华法林和/或胶原酶在制备治疗表达胶原的肿瘤和

本发明涉及了药物的新应用领域，具体涉及了华法林和/或胶原酶在制备治疗表达胶原的肿瘤和/或胶原相关疾病药物中的应用。背景技术：1、癌症是全世界的一个主要死因，近六分之一的人死亡是由癌症导致。近年来，以anti-pd1/pd-l1单抗为代表的免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors，ici)为肿瘤治疗带来了突破性的进展。apd-1/pd-l1单抗被批准用于黑色素瘤、肺癌、膀胱尿路上皮癌、食管癌等多个瘤种的治疗，免疫治疗的临床成功彻底改变了癌症免疫治疗领域并使免疫治疗与手术、化疗和放射治疗等传统治疗方式一起成为癌症治疗的支柱手段。2、免疫治疗带来了持久的临床获益，极大地延长了癌症患者的寿命。在基于铂类化疗的一线化疗中加入免疫检查点阻断剂(icb)，能够显著提高了非小细胞肺癌(nsclc)病人的总生存期。但临床发现，60％以上最初有应答的患者后来仍会出现获得性耐药。病人平均总生存期的延长时间未达3年。目前对于icis获得性耐药性机制的认知非常有限，缺乏突破获得性耐药的有效治疗手段。3、华法林(warfarin)是一种抗凝血药物，通过抑制维生素k依赖的凝血因子及抗凝蛋白c和s的合成而发挥抗凝作用，临床上用于预防和治疗血栓栓塞性疾病，尤其在中重度二尖瓣狭窄(通常为风湿性疾病)、机械瓣置换、生物瓣置换(术后前3个月)中的治疗地位是其他新型口服抗凝药无法替代的。目前其治疗肿瘤的相关研究还未见报道。4、胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(collagenase)，它能在生理ph和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构，而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶按其存在的方式不同可分为人体内源性胶原酶和药用胶原酶两种。人体内源性胶原酶是指人体内部本身所具有的胶原酶，如牙龈、触膜等上皮组织和关节滑膜、椎间盘内都不同程度的存在着这种胶原酶，它在体内胶原蛋白的分解过程中发挥着不可或缺的作用。药用胶原酶是指利用生物制药的高科技手段从溶组织梭状芽孢杆菌的发酵液中提取、纯化并精制而得的白色或类白色无菌冻干粉针生物制剂。目前其治疗肿瘤的相关研究还未见报道。技术实现思路1、本发明的目的在于：针对现有技术存在的不足，提供华法林和/或胶原酶在制备治疗表达胶原的肿瘤和/或胶原相关疾病药物中的应用。2、本发明研究发现将华法林和/或胶原酶应用于肿瘤治疗中，其联合ici在表达胶原的肿瘤中治疗效果较好，其机制为华法林和/或胶原酶打破肿瘤表面胶原的排布，增加t细胞的浸润，增强了t细胞相关的免疫作用，不仅为华法林和/或胶原酶提供了一种新的应用方向，也为肿瘤疾病的治疗提供一种新的药物选择。3、为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为：4、华法林在制备治疗表达胶原的肿瘤和/或胶原相关疾病药物中的应用。5、胶原酶在制备治疗表达胶原的肿瘤和/或胶原相关疾病药物中的应用。6、本技术建立了免疫治疗耐药的皮下瘤模型，研究了华法林或胶原酶联合anti-pd1/pd-l1给药组小鼠的肿瘤生长显著慢于对照组，表明胶原相关药物(华法林和/或胶原酶)对免疫治疗耐药肿瘤具有较好的治疗效果。7、通过if染色(immuno fluorescence染色，免疫荧光染色)显示华法林降低了col3a1和col6a1，扫描电镜和透射电镜分析显示耐药肿瘤细胞表面胶原原纤维的结构大部分被华法林治疗消除。当联合抗pd1抗体，华法林和/或胶原酶治疗明显抑制肿瘤在小鼠体内的生长情况，肿瘤组织坏死面积增加。尤其是t细胞gzmk+细胞毒性cd8+t细胞，经华法林和/或胶原酶处理后显著增加，表明华法林和/或胶原酶可以通过去除胶原原纤维，逆转免疫治疗获得性耐药增强t细胞的浸润和活化。8、同时，通过华法林和/或胶原酶对免疫治疗耐药的非小细胞肺癌(nsclc)类器官进行体外杀伤测试，发现华法林对类器官杀伤作用微弱，安全性高。实验测试结果表明，华法林和/或胶原酶可用于制备治疗肿瘤疾病药物，不仅为华法林/胶原酶提供了一种新的应用方向，也为肿瘤疾病的治疗提供一种新的药物选择。胶原相关疾病为胶原异常累积导致的疾病，胶原是多种结缔组织的主要成分，维持着组织和器官的完整结构，并与人体早期发育、器官形成、细胞间的连接、细胞趋化、血小板凝集以及膜的通透性等功能密切相关。胶原产生过多或过少、以及胶原结构的缺陷都可导致疾病。许多疾病都是由于胶原的异常高表达导致的，包括特发性肺纤维化、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、骨髓纤维化、硬皮病、克罗恩病、溃疡性结肠炎等，本发明还提出可应用华法林及胶原酶治疗达到降解胶原的作用，从而治疗相关疾病。9、研究发现，用华法林和/或胶原酶治疗的肿瘤类型为肿瘤细胞本身高表达胶原或肿瘤中富含大量高表达胶原的间质细胞，可通过华法林及胶原酶的治疗去除肿瘤细胞本身的胶原或者肿瘤内部间质细胞胶原，促进免疫杀伤的t细胞的浸润，同时联用激活机体免疫系统的免疫检查点抑制剂anti-pd1/anti-pdl1,anti-ctla4或cart细胞回输，从而更好的治疗肿瘤。10、进一步的，表达胶原的肿瘤为黑色素瘤、肺癌、膀胱尿路上皮癌、食管癌、胃癌中的至少一种。11、华法林和/或胶原酶在制备抑制抗肿瘤细胞上胶原原纤维形成的药物中的应用。12、华法林和/或胶原酶在制备增加t细胞浸润作用的药物中的应用。13、进一步的，华法林在小鼠体内的最小用药浓度为1mg/kg。华法林在人体内的最小用于浓度为0.1mg/kg。14、一种药物组合物在以下a-c任意一种或多种疾病或病症对应的药物制备中的应用，所述药物组合物包括治疗有效量的华法林，和/或胶原酶，以及药学上可接受的辅料；15、a、治疗nsclc肿瘤，或者治疗免疫治疗耐药nsclc肿瘤；16、b、抑制胶原原纤维在抗肿瘤细胞上的形成；17、c、增加t细胞的浸润和活化。18、通过将华法林和/或胶原酶制成药物组合物作为制药原料，可以获得具有针对性的药物产品，相应的药物产品对于上述的a-c三种情况均有良好的防治作用。a，对于nsclc肿瘤可以提高肿瘤敏感性，提升生物工程治疗的手段对于肿瘤细胞的杀伤力。b，对于抗肿瘤细胞治疗，可以抑制胶原原纤维形成，降低肿瘤的防御力，提高药物杀伤敏感性。c，华法林和/或胶原酶降低肿瘤细胞表面胶原结合强度，增加t细胞的浸润和活化，提升了杀伤力。19、进一步的，所述药物组合物还包括有效剂量的anti-pd1和/或car-t。华法林和/或胶原酶和生物治疗应用的pd1或car-t协同发挥更好的肿瘤杀伤作用，实现更高的治疗效果。20、进一步的，药学上可接受的辅料包括稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、吸收促进剂、表面活性剂、润滑剂、稳定剂、香味剂、甜味剂、色素中的至少一种。21、进一步的，所述药物组合物为液体制剂、固体制剂或喷雾制剂。22、综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：23、本发明试验研究过程中建立了免疫治疗耐药的皮下瘤模型，研究了华法林或胶原酶联合anti-pd1给药组小鼠的肿瘤生长显著慢于对照组，表明胶原相关药物(华法林和/或胶原酶)对免疫治疗耐药肿瘤具有较好的治疗效果；if染色显示华法林降低了col3a1和col6a1，扫描电镜和透射电镜分析显示耐药肿瘤细胞表面胶原原纤维的结构大部分被华法林治疗消除。24、本发明试验研究表明，当联合抗pd1抗体应用时，华法林和/或胶原酶的应用提升了治疗效果，明显抑制了肿瘤在小鼠体内的生长情况，肿瘤坏死面积增加。尤其是t细胞gzmk+细胞毒性cd8+t细胞，经华法林和/或胶原酶处理后显著增加，表明华法林和/或胶原酶可以通过去除胶原原纤维，逆转免疫治疗获得性耐药增强t细胞的浸润和活化。25、同时，本发明试验中通过华法林和/或胶原酶对免疫治疗耐药的非小细胞肺癌(nsclc)类器官进行体外杀伤测试，发现华法林对类器官杀伤作用微弱，安全性高。实验测试结果表明，华法林和/或胶原酶可用于制备治疗肿瘤疾病药物，不仅为华法林/胶原酶提供了一种新的应用方向，也为肿瘤疾病的治疗提供一种新的药物选择。