自如下任一种物质：降低炎性小体nlrp3表达水平、降低炎性小体nlrp3活性或促进炎性小体nlrp3代谢的物质。6、药物形式上，炎性小体nlrp3抑制剂为单克隆抗体类试剂、小分子化合物中的任意一种，优选小分子化合物。7、该小分子化合物选自mcc950、glyburide、cy-09、olt177、mns、bay11-7082、bot-4-one、inf39、oridonin、tranilast中的任意一种。8、本发明的第二方面，提供了一种治疗抑郁障碍相关生殖损伤疾病的药物组合物，包括活性组分以及药学上可接受的辅料，该活性组分包括上述任一项所述的炎性小体nlrp3抑制剂。9、该抑制nlrp3炎性小体表达的试剂以nod样受体家族蛋白3-nlrp3为靶点，抑制nlrp3炎性小体的表达及下游产物。10、药物剂型上包括注射剂、输液剂、散剂、片剂、胶囊剂或膏剂中的任意一种，优选的剂型为注射剂。11、应理解，本文的炎性小体nlrp3分子优选获自人，获自其它动物的与人炎性小体nlrp3高度同源(如具有70％以上、75％以上、80％以上，更优选85％以上如85％、90％、95％、98％甚至99％或以上的序列相同性)的其它炎性小体nlrp3分子也在本发明优选考虑的等同范围之内。比对序列相同性的方法和工具也是本领域周知的，如blast。12、来源方面，本发明抑制剂选自：天然纯化物质、经修饰的天然纯化物质、半合成物质、化学合成物质；进一步的，所述抑制剂源自哺乳动物，如人、非人灵长类动物(例如猩猩、猿)、啮齿动物(例如大鼠、小鼠、豚鼠)、宠物(例如猫、狗)、家畜(例如马、牛、羊、猪、兔)。13、进行治疗时，通过给予有需要的对象治疗有效量的炎性小体nlrp3小分子化合物抑制剂，优选，在给予本技术的炎性小体nlrp3抑制剂之前、之时或之后给予其他抗抑郁药物，以增强治疗效果。14、本发明的第三方面，提供了炎性小体nlrp3在制备抑郁障碍相关生殖损伤疾病诊断或预后评估试剂盒中的应用。15、优选的，抑郁障碍相关生殖损伤疾病诊断或预后评估试剂盒中包含了检测生物样品中炎性小体nlrp3表达量的试剂。16、进一步优选，检测生物样品中炎性小体nlrp3表达量的试剂选自检测nlrp3基因或蛋白表达水平技术中的物质，17、其中，检测nlrp3基因表达水平的技术为pcr检测技术，包含对炎性小体nlrp3基因具有检测特异性的pcr引物，引物序列如seq id no.13～14所示；检测nlrp3蛋白表达水平技术的物质中含有nlrp3蛋白抗体。18、attacccgcccgagaaagg(seq id no.13)；19、tcgcagcaaagatccacacag(seq id no.14)。20、本发明的第四方面，一种抑郁障碍相关生殖损伤疾病诊断或预后评估试剂盒，该试剂盒包含了检测生物样品中炎性小体nlrp3表达量的试剂。21、优选的，试剂盒中含有对炎性小体nlrp3基因具有检测特异性的pcr引物或nlrp3蛋白抗体，引物序列如上述seq id no.13～14所示。22、在本发明的一些实施例中，通过抑制nlrp3炎性小体的小分子抑制剂mcc950以10mg/kg剂量用于干预治疗抑郁相关生殖损伤模型小鼠，在mcc950以10mg/kg药物干预后效果显著，小鼠症状得到了减轻，有效缓解了疾病的进展。证实药物靶向nlrp3炎性小体可作为一种调控精原细胞增殖分化和缓解抑郁症相关生殖损伤的有效方法，提示靶向nlrp3的药物在治疗抑郁症相关生殖损伤疾病的应用潜能。23、相比于现有技术，本发明的有益效果如下：24、本发明通过实验发现nlrp3及其下游分子il-1β在抑郁小鼠睾丸组织中高表达，使得nlrp3可以成为诊治抑郁症生殖损伤的新靶点。本发明首次探究了靶向nlrp3的药物mcc950治疗抑郁症生殖损伤的效用及机制，通过动物实验研究了其对精原细胞增殖分化的影响，证实了药物靶向nlrp3炎性小体可作为一种调控精原细胞增殖分化和缓解抑郁症相关生殖损伤的有效方法，为抑郁症生殖功能障碍的治疗提供了坚实的实验基础，提示了以nlrp3为靶点开发治疗如抑郁症相关生殖损伤疾病药物的巨大潜力，提供了一种靶向nlrp3的治疗抑郁症生殖功能损伤的治疗新策略。