抗体药物结合物的制作方法

背景技术：：：0、2.背景技术：：1、抗体-药物结合物(adc)是可操作地连接至生物活性小分子(也称为毒素或有效负载)的抗体。adc选择性地将强效有效负载递送至靶标表达细胞，从而潜在地减少脱靶副作用和/或毒性并提高治疗指数。许多有效负载(即药物)的亲脂性会对adc的特性产生不利影响，以至于有效负载不能有效地递送至靶细胞。亲脂性有效负载的低生物可用性会缩小adc治疗的治疗窗口。此外，有效负载的疏水性可能会对其与抗体的结合带来挑战，所述结合是一种在水性条件下进行的反应。因此，需要不断开发用于蛋白质结合物(例如adc)的亲水性接头，这将允许结合亲脂性有效负载、改善生物靶标的调节、提高生物可用性和改善治疗窗口。2、单克隆抗体(mab)疗法作为癌症的辅助和一线治疗正日益受到青睐。如avastintm(抗vegf)治疗结肠癌、rituxantm(利妥昔单抗(rituximab)；抗cd20)治疗非霍奇金氏淋巴瘤和herceptintm(抗her2)治疗乳腺癌等mab疗法的成功表明，非结合抗体可提高患者的存活率而不会显著增加毒性的发生率。3、单克隆抗体可与治疗剂结合形成抗体-药物结合物。例如，上文提及的herceptintm抗体与美登素有效负载结合形成adc kadcylatm。与未结合抗体相比，adc可表现出更高的功效。抗体与药物的连接可为直接的，或通过接头间接的。接头可为可裂解的或不可裂解的。被认为对开发有效且耐受性良好的adc重要的一个组成部分是接头的组成和稳定性。对于某些类型的adc，接头理想地提供血清稳定性，但选择性地在靶细胞内释放药物。4、接头与mab的连接可通过多种方式实现，例如通过表面赖氨酸、与氧化碳水化合物的还原偶联、以及通过由还原链间二硫键释放的半胱氨酸残基。文献中描述了多种adc连接系统，包括基于腙、二硫键和肽的连接。一些基于腙和二硫键的接头可能在循环中不稳定，导致药物在靶组织外不必要地释放。人们认为，这种药物的过早释放会导致全身毒性或器官特异性毒性和/或治疗效果功效不理想。基于肽的接头策略可提供更高稳定性的接头；然而，一些接头的相关疏水性的增加可能导致聚集，特别是强疏水性药物。这种聚集会导致许多不良影响，例如adc沉淀、施用困难以及adc被非特异性吸收至非靶组织，从而可能影响非靶毒性并降低功效。5、依沙替康(exatecan)是一种作为具有抗肿瘤活性的喜树碱结构类似物的药物。参见abou-alfa等人,“randomized phase iii study of exatecan and gemcitabinecompared with gemcitabine alone in untreated advanced pancreatic cancer,”journal of clinical oncology,24(27):4441-7,2006年9月20日。单甲基奥瑞他汀e(mmae)是一种合成抗肿瘤剂。由于其毒性，其本身不能用作药物。mmae实际上是去甲基奥瑞他汀e；也就是说，n末端氨基只有一个甲基取代基，而不是像奥瑞他汀e本身那样有两个。参见dosio等人,“im munotoxins and anticancer drug conjugate assemblies:the roleof the linkage between components,”toxins.3(12):848-883,2011。6、在小分子治疗剂领域，已开发出提供活性化学实体的前药的策略。此类前药以相对无活性(或活性明显较低)的形式施用。一旦施用，前药就会在体内代谢成活性化合物。此类前药策略可提高药物针对其预期靶标的选择性，并减少副作用。7、因此，仍需要靶向递送毒素，以消除靶细胞，同时降低对非靶细胞的毒性。8、此外，一些抗体，例如帕曲妥单抗(patritumab)在快速缓冲液交换过程中具有可视觉观察到的聚集。其通过动态光散射(dls)检测到的聚集温度(tagg)和通过ac-sins分析检测到的自缔合趋势均比一组表现良好的mab差。帕曲妥单抗的聚集趋势导致相应adc的聚集。9、因此，存在尚未满足的医疗需求，即产生具有接头系统的adc，所述接头系统提供高水平的接头血清稳定性和增加的溶解度，从而允许疏水性药物的有效结合并实现药物的细胞内递送。10、3.发明概述11、本文提供具有接头系统的adc，所述接头系统提供高水平的接头血清稳定性和增加的溶解度，从而允许疏水性药物的有效结合并实现药物的细胞内递送。在一个实施方案中，adc是式(i)的化合物：12、13、或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，其中变量如本文所定义。在一个实施方案中，adc包含一个或多个亲水残基。14、在另一实施方案中，adc是式(ia)的化合物：15、16、或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，其中变量如本文所定义。17、在一个实施方案中，adc是式(ib)的化合物：18、19、或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，其中变量如本文所定义。20、在另一实施方案中，本文阐述了一种治疗有需要的患者的疾病、疾患或病症的方法，所述方法包括向患者施用本文阐述的化合物。还提供了本文阐述的化合物用于治疗本文阐述的疾病、疾患或病症的用途。进一步提供了本文阐述的化合物用于制造供治疗本文阐述的疾病、疾患或病症用的药物的用途。在一些实施方案中，化合物是抗体-药物结合物。21、在另一实施方案中，本文阐述了一种制备抗体-药物结合物的方法，包括在适合于在结合剂与接头-有效负载化合物之间形成键的条件下使结合剂与本文阐述的接头-有效负载化合物接触的步骤。22、4.附图简述23、图1说明了adc2-b的人血浆稳定性概况。adc2-b_tab曲线指示不同时刻抗体的浓度相比于其在t0点的浓度之比(所谓的总抗体曲线)。其包括非有效负载结合抗体和有效负载结合抗体，可被血浆中的抗原(her2)捕获。adc2-b_adc曲线指示药物结合抗体adc2-b在不同时间点的浓度相比于其在t0时的浓度之比(所谓的adc曲线)。adc2-b_有效负载曲线指示不同时间点的有效负载释放率与其t0时刻的浓度的比较(所谓的有效负载释放曲线)。在时间点168h，adc2-b的dxd释放率小于5％。adc2-b未经历马来酰亚胺开环过程。24、图2说明了adc2-40的人血浆稳定性概况。adc2-40_tab是总抗体曲线。其包括非有效负载结合抗体和有效负载结合抗体，可被血浆中的抗原(her2)捕获。adc2-40_adc是adc曲线。adc2-40_有效负载曲线是有效负载释放曲线。adc2-40经过马来酰亚胺开环过程(开环)并具有p5修饰。从有效负载释放曲线来看，其显示出比adc2-b更少的自由有效负载释放(<2％)，表明接头稳定性良好。此外，随着马来酰亚胺环的打开，adc曲线几乎与tab曲线重合，表明发生的去结合事件较少。25、图3说明了adc2-32的人血浆稳定性概况。adc2-32_tab曲线是总抗体曲线。adc2-32_adc曲线是adc曲线。adc2-32_有效负载曲线是有效负载释放曲线。adc2-32没有开环，但具有p5修饰。adc2-32在时间点t168 h显示的有效负载释放率(<2％)低于adc2-b。26、图4说明了adc2-42的人血浆稳定性概况。adc2-42_tab曲线是总抗体曲线。adc2-42_adc曲线是adc曲线。adc2-42_有效负载曲线是有效负载释放曲线。adc2-42具有开环和p5修饰。adc2-42与adc2-40类似并显示adc和tab曲线几乎重合，并且有效负载释放率(ex.t168 h)低于adc2-b。图2和图4说明了抗体曲线与adc曲线分别几乎相互重合，表明adc2-40和adc2-42的人血浆稳定性与相应抗体一致。27、图5说明了adc2-b、adc2-32、adc2-40和adc2-42的人血浆稳定性概况，显示了相应的有效负载释放曲线。adc2-b没有开环。adc2-32没有开环，但含有相应的p5修饰。adc2-40和adc2-42已开环，并含有相应的p5修饰。图5表明，在人血浆中，马来酰亚胺环打开的adc的自由有效负载释放低于未经开环处理的adc。在p5修饰下，adc 2-32的有效负载释放少于adc2-b。28、图6说明了基于adc2-b、adc2-32、adc2-40和adc2-42的总抗体(包括含有和不含有效负载结合物的抗体)浓度曲线的大鼠pk概况。adc2-b和adc2-32未开环，但含有相应的p5修饰。adc2-40_tab和adc2-42_tab已开环，并含有相应的p5修饰。基于抗体浓度的大鼠pk概况对于开环或未开环的adc是相似的。29、图7说明了基于adc2-b、adc2-32、adc2-40和adc2-42的adc(有效负载结合抗体)浓度曲线的大鼠pk概况。adc2-b和adc2-32未开环，但含有相应的p5修饰。adc2-40和adc2-42已开环，并含有相应的p5修饰。基于adc浓度的大鼠pk概况表明，开环的adc的清除速度比未开环的adc慢。30、图8说明了adc2-b的大鼠pk概况。adc2-b_adc曲线指示adc(有效负载结合抗体)的浓度。adc2-b_tab总抗体曲线指示包括非有效负载结合抗体和有效负载连接抗体的总抗体的浓度。adc2-b没有开环。31、图9说明了adc2-40的大鼠pk概况。adc2-40_adc曲线指示adc(有效负载结合抗体)的浓度。adc2-40_tab是指示包括非有效负载结合抗体和有效负载连接抗体的总抗体的浓度的总抗体曲线。adc2-40已开环，但含有相应的p5修饰。图9说明了adc2-40_adc和adc2-40_tab的曲线几乎重合，表明开环adc的pk由相应抗体的pk驱动。32、图10说明了adc2-32的大鼠pk概况。adc2-32_adc曲线指示adc(有效负载结合抗体)的浓度。adc2-32_tab曲线指示包括非有效负载结合抗体和有效负载连接抗体的抗体的浓度。adc2-32没有开环，但含有相应的p5修饰。33、图11说明了adc2-42的大鼠pk概况。adc2-42_adc曲线指示adc(有效负载结合抗体)的浓度。adc2-42_tab曲线指示包括非有效负载结合抗体和有效负载连接抗体的抗体的浓度。adc2-42已开环，并含有相应的p5修饰。图11说明了adc2-42_adc和adc2-42_tab的曲线几乎重合，表明开环adc的pk由相应抗体的pk驱动。34、图12说明了adc2-a、adc2-2、adc2-4、adc2-11和adc2-9-1在人血浆稳定性研究中的mmae释放百分比。adc2-a不含p3修饰，但adc2-2、adc2-4、adc2-11和adc2-9-1含有p3修饰。35、图13说明了adc2-a、adc2-2、adc2-4、adc2-11和adc2-9-1在小鼠血浆稳定性研究中的mmae释放百分比。adc2-a不含p3修饰，但adc2-2、adc2-4、adc2-11和adc2-9-1含有p3修饰。图12和图13表明mmae adc的p3修饰能够减少小鼠系统ces1c酶对vc-pab接头的裂解，即减少小鼠系统中的过早自由mmae释放，至少是因为具有p3修饰的mmae adc(例如adc2-2、adc2-4、adc2-11和adc2-9-1)表现出减少的过早自由mmae释放。36、图14说明了adc2-a、adc2-2、adc2-4、adc2-11和adc2-9-1的小鼠pk概况。adc2-a不含p3修饰，但adc2-2、adc2-4、adc2-11和adc2-9-1含有p3修饰。图14表明，与未经p3修饰的mmae adc(例如adc2-a)相比，mmae adc(例如adc2-2、adc2-4、adc2-11和adc2-9-1)的p3修饰可使小鼠系统中的过早自由mmae释放减少。换句话说，图14表明未经p3修饰的mmae adc(即adc2-a)比具有p3修饰的mmae adc(例如adc2-2、adc2-4、adc2-11和adc2-9-1)具有更多的过早mmae释放。37、图15说明了adc 2-6-2疏水相互作用色谱(hic)概况(hic dar 8.0)。38、图16说明了纯度>98％的adc 2-6-2尺寸排阻色谱(sec)概况。39、图17说明了adc 2-9-2 hic概况(hic dar 8.0)。40、图18说明了adc 2-9-2 sec概况(>99％纯度)。41、图19说明了adc2-36-2 hic概况(hic dar7.8)。42、图20说明了纯度>99％的adc2-36-2 sec概况。43、图21说明了不同的组织蛋白酶b介导的罗丹明释放速率。速率排序如下：naccys-15～naccys-13(基准)>naccys-14>naccys-17。44、图22说明了ovcar3细胞系的抑制。45、图23说明了a549细胞系的抑制。46、图24和图25说明了nci-n87细胞存活率检测的数据。47、图26说明了nci-n87细胞存活率检测的数据。48、图27和图28说明了nci-n87细胞存活率检测的数据。49、图29和图30说明了nci-n87细胞存活率检测的数据。50、图31和图32说明了nci-n87细胞存活率检测的数据。51、图33描述了人血浆中adc的有效负载释放％。52、图34描述了小鼠pk研究中的自由mmae释放。53、图35说明了人血浆中adc2-b、adc2-32和adc2-42的adc dar变化。54、图36说明了人血浆中adc2-b和adc2-42的adc dar变化。55、图37说明了大鼠pk中adc2-b、adc2-32和adc2-40以及adc2-42的adc dar变化。56、图38说明了a部分中p5修饰的adc(即adc3-2、adc3-3、adc3-4、adc3-6)与adc3-1之间以及b部分中p5修饰的adc(即adc3-5、adc3-7、adc3-8、adc3-9、adc3-10)与adc3-1之间的hcc1569细胞杀伤比较。57、图39说明了a部分中p3修饰的adc(即adc3-12和adc3-15)与adc3-1之间以及b部分中p3修饰的adc(即adc3-11和adc3-14)与adc3-1之间的hcc1569细胞杀伤比较。58、图40说明了adc3-1、adc3-2、adc3-3、adc3-4、adc3-5、adc3-6、adc3-7、adc3-8、adc3-9和adc3-10的人血浆稳定性概况，如通过相应抗体的浓度所测量。adc3-1_tab、adc3-2_tab、adc3-3_tab、adc3-4_tab、adc3-5_tab、adc3-6_tab、adc3-7_tab、adc3-8_tab、adc3-9_tab、adc3-10_tab为总抗体曲线，分别指示不同时刻抗体的浓度与其t0点浓度之比，包括非有效负载结合抗体和有效负载连接抗体。此图说明了相应的p5修饰的开环adc的总抗体曲线与p5修饰的非开环adc的adc曲线几乎重合，表明p5修饰的开环adc与p5修饰的非开环adc的人血浆稳定性是一致的，如通过相应抗体的浓度所测量。59、图41说明了adc3-1、adc3-2、adc3-3、adc3-4、adc3-5、adc3-6、adc3-7、adc3-8、adc3-9和adc3-10的人血浆稳定性概况，如通过相应adc的浓度所测量。adc3-1_adc、adc3-2_adc、adc3-3_adc、adc3-4_adc、adc3-5_adc、adc3-6_adc、adc3-7_adc、adc3-8_adc、adc3-9_adc、adc3-10_adc为adc曲线，其指示相应药物结合抗体在不同时间点的浓度与其t0时刻浓度之比。此图说明p5修饰的开环adc(adc3-4、adc3-5、adc3-6、adc3-7、adc3-8)比p5修饰的非开环adc具有更好的稳定性。然而，p5修饰的开环adc的稳定性相似。p5修饰的非开环adc的稳定性也相似。60、图42显示了adc3-1、adc3-2、adc3-3、adc3-4、adc3-5、adc3-6、adc3-7、adc3-8、adc3-9和adc3-10的人血浆稳定性概况，如通过自由有效负载释放所测量。adc3-1_adc_有效负载、adc3-2_adc_有效负载、adc3-3_adc_有效负载、adc3-4_adc_有效负载、adc3-5_adc_有效负载、adc3-6_adc_有效负载、adc3-7_adc_有效负载、adc3-8_adc_有效负载、adc3-9_adc_有效负载、adc3-10_adc_有效负载曲线为有效负载释放曲线，其指示不同时间点的有效负载释放率与其t0时刻的浓度的比较。此图说明，所有adc的游离有效负载在人血浆中168小时后浓度均小于3％，表明adc的人血浆稳定性在可接受范围内。开环adc释放的有效负载比非开环adc还要少。61、图43说明了adc3-1、adc3-11、adc3-12、adc3-13、adc3-14和adc3-15的人血浆稳定性概况，如通过相应抗体的浓度所测量。adc3-1_tab、adc3-11_tab、adc3-12_tab、adc3-13_tab、adc3-14_tab和adc3-15_tab曲线为总抗体曲线，分别指示不同时刻抗体的浓度与其t0点浓度之比，包括非有效负载结合抗体和有效负载连接抗体。此图说明了相应p3修饰的adc的总抗体曲线几乎彼此重合，表明p3修饰adc的人血浆稳定性相似，如通过相应抗体的浓度所测量。62、图44说明了adc3-1、adc3-11、adc3-12、adc3-13、adc3-14和adc3-15的人血浆稳定性概况，如通过相应adc的浓度所测量。adc3-1_adc、adc3-11_adc、adc3-12_adc、adc3-13_adc、adc3-14_adc、adc3-15_adc曲线为adc曲线。此图说明了p3修饰的开环adc(adc3-11、adc3-12和adc3-13)比p3修饰的非开环adc具有更好的稳定性。然而，p3修饰的开环adc的稳定性相似。p3修饰的非开环adc的稳定性也相似。63、图45说明了通过自由有效负载释放测量的adc3-1、adc3-11、adc3-12、adc3-13、adc3-14和adc3-15的人血浆稳定性概况。adc3-1_adc_有效负载、adc3-11_adc_有效负载、adc3-12_adc_有效负载、adc3-13_adc_有效负载、adc3-14_adc_有效负载、adc3-15_adc_有效负载曲线为有效负载释放曲线，其指示相应adc释放的自由有效负载的浓度。此图说明，所有adc的游离有效负载在人血浆中168小时后浓度均小于3％，表明adc的人血浆稳定性在可接受范围内。开环adc释放的有效负载比非开环adc还要少。64、图46说明了adc3-1、adc3-3和adc3-4在异种移植肿瘤模型上的研究结果，其中p5修饰的非开环adc(adc3-3)和p5修饰的开环adc(adc3-4)表现出与adc3-1相似的功效。65、图47说明了adc3-1、adc3-3和adc3-4在异种移植肿瘤模型上的研究结果，其中p5修饰的非开环adc(adc3-3)、p5修饰的开环adc(adc3-4)表现出与adc3-1相似的功效。66、图48说明了adc3-1和adc3-7在a375异种移植肿瘤模型上的研究结果，其中p5修饰的开环adc(adc3-7)表现出与adc3-1相似的功效。67、图49说明了adc3-1和adc3-7在a375异种移植肿瘤模型上的研究结果，其中p5修饰的开环adc(adc3-7)表现出与adc3-1相似的功效。68、图50说明了adc3-1、adc3-12和adc3-15在a375异种移植肿瘤模型上的研究结果，其中p3修饰的非开环adc(adc3-15)、p5修饰的开环adc(adc3-12)表现出与adc3-1相似的功效。69、图51说明了adc3-1、adc3-12和adc3-15在a375异种移植肿瘤模型上的研究结果，其中p3修饰的非开环adc(adc3-15)、p5修饰的开环adc(adc3-12)表现出比adc3-1更好的功效。特别地，对于adc3-12观察到1/8cr和2/8pr。70、图52说明了adc3-1、adc3-3和adc3-4在a375异种移植肿瘤模型上的研究结果。结果表明，p5修饰的非开环adc(adc3-3)和p5修饰的开环adc(adc3-4)表现出与参考adc3-1相似的药物动力学概况。71、图53说明了adc3-1、adc3-7、adc3-12和adc3-15在小鼠药物动力学研究中的研究结果，其中p5修饰的开环adc(adc3-7)、p5修饰的开环adc(adc3-12)和p3修饰的未开环adc(adc3-15)表现出与adc3-1相似的药物动力学概况。这表明adc功效与adc药物动力学概况呈正相关。72、图54说明了adc2-62-1和adc2-62-2与jimt-1(her2中等表达水平)中的参考adc(具有dar4的adc2-a)相比具有相当的细胞杀伤活性。73、图55说明了与参考adc(具有dar4的adc2-a)相比，具有dar8的adc2-62-2在capan-1(her2低表达水平)中具有更好的细胞杀伤活性。74、图56说明，adc2-63-1(dar4)在jimt-1(her2中等表达水平)中具有与参考adc(具有dar4的adc2-a)相当的细胞杀伤活性，并且adc2-63-2(dar8)在jimt-1(her2中等表达水平)中具有比参考adc更好的细胞杀伤活性。75、图57说明，adc2-63-1(dar4)在capan-1(her2低表达水平)中具有与参考adc(具有dar4的adc2-a)相当的细胞杀伤活性，并且adc2-63-2(dar8)在capan-1(her2低表达水平)中具有比参考adc更好的细胞杀伤活性。76、图58说明，具有dar4的adc2-64-1在jimt-1(her2中等表达水平)中具有与参考adc(具有dar4的adc2-a)相当的细胞杀伤活性，并且具有dar8的adc2-64-2在jimt-1(her2中等表达水平)中具有比参考adc(具有dar4的adc2-a)更好的细胞杀伤活性。77、图59说明，adc2-64-1(dar4)在capan-1(her2低表达水平)中具有与参考adc(具有dar4的adc2-a)相当的细胞杀伤活性，并且adc2-64-2(dar8)在capan-1(her2低表达水平)中具有比参考adc(具有dar4的adc2-a)更好的细胞杀伤活性。78、图60说明，具有dar4的adc2-65-1在jimt-1(her2中等表达水平)中具有与参考adc(具有dar4的adc2-a)相当的细胞杀伤活性，并且具有dar8的adc2-65-2在jimt-1(her2中等表达水平)中具有比参考adc(具有dar4的adc2-a)更好的细胞杀伤活性。79、图61说明，adc2-65-1(dar4)在capan-1(her2低表达水平)中具有与参考adc(具有dar4的adc2-a)相当的细胞杀伤活性，并且adc2-65-2(dar8)在capan-1(her2低表达水平)中具有比参考adc(具有dar4的adc2-a)更好的细胞杀伤活性。80、图62说明了adc2-62-2 hic概况(hic dar 7.7)。81、图63说明了纯度>99％的adc2-62-2 sec概况。82、图64说明了adc2-63-2 hic概况(hic dar 8.0)。83、图65说明了纯度>99％的adc2-63-2 sec概况。84、图66说明了adc2-64-2 hic概况(hic dar 7.7)。85、图67说明了纯度>99％的adc2-64-2 sec概况。86、图68说明了adc2-65-2 hic概况(hic dar 7.5)。87、图69说明了纯度>99％的adc2-65-2 sec概况。88、图70和图71说明了实施例66和实施例69在a375和calu-6癌细胞系中表现出比dxd更强的细胞杀伤活性，并且实施例68和实施例72在a375和calu-6癌细胞系中的效力低于dxd。89、图72、图73和图74说明了adc-c2在mda-mb-453中具有比adc-c1更强的杀伤效力，并且adc-c3和adc-c5在a375中表现出比adc-c1更好的细胞杀伤活性。90、图75、图76和图77说明了adc-c3在mda-mb-453和calu-6-nanoluc系统中具有比adc-c1更强的旁观者细胞杀伤活性，并且adc-c3和adc-c5在a375和calu-6-nanoluc系统中表现出比adc-c1更好的旁观者杀伤效力。91、图78描绘了本文使用的抗体的序列。92、图79描绘了adc-c1、adc-c3和adc-c5与在balb/c裸小鼠中皮下生长的a-375黑色素瘤异种移植物相比的体内功效。93、图80描绘了在balb/c裸小鼠中皮下生长的a-375黑色素瘤异种移植物中比较adc-c1和adc-c2的体内功效。94、5.具体实施方式95、本文提供了用于治疗多种人类癌症的化合物、组合物、adc和方法，所述癌症包括但不限于结直肠癌、胃癌、乳腺癌、非小细胞肺癌(nsclc)、卵巢癌、头颈癌、胰腺癌和宫颈癌。在一个实施方案中，本文提供了可用于治疗多种人类癌症的化合物、组合物、adc和方法。96、在本公开中，应理解，本公开不限于所描述的特定方法和/或实验条件，因为此类方法和条件可能会有所不同。还应理解，本文使用的术语仅出于描述具体实施方案的目的并且不意图具有限制性。97、虽然可在本发明的实践或测试中使用类似于或等同于本文所述的那些方法和材料的任何方法和材料，但现在描述优选的方法和材料。本说明书中提及的所有专利、申请和非专利出版物均以引用的方式整体并入本文中。98、5.1.定义99、当提及本文提供的化合物时，除非另有说明，否则下列术语具有下列含义。除非另有定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解相同的含义。如果本文中提供的某个术语有多个定义，则以这些定义为准，除非另有说明。100、如本文以及说明书和所附权利要求书中所用，除非上下文另有明确说明，否则不定冠词“一(a)”和“一(an)”以及定冠词“所述(the)”包括复数和单数指示物。101、如本文所用并且除非另有说明，否则术语“约”和“大约”在与组合物的成分的量或重量百分比连用时，意指本领域普通技术人员公认的提供与指定量或重量百分比所获得的药理作用等效的药理作用的量或重量百分比。在某些实施方案中，术语“约”和“大约”在这种情形中使用时，涵盖在指定量或重量百分比的30％以内、20％以内、15％以内、10％以内或5％以内的量或重量百分比。102、如本文所用并且除非另有说明，否则术语“约”和“大约”在与为表征特定固体形式而提供的数值或值范围连用时，例如特定温度或温度范围，诸如描述熔融、脱水、脱溶剂或玻璃化转变温度；质量变化，诸如随温度或湿度而变的质量变化；溶剂或水含量，以例如质量或百分比表示；或峰位置，诸如在通过例如ir或拉曼光谱(raman spectroscopy)或xrpd的分析中；指示所述值或值范围可能偏离到本领域普通技术人员认为合理的程度，同时仍描述所述固体形式。用于表征晶体形式和非晶态固体的技术包括但不限于热重分析(tga)、差示扫描量热法(dsc)、x射线粉末衍射法(xrpd)、单晶x射线衍射法、振动光谱法(例如红外(ir)和拉曼光谱法)、固态和溶液核磁共振(nmr)光谱法、光学显微术、热台光学显微术、扫描电子显微术(sem)、电子晶体学和定量分析、粒度分析(psa)、表面积分析、溶解度研究和溶解研究。在某些实施方案中，术语“约”和“大约”在此情形中使用时，指示数值或值范围可在所叙述的值或值范围的30％、20％、15％、10％、9％、8％、7％、6％、5％、4％、3％、2％、1.5％、1％、0.5％或0.25％以内变化。举例来说，在一些实施方案中，xrpd峰位置的值可能变化高达±0.2°2θ(或±0.2度2θ)，同时仍描述特定的xrpd峰。103、“烷基”基团是饱和、部分饱和或不饱和的直链或支链非环状烃，其具有1至10个碳原子，通常1至8个碳，或在一些实施方案中1至6个、1至4个、或2至6个碳原子。代表性的烷基包括-甲基、-乙基、-正丙基、-正丁基、-正戊基和正己基；而饱和的支链烷基包括-异丙基、-仲丁基、-异丁基、-叔丁基、-异戊基、2-甲基戊基、3甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。不饱和烷基的实例包括但不限于乙烯基、烯丙基、ch＝ch(ch3)、-ch＝c(ch3)2、-c(ch3)＝ch2、-c(ch3)＝ch(ch3)、c(ch2ch3)＝ch2、c≡ch、-c≡c(ch3)、-c≡c(ch2ch3)、-ch2c≡ch、-ch2c≡c(ch3)和ch2c≡c(ch2ch3)等。烷基可为取代的或未取代的。在某些实施方案中，当本文所描述的烷基被称为“经取代”时，它们可以被任何一个或多个取代基取代，如本文所公开的示例性化合物和实施方案中发现的那些；以及卤素(氯、碘、溴或氟)；羟基；烷氧基；烷氧基烷基；氨基；烷基氨基；羧基；硝基；氰基；硫醇；硫醚；亚胺；酰亚胺；脒；胍；烯胺；氨基羰基；酰基氨基；膦酸酯基；膦；硫羰基；磺酰基；砜；磺酰胺；酮；醛；酯；脲；氨基甲酸酯；肟；羟胺；烷氧基胺；芳烷氧基胺；n-氧化物；肼；酰肼；腙；叠氮化物；异氰酸酯；异硫氰酸酯；氰酸酯；硫氰酸酯；b(oh)2；或o(烷基)氨基羰基。104、“烯基”为具有2至10个碳原子、典型地2至8个碳原子并且包括至少一个碳-碳双键的直链或支链非环状烃。代表性的直链和支链(c2c8)烯基包括-乙烯基、-烯丙基、-1-丁烯基、-2-丁烯基、-异丁烯基、-1-戊烯基、2戊烯基、-3-甲基-1-丁烯基、-2-甲基-2-丁烯基、-2,3-二甲基-2-丁烯基、-1-己烯基、2-己烯基、-3-己烯基、-1-庚烯基、-2-庚烯基、-3-庚烯基、-1-辛烯基、-2-辛烯基、3辛烯基等。烯基的双键可为非共轭的，或与另一不饱和基团共轭的。烯基可为未取代的或取代的。105、“环烷基”基团是具有3至10个碳原子的饱和或部分饱和的环状烷基，其具有可以任选地被1至3个烷基取代的单个环或多个稠环或桥环。在一些实施方案中，环烷基具有3至8个环成员，而在其它实施方案中，环碳原子的数目在3至5、3至6或3至7的范围内。此类环烷基包括例如单环结构，诸如环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、1-甲基环丙基、2甲基环戊基、2-甲基环辛基等，或多环或桥环结构，诸如金刚烷基等。不饱和环烷基的实例包括环己烯基、环戊烯基、环己二烯基、丁二烯基、戊二烯基、己二烯基等。环烷基可经取代或未经取代。此类经取代的环烷基包括例如环己酮等。106、“芳基”基团是具有单环(例如苯基)或多个稠环(例如萘基或蒽基)的6至14个碳原子的芳香族碳环基团。在一些实施方案中，芳基含有6-14个碳，并且在其它实施方案中，芳基的环部分含有6至12个或甚至6至10个碳原子。具体的芳基包括苯基、联苯基、萘基等。芳基可经取代或未经取代。短语“芳基”还包括含有稠环的基团，诸如稠合的芳香族-脂肪族环系统(例如茚满基、四氢萘基等)。107、“杂芳基”基团是杂芳香族环系统中具有一至四个杂原子作为环原子的芳基环系统，其中其余原子是碳原子。在一些实施方案中，杂芳基含有5至6个环原子，并且在其它实施方案中，基团的环部分含有6至9个或甚至6至10个原子。合适的杂原子包括氧、硫和氮。在某些实施方案中，杂芳基环系统是单环或双环。非限制性实例包括但不限于以下基团：诸如吡咯基、吡唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、吡咯基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、噻吩基、苯并噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基(例如异苯并呋喃-1,3-二亚胺)、吲哚基、氮杂吲哚基(例如吡咯并吡啶基或1h-吡咯并[2,3-b]吡啶基)、吲唑基、苯并咪唑基(例如1h-苯并[d]咪唑基)、咪唑并吡啶基(例如氮杂苯并咪唑基、3h咪唑并[4,5-b]吡啶基或1h-咪唑并[4,5-b]吡啶基)、吡唑并吡啶基、三唑并吡啶基、苯并三唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、异噁唑并吡啶基、硫萘基、嘌呤基、黄嘌呤基、腺嘌呤基、鸟嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、四氢喹啉基、喹喔啉基和喹唑啉基。108、“杂环基”是芳香族(也称为杂芳基)或非芳香族环烷基，其中一至四个环碳原子独立地被来自由o、s和n组成的组的杂原子取代。在一些实施方案中，杂环基包括3至10个环成员，而其它此类基团具有3至5个、3至6个或3至8个环成员。杂环基还可以在任何环原子处(即，杂环的任何碳原子或杂原子处)与其它基团键结。杂环基可经取代或未经取代。杂环基包括不饱和、部分饱和和饱和的环系统，诸如咪唑基、咪唑啉基和咪唑烷基。短语杂环基包括稠合环种类，包括包含稠合芳香族和非芳香族基团的那些，诸如苯并三唑基、2,3-二氢苯并[l,4]二氧杂环己烯基和苯并[l,3]二氧杂环戊烯基。所述短语还包括含有杂原子的桥联多环系统，诸如但不限于奎宁环基。杂环基的代表性实例包括但不限于氮丙啶基、氮杂环丁烷基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、噻唑烷基、四氢噻吩基、四氢呋喃基、二氧杂环戊烯基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡咯啉基、咪唑基、咪唑啉基、吡唑基、吡唑啉基、三唑基、四唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、噻唑啉基、异噻唑基、噻二唑基、噁二唑基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、四氢吡喃基(例如四氢-2h-吡喃基)、四氢噻喃基、氧硫杂环己烷、二氧基、二噻烷基、吡喃基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基、吡嗪基、三嗪基、二氢吡啶基、二氢二噻嗪基、二氢二亚硫酰基、高哌嗪基、奎宁环基、吲哚基、吲哚啉基、异吲哚基、氮杂吲哚基(吡咯并吡啶基)、吲唑基、吲嗪基、苯并三唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁二唑基、苯并噁嗪基、苯并二噻嗪基、苯并噁噻嗪基、苯并噻嗪基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并[l,3]二氧杂环戊烯基、吡唑并吡啶基、咪唑并吡啶基(氮杂苯并咪唑基；例如1h-咪唑并[4,5-b]吡啶基或1h-咪唑并[4,5-b]吡啶-2(3h)-酮基)、三唑并吡啶基、异噁唑并吡啶基、嘌呤基、黄嘌呤基、腺嘌呤基、鸟嘌呤基、喹啉基、异喹啉基、喹嗪基、喹喔啉基、喹唑啉基、噌啉基、酞嗪基、萘啶基、蝶啶基、硫萘基、二氢苯并噻嗪基、二氢苯并呋喃基、二氢吲哚基、二氢苯并二恶英基、四氢吲哚基、四氢吲唑基、四氢苯并咪唑基、四氢苯并三唑基、四氢吡咯并吡啶基、四氢吡唑并吡啶基、四氢咪唑并吡啶基、四氢三唑并吡啶基和四氢喹啉基。代表性的取代的杂环基可以是单取代的或取代多于一次的，例如但不限于吡啶基或吗啉基，其为2-、3-、4-、5-或6-取代的，或被各种取代基(例如下面列出的那些)二取代的。109、“环烷基烷基”基团是下式的基团：-烷基-环烷基，其中烷基和环烷基如上文所定义。取代的环烷基烷基可在基团的烷基、环烷基或烷基和环烷基两个部分处被取代。代表性的环烷基烷基包括但不限于环戊基甲基、环戊基乙基、环己基甲基、环己基乙基和环己基丙基。代表性的取代的环烷基烷基可以是单取代的或取代多于一次的。110、“芳烷基”基团是下式的基团：-烷基-芳基，其中烷基和芳基如上文所定义。取代的芳烷基可在基团的烷基、芳基或烷基和芳基两个部分处被取代。代表性的芳烷基包括但不限于苄基和苯乙基以及稠合(环烷基芳基)烷基，诸如4-乙基-茚满基。111、“杂环基烷基”基团是下式的基团：-烷基-杂环基，其中烷基和杂环基如上文所定义。取代的杂环基烷基可在基团的烷基、杂环基或烷基和杂环基两个部分处被取代。代表性的杂环烷基包括但不限于4-乙基吗啉基、4-丙基吗啉基、呋喃-2-基甲基、呋喃-3-基甲基、吡啶-3-基甲基、(四氢-2h-吡喃-4-基)甲基、(四氢-2h-吡喃-4-基)乙基、四氢呋喃-2-基甲基、四氢呋喃-2-基乙基和吲哚-2-基丙基。112、“卤素”是氯、碘、溴或氟。113、“羟烷基”基团是被一个或多个羟基取代的如上文所描述的烷基。114、“烷氧基”基团是o(烷基)，其中烷基如上文所定义。115、“烷氧基烷基”基团是(烷基)o(烷基)，其中烷基如上文所定义。116、“胺”基团是下式的基团：nh2。117、“羟胺”基团是下式的基团：n(r#)oh或nhoh，其中r#是如本文所定义的经取代或未经取代的烷基、环烷基、环烷基烷基、芳基、芳烷基、杂环基或杂环基烷基。118、“烷氧基胺”基团是下式的基团：-n(r#)o-烷基或-nho-烷基，其中r#如上文所定义。119、“芳烷氧基胺”基团是下式的基团：n(r#)o-芳基或nho芳基，其中r#如上文所定义。120、“烷基胺”基团是下式的基团：nh烷基或n(烷基)2，其中每个烷基独立地如上文所定义。121、“氨基羰基”基团是下式的基团：-c(＝o)n(r#)2、-c(＝o)nh(r#)或c(＝o)nh2，其中每个r#如上文所定义。122、“酰基氨基”基团是下式的基团：nhc(＝o)(r#)或n(烷基)c(＝o)(r#)，其中每个烷基和r#独立地如上文所定义。123、“o(烷基)氨基羰基”基团是下式的基团：-o(烷基)c(＝o)n(r#)2、-o(烷基)c(＝o)nh(r#)或-o(烷基)c(＝o)nh2，其中每个r#独立地如上文所定义。124、“n-氧化物”基团是下式的基团：-n+-o-。125、“羧基”基团是下式的基团：c(＝o)oh。126、“酮”基团是下式的基团：c(＝o)(r#)，其中r#如上文所定义。127、“醛”基团是下式的基团：-ch(＝o)。128、“酯”基团是下式的基团：c(＝o)o(r#)或oc(＝o)(r#)，其中r#如上文所定义。129、“脲”基团是下式的基团：-n(烷基)c(＝o)n(r#)2、-n(烷基)c(＝o)nh(r#)、-n(烷基)c(＝o)nh2、-nhc(＝o)n(r#)2、-nhc(＝o)nh(r#)或nhc(＝o)nh2#，其中每个烷基和r#独立地如上文所定义。130、“亚胺”基团是下式的基团：-n＝c(r#)2或-c(r#)＝n(r#)，其中每个r#独立地如上文所定义。131、“酰亚胺”基团是下式的基团：-c(＝o)n(r#)c(＝o)(r#)或n((c＝o)(r#))2，其中每个r#独立地如上文所定义。132、“氨基甲酸酯”基团是下式的基团：-oc(＝o)n(r#)2、-oc(＝o)nh(r#)、-n(r#)c(＝o)o(r#)或-nhc(＝o)o(r#)，其中每个r#独立地如上文所定义。133、“脒”基团是下式的基团：-c(＝n(r#))n(r#)2、-c(＝n(r#))nh(r#)、-c(＝n(r#))nh2、-c(＝nh)n(r#)2、-c(＝nh)nh(r#)、-c(＝nh)nh2、-n＝c(r#)n(r#)2、-n＝c(r#)nh(r#)、-n＝c(r#)nh2、-n(r#)c(r#)＝n(r#)、-nhc(r#)＝n(r#)、-n(r#)c(r#)＝nh或-nhc(r#)＝nh，其中每个r#独立地如上文所定义。134、“胍”基团是下式的基团：-n(r#)c(＝n(r#))n(r#)2、-nhc(＝n(r#))n(r#)2、-n(r#)c(＝nh)n(r#)2、-n(r#)c(＝n(r#))nh(r#)、-n(r#)c(＝n(r#))nh2、-nhc(＝nh)n(r#)2、-nhc(＝n(r#))nh(r#)、-nhc(＝n(r#))nh2、-nhc(＝nh)nh(r#)、-nhc(＝nh)nh2、-n＝c(n(r#)2)2、-n＝c(nh(r#))2或-n＝c(nh2)2，其中每个r#独立地如上文所定义。135、“烯胺”基团是下式的基团：-n(r#)c(r#)＝c(r#)2、-nhc(r#)＝c(r#)2、-c(n(r#)2)＝c(r#)2、-c(nh(r#))＝c(r#)2、-c(nh2)＝c(r#)2、-c(r#)＝c(r#)(n(r#)2)、-c(r#)＝c(r#)(nh(r#))或-c(r#)＝c(r#)(nh2)，其中每个r#独立地如上文所定义。136、“肟”基团是下式的基团：-c(＝no(r#))(r#)、-c(＝noh)(r#)、-ch(＝no(r#))或-ch(＝noh)，其中每个r#独立地如上文所定义。137、“酰肼”基团是下式的基团：-c(＝o)n(r#)n(r#)2、-c(＝o)nhn(r#)2、-c(＝o)n(r#)nh(r#)、-c(＝o)n(r#)nh2、-c(＝o)nhnh(r#)2或-c(＝o)nhnh2，其中每个r#独立地如上文所定义。138、“肼”基团是下式的基团：-n(r#)n(r#)2、-nhn(r#)2、-n(r#)nh(r#)、-n(r#)nh2、-nhnh(r#)2或-nhnh2，其中每个r#独立地如上文所定义。139、“腙”基团是下式的基团：-c(＝n-n(r#)2)(r#)2、-c(＝nnh(r#))(r#)2、-c(＝n-nh2)(r#)2、-n(r#)(n＝c(r#)2)或-nh(n＝c(r#)2)，其中每个r#独立地如上文所定义。140、“叠氮化物”基团是下式的基团：-n3。141、“异氰酸酯”基团是下式的基团：n＝c＝o。142、“异硫氰酸酯”基团是下式的基团：n＝c＝s。143、“氰酸酯”基团是下式的基团：ocn。144、“硫氰酸酯”基团是下式的基团：scn。145、“硫醚”基团是下式的基团：-s(r#)，其中r#如上文所定义。146、“硫羰基”基团是下式的基团：-c(＝s)(r#)，其中r#如上文所定义。147、“亚磺酰基”基团是下式的基团：-s(＝o)(r#)，其中r#如上文所定义。148、“砜”基团是下式的基团：-s(＝o)2(r#)，其中r#如上文所定义。149、“磺酰基氨基”基团是下式的基团：-nhso2(r#)或-n(烷基)so2(r#)，其中每个烷基和r#如上文所定义。150、“磺酰胺”基团是下式的基团：-s(＝o)2n(r#)2或-s(＝o)2nh(r#)或-s(＝o)2nh2，其中每个r#独立地如上文所定义。151、“膦酸酯”基团是下式的基团：-p(＝o)(o(r#))2、-p(＝o)(oh)2、-op(＝o)(o(r#))(r#)或-op(＝o)(oh)(r#)，其中每个r#独立地如上文所定义。152、“膦”基团是下式的基团：-p(r#)2，其中每个r#独立地如上文所定义。153、当本文所述的基团(烷基除外)被称为“取代”时，其可被任何适当的取代基取代。取代基的说明性实例是在本文所公开的示例性化合物和实施方案中发现的那些，以及卤素(氯、碘、溴或氟)；烷基；羟基；烷氧基；烷氧基烷基；胺基；烷基胺基；羧基；硝基；氰基；硫醇；硫醚；亚胺；酰亚胺；脒；胍；烯胺；氨基羰基；酰基氨基；膦酸酯；膦；硫羰基；亚磺酰基；砜；磺酰胺；酮；醛；酯；脲；氨基甲酸酯；肟；羟胺；烷氧基胺；芳烷氧基胺；n-氧化物；肼；酰肼；腙；叠氮化物；异氰酸酯；异硫氰酸酯；氰酸酯；硫氰酸酯；氧(═o)；b(oh)2，o(烷基)氨基羰基；环烷基，其可以是单环或者稠合或非稠合的多环(例如环丙基、环丁基、环戊基或环己基)，或者杂环基，其可以是单环或者稠合或非稠合的多环(例如吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基或噻嗪基)；单环或者稠合或非稠合的多环芳基或杂芳基(例如苯基、萘基、吡咯基、吲哚基、呋喃基、噻吩基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、三唑基、四唑基、吡唑基、吡啶基、喹啉基、异喹啉基、吖啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基、苯并咪唑基、苯并噻吩基或苯并呋喃基)芳氧基；芳烷氧基；杂环氧基；和杂环基烷氧基。154、如本文所用的术语“一种或多种药学上可接受的盐”是指由药学上可接受的无毒酸或碱(包括无机酸和碱以及有机酸和碱)制备的盐。155、如本文所用，除非另有说明，术语“包合物”意指以下形式的化合物或其盐：含有在其中捕获客体分子(例如溶剂或水)的空间(例如通道)的晶格或其中化合物为客体分子的晶格。156、如本文所用，除非另有说明，否则术语“溶剂合物”意指化合物或其盐，其还包括通过非共价分子间力结合的化学计量或非化学计量的溶剂。在一个实施方案中，溶剂合物是水合物。157、如本文所用，除非另有说明，否则术语“水合物”意指化合物或其盐，其还包括通过非共价分子间力结合的化学计量或非化学计量的水。158、如本文所用，除非另有说明，否则术语“前药”意指能够在生物条件下(体外或体内)水解、氧化或以其它方式反应以提供活性化合物，特别是化合物的化合物衍生物。前药的实例包括但不限于化合物的衍生物和代谢物，其包括可生物水解的部分，诸如可生物水解的酰胺、可生物水解的酯、可生物水解的氨基甲酸酯、可生物水解的碳酸酯、可生物水解的酰脲和可生物水解的磷酸酯类似物。在某些实施方案中，具有羧基官能团的化合物的前药是羧酸的低级烷基酯。羧酸酯可通过酯化分子上存在的任何羧酸部分而方便地形成。前药典型地可使用众所周知的方法制备，例如由burger’s medicinal chemistry and drugdiscovery第6版(donald j.abraham编,2001,wiley)和design and application ofprodrugs(h.bundgaard编,1985,harwood academic publishers gmfh)描述的方法。159、除非另有说明，否则本文中使用的术语“立体异构体”或“立体异构纯”意指化合物的一种立体异构体基本上不含所述化合物的其它立体异构体。例如，具有一个手性中心的立体异构纯化合物将基本上不含所述化合物的相反对映异构体。具有两个手性中心的立体异构纯化合物将基本上不含所述化合物的其它非对映异构体。典型的立体异构纯化合物包括大于约80重量％的化合物的一种立体异构体和小于约20重量％的化合物的其它立体异构体，大于约90重量％的化合物的一种立体异构体和小于约10重量％的化合物的其它立体异构体、大于约95重量％的化合物的一种立体异构体和小于约5重量％的化合物的其它立体异构体、或大于约97重量％的化合物的一种立体异构体和小于约3重量％的化合物的其它立体异构体。化合物可具有手性中心，并且可以外消旋体、单独的对映异构体或非对映异构体以及其混合物的形式出现。所有此类异构体形式均包含在本文公开的实施方案中，包括其混合物。本文公开的实施方案涵盖了此类化合物的立体异构纯形式的用途，以及这些形式的混合物的用途。例如，包含等量或不等量的特定化合物的对映异构体的混合物可用于本文公开的方法和组合物。这些异构体可被不对称合成或使用诸如手性柱或手性拆分剂等标准技术进行拆分。参见例如jacques,j.等人,enantiomers,racemates andresolutions(wileyinterscience,new york,1981)；wilen,s.h.等人,tetrahedron 33:2725(1977)；eliel,e.l.,stereochemistry of carbon compounds(mcgrawhill,ny,1962)；以及wilen,s.h.,tables of resolving agents and optical resolutions第268页(e.l.eliel编,univ.of notre dame press,notre dame,in,1972)。160、还应注意，化合物可包括e和z异构体，或其混合物，以及顺式和反式异构体，或其混合物。在某些实施方案中，化合物被分离为顺式或反式异构体。在其它实施方案中，化合物是顺式和反式异构体的混合物。161、“互变异构体”是指化合物彼此处于平衡状态的异构形式。异构形式的浓度将取决于化合物所处的环境，并且可能取决于例如化合物是固体还是处于有机溶液或水溶液中而有所不同。举例来说，在水溶液中，吡唑可能表现出以下异构形式，所述异构形式被称为彼此的互变异构体：162、163、本领域技术人员容易理解，多种官能团和其它结构可能表现出互变异构现象，并且化合物的所有互变异构体均在本发明的范围内。164、还应注意的是，化合物的一个或多个原子处可能含有非自然比例的原子同位素。举例来说，化合物可用诸如氚(3h)、碘-125(125i)、硫35(35s)或碳-14(14c)的放射性同位素进行放射性标记，或可以用诸如氘(2h)、碳-13(13c)或氮-15(15n)进行同位素富集。如本文所用的“同位素体”是同位素富集的化合物。术语“同位素富集”是指原子具有除所述原子的天然同位素组成以外的同位素组成。“同位素富集”也可指其中所含的至少一种原子具有不同于所述原子的天然同位素组成的同位素组成的化合物。术语“同位素组成”是指给定原子所存在的每种同位素的量。放射性标记和同位素富集的化合物可用作治疗剂(例如癌症和炎症治疗剂)、研究试剂(例如结合测定试剂)和诊断剂(例如体内成像剂)。如本文所述的化合物的所有同位素变化(无论是否具有放射性)均意图涵盖于本文所提供的实施方案的范围内。在一些实施方案中，提供了化合物的同位素体，例如，同位素体是氘、碳-13或氮-15富集的化合物。165、应该注意的是，如果所描绘的结构与所述结构的名称之间存在不一致，则所描绘的结构应具有更高权重。166、与化合物相关的术语“有效量”意指能够完全或部分缓解症状，或减缓或停止这些症状的进一步发展或恶化的量。本领域技术人员将清楚，预期本文公开的化合物的有效量可根据所治疗适应症的严重程度而变化。167、如本文所用，“炔基”是指含有至少两个碳原子和一个或多个碳-碳三键的单价烃基部分。炔基可任选地被取代且可为直链、支链或环状的。炔基包括但不限于具有2-20个碳原子的基团，即c2-20炔基；2-12个碳原子的基团，即c2-12炔基；2-8个碳原子的基团，即c2-8炔基；2-6个碳原子的基团，即c2-6炔基；以及2-4个碳原子的基团，即c2-4炔基。炔基部分的实例包括但不限于乙炔基、丙炔基和丁炔基。168、如本文所用，“卤烷基”是指如上定义的烷基，其中烷基包括至少一个选自卤素，例如氟(f)、氯(cl)、溴(br)或碘(i)的取代基。卤烷基的实例包括但不限于-cf3、-ch2cf3、-ccl2f和-ccl3。169、如本文所用，“卤烷氧基”是指如上定义的烷氧基，其中烷氧基包括至少一个选自卤素，例如f、cl、br或i的取代基。170、如本文所用，“芳基烷基”是指作为烷基化合物的基团的单价部分，其中烷基化合物被芳香族取代基取代，即芳香族化合物包括与烷基的单键，并且其中所述基团位于烷基上。芳基烷基通过烷基与所示的化学结构键结。芳基烷基可由例如以下的结构表示：b-ch2-、b-c h2-ch2-、b-ch2-ch2-ch2-、b-ch2-ch2-ch2-ch2-、b-ch(ch3)-ch2-ch2-、b-ch2-ch(ch3)-ch2-，其中b为芳香族部分，例如苯基。芳基烷基任选地被取代，即芳基和/或烷基可如本文所公开地被取代。芳基烷基的实例包括但不限于苄基。171、如本文所用，“烷基芳基”是指作为芳基化合物的基团的单价部分，其中芳基化合物被烷基取代基取代，即芳基化合物包括与烷基的单键，并且其中所述基团位于芳基上。烷基芳基通过芳基与所示的化学结构键结。烷基芳基可由例如以下的结构表示：-b-ch3、-b-ch2-ch3、-b-ch2-ch2-ch3、-b-ch2-ch2-ch2-ch3、-b-ch(ch3)-ch2-ch3、-b-ch2-ch(ch3)-ch3，其中b为芳香族部分，例如苯基。烷基芳基任选地被取代，即芳基和/或烷基可如本文所公开地被取代。烷基芳基的实例包括但不限于甲苯甲酰基。172、如本文所用，“芳氧基”是指作为芳香族化合物的基团的单价部分，其中环原子是碳原子并且其中所述环被氧基团取代，即，芳香族化合物包含与氧原子连接的单键并且其中所述基团位于氧原子上，例如苯氧基的c6h5-o-。芳氧基取代基通过此氧原子与其取代的化合物键结。芳氧基可任选地被取代。芳氧基包括但不限于：具有6至20个环碳原子的那些基团，即c6-20芳氧基；具有6至15个环碳原子的那些基团，即c6-15芳氧基；以及具有6至10个环碳原子的那些基团，即c6-10芳氧基。芳氧基部分的实例包括但不限于苯氧基、萘氧基和蒽氧基。173、如本文所用，术语“残基”是指化合物内化学反应后残留的化学部分。例如，术语“氨基酸残基”或“n-烷基氨基酸残基”是指氨基酸或n-烷基氨基酸与合适的偶联搭配物进行酰胺偶联或肽偶联后的产物；其中，例如，在氨基酸或n-烷基氨基酸进行酰胺或肽偶联后会排出一个水分子，从而产生其中并有氨基酸残基或n-烷基氨基酸残基的产物。174、如本文所用，“糖”或“糖基”或“糖残基”是指碳水化合物部分，其可包括3-碳(丙糖)单元、4-碳(丁糖)单元、5-碳(戊糖)单元、6-碳(己糖)单元、7-碳(庚糖)单元或其组合，并且可以是单糖、二糖、三糖、四糖、五糖、寡糖或任何其它多糖。在一些情况下，“糖”或“糖基”或“糖残基”包括呋喃糖(例如呋喃核糖、呋喃果糖)或吡喃糖(例如吡喃葡萄糖、吡喃半乳糖)或其组合。在一些情况下，“糖”或“糖基”或“糖残基”包括醛糖或酮糖，或其组合。单糖的非限制性实例包括核糖、脱氧核糖、木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、甘露糖、半乳糖和果糖。二糖的非限制性实例包括蔗糖、麦芽糖、乳糖、乳果糖和海藻糖。其它“糖”或“糖基”或“糖残基”包括多糖和/或寡糖，包括但不限于直链淀粉、支链淀粉、糖原、菊粉和纤维素。在一些情况下，“糖”或“糖基”或“糖残基”是氨基糖。在一些情况下，“糖”或“糖基”或“糖残基”是葡糖胺残基(1-氨基-1-脱氧-d-葡萄糖醇)，其通过其氨基与分子的其余部分相连，从而与分子的其余部分形成酰胺键(即，葡糖酰胺)。175、如本文所用，“无机酸残基”是指正磷酸和焦磷酸、磷酸和硫酸残基。176、如本文所用，“有机酸残基”是指烷羧酸、氨基酸或寡肽的残基。在一个实施方案中，烷羧酸是甲酸；乙酸；丙酸；丁酸；戊酸；己酸；庚酸；辛酸；壬酸；癸酸；十一酸；十二酸；十三酸；十四酸；十五酸；十六酸；十七酸；十八酸；十九酸；或二十酸。在一个实施方案中，烷羧酸是甲酸；乙酸；丙酸；或丁酸177、某些基团、部分、取代基和原子用与一个或多个键相交的波浪线表示，以指示所述基团、部分、取代基和原子通过哪个原子键结。例如，被丙基取代的苯基描绘为：178、具有以下结构：179、如本文所用，显示取代基通过环原子之间的键与环状基团(例如芳香族、杂芳香族、稠合环和饱和或不饱和环烷基或杂环烷基)键结的图示旨在表明，除非另有说明，否则环状基团可根据本文阐述的技术或本公开所属领域中已知的技术在环状基团中的任何环位置处或在稠合环基团中的任何环上被所述取代基取代。180、如本文所用，“结合剂”是指能够特异性地与给定结合搭配物(例如抗原)结合的任何分子，例如抗体。181、如本文所用，术语“氨基酸”是指含有胺(—nh2)和羧基(—cooh)官能团以及侧链(r基团)的有机化合物，所述侧链对于每种氨基酸都是特异性的。氨基酸可以是蛋白原的或非蛋白原的。“蛋白原”意指氨基酸是蛋白质中发现的二十种天然存在的氨基酸之一。蛋白原氨基酸包括丙氨酸、精氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、半胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、组氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸、色氨酸、酪氨酸和缬氨酸。“非蛋白原”意指氨基酸不是在蛋白质中天然发现的，或者不是由细胞机制直接产生的(例如，是翻译后修饰的产物)。非蛋白原氨基酸的非限制性实例包括γ-氨基丁酸(gaba)、牛磺酸(2-氨基乙磺酸)、茶氨酸(l-γ-谷氨酰乙酰胺)、羟脯氨酸、β-丙氨酸、鸟氨酸和瓜氨酸。182、如本文所用，“肽”在其各种语法形式中以其最广义来定义，是指两个或多个亚基氨基酸、氨基酸类似物或其它肽模拟物的化合物。亚基之间可通过肽键连接，或通过其它键，例如酯键、醚键等连接。如本文所用，术语“氨基酸”是指天然和/或非天然、蛋白原或非蛋白原、或合成氨基酸，包括甘氨酸和d或l旋光异构体、以及氨基酸类似物和肽模拟物。如果肽链较短，例如两个、三个或更多个氨基酸，则通常将其称为寡肽。如果肽链较长，则所述肽典型地被称为多肽或蛋白质。所述定义涵盖全长蛋白质、其类似物、突变体和片段。所述术语还包括多肽的表达后修饰，例如糖基化、乙酰化、磷酸化等。此外，由于分子中存在可离子化的氨基和羧基，特定肽可以酸性或碱性盐或中性形式获得。肽可直接从来源生物体中获得，或可以重组或合成方式产生。183、抗体的氨基酸序列可使用任何已知的编号方案来编号，包括由以下描述的方案：kabat等人(“kabat”编号方案)；al-lazikani等人,1997,j.mol.biol.,273:927-948(“chothia”编号方案)；maccallum等人,1996,j.mol.biol.262:732-745(“contact”编号方案)；lefranc等人,dev.comp.immunol.,2003,27:55-77(“imgt”编号方案)；以及honegge和pluckthun,j.mol.biol.,2001,309:657-70(“aho”编号方案)。除非另有说明，否则本文使用的编号方案是kabat编号方案。然而，编号方案的选择并不意味着不存在差异的序列中的差异，并且本领域技术人员可通过检查一种或多种抗体的氨基酸序列容易地确认序列位置。除非另有说明，否则当指代抗体重链恒定区中的残基时，通常使用“eu编号方案”(例如，如上文kabat等人所报道)。184、如本文所用，术语“抗her2抗体”是指选择性结合于her2受体的抗体，例如曲妥珠单抗。在一个实施方案中，曲妥珠单抗可如us6407213和us5821337中所描述地制造和使用，所述文献的全部公开内容以引用的方式并入本文中。185、如本文所用，术语“抗her3抗体”是指选择性结合于her3受体的抗体，例如帕曲妥单抗。在一个实施方案中，帕曲妥单抗可如us7705130中所描述地制造和使用，所述文献的全部公开内容以引用的方式并入本文中。186、如本文所用，术语“抗ptk7抗体”是指选择性结合于ptk7受体的抗体，例如考非妥珠单抗。在一个实施方案中，考非妥珠单抗可如us9777070中所描述地制造和使用，所述文献的全部公开内容以引用的方式并入本文中。187、术语“癌症”和“癌性”是指或描述哺乳动物的特征通常在于细胞生长不受调控的生理病状。“肿瘤”包括一种或多种癌细胞。癌症的实例包括但不限于癌、淋巴瘤、母细胞瘤、肉瘤和白血病或淋巴恶性肿瘤。此类癌症的更具体的实例包括鳞状细胞癌(例如上皮鳞状细胞癌)、肺癌(包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌("nsclc")、肺腺癌和肺鳞癌)、腹膜癌、肝细胞癌、包括胃肠癌的胃癌(gastric cancer)或胃癌(stomach cancer)、胰腺癌、成胶质细胞瘤、子宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝细胞瘤、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、结直肠癌、子宫内膜癌或子宫癌、唾液腺癌、肾癌(kidney cancer)或肾癌(renal cancer)、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、肝癌、肛门癌、阴茎癌以及头颈癌。188、如本文所用，术语“细胞杀伤活性”是指降低或减少测试细胞系的细胞存活率的活性。189、在以下的权利要求中和在本发明前面的描述中，除了当上下文由于表达语言或必要暗示而另有要求之为，词语“包括/包含(comprise)”或变化形式，诸如“包括/包含(comprises,comprising)”以包括性含义使用，即在本发明的各个实施方案中指定存在说明的特征而不是排除存在另外的特征或添加另外的特征。190、除非另有定义，否则本文中使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解相同的含义。尽管在本发明的实践或测试中可使用与本文中所描述的那些方法和材料相似或相等的任何方法和材料，但现在描述优选的方法、装置和材料。191、5.2.结合物192、在一些其它实例中，本文阐述了一种adc或其药学上可接受的盐，包括：通过共价接头与至少一个有效负载部分连接并与至少一个亲水部分连接的蛋白质，其中所述共价接头直接或间接地与蛋白质、有效负载部分和亲水部分中的每一者键结。在一些实施方案中，蛋白质是抗体或其抗原结合片段。193、如本文所示，在一些实例中，结合剂直接与共价接头，例如本文所阐述的接头键结。这意味着结合剂与本文所阐述的共价接头相距一个键位。在其中一些实例中，共价接头也直接与有效负载部分键结。这意味着共价接头与有效负载(例如但不限于dxd、mmae或其立体异构体或本文所阐述的任何有效负载)相距一个键位。在这些实例中的一些中，共价接头也直接与亲水部分键结。这意味着共价接头与亲水残基(例如本文所阐述的亲水残基)相距一个键位。在这些实例中的一些中，共价接头是本文中所阐述的共价接头。194、在其它实例中，结合剂间接与共价接头键结。这意味着结合剂与共价接头相距超过一个键位。195、这也意味着结合剂通过另一部分与共价接头键结。例如，结合剂可与马来酰亚胺基团键结，所述马来酰亚胺基团与聚乙二醇基团键结，所述聚乙二醇基团与共价接头键结。在这些实例中的一些中，共价接头也间接与有效负载部分键结。这意味着共价接头与有效负载(例如但不限于dxd、mmae或其立体异构体或本文所阐述的任何有效负载)相距超过一个键位。这也意味着共价接头通过另一部分与有效负载键结。例如，共价接头可与二肽键结，例如但不限于val-ala或val-cit，其可与pab键结，而pab可与有效负载键结。在这些实例中的一些中，共价接头也间接与亲水部分键结。这意味着共价接头与亲水部分(例如本文所阐述的亲水残基)相距超过一个键位。这也意味着共价接头通过另一部分与亲水部分键结。196、在某些情况下，亲水残基包含末端亲水基团。在一些情况下，亲水残基包含至少一个糖残基。在一些情况下，亲水残基包含一个糖残基。在一些情况下，亲水残基包含一个末端糖残基。在进一步的情况下，亲水残基包含超过一个糖残基。在一些情况下，亲水残基包含超过一个末端糖残基。197、在另一实施方案中，本文提供的有效负载是发色团官能团，对于所述官能团，本文提供的化合物可用于检测、监测或研究细胞结合分子与靶细胞的相互作用。发色团官能团是具有吸收某种光，例如紫外光、荧光、红外光、近红外光、可见光的能力的官能团。色素细胞官能团是选自以下的官能团：黄色素细胞、红色素细胞、虹色素细胞、白色素细胞、黑色素细胞和蓝色素细胞的类或子类；荧光团分子的类或子类，所述荧光团分子是在光照下重新发射光的荧光化合物；视觉光转导分子的类或子类；发光器分子的类或子类；发光分子的类或子类；以及荧光素化合物的类或子类。198、5.2.1.方面1199、本文描述了根据式(i)的化合物：200、201、或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，202、其中ba为选自人源化、嵌合或人抗体或抗体的抗原结合抗体片段的结合剂；l为共价接头；pa为有效负载残基；并且下标x为1至30。在一些情况下，x为1至4。在一些情况下，x为约1。在一些情况下，x为约2。在一些情况下，x为约3。在一些情况下，x为约4。203、在一个实例中，ba为抗体。在一个实例中，所述抗体为人源化、嵌合或人抗体或抗体的抗原结合抗体片段。在一个实例中，所述抗体为人源化、嵌合或人抗her2或抗her3抗体或抗her2或抗her3抗体的抗原结合抗体片段。在一个实例中，所述抗体为单克隆抗体。204、在一个实例中，ba为抗体。在一个实例中，所述抗体为人源化、嵌合或人抗体或考非妥珠单抗、帕曲妥单抗或曲妥珠单抗的抗原结合抗体片段。205、在某些实施方案中，本文所述的抗体与选自由以下组成的组的一种或多种受体结合：cd7、cd19、cd22、cd27、cd30、cd33、cd37、cd70、cd74、cd79b、cd138、cd142、ca6、胎盘钙粘蛋白、cea、ceacam5、c4.4a、dll3、egfr、egfrviii、enpp3、epha2、ephrina、flor1、fgfr2、gcc、her2、her3、ckit、liv1、ly6e、msln、muc16、napi2b、nectin4、gpnmb、psma、slitrk6、steap1、trop2、5t4、ssea4、globoh、gb5、stn和tn。206、在某些实施方案中，本文所述的抗体与选自由以下组成的组的一种或多种受体结合：b7h3、muc1、fgfr2b、cll1、ccr7、gpc1和gpc3。207、在某些实施方案中，本文所述的抗体与cea受体结合。208、在某些实施方案中，本文所述的抗体是双特异性抗体。209、5.2.2.方面2210、本文描述了根据式(ia)的化合物：211、212、或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，213、其中rg1为反应性基团残基；rg2为任选的反应性基团残基；sp1和sp2在每种情况下独立地为任选的间隔基团残基；hg为亲水残基；pab为任选的自消除单元；下标p为0或1；并且下标x为1至30。214、在一些实施方案中，x为1至15。在一些实施方案中，x为2至10。在一些实施方案中，x为3至9。在一个实施方案中，x为约3。在一个实施方案中，x为约4。在一个实施方案中，x为约5。在一个实施方案中，x为约6。在一个实施方案中，x为7约。在一个实施方案中，x为约8。在一个实施方案中，x为约9。215、在一些实施方案中，式(ia)化合物为具有p3修饰的化合物，其中aa2包含式(w)：216、217、     且218、aa3为-缬氨酸-丙氨酸-、-缬氨酸-瓜氨酸-或的二肽残基；其中r6为-ch3或-(ch2)3-nhc(＝o)nh2。219、在一个实施方案中，为220、在一些实施方案中，pab表示-nh-ch2-o-；式(y1)：221、222、     或223、式(y2)：224、225、其中指示所述pab与式中的相邻基团键结所通过的键。226、在一些实施方案中，rg1为-(琥珀酰亚胺-3-基-n)—、227、在一些实施方案中，rg1为其中ewg为吸电子基团，例如-cn、-no2、卤素、-cf3、-c(＝o)or1和-c(＝o)r1，并且r1为取代或未取代的烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环烷基、或取代或未取代的杂芳基。228、在一些实施方案中，rg1为229、在一些实施方案中，rg1为其中ewg为吸电子基团，例如-cn、-no2、卤素、-cf3、-c(＝o)or1和-c(＝o)r1，并且r1为取代或未取代的烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环烷基、或取代或未取代的杂芳基。230、在一些实施方案中，开环的式(ia)化合物为式(ia)化合物，其中rg1为开环的杂环。在一些实施方案中，rg1为231、在一些实施方案中，rg2为键、-c(＝o)-nh-或-nhc(＝o)-。232、在一些实施方案中，sp1为-(ch2)n1-c(═o)-、-(ch2ch2o)n2-ch2ch2-c(═o)-、-ch[-(ch2)n3-cooh]-c(═o)-、-ch2-c(═o)-nh-(ch2)n4-c(═o)-、-ch2-c(═o)-nh-(ch2)n3-c(═o)-nh-(ch2)n4-c(═o)-或—c(═o)—(ch2)n5-c(═o)—，其中n1、n2、n3、n4和n5各自独立地表示1至8的整数。233、在一些实施方案中，sp2为-(ch2)n6-；并且n6表示1至8的整数。234、在一些实施方案中，hg为235、236、237、其中每个n7独立地为1-15；每个n8独立地为0或1；每个n9独立地为1或2；每个n10独立地为4至16的整数，例如4、8或12；每个n11独立地为0至5的整数；n12为0至3的整数；d为0-3；r2为h或me；r3为-oh、-nh2、-nhch2-ch2-(peg)x-oh或-nhch2-ch2-(peg)x-ome；r4为oh或nh2；并且x、y和z各自独立地为-ch2-、-nh-、-s-或-o-。238、在一些实施方案中，hg为239、240、241、其中每个n7独立地为1-15；每个n8独立地为0或1；每个n9独立地为1或2；每个n10独立地为4至16的整数，例如4、8或12；d为0-3；r2为h或me；r3为-oh、-nh2、-nhch2-ch2-(peg)x-oh或-nhch2-ch2-(peg)x-ome；r4为oh或nh2。242、在一些实施方案中，hg为其中每个n8独立地为0或1；且r1为h或me。243、在一些实施方案中，hg为其中每个n11独立地为0至5的整数；n12为0至3的整数；并且每个x、y和z独立地为-ch2-、-nh-、-s-或-o-。244、在一些实施方案中，hg为-nhso2nh2、-so3h、-so2nh2、-po3h2，并且rg2为键。245、在一些实施方案中，每个pa独立地表示一个发色团官能团。246、在一些实施方案中，每个色素细胞官能团是独立地选自以下的官能团：黄色素细胞、红色素细胞、虹色素细胞、白色素细胞、黑色素细胞和蓝色素细胞的类或子类；荧光团分子的类或子类，所述荧光团分子是在光照下重新发射光的荧光化合物；视觉光转导分子的类或子类；发光器分子的类或子类；发光分子的类或子类；以及荧光素化合物的类或子类。247、在一些实施方案中，每个pa独立地选自由以下组成的组：单甲基奥瑞他汀e(mmae)、单甲基奥瑞他汀f(mmaf)、单甲基奥瑞他汀d(mmad)、美坦辛(mertansine)(美登木素dm1/dm4)、紫杉醇、多西他赛(docetaxel)、埃博霉素(epothilone)b、埃博霉素a、cyt997、奥瑞他汀酪胺磷酸盐、奥瑞他汀氨基喹啉、卤代康普他汀(halocombstatins)、卡奇霉素(calicheamicin)θ、7-乙基-10-羟基喜树碱(sn-38)、吡咯并苯二氮卓(pbd)、水鬼蕉碱(pancratistatin)、环磷酸盐、克瑞布他汀(cribrostatin)-6、基塔他汀(kitastatin)、涡轮他汀(turbostatin)1-4、卤代康普他汀、艾日布林(eribulin)、哈米特林(hemiasterlin)、pnu和西司他丁(silstatins)。248、在一些实施方案中，每个pa独立地表示式(d1)：249、250、      251、其中r4、r5a和r5b各自独立地为氢、糖残基、取代或未取代的无机或有机酸残基、取代或未取代的c1-8烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的非芳香族杂环基、取代或未取代的环烷基烷基、或取代或未取代的杂环基烷基；252、r5a和r5b与其所连接的原子一起形成取代或未取代的环烷基、取代或未取代的非芳香族杂环基。253、在一些实施方案中，r4为氢、且254、其中r5a和r5b各自独立地为h、ch3或cf3；或255、r5a和r5b与其所连接的原子一起形成取代或未取代的环烷基、取代或未取代的非芳香族杂环基。256、在一些实施方案中，r4为氢、且257、其中r5a和r5b各自独立地为h、ch3或cf3；或258、r5a和r5b与其所连接的原子一起形成取代或未取代的环烷基、取代或未取代的非芳香族杂环基。259、在一些实施方案中，每个pa独立地表示260、在一些实施方案中，每个pa独立地表示式(d2)：261、262、        263、其中环b为取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环基、或取代或未取代的杂芳基。264、在一些实施方案中，每个pa独立地表示265、在一些实施方案中，每个pa独立地表示式(d3)：266、267、其中s2为酶可水解的亲水基团。268、在一些实施方案中，s2基团为氢或表示下式之一：269、270、在一些实施方案中，每个pa独立地表示式(e1)：271、272、其中r7和r8各自独立地为氢、卤素或烷基。273、在一个实施方案中，r7和r8为氢。274、在一个实施方案中，r7和r8为甲基。275、在一个实施方案中，r7为甲基且r8为f。276、在一个实施方案中，r7和r8所连接的碳呈s构型。277、在一个实施方案中，r7和r8所连接的碳呈r构型。278、在一些实施方案中，每个pa独立地表示下式：279、280、在一些实施方案中，每个pa独立地为dxd，或独立地表示下式：281、282、在一些实施方案中，每个pa独立地表示下式：283、284、在一些实施方案中，285、aa2为甘氨酸或的氨基酸残基。286、5.2.3.方面3287、本文描述了式(ia)的化合物或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，288、其中aa2包括式(w)：289、290、     且291、aa3为-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-或的四肽残基。292、在一些实施方案中，x为1至15。在一些实施方案中，x为2至10。在一些实施方案中，x为3至9。在一个实施方案中，x为约3。在一个实施方案中，x为约4。在一个实施方案中，x为约5。在一个实施方案中，x为约6。在一个实施方案中，x为7约。在一个实施方案中，x为约8。在一个实施方案中，x为约9。293、在一个实施方案中，ba、rg1、sp1、sp2、rg2、hg、pab、p和pa如本文所提供。294、5.2.4.方面4295、本文描述了根据式(ib)的化合物：296、297、或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，298、其中aa2包含式(w)：299、300、    且301、aa1为-缬氨酸-丙氨酸-、-缬氨酸-瓜氨酸-或的二肽残基；其中r6为-ch3或-(ch2)3-nhc(＝o)nh2。302、在一个实施方案中，为303、在一些实施方案中，x为1至15。在一些实施方案中，x为2至10。在一些实施方案中，x为3至9。在一个实施方案中，x为约3。在一个实施方案中，x为约4。在一个实施方案中，x为约5。在一个实施方案中，x为约6。在一个实施方案中，x为7约。在一个实施方案中，x为约8。在一个实施方案中，x为约9。304、在一些实施方案中，开环的式(ib)化合物为式(ib)化合物，其中rg1为开环的杂环。在一些实施方案中，具有开环的式(ib)化合物为式(ib)化合物，其中rg1为开环的杂环。在一些实施方案中，rg1为305、在一个实施方案中，ba、rg1、sp1、sp2、rg2、hg、pab、p和pa如本文所提供。306、5.2.5.方面5307、本文描述了式(ib)化合物或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，308、其中aa2包括式(w)：309、310、     且311、aa1为-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-或的四肽残基。312、在一个实施方案中，ba、rg1、sp1、sp2、rg2、hg、pab、p、x和pa如本文所提供。313、5.2.6.方面6314、本文描述了根据式(ic)的化合物：315、316、或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，317、其中aa3为-缬氨酸-丙氨酸-、-缬氨酸-瓜氨酸-或的二肽残基；其中r6为-ch3或-(ch2)3-nhc(＝o)nh2。318、在一些实施方案中，x为1至15。在一些实施方案中，x为2至10。在一些实施方案中，x为3至9。在一个实施方案中，x为约3。在一个实施方案中，x为约4。在一个实施方案中，x为约5。在一个实施方案中，x为约6。在一个实施方案中，x为7约。在一个实施方案中，x为约8。在一个实施方案中，x为约9。319、在一些实施方案中，开环的式(ic)化合物为式(ic)化合物，其中rg1为开环的杂环。在一些实施方案中，具有开环的式(ic)化合物为式(ic)化合物，其中rg1为开环的杂环。在一些实施方案中，rg1为320、在一个实施方案中，ba、rg1、sp1、pab、p、x和pa如本文所提供。321、5.2.7.方面7322、本文描述了根据式(ic)的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、立体异构体或衍生物，323、其中aa3为-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-或的四肽残基。324、在一个实施方案中，ba、rg1、sp1、pab、p、x和pa如本文所提供。325、5.2.8.方面8326、在一些实施方案中，化合物选自由表3中的化合物组成的组。在一些实施方案中，化合物选自由adc2-62-1、adc2-62-2、adc2-63-1、adc2-63-2、adc2-64-1、adc2-64-2、adc2-65-1和adc2-65-2组成的组。327、5.3.带有效负载的接头(平台)328、在一些实施方案中，本文阐述的化合物包含与至少一个有效负载部分键结的反应性接头。329、在一些实施方案中，本文阐述了一种化合物或其药学上可接受的溶剂合物、立体异构体或衍生物，其包含通过共价连接单元与至少一个亲水残基连接的有效负载单元，其中共价接头直接或间接地与每个有效负载单元和亲水残基键结。330、在一个实施方案中，亲水残基包含末端亲水基团。331、在一个实施方案中，亲水残基包含糖残基。332、5.3.1.方面9333、在一些实施方案中，本文中阐述一种具有式(ii)的化合物：334、l-pa335、(ii)336、或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，其中l为共价接头；并且pa为有效负载残基。337、5.3.2.方面10338、本文描述了根据式(iia)的化合物：339、340、或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，341、其中aa2包含式(w)：342、343、      且344、aa3为-缬氨酸-丙氨酸-、-缬氨酸-瓜氨酸-或的二肽残基；其中r6为-ch3或-(ch2)3-nhc(＝o)nh2。345、在一个实施方案中，为346、在一个实施方案中，rg1为琥珀酰亚胺-n—、347、在一个实施方案中，rg1为其中ewg为吸电子基团，例如-cn、-no2、卤素、-cf3、-c(＝o)or1和-c(＝o)r1，并且r1为取代或未取代的烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环烷基、或取代或未取代的杂芳基。348、在一个实施方案中，rg1为349、在一个实施方案中，rg1为其中ewg为吸电子基团，例如-cn、-no2、卤素、-cf3、-c(＝o)or1和-c(＝o)r1，并且r1为取代或未取代的烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环烷基、或取代或未取代的杂芳基。350、在一些实施方案中，开环的式(ii)化合物为式(ii)化合物，其中rg1为开环的杂环。在一些实施方案中，具有开环的式(ii)化合物为式(ii)化合物，其中rg1为开环的杂环。在一些实施方案中，rg1为其中ewg为吸电子基团，例如-cn、-no2、卤素、-cf3、-c(＝o)or1和-c(＝o)r1，并且r1为取代或未取代的烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环烷基、或取代或未取代的杂芳基。351、在一些实施方案中，开环的式(iia)化合物为式(iia)化合物，其中rg1为开环的杂环。在一些实施方案中，具有开环的式(iia)化合物为式(iia)化合物，其中rg1为开环的杂环。在一些实施方案中，rg1为352、在一个实施方案中，rg1、sp1、sp2、rg2、hg、pab、p和pa如本文所提供。353、5.3.3.方面11354、本文描述了根据式(iia的化合物或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，355、其中aa2包括式(w)：356、357、    且358、aa3为-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-或的四肽残基。359、在一个实施方案中，rg1、sp1、sp2、rg2、hg、pab、p和pa如本文所提供。360、5.3.4.方面12361、本文描述了根据式(iib)的化合物：362、363、或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，364、其中aa2包含式(w)：365、366、    且367、aa1为-缬氨酸-丙氨酸-、-缬氨酸-瓜氨酸-或的二肽残基；其中r6为-ch3或-(ch2)3-nhc(＝o)nh2。368、在一个实施方案中，为369、在一些实施方案中，开环的式(iib)化合物为式(iib)化合物，其中rg1为开环的杂环。在一些实施方案中，rg1为370、在一个实施方案中，rg1、sp1、sp2、rg2、hg、pab、p和pa如本文所提供。371、5.3.5.方面13372、本文描述了根据式(iib)的化合物或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，373、其中aa2包括式(w)：374、375、     且376、aa1为-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-或的四肽残基。377、在一个实施方案中，rg1、sp1、sp2、rg2、hg、pab、p和pa如本文所提供。378、5.3.6.方面14379、本文描述了根据式(iic)的化合物：380、rg1—sp1—aa3—(pab)p—pa (iic)381、或其药学上可接受的盐互变异构体、溶剂合物、立体异构体、对映异构体、同位素体或前药，382、其中aa3为-缬氨酸-丙氨酸-、-缬氨酸-瓜氨酸-或的二肽残基；其中r6为-ch3或-(ch2)3-nhc(＝o)nh2。383、在一些实施方案中，开环的式(iic)化合物为式(iic)化合物，其中rg1为开环的杂环。在一些实施方案中，rg1为384、在一个实施方案中，rg1、sp1、pab、p和pa如本文所提供。385、5.3.7.方面15386、本文描述了根据式(iic)的化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、立体异构体或衍生物，387、其中：rg1为反应性基团残基；sp1为任选的间隔基团残基；pab为任选的自消除单元；下标p为0或1；并且pa为有效负载残基；388、其中aa3为-甘氨酸-甘氨酸-苯丙氨酸-甘氨酸-或的四肽残基。389、在一个实施方案中，rg1、sp1、pab、p和pa如本文所提供。390、5.3.8.方面16391、在一些实施方案中，化合物选自由表1中的化合物组成的组。392、5.3.9.方面17393、本文描述了一种配体-药物结合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物，其中所述配体-药物结合物包含式(e1)的结构：394、395、其中396、r7和r8各自独立地为氢、卤素或烷基。397、在一些实施方案中，配体-药物结合物包含式(e2)的结构：398、399、其中400、ba为选自人源化、嵌合或人抗体或抗体的抗原结合抗体片段的结合剂；401、l为本文所述的共价接头；并且402、x为1至10，其可为整数或小数。403、在一些实施方案中，抗体为帕曲妥单抗、考非妥珠单抗或曲妥珠单抗。在一个实施方案中，抗体为帕曲妥单抗。404、在一个实施方案中，r7和r8为氢。405、在一个实施方案中，r7和r8为甲基。406、在一个实施方案中，r7为甲基且r8为f。407、在一个实施方案中，r7和r8所连接的碳呈s构型。408、在一个实施方案中，r7和r8所连接的碳呈r构型。409、在一些实施方案中，配体-药物结合物选自表24。在一个实施方案中，抗体为帕曲妥单抗。410、5.3.10.方面18411、本文描述了具有式(e3)的化合物：412、413、或其药学上可接受的溶剂合物、立体异构体或衍生物，414、其中l为如本文所述的共价接头；415、r7和r8各自独立地为氢、卤素或烷基。416、在一个实施方案中，r7和r8为氢。417、在一个实施方案中，r7和r8为甲基。418、在一个实施方案中，r7为甲基且r8为f。419、在一个实施方案中，r7和r8所连接的碳呈s构型。420、在一个实施方案中，r7和r8所连接的碳呈r构型。421、在一个实施方案中，化合物选自表25。422、5.4.有效负载423、本文提供一种化合物或其药学上可接受的溶剂合物、立体异构体或衍生物，其中所述化合物为具有式(d4)的化合物：424、425、其中r4、r5a和r5b各自独立地为氢、糖残基、取代或未取代的无机或有机酸残基、取代或未取代的c1-8烷基、取代或未取代的环烷基、取代或未取代的非芳香族杂环基、取代或未取代的环烷基烷基、或取代或未取代的杂环基烷基；426、r5a和r5b与其所连接的原子一起形成取代或未取代的环烷基、取代或未取代的非芳香族杂环基。427、在一个实施方案中，化合物具有以下结构之一：428、429、本文提供一种化合物或其药学上可接受的溶剂合物、立体异构体或衍生物，其中所述化合物为具有式(d5)的化合物：430、431、其中环b为取代或未取代的环烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的杂环基、或取代或未取代的杂芳基。432、在一个实施方案中，化合物具有以下结构之一：433、434、本文提供一种化合物或其药学上可接受的溶剂合物、立体异构体或衍生物，其中所述化合物为具有式(d6)的化合物：435、436、其中s2为酶可水解的亲水基团。437、在一个实施方案中，s2基团如本文所阐述。438、本文提供一种化合物或其药学上可接受的溶剂合物、立体异构体或衍生物，其中所述化合物为式(e4)化合物：439、440、       441、或其药学上可接受的溶剂合物、442、立体异构体或衍生物，其中r7和r8各自独立地为氢、卤素或烷基。443、在一个实施方案中，r7和r8为氢。444、在一个实施方案中，r7和r8为甲基。445、在一个实施方案中，r7为甲基，且r8为f。446、在一个实施方案中，r7和r8所连接的碳呈s构型。447、在一个实施方案中，r7和r8所连接的碳呈r构型。448、在一个实施方案中，化合物选自表26。449、5.5.制备结合物的方法或工艺450、在一些实施方案中，本文阐述了一种制备抗体-药物结合物的方法，包括在适合于在结合剂与接头-有效负载化合物之间形成键的条件下使结合剂与接头-有效负载化合物接触的步骤。还提供了在适合于在结合剂与接头-有效负载化合物之间形成键的条件下制备式(i)、式(ia)、式(ib)或式(ic)化合物的方法。451、在某些实施方案中，抗体与反应性接头-有效负载发生反应或用其进行处理以形成抗体-有效负载结合物。反应可在本领域技术人员认为合适的条件下进行。在某些实施方案中，使抗体在适合于在抗体与接头-有效负载化合物之间形成键的条件下与反应性接头-有效负载化合物接触。合适的反应条件是本领域技术人员所熟知的。452、以下实施例中提供了此类反应的实例。453、在一些实施方案中，本文阐述了一种制备结合物的方法，所述方法包括在偶联条件下用结合剂处理化合物或使化合物与结合剂接触，其中所述化合物包含与至少一个有效负载部分键结的反应性接头，并且其中与结合剂反应的化合物为式(ii)、式(iia)、式(iib)或式(iic)化合物或其药学上可接受的盐、溶剂合物、立体异构体或衍生物。454、5.6.药物组合物455、本文提供一种药物组合物，其包含本文阐述的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的赋形剂。456、5.7.使用方法457、在一些实施方案中，本文阐述了一种治疗有需要的患者的疾病或病症的方法，所述方法包括向患者施用本文阐述的化合物或药物组合物。在一些实施方案中，所施用的化合物是本文阐述的抗体-药物结合物。458、在一些实施方案中，本文阐述了一种治疗或预防选自由以下组成的组的疾病、病症或疾患的方法：增殖性病症、神经退行性病症、免疫学病症、自身免疫性疾病、炎症性病症、皮肤病、代谢性疾病、心血管疾病和胃肠道疾病，所述方法包括向受试者施用有效治疗量的本文阐述的化合物或药物组合物。在一些实施方案中，所施用的化合物是本文阐述的抗体-药物结合物。459、在一些实施方案中，本文阐述了一种治疗受试者的增殖性疾病、代谢性疾病、炎症或神经退行性疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效治疗量的本文阐述的化合物或药物组合物。在一些实施方案中，本文阐述了一种治疗受试者的增殖性疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效治疗量的本文阐述的化合物或药物组合物。在一些实施方案中，所施用的化合物是本文阐述的抗体-药物结合物。460、在一些实施方案中，本文阐述了一种治疗受试者的代谢性疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效治疗量的本文阐述的化合物或药物组合物。在一些实施方案中，所施用的化合物是本文阐述的抗体-药物结合物。461、在一些实施方案中，本文阐述了一种治疗受试者的炎症的方法，所述方法包括向受试者施用有效治疗量的本文阐述的化合物或药物组合物。在一些实施方案中，所施用的化合物是本文阐述的抗体-药物结合物。462、在一些实施方案中，本文阐述了一种治疗受试者的神经退行性疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效治疗量的本文阐述的化合物或药物组合物。在一些实施方案中，所施用的化合物是本文阐述的抗体-药物结合物。463、虽然可在本发明的实践或测试中使用类似于或等同于本文所述的那些方法和材料的任何方法和材料，但现在描述优选的方法和材料。本说明书中提及的所有专利、申请和非专利出版物均以引用的方式整体并入本文中。464、6.实施例465、试剂和溶剂均获自商业来源，例如sinopharm chemical reagent co.(scrc)、sigma-aldrich、alfa或其它供应商，除非另有明确说明。466、如本文所用，这些过程、方案和实施例中使用的符号和约定(无论是否特别定义特定的缩写)与当代科学文献(例如journal of the american chemical society或journalof biological chemistry)中使用的符号和约定一致。具体来说，但非限制性地，在实施例和整个说明书中可使用下列缩写：467、为了简洁起见，本文使用了一些缩写。一个实例是用单字母缩写来表示氨基酸残基。氨基酸和其相应的三字母和单字母缩写如下：氨基酸缩写列表468、 丙氨酸 ala (a) 精氨酸 arg (r) 天冬酰胺 asn (n) 天冬氨酸 asp (d) 半胱氨酸 cys (c) 谷氨酸 glu (e) 谷氨酰胺 gln (q) 甘氨酸 gly (g) 组氨酸 his (h) 异亮氨酸 ile (i) 亮氨酸 leu (l) 赖氨酸 lys (k) 甲硫氨酸 met (m) 苯丙氨酸 phe (f) 脯氨酸 pro (p) 丝氨酸 ser (s) 苏氨酸 thr (t) 色氨酸 trp (w) 酪氨酸 tyr (y) 缬氨酸 val (v) 469、缩写列表470、471、472、实施例1473、474、步骤1475、(3as,4s,6ar)-6-((s)-4-(((苄氧基)羰基)氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酰胺基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-甲酸(1b)476、将湿pd/c(50mg，10％纯度)添加至((3ar,4r,6r,6ar)-6-叠氮基-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)甲醇1a(400mg，1.75mmol；参见nucleosides,nucleotides and nucleic acids2018,37,79-88)和tea(353.2mg，3.49mmol)于thf(4ml)中的混合物中。将反应混合物用h2气球吹扫三次，并在室温下在h2气球下反应2小时。反应完成后，混合物经硅藻土滤出，并用甲醇洗涤。真空浓缩滤液，得到1b(500mg，粗物质)。477、步骤2478、n2-((苄氧基)羰基)-n5-((3ar,6r,6ar)-6-(羟甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)-l-谷氨酸甲酯(1d)479、将tea(511mg，5.06mmol)添加至1b(500mg，粗物质)和((苄氧基)羰基)-l-谷氨酸5-(2,5-二氧代吡咯烷-1-基)1-甲酯1c(550mg，1.40mmol)于thf(5ml)中的混合物中。使反应混合物在室温下反应过夜。反应完成后，将混合物真空浓缩。残余物使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到1d(300mg，45.9％产率)。c22h30n2o9[m+h]+的精确质量计算值467.2；实验值467.4。480、步骤3481、(3as,4s,6ar)-6-((s)-4-(((苄氧基)羰基)氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酰胺基)-2,2-二甲基四氢呋喃[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-甲酸(1)482、将tempo(18mg，0.12mmol)和phi(oac)2(285mg，0.88mmol)添加至1d(275mg，0.59mmol)于乙腈/h2o(4:1，6ml)中的混合物中。使反应混合物在40℃下反应6小时。反应完成后，将混合物真空浓缩。残余物使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd5um19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到1(115mg，40％产率)。c22h28n2o10[m+h]+的精确质量计算值481.17；实验值481.4483、实施例2484、485、步骤1486、n2-((苄氧基)羰基)-n5-((3ar,4r,6as)-6-氨基甲酰基-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)-l-谷氨酸甲酯(2a)487、将pybop(433mg，0.83mmol)、hobt(113mg，0.83mmol)和diea(161mg，1.25mmol)添加至1(200mg，0.42mmol)和nh4cl(45mg，0.83mmol)于dmf(2ml)中的混合物中。将反应混合物加热至50℃后维持过夜，并通过lcms进行监测。过滤混合物，且滤液经制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到2a(112mg，56％产率)。c22h29n3o9[m+h]+的精确质量计算值480.19；实验值480.4。488、步骤2489、n2-((苄氧基)羰基)-n5-((3ar,6s,6as)-6-氨基甲酰基-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)-l-谷氨酰胺(2b)490、将1m lioh水溶液(0.36ml，0.36mmol)添加至2a(160mg，0.33mmol)于thf/meoh(4:1，2.5ml)中的溶液中。使反应混合物在室温下反应1小时。将混合物用1n hcl酸化至ph＝6，过滤，使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到2b(85mg，65％产率)。c21h27n3o9[m+h]+的精确质量计算值466.17；实验值466.4。491、步骤3492、((s)-5-(((3ar,6s,6as)-6-氨基甲酰基-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)氨基)-1-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊烷-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-1,5-二氧代戊烷-2-基)氨基甲酸苄酯(2d)493、将hatu(83mg，0.22mmol)和diea(71mg，0.55mmol)添加至2b(85mg，0.18mmol)于dmf(1ml)中的溶液中。使反应物在室温下反应10分钟，接着添加(s)-2-((s)-2-氨基-3-甲基丁酰胺基)-n-(4-(羟甲基)苯基)-5-脲基戊酰胺2c(69mg，0.18mmol；市售)，在同一温度下再放置1小时。反应物用1ml水淬灭且过滤，滤液经制备型hplc(方法：柱：xbridge prepc18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到2d(85mg，65％产率)。c39h54n8o12[m+h]+的精确质量计算值827.39；实验值827.6。494、步骤4495、((s)-5-(((3ar,6s,6as)-6-氨基甲酰基-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)氨基)-1-(((s)-3-甲基-1-(((s)-1-(4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)-2-氧代-6-脲基己烷-3-基)氨基)-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-1,5-二氧代戊烷-2-基)氨基甲酸苄酯(2e)496、将diea(40mg，0.31mmol)添加至2d(85mg，0.10mmol)和pnp(47mg，0.15mmol)的混合物中。使反应混合物在室温下反应4小时并通过lcms进行监测。过滤混合物，且滤液使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到2e(70.2mg，70％产率)。c47h58n8o16[m+h]+的精确质量计算值991.40；实验值992.7。497、步骤5498、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((5s,8s,11s)-5-(3-(((3ar,6s,6as)-6-氨基甲酰基-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)氨基)-3-氧代丙基)-8-异丙基-3,6,9-三氧代-1-苯基-11-(3-脲基丙基)-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十二烷-12-酰胺基)苄酯(2g)499、将hobt(4.4mg，0.3mmol)和diea(17mg，0.13mmol)添加至2e(65mg，0.07mmol)和2f(47mg，0.07mmol；市售)于dmf(1.5ml)中的混合物中。使反应混合物在室温下反应24小时。过滤混合物，且滤液使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到2g(68mg，66％产率)。c79h119n13o20[m+h]+的精确质量计算值1570.87；实验值1593.2[m+na+]。500、步骤6501、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚烷-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((s)-2-((s)-2-((s)-2-氨基-5-(3-(((3ar,6s,6as)-6-氨基甲酰基-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯基-4-基)氨基)-5-氧代戊酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄酯(2h)502、将湿pd/c(5mg，10％纯度)添加至2g(23mg，0.01mmol)于meoh(1ml)中的溶液中。将反应混合物用h2气球吹扫三次，并在室温下在h2气球下反应2小时。将反应混合物用针筒过滤器过滤，并将滤液真空浓缩，得到2h(20mg，粗物质)。c71h113n13o18[m+h]+的精确质量计算值1436.83；实验值1438.2。503、步骤7504、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚烷-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((s)-2-((s)-2-((s)-2-氨基-5-(((3r,4s,5s)-5-氨基甲酰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-5-氧代戊酰氨基)-3-甲基丁酰氨基)-5-脲基戊酰氨基)苄酯(2i)505、将2h(20mg，粗物质)于tfa/h2o(1:1，500ul)中的混合物在室温下搅拌2小时。过滤混合物，且滤液用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到2i(11mg，55％产率)。c68h109n13o18[m+h]+的精确质量计算值1396.80；实验值1398.1。506、步骤8507、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((s)-2-((s)-2-((s)-5-(((3r,4s,5s)-5-氨基甲酰基-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-5-氧代戊酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(2)508、将diea(3.1mg，0.02mmol)添加至2i(11mg，0.01mmol)和2j(2.4mg，0.01mmol)于dmf(200ul)中的混合物中。使反应混合物在室温下反应2小时。反应混合物使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到2i(11mg，55％产率)。c78h120n14o21[m+h]+的精确质量计算值1589.88；实验值796.0[m+2h]2+。509、实施例3510、511、512、步骤1513、(3as,4s,6r,6ar)-6-叠氮基-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-甲酸(3a)514、根据实施例1步骤3的合成程序来合成3a。515、步骤2516、(3as,4s,6r,6ar)-6-叠氮基-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-甲酸甲酯(3b)517、将k2co3(1.024g，7.41mmol)和mei(956mg，6.74mmol)添加至3a(1.45g，6.74mmol)于dmf(10ml)中的溶液中。使反应混合物在室温下反应4小时。向混合物中添加水(20ml)，用etoac(20ml*3)萃取，分离后，将合并的有机层用盐水(20ml*3)洗涤，经na2so4干燥，过滤并真空浓缩滤液。残余物经硅胶柱快速色谱(a-石油醚；b-etoac)纯化，得到3b(820mg，50％产率)。518、步骤3519、(3as,4s,6ar)-6-氨基-2,2-二甲基四氢呋喃[3,4-d][1,3]二氧杂环戊烯-4-甲酸甲酯(3)520、将湿pd/c(40mg，10％产率)添加至3b(400mg，1.75mmol)于meoh(5ml)中的溶液中。将反应混合物用h2气球吹扫并在室温下在h2气球下搅拌2小时。反应结束后，混合物经硅藻土滤出并用meoh洗涤。最后真空浓缩，得到3(300mg，79％产率)。c19h15no5[m+h]+的精确质量计算值218.10；实验值218.2。521、实施例4522、523、524、步骤1525、(s)-4-(((苄氧基)羰基)氨基)-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊烷-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-5-氧代戊酸叔丁酯(4c)526、将hatu(338mg，0.89mmol)和diea(345mg，2.67mmol)添加至4a(300mg，0.89mmol)于dmf(5ml)中的混合物中。使反应混合物在室温下反应10分钟。接着添加2c(100mg，0.89mmol)，在同一温度下再放置2小时。反应物用10ml水淬灭并过滤，将滤饼在室温下用etoac湿磨。再次过滤且将滤饼真空干燥，得到4c(520mg，84％产率)。527、步骤2528、(s)-4-(((苄氧基)羰基)氨基)-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊烷-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-5-氧代戊酸(4d)529、将4c(300mg，0.43mmol)于tfa/dcm(1:1，4ml)中的混合物在室温下搅拌2小时。真空浓缩混合物，得到残余物，接着将其溶解于meoh(3ml)中且冷却至0℃，将meona(200mg)添加至甲醇溶液中，且在0℃下搅拌30分钟。用1m hcl将混合物酸化至ph＝3～4。大部分沉淀物被过滤并且滤饼用水洗涤。最后将滤饼真空干燥，得到4d(140mg，51％产率)。c31h42n6o9[m+h]+的精确质量计算值643.30；实验值643.5。530、步骤3531、(3as,4s,6ar)-6-((s)-4-(((苄氧基)羰基)氨基)-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-甲酸甲酯(4e)532、将hatu(99mg，0.22mmol)和diea(84mg，0.65mmol)添加至4d(140mg，0.22mmol)和3(47.32mg，0.22mmol)于dmf(1.2ml)中的混合物中。使混合物在室温下反应1小时。过滤混合物，且使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到4e(92mg，49％产率)。c40h55n7o13[m+h]+的精确质量计算值842.39；实验值842.6[m+h]+。533、步骤4534、(3as,4s,6r,6ar)-6-((s)-4-(((苄氧基)羰基)氨基)-5-(((s)-3-甲基-1-(((s)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-甲酸甲酯(4f)535、根据实施例2步骤4的合成程序来合成4f(37mg，产率88％)。c47h58n8o17[m+h]+的精确质量计算值1007.39；实验值1007.6。536、步骤5537、(3as,4s,6ar)-6-((s)-4-(((苄氧基)羰基)氨基)-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-((5s,8s,11s,12r)-11-((s)-仲丁基)-12-(2-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙烷-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基)-5,8-二异丙基-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-2,13-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四烷基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-甲酸甲酯(4h)538、根据实施例2步骤5的合成程序来合成4h(40mg，68％产率)。c80h120n12o21[m+h]+的精确质量计算值1586.87；实验值1587.37。539、步骤6540、(3as,4s,6ar)-6-((s)-4-氨基-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-((5s,8s,11s,12r)-11-((s)-仲丁基)-12-(2-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙烷-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基)-5,8-二异丙基-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-2,13-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四烷基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁烷-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-甲酸甲酯(4i)541、根据实施例2步骤6的合成程序来合成4i(18mg，粗物质)。c72h114n12o19[m+h]+的精确质量计算值1451.83；实验值1453.2。542、步骤7543、(2s,3s,4r)-5-((s)-4-氨基-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-((5s,8s,11s,12r)-11-((s)-叔丁基)-12-(2-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基)-5,8-二异丙基-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-2,13-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-甲酸甲酯(4j)544、根据实施例2步骤7的合成程序合成4j(10mg，70％产率)。c69h110n12o19[m+h]+的精确质量计算值1411.80；实验值1413.2。545、步骤8546、(2s,3s,4r)-5-((s)-4-氨基-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-((5s,8s,11s,12r)-11-((s)-叔丁基)-12-(2-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基)-5,8-二异丙基-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-2,13-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-甲酸(4k)547、将1m lioh水溶液(0.2ml,0.2mmol)添加至4j(10mg,0.007mmol)于meoh(0.5ml)中的溶液中。使反应混合物在室温下反应30分钟。将混合物用1n hcl酸化至ph＝6，过滤，使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到4k(5.6mg，57％产率)。c68h108n12o19[m+h]+的精确质量计算值1397.79；实验值1399.2。548、步骤9549、(2s,3s,4r)-5-((s)-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-((5s,8s,11s,12r)-11-((s)-叔丁基)-12-(2-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基)-5,8-二异丙基-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-2,13-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-4-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-5-氧代戊酰胺基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-甲酸(4)550、根据实施例2步骤7的合成程序合成4(4.3mg，67％产率)。c78h118n13o22[m+h]+的精确质量计算值1590.86；实验值1591.8。551、实施例5552、553、554、步骤1555、(3as,4s,6r)-6-((s)-4-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(苄氧基)-5-氧代戊酰胺基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-甲酸甲酯(5b)556、将hatu(580mg，1.52mmol)和diea(591mg，4.57mmol)添加至(s)-4-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(苄氧基)-5-氧代戊酸5a(700mg，1.52mmol)和3(320mg，1.47mmol)的混合物中。使反应混合物在室温下反应2小时。将反应混合物用20ml水淬灭，用etoac(30ml*3)萃取。分离后，将合并的有机物用盐水(20ml*3)洗涤，经na2so4干燥，过滤且真空浓缩滤液。残余物使用硅胶快速色谱(a-石油醚；b-etoac)纯化，得到5b(742.7mg，74％产率)。c36h38n2o10[m+h]+的精确质量计算值659.25；实验值659.5。557、步骤2558、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-((3ar,6s,6as)-6-(甲氧基羰基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)-l-谷氨酰胺(5c)559、将湿pd/c(70mg，10％纯度)添加至5b(739mg，1.12mmol)于meoh(10ml)中的溶液中。将反应混合物用h2气球吹扫三次，接着在室温下在h2气球下搅拌2小时。将混合物通过硅藻土洗涤的meoh过滤，将滤液真空浓缩，得到5c(600mg，94％产率)。c29h32n2o10[m+h]+的精确质量计算值569.21；实验值569.5。560、步骤3561、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-((3r,4s,5s)-3,4-二羟基-5-(甲氧基羰基)四氢呋喃-2-基)-l-谷氨酰胺(5)562、根据实施例2步骤7的合成程序合成5(35mg，47％产率)。c26h28n2o10[m+h]+的精确质量计算值529.17；实验值529.4。563、实施例6564、565、566、步骤1567、(1s,2r)-2-((2r,3r)-3-((s)-1-((5s,8s,11s,12r)-1-(4-((s)-2-((s)-2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苯基)-11-((s)-叔丁基)-5,8-二异丙基-12-甲氧基-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十四-14-酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺基)-1-苯丙基硫酸氢盐(6b)568、根据实施例2步骤5的合成程序合成6b(50mg，50％产率)。c73h104n10o17s[m-h]-的精确质量计算值1423.73；实验值1425.0。569、步骤2570、(1s,2r)-2-((2r,3r)-3-((s)-1-((5s,8s,11s,12r)-1-(4-((s)-2-((s)-2-氨基-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苯基)-11-((s)-叔丁基)-5,8-二异丙基-12-甲氧基-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十四-14-酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺基)-1-苯丙基硫酸氢盐(6c)571、将6b(50mg，0.04mmol)溶解于20％哌啶(1ml，dmf溶液)中，在室温下搅拌10min。将混合物用1n hcl酸化至ph＝5～6，接着过滤，且使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prepc18 obd 5um19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到6c(34mg，81％产率)。c58h94n10o15s[m-h]-的精确质量计算值1201.66；实验值1201.8。572、步骤3573、(2s,3s,4r)-5-((s)-4-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-((5s,8s,11s,12r)-11-((s)-叔丁基)-5,8-二异丙基-12-(2-((s)-2-((1r,2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((1s,2r)-1-苯基-1-(磺氧基)丙-2-基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基)-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-2,13-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-甲酸甲酯(6d)574、将hatu(15mg，0.04mmol)和diea(15mg，0.119mmol)添加至5(21mg，0.04mmol)于dmf(2ml)中的溶液中。使反应混合物在室温下反应10分钟。接着添加6c(33.5mg，0.028mmol)，在同一温度下再放置1小时。过滤混合物，且滤液通过使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到6c(34mg，81％产率)。c84h120n12o24s[m-h]-的精确质量计算值1711.83；实验值1713.2。575、步骤4576、(2s,3s,4r)-5-((s)-4-氨基-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-((5s,8s,11s,12r)-11-((s)-叔丁基)-5,8-二异丙基-12-(2-((s)-2-((1r,2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((1s,2r)-1-苯基-1-(磺氧基)丙-2-基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基)-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-2,13-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-甲酸(6e)577、将2m lioh水溶液(20ul，0.04mmol)添加至6d(25mg，0.01mmol)于thf(0.2ml)中的溶液中。使反应混合物在室温下反应2小时。将混合物用1n hcl酸化至ph＝6，过滤，使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到6e(85mg，48％产率)。c68h108n12o22s[m-h]-的精确质量计算值1475.74；实验值1475.9。578、步骤5579、(2s,3s,4r)-5-((s)-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-((5s,8s,11s,12r)-11-((s)-叔丁基)-5,8-二异丙基-12-(2-((s)-2-((1r,2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((1s,2r)-1-苯基-1-(磺氧基)丙-2-基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基)-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-2,13-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-4-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-5-氧代戊酰胺基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-甲酸(6)580、根据实施例2步骤8的合成程序合成6(3.6mg，80％产率)。c78h119n13o25s[m-h]-的精确质量计算值1668.82；实验值1670.7。581、实施例7582、583、584、步骤1585、(2s,3s,4r)-5-((s)-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-((5s,8s,11s,12r)-11-((s)-叔丁基)-5,8-二异丙基-12-(2-((s)-2-((1r,2r)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代-3-(((1s,2r)-1-苯基-1-(磺氧基)丙-2-基)氨基)丙基)吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基)-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-2,13-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-4-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)-5-氧代戊酰胺基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-甲酸(7)586、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物7(4.5mg，57％产率)。587、ms(esi)m/z:1684.8[m-h]-588、实施例8589、590、步骤1591、2-((3as,4s,6r,6ar)-6-((((苄氧基)羰基)氨基)甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)乙酸(8b)592、将8a(740mg，1.95mmol，根据journal of carbohydrate chemistry 2000,19,653-657中描述的方法合成)溶解于meoh(4ml)和h2o(1ml)的混合溶剂中，然后添加naoh(187mg，23.95mmol)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。反应完全后，将混合物减压浓缩以去除大部分meoh。接着添加h2o(5ml)，且在0℃下用hcl水溶液(1m)将混合物调节至ph＝5～6。将混合物用ea(20ml*3)萃取。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤且减压浓缩，得到呈无色油状的8b(560mg，79％产率)。593、ms(esi)m/z:364.2[m-h]-594、步骤2595、2-((3as,4s,6r,6ar)-6-((((苄氧基)羰基)氨基)甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)乙酸2,5-二氧代吡咯烷-1-基酯(8c)596、将8b溶解于dcm(5ml)中，然后添加dcc(365mg，1.77mmol)和hosu(204mg，1.77mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。反应完成后，将反应混合物过滤且浓缩，得到粗产物形式的黄色固体，将其通过快速柱纯化(用pe/ea洗脱)。得到呈淡黄色固体状的8c(490mg，72％产率)。597、ms(esi)m/z:485.4[m+na]+598、步骤3599、(2-((2s,3r,4s,5r)-5-((((苄氧基)羰基)氨基)甲基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)乙酰基)甘氨酰甘氨酰甘氨酰甘氨酸(8e)600、将8c(490mg，1.06mmol)溶解于thf(8ml)中，然后添加8d(381.70mg，1.06mmol，市售)和nahco3饱和水溶液(1ml)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。反应完成后，将混合物在0℃下用hcl水溶液(1m)调节至ph＝1，且通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到作为最终产物的8e(100mg，19％产率)。601、ms(esi)m/z:594.4[m+h]+602、步骤4603、(2-((2s,3r,4s,5r)-5-((((苄氧基)羰基)氨基)甲基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)乙酰基)甘氨酰甘氨酰甘氨酰甘氨酸甲酯(8f)604、将8e(90mg，0.16mmol)溶解于dmf(2ml)中，然后依次添加ch3i(35mg，0.24mmol)和nahco3(27mg，0.33mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物在0℃下用hcl水溶液(1m)调节至ph＝6，并通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。冻干后，得到呈透明油状的8f(85mg，83％产率)。605、ms(esi)m/z:590.4[m+na]+606、步骤5607、(2-((2s,3r,4s,5r)-5-(氨基甲基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)乙酰基)甘氨酰甘氨酰甘氨酰甘氨酸甲酯(8g)608、将8f(85mg，0.15mmol)溶解于meoh(2ml)中，然后添加pd/c(湿，10mg，10％)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。反应完成后，用硅藻土过滤反应混合物。将所得滤液减压浓缩，得到粗产物形式的澄清油(65mg)，其直接用于下一步。609、ms(esi)m/z:434.3[m+h]+610、步骤6611、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-3,4-二羟基-5-(2-((2-((2-((2-((2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)-2-氧代乙基)氨基)-2-氧代乙基)氨基)-2-氧代乙基)氨基)-2-氧代乙基)四氢呋喃-2-基)甲基)-l-谷氨酸苄酯(8i)612、将8g(65mg，0.15mmol)溶解于thf(2ml)中，然后添加8h(100mg，0.18mmol，市售)和饱和nahco3(0.5ml)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。反应完成后，将反应混合物减压浓缩，得到8i(132mg，粗物质)，其直接用于下一步。613、ms(esi)m/z:875.5[m+h]+614、步骤7615、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-3,4-二羟基-5-(2-((2-((2-((2-((2-甲氧基-2-氧代乙基)氨基)-2-氧代乙基)氨基)-2-氧代乙基)氨基)-2-氧代乙基)氨基)-2-氧代乙基)四氢呋喃-2-基)甲基)-l-谷氨酰胺(8)616、根据实施例5步骤2的合成程序合成化合物8(70mg，59％产率)。617、ms(esi)m/z:785.5[m+h]+618、实施例9619、620、621、步骤1622、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((s)-2-((s)-2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(9a)623、根据实施例2步骤5的合成程序合成9a(60mg，32％产率)。624、ms(esi)m/z:1347.1[m+h]+625、步骤2626、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((s)-2-((s)-2-氨基-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(9b)627、根据实施例6步骤2的合成程序合成9b(31mg，70％产率)。628、ms(esi)m/z:1124.7[m+h]+629、步骤3630、(2-((2s,3r,4s,5r)-5-(((s)-4-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-(((((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酰基)氧基)甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)甲基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)乙酰基)甘氨酰甘氨酰甘氨酰甘氨酸甲酯(9d)631、根据实施例6步骤3的合成程序合成9d(19mg，51％产率)。632、ms(esi)m/z:946.1[m+2h]2+633、步骤4634、(2-((2s,3r,4s,5r)-5-(((s)-4-氨基-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-(((((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酰基)氧基)甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)甲基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)乙酰基)甘氨酰甘氨酰甘氨酰甘氨酸(9e)635、将9d(19mg，0.01mmol)溶解于ch3cn和h2o的混合溶剂(v:v＝1:1，1ml)中，然后添加哌啶(1.12g，2.936mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。接着在0℃下用hcl(1m)将反应混合物调节至ph＝6，且通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到9e(14mg，87％产率)。636、ms(esi)m/z:828.0[m+2h]2+637、步骤5638、(2-((2s,3r,4s,5r)-5-(((s)-4-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-5-(((s)-1-(((s)-1-((4-(((((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酰基)氧基)甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)甲基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)乙酰基)甘氨酰甘氨酰甘氨酰甘氨酸(9)639、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物9(13mg，83％产率)。640、ms(esi)m/z:924.5[m+2h]2+641、实施例10642、643、步骤1644、((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酸4-((r)-2-((r)-2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(10b)645、将6a(100mg，0.13mmol)和10a(69mg，0.13mmol)溶解于dmf(1ml)中，然后添加diea(51mg，0.39mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌4小时。反应完成后，将反应混合物减压浓缩，得到标题化合物10b(200mg，粗物质)。646、ms(esi)m/z:1063.6[m+h]+647、步骤2648、((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酸4-((r)-2-((r)-2-氨基-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(10c)649、根据实施例6步骤2的合成程序合成10c(52mg，66％产率)。650、步骤3651、(2-((2s,3r,4s,5r)-5-(((s)-4-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(((r)-1-(((r)-1-((4-(((((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)氧基)甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)甲基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)乙酰基)甘氨酰甘氨酰甘氨酰甘氨酸甲酯(10d)652、根据实施例6步骤3的合成程序合成10d(28mg,28％产率)。653、ms(esi)m/z:804.0[m+2h]2+654、步骤4655、(2-((2s,3r,4s,5r)-5-(((s)-4-氨基-5-(((r)-1-(((r)-1-((4-(((((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)氧基)甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)甲基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)乙酰基)甘氨酰甘氨酰甘氨酰甘氨酸(10e)656、根据实施例9步骤4的合成程序合成10e(16mg，68％产率)。657、ms(esi)m/z:1372.9[m+h]+658、步骤5659、(2-((2s,3r,4s,5r)-5-(((s)-4-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-5-(((r)-1-(((r)-1-((4-(((((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)氧基)甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)甲基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)乙酰基)甘氨酰甘氨酰甘氨酰甘氨酸(10)660、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物10(7.5mg，34％产率)。661、ms(esi)m/z:1565.5[m+h]+662、实施例11663、664、665、步骤1666、n5-((3ar,6s,6as)-6-((2,5,8,11-四氧杂十三-13-基)氨基甲酰基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)-n2-((苄氧基)羰基)-l-谷氨酸甲酯(11b)667、将1(300mg，0.62mmol，根据实施例1的合成程序合成)溶解于dmf(4ml)中，然后添加hatu(309mg，0.81mmol)和diea(242mg，1.87mmol)。将混合物在25℃下搅拌15分钟，随后添加11a(259mg，1.25mmol)。将所得混合物在25℃下进一步搅拌5小时。反应完成后，反应混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到11b(164mg，45％产率)。668、ms(esi)m/z:670.6[m+h]+669、步骤2670、n5-((3ar,6s,6as)-6-((2,5,8,11-四氧杂十三-13-基)氨基甲酰基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)-n2-((苄氧基)羰基)-l-谷氨酰胺(11c)671、将11b(116mg,0.17mmol)溶解于thf和meoh的混合溶剂(v:v＝1:1，0.6ml)中，然后添加含lioh·h2o(13mg，0.31mmol)的h2o(0.3ml)。将所得混合物在40℃下搅拌1.5小时。反应完成后，将反应混合物用hcl水溶液(1m)调节至ph＝5，且通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到11c(62mg，55％产率)。672、ms(esi)m/z:656.5[m+h]+和654.3[m-h]-673、步骤3674、((s)-5-(((3ar,6s,6as)-6-((2,5,8,11-四氧杂十三-13-基)氨基甲酰基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)氨基)-1-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-1,5-二氧代戊-2-基)氨基甲酸苄酯(11d)675、将11c(58mg，0.09mmol)溶解于dmf(2ml)中，然后添加h atu(44mg，0.11mmol)和diea(34mg，0.27mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌15分钟，随后添加2c(根据专利“wo2020/14541a2”所揭示的程序合成)。将混合物在25℃下进一步搅拌2小时。反应完成后，混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到11d(58mg，65％产率)。676、ms(esi)m/z:1017.8[m+h]+677、步骤4678、((s)-5-(((3ar,6s,6as)-6-((2,5,8,11-四氧杂十三-13-基)氨基甲酰基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)氨基)-1-(((s)-3-甲基-1-(((s)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)氧基)甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-1-氧代丁-2-基)氨基)-1,5-二氧代戊-2-基)氨基甲酸苄酯(11e)679、将11d(20mg，0.02mmol)和对硝基苯酚碳酸酯(7mg，0.02mmol)溶解于dmf(0.2ml)中，然后添加diea(8mg，0.06mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌4小时。反应完成后，添加h2o(1ml)以淬灭反应。反应混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到11e(18mg，78％产率)。680、ms(esi)m/z:1017.8[m+h]+681、步骤5682、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((5s,8s,11s)-5-(3-(((3ar,6s,6as)-6-((2,5,8,11-四氧杂十三-13-基)氨基甲酰基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)氨基)-3-氧代丙基)-8-异丙基-3,6,9-三氧代-1-苯基-11-(3-脲基丙基)-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十二-12-酰胺基)苄酯(11f)683、根据实施例2步骤5的合成程序合成11f(31mg，68％产率)。684、ms(esi)m/z:881.5[m+2h]2+685、步骤6686、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((s)-2-((s)-2-((s)-5-(((3ar,6s,6a s)-6-((2,5,8,11-四氧杂十三-13-基)氨基甲酰基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)氨基)-2-氨基-5-氧代戊酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(11g)687、根据实施例2步骤6的合成程序合成11g(25mg，粗物质)。688、ms(esi)m/z:814.6[m+2h]2+689、步骤7690、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((s)-2-((s)-2-((s)-5-(((3r,4s,5s)-5-((2,5,8,11-四氧杂十三-13-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-2-氨基-5-氧代戊酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(11h)691、根据实施例2步骤7的合成程序合成11h(6.5mg，27％产率)。692、ms(esi)m/z:1588.4[m+h]+693、步骤8694、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((s)-2-((s)-2-((s)-5-(((3r,4s,5s)-5-((2,5,8,11-四氧杂十三-13-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-5-氧代戊酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(11)695、根据实施例2步骤8的合成程序合成11(3.5mg，48％产率)。696、ms(esi)m/z:1781.0[m+h]+697、实施例12698、699、步骤1700、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(12a)701、将二叔丁基碳酸二酯(60μl，0.15mmol)添加至mmae(100m g，0.14mmol)的etoh溶液(1ml)中。将混合物搅拌过夜。反应完成后，将反应混合物减压浓缩，并通过快速柱(洗脱剂：dcm/meoh，100/0至20/1(v/v))纯化，得到12a(115mg，定量)。702、ms(esi)m/z:818.8[m+h]+703、步骤2704、(1s,2r)-2-((2r,3r)-3-((s)-1-((6s,9s,12s,13r)-12-((s)-叔丁基)-6,9-二异丙基-13-甲氧基-2,2,5,11-四甲基-4,7,10-三氧代-3-氧杂-5,8,11-三氮杂十五-15-酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺基)-1-苯丙基硫酸氢盐(12b)705、在0℃下将et3n(48μl，0.34mmol)和氯磺酸(14μl，0.22mmol)添加至12a(70mg，0.08mmol)的dcm(1ml)溶液中。所得混合物在此温度下搅拌1小时。反应完成后，通过添加h2o(1ml)淬灭反应。用dcm(1ml×4)萃取混合物。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物形式的棕色油，其通过快速柱(洗脱剂：dcm/meoh，100/0至10/1(v/v))纯化，得到呈白色固体状的12b(47mg，65％产率)。706、ms(esi)m/z:896.6[m-h]-707、步骤3708、(1s,2r)-2-((2r,3r)-3-((s)-1-((3r,4s,5s)-4-((s)-n,3-二甲基-2-((s)-3-甲基-2-(甲基氨基)丁酰胺基)丁酰胺基)-3-甲氧基-5-甲基庚酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺基)-1-苯丙基硫酸氢盐(12c)709、将12b(40mg，0.04mmol)溶解于dcm(0.8ml)中，然后添加tfa(0.2ml)。将所得混合物在0℃下搅拌2小时。反应完成后，将混合物减压浓缩，得到粗12c(50mg)，其直接用于下一步。710、ms(esi)m/z:796.7[m-h]-711、步骤4712、(1s,2r)-2-((2r,3r)-3-((s)-1-((5s,8s,11s,12r)-11-((s)-叔丁基)-1-(4-((s)-2-((s)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苯基)-5,8-二异丙基-12-甲氧基-4,10-二甲基-3,6,9-三氧代-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十四-14-酰基)吡咯烷-2-基)-3-甲氧基-2-甲基丙酰胺基)-1-苯丙基硫酸氢盐(12)713、将12c(27mg，0.03mmol)和12d(37mg，0.05mmol，市售)溶解于dmf(0.5ml)中，然后添加hobt(0.9mg，0.01mmol)和diea(56μl，0.34mmol)。将所述混合物在25℃下搅拌过夜。反应完成后，混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到呈白色固体状的12(5.4mg，13％产率)。714、ms(esi)m/z:1395.0[m-h]-715、实施例13716、717、步骤1718、(3'-氨基-3-氧代-3h-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-6'-基)氨基甲酸乙酯(13b)719、在0℃下向2-(6-氨基-3-亚氨基-3h-呫吨-9-基)苯甲酸盐酸盐13a(800mg，2.18mmol)和diea(705mg，5.4mmol)于dmf(5ml)中的溶液中滴加氯甲酸乙酯(284mg，2.6mmol)。添加完成后，将溶液在室温下搅拌15小时。将冰水(5ml)添加至反应溶液中以淬灭反应。溶液用etoac(20ml*3)萃取，用水(10ml*2)和盐水(10ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，浓缩，并通过快速柱色谱(石油醚/etoac＝100/0至70/30)纯化，得到标题化合物13b(321mg，36.3％产率)。720、ms(esi)m/z:403.0[m+h]+721、步骤2722、(3-氧代-3h-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3',6'-二基)二氨基甲酸4-((14s,17s)-1-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-14-异丙基-12,15-二氧代-17-(3-脲基丙基)-3,6,9-三氧杂-13,16-二氮杂十八-18-酰胺基)苄酯乙酯(13)723、在0℃的氮气氛围下向13b(90mg，0.22mmol)和2,6-二甲基吡啶(72mg，0.67mmol)于dcm(15ml)中的溶液中逐份添加三光气(33mg，0.11mmol)，在室温下搅拌3小时。在0℃下滴加中间物13c(148mg，0.22mmol)于dcm(3ml)中的溶液，在室温下搅拌15小时。添加水(5ml)以淬灭反应。有机相经无水硫酸钠干燥，浓缩并通过快速柱色谱纯化，得到标题化合物13(30mg，12.5％产率)。724、ms(esi)m/z:1091.4[m+h]+725、实施例14726、727、728、步骤1729、(s)-2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸苄酯(14b)730、将(s)-2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-((叔丁氧羰基)氨基)丙酸14a(10.0g，23.45mmol)和苄基溴(16.0g,93.79mmol)溶解于dmf(118ml)中。向所述溶液中添加碳酸氢钠(3.94g，46.90mmol)，在室温下搅拌15小时。添加etoac(1l)，用水(200ml*3)和盐水(200ml)洗涤。有机相经无水硫酸钠干燥，真空浓缩并通过快速柱色谱纯化，得到标题化合物14b(7g，57.8％产率)。731、ms(esi)m/z:517.3[m+h]+732、步骤2733、(s)-2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-氨基丙酸苄酯(14c)734、向14b(7.0g，13.55mmol)于dcm(20ml)中的溶液中添加tfa(10ml)，在室温下搅拌2小时。将溶液浓缩并用饱和碳酸氢钠将溶液的ph调节至8，用etoac(200ml*3)萃取，经无水硫酸钠干燥，真空浓缩，并通过快速柱色谱纯化，得到标题化合物14c(4.5g，79.7％产率)。735、ms(esi)m/z:417.2[m+h]+736、步骤3737、(s)-2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(氨磺酰基氨基)丙酸苄酯(14d)738、在0℃下向14c(4.0g，9.60mmol)和tea(1.5g，14.41mmol)于dcm(100ml)中的溶液中逐份添加氯磺酰胺(1.2g，10.57mmol)，在室温下搅拌15小时。添加水(100ml)以淬灭反应物，用etoac(200ml*3)萃取，经无水硫酸钠干燥，真空浓缩并通过快速柱色谱纯化，得到标题化合物14d(1.2g，25.2％产率)。739、ms(esi)m/z:496.2[m+h]+740、步骤4741、(s)-2-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(氨磺酰基氨基)丙酸(14e)742、向14d(1.1g，2.22mmol)于meoh(20ml)和thf(20ml)中的溶液中添加湿pd/c(10％，1.1g)，在h2(15psi)气氛下在室温下搅拌1小时。将溶液经由硅藻土过滤，真空浓缩，得到标题化合物14e(600mg，66.7％产率)。743、ms(esi)m/z:406.1[m+h]+744、步骤5745、((s)-1-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-1-氧代-3-(氨磺酰基氨基)丙-2-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(14g)746、向14e(600mg，1.48mmol)和14f(562mg，1.48mmol)于dmf(10ml)中的溶液中添加diea(383mg，2.96mmol)。在0℃下将hatu(732mg，1.92mmol)添加至溶液中，在室温下搅拌3小时。反应溶液通过快速柱色谱纯化，得到标题化合物14g(600mg，52.9％产率)。747、ms(esi)m/z:767.3[m+h]+748、步骤6749、(3-氧代-3h-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3',6'-二基)二氨基甲酸4-((5s,8s,11s)-1-(9h-芴-9-基)-8-异丙基-3,6,9-三氧代-5-((氨磺酰基氨基)甲基)-11-(3-脲基丙基)-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十二-12-酰胺基)苄酯乙酯(14h)750、根据实施例13步骤2中所述的程序合成14h(50mg，8.0％产率)。751、ms(esi)m/z:1195.4[m+h]+752、步骤7753、(3-氧代-3h-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3',6'-二基)二氨基甲酸4-((s)-2-((s)-2-((s)-2-氨基-3-(氨磺酰基氨基)丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯乙酯(14i)754、向14h(50mg，0.04mmol)于dmf(3ml)中的溶液中添加dbu(26mg，0.17mmol)，在室温下搅拌2小时。反应溶液通过快速柱色谱纯化，得到标题化合物14i(20mg,49.1％产率)。755、ms(esi)m/z:973.4[m+h]+756、步骤8757、(3-氧代-3h-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3',6'-二基)二氨基甲酸4-((2s,5s,8s)-21-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-5-异丙基-4,7,10-三氧代-8-((氨磺酰基氨基)甲基)-2-(3-脲基丙基)-13,16,19-三氧杂-3,6,9-三氮杂二十一烷酰胺基)苄酯乙酯(14)758、在0℃下向14i(20mg，0.02mmol)、14j(7mg,1.40mmol)和diea(5.3mg，0.04mmol)于dmf(3ml)中的溶液中添加hatu(10mg，0.03mmol)，在室温下搅拌3小时。反应溶液通过制备型hplc纯化，得到标题化合物14(8.3mg，32.1％产率)。759、ms(esi)m/z:1256.3[m+h]+760、实施例15761、762、步骤1763、(叔丁氧羰基)(磺基)-d-丙氨酸(15b)764、向磺基-d-丙氨酸15a(1.2g，7.1mmol)和二碳酸二叔丁酯(1.9g，8.52mmol)于dmf(10ml)中的溶液中添加diea(1.4g,14.2mmol)，在室温下搅拌过夜。将反应溶液真空浓缩，得到呈无色油状的标题化合物15b(2.0g，粗物质)。765、ms(esi)m/z:267.7[m-h]-766、步骤2767、(r)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-氧代丙烷-1-磺酸(15c)768、向15b(100mg，0.37mmol)和14f(99mg，0.26mmol)于dmf(3ml)中的溶液中添加diea(1.5g，11.9mmol)和bop(246mg，0.56mmol)，在冰浴中搅拌0.5小时。反应溶液通过制备型hplc(水/mecn＝100/0至80/20，30min；检测波长254/220nm)纯化，得到呈淡黄色固体状的标题化合物15c(180mg，77.1％产率)。769、ms(esi)m/z:629.1[m-h]-770、步骤3771、(r)-2-氨基-3-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-氧代丙烷-1-磺酸(15d)772、向15c(210mg，0.33mmol)于dcm(3ml)中的溶液中添加tfa(1ml)，在室温下搅拌1小时，浓缩。将残余物溶解于1,4-二噁烷(2ml)中，添加naoh(67mg，1.67mmol)于水(1ml)中的溶液，在室温下搅拌1小时。用1n hcl溶液将反应溶液的ph调节为6。粗产物通过制备型hplc(水/mecn＝100/0至60/40，30分钟；检测波长：254/220nm)纯化，得到呈浅黄色固体状的标题化合物15d(160mg，91.4％产率)。773、ms(esi)m/z:531.2[m+h]+774、步骤4775、(r)-1-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-14-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酰基)-12-氧代-3,6,9-三氧杂-13-氮杂十五烷-15-磺酸(15e)776、在冰浴中向15d(180mg，0.34mmol)和14j(153mg，0.51mmol)于dmf(5ml)中的溶液中添加diea(88mg，0.68mmol)和bop(225mg，0.51mmol)，在0℃下搅拌0.5小时。反应溶液通过制备型hplc(水/mecn＝100/0至80/20，30min；检测波长254/220nm)纯化，得到呈淡黄色固体状的标题化合物15e(130mg，47.0％产率)。777、ms(esi)m/z:814.2[m+h]+778、步骤5779、(14r)-1-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-14-(((2s)-1-(((2s)-1-((4-((((3'-((乙氧羰基)氨基)-3-氧代-3h-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-6'-基)氨基甲酰基)氧基)甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酰基)-12-氧代-3,6,9-三氧杂-13-氮杂十五烷-15-磺酸(15)780、在冰浴中向13b(64mg，0.16mmol)和2,6-二甲基吡啶(51mg，0.48mmol)于dcm(10ml)中的溶液中逐份添加三光气(24mg，0.08mmol)，在室温下搅拌3小时。向其中添加15e(130mg，0.16mmol)于dcm(2ml)中的溶液，在室温下搅拌过夜。添加冰水(0.2ml)以淬灭反应。将反应溶液浓缩。残余物通过快速柱色谱(dcm/meoh＝6/1)纯化。粗产物通过制备型hplc(柱：xbridge prep obd c18柱，30*150mm；水(0.05％ tfa)/mecn＝62/38至42/58，7分钟；检测波长：254/220nm)纯化，得到呈橙色固体状的标题化合物15(6.0mg，3.0％产率)。781、ms(esi)m/z:1242.3[m+h]+782、实施例16783、784、步骤1785、(r)-2-氨基-3-甲氧基-3-氧代丙烷-1-磺酸盐酸盐(16a)786、在0℃下在30分钟内向磺基-d-丙氨酸15a(15g，88.7mmol)于meoh(500ml)中的溶液中滴加亚硫酰氯(211g，1.77mol)。将反应溶液在室温下搅拌过夜。将溶液真空浓缩，得到呈白色固体状的标题化合物16a(18g，粗物质)。787、ms(esi)m/z:184.0[m-hcl+h]+788、步骤2789、(r)-2-(((苄氧基)羰基)氨基)-3-甲氧基-3-氧代丙烷-1-磺酸(16b)790、向16a(18g，60.9mmol)于thf(75ml)中的溶液中添加碳酸氢钠(12.8g，152.2mmol)于水(25ml)中的溶液。在0℃下滴加氯甲酸苄酯(12.5g，73.0mmol)，在室温下搅拌过夜。反应溶液用etoac(300ml*3)萃取，有机相用盐水(200ml*3)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。将残余物通过快速柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)纯化，得到呈白色固体状的标题化合物16b(15g，77.6％收率)。791、ms(esi)m/z:335.2[m+nh3]+792、步骤3793、((苄氧基)羰基)(磺胺酰基)-d-丙氨酸甲酯(16c)794、在冰浴中向16b(14.0g，44.12mmol)和三苯基膦(17.4g，66.2mmol)于dcm(500ml)中的溶液中滴加亚硫酰氯(8.9g，75.0mmol)，在室温下搅拌3小时。将反应溶液浓缩。将残余物溶解于0.5m氨的thf溶液(150ml)中，在室温下搅拌过夜。将反应溶液浓缩。将残余物溶解于meoh(20ml)中，过滤。滤液通过制备型hplc(柱：xbridge prep obd c18柱，30*150mm；水(0.5％碳酸氢铵)/乙腈＝100/0至70/30，60分钟；检测波长：254/220nm)纯化，得到呈白色固体状的标题化合物16c(6.0g，43.0％产率)。795、ms(esi)m/z:318.0[m+h]+796、步骤4797、((苄氧基)羰基)(磺胺酰基)-d-丙氨酸(16d)798、将中间物16c(6.0g，19.0mmol)和三甲基氢氧化锡(13.7g，75.9mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(50ml)中，在80℃下搅拌3小时。将反应溶液过滤并通过制备型hplc(柱：xbridgeprep obd c18柱，30*150mm；水(0.5％碳酸氢铵)/乙腈＝100/0至80/20，60分钟；检测波长：254/220nm)纯化，得到呈淡黄色固体状的标题化合物16d(1.8g，31.3％产率)。799、ms(esi)m/z:325.0[m+na]+800、步骤5801、((r)-1-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-1-氧代-3-磺胺酰基丙-2-基)氨基甲酸苄酯(16e)802、向16d(1.8g，5.9mmol)和14f(2.3g，5.9mmol)于dmf(20ml)中的溶液中添加diea(1.5g，11.9mmol)和hatu(2.7g，7.2mmol)，在室温下搅拌3小时。反应溶液通过制备型hplc(柱：xbridge prep obd c18柱，30*150mm；水(0.5％碳酸氢铵)/乙腈＝100/0至20/80，60分钟；检测波长：254/220nm)纯化，得到呈淡黄色固体状的标题化合物16e(500mg，12.8％产率)。803、ms(esi)m/z:664.3[m+h]+804、步骤6805、(s)-2-((s)-2-((r)-2-氨基-3-磺胺酰基丙酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-n-(4-(羟甲基)苯基)-5-脲基戊酰胺(16f)806、将中间物16e(400.0mg，0.6mmol)溶解于tfa(5ml)中，在50℃下搅拌6小时，浓缩。将残余物溶解于1,4-二噁烷(5ml)中，向其中添加氢氧化锂(72.2mg，3.0mmol)于水(2.5ml)中的溶液，在室温下搅拌1小时。将反应物浓缩并通过制备型hplc(柱：xbridge prep obdc18柱，30*150mm；水(10m碳酸氢铵)/乙腈＝80/20至50/50，8分钟；检测波长：254/220nm)纯化，得到呈白色固体状的标题化合物16f(150mg，47.2％产率)。807、ms(esi)m/z:530.3[m+h]+808、步骤7809、(s)-2-((14r,17s)-1-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-17-异丙基-12,15-二氧代-14-(磺胺酰基甲基)-3,6,9-三氧杂-13,16-二氮杂十八-18-酰胺基)-n-(4-(羟甲基)苯基)-5-脲基戊酰胺(16g)810、向16f(150mg，0.28mmol)和14j(93.9mg，0.31mmol)于dmf(5ml)中的溶液中添加diea(73.2mg，0.57mmol)和hatu(129.2mg，0.34mmol)，在室温下搅拌2小时。反应溶液通过制备型hplc(柱：xselect csh obd柱30*150mm，5μm；水(0.1％ fa)/乙腈＝95/5至68/32，10分钟；检测波长：254/220nm)纯化，得到呈白色固体状的标题化合物16g(110mg，48.3％产率)。811、ms(esi)m/z:813.4[m+h]+812、步骤8813、(3-氧代-3h-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-3',6'-二基)二氨基甲酸4-((2s,5s,8r)-21-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-5-异丙基-4,7,10-三氧代-8-(磺胺酰基甲基)-2-(3-脲基丙基)-13,16,19-三氧杂-3,6,9-三氮杂二十一烷酰胺基)苄酯乙酯(16)814、在冰浴中向13b(65.3mg，0.16mmol)和2,6-二甲基吡啶(52.2mg，0.49mmol)于dcm(20ml)中的溶液中逐份添加三光气(24.1mg，0.08mmol)，在室温下搅拌4小时。向所述溶液中添加16g(110.0mg，0.14mmol)，在室温下搅拌过夜。添加水(0.2ml)以淬灭反应物，浓缩。残余物通过快速柱色谱(dcm/meoh＝5/1)纯化。粗产物通过制备型hplc(柱：xbridge prepobd c18柱，19*250mm，5μm；水(0.1％fa)/乙腈＝80/20至50/50，8分钟；检测波长：254/220nm)纯化，得到呈淡粉色固体状的标题化合物16(5.9mg，3.4％产率)。815、ms(esi)m/z:1241.3[m+h]+816、实施例17817、818、步骤1819、(r)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(二乙氧基磷酰基)丙酸甲酯(17c)820、将(r)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-碘丙酸甲酯17a(10g，30.38mmol，市售)与亚磷酸三乙酯(100ml，601.84mmol)混合，在140℃下搅拌过夜。将反应溶液浓缩，并通过快速柱色谱(石油醚/乙酸乙酯，梯度洗脱)纯化，得到标题化合物17c(7.5g，72.8％产率)。821、ms(esi)m/z:340.3[m+h]+822、步骤2823、(r)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(二乙氧基磷酰基)丙酸(17d)824、向17c(7.5g，22.1mmol)于thf(40ml)和水(20ml)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(2.1g，88.53mmol)，在室温下搅拌过夜。用1m hcl将反应溶液的ph调节至6，浓缩并通过反相柱色谱(柱：c18；水(0.1％ fa)/乙腈，梯度洗脱，流速：20ml/min)纯化。将所需洗脱份冻干，得到标题化合物17d(2.8g，38.9％产率)。825、ms(esi)m/z:326.1[m+h]+826、步骤3827、((r)-3-(二乙氧基磷酰基)-1-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(17e)828、向17d(2.8g，8.61mmol)于dmf(40ml)中的溶液中添加hatu(3.9g，10.33mmol)和diea(2.2g，17.22mmol)，在室温下搅拌10分钟。向所述溶液中添加14f(3.6g，9.47mmol，市售)，在室温下搅拌2小时。反应溶液通过反相柱色谱(柱：c18；水(0.5％碳酸氢铵)/乙腈，梯度洗脱，流速：20ml/min)纯化。将所需洗脱份冻干，得到标题化合物17e(4.5g，76.1％产率)。829、ms(esi)m/z:686.3[m+h]+830、步骤4831、((r)-2-氨基-3-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-氧代丙基)膦酸二乙酯(17f)832、向17e(4.5g，6.55mmol)于dcm(20ml)中的溶液中添加tfa(10ml)，在室温下搅拌1小时。将反应溶液浓缩并溶解于1,4-二噁烷(30ml)和水(10ml)中。在冰浴中向其中添加氢氧化锂一水合物(1.4g，32.65mmol)，在室温下搅拌2小时。反应溶液通过反相柱色谱(柱：c18；水(0.5％碳酸氢铵)/乙腈，梯度洗脱，流速：20ml/min)纯化。将所需洗脱份冻干，得到标题化合物17f(3.3g，85.9％产率)。833、ms(esi)m/z:587.8[m+h]+834、步骤5835、((r)-2-氨基-3-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-氧代丙基)膦酸(17g)836、向17f(3.0g，5.11mmol)于n-甲基-2-吡咯烷酮(15ml)中的溶液中添加溴化钠(2.2g，21.48mmol)，在冰浴中滴加三氟甲磺酸三甲基硅烷酯(9.1g，40.91mmol)，在60℃下搅拌过夜。反应溶液通过反相柱色谱(柱：c18；水(0.05％ tfa)/乙腈，梯度洗脱，流速：20ml/min)纯化。将所需洗脱份冻干，得到标题化合物17g(1.5g，55.3％产率)。837、ms(esi)m/z:531.3[m+h]+838、步骤6839、((r)-1-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-14-(((s)-1-(((s)-1-((4-(羟甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酰基)-12-氧代-3,6,9-三氧杂-13-氮杂十五-15-基)膦酸(17i)840、在冰浴中向17h(500mg，0.94mmol)和17g(413mg，1.04mmol，市售)于dmf(10ml)中的溶液中添加diea(365mg，2.83mmol)，在室温下搅拌3小时。反应溶液通过反相柱色谱(柱：c18；水(0.05％tfa)/乙腈，梯度洗脱，流速：20ml/min)纯化。将所需洗脱份冻干，得到标题化合物17i(200mg，26.1％产率)。841、ms(esi)m/z:814.2[m+h]+842、步骤7843、((14r)-1-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-14-(((2s)-1-(((2s)-1-((4-((((3'-((乙氧羰基)氨基)-3-氧代-3h-螺[异苯并呋喃-1,9'-呫吨]-6'-基)氨基甲酰基)氧基)甲基)苯基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酰基)-12-氧代-3,6,9-三氧杂-13-氮杂十五-15-基)膦酸(17)844、向13b(119mg，0.30mmol)于dcm(6ml)中的溶液中添加2,6-二甲基吡啶(95mg，0.89mmol)，在冰浴中滴加三光气(44mg，0.15mmol)，在室温下搅拌4小时。将17i(200mg,0.25mmol)于n-甲基-2-吡咯烷酮中的溶液滴加至冰浴中的反应溶液中，在室温下搅拌过夜。反应溶液通过快速柱色谱(dcm/meoh，梯度洗脱)纯化。粗产物通过制备型hplc(柱：sunfire prep c18 obd 5μm 19*250mm；流动相：水(0.05％ tfa)/乙腈，梯度洗脱；流速：20ml/min)纯化。将所需洗脱份冻干，得到标题化合物17(10mg，3.2％产率)。845、ms(esi)m/z:1242.5[m+h]+846、实施例18847、848、步骤1849、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-l-谷氨酸苄酯(18b)850、在0℃下向n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-((3ar,6r,6ar)-6-(羟甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)-l-谷氨酸苄酯18a(100mg，0.16mmol，可从wuxi apptec获得)于t hf(0.5ml)中的溶液中添加水(1ml)和tfa(1ml)，在室温下搅拌2小时。添加甲苯(3ml)，真空浓缩，得到标题化合物18b(95m g，粗物质，100％产率)，其未经进一步纯化即直接使用。851、ms(esi)m/z:591.5[m+h]+852、步骤2853、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-l-谷氨酰胺(18)854、在氮气气氛下向18b(94mg，0.16mmol，粗物质)于甲醇(2ml)中的溶液中添加10％pd/c(17mg)。将混合物在氢气气氛(氢气球)下在室温下搅拌1.5小时。将溶液通过硅藻土过滤并浓缩，得到标题化合物18(80mg，100％产率)855、ms(esi)m/z:499.2[m-h]-856、实施例19857、858、步骤1859、(((3ar,4r,6r,6ar)-6-叠氮基-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲氧基)(叔丁基)二甲基硅烷(19a)860、将tbscl(770.4mg，5.11mmol)和咪唑(632.7mg，9.29mmol)添加至1a(1.00g，4.65mmol)于dcm(10ml)中的混合物中。使混合物在室温下反应过夜并通过tlc进行监测。反应物用50ml饱和nahco3淬灭并用dcm(50ml*2)萃取。分离后，将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将滤液真空浓缩，得到残余物。将其通过硅胶柱色谱(a-石油醚；b-etoac)纯化，得到19a(1.40g，91％产率)861、步骤2862、(3ar,4r,6r,6ar)-6-(((叔丁基二甲基硅烷基)氧基)甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-胺(19b)863、将湿pd/c(150mg，10％纯度)添加至19a(1.40g，4.25mmol)于meoh(20ml)中的混合物中。将反应混合物用h2气球吹扫三次，并在室温下在h2气球下反应1小时。反应完成后，将混合物通过硅藻土滤出并用meoh洗涤。真空浓缩滤液并通过硅胶柱色谱(a-dcm；b-meoh)纯化，得到19b(740.0mg，57.3％产率)。864、ms(esi)m/z:326.4[m+na+]865、步骤3866、(3as,6r,6ar)-6-((s)-4-(((苄氧基)羰基)氨基)-5-甲氧基-5-氧代戊酰胺基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-甲酸(19c)867、向1(255.0mg，0.531mmol)于吡啶(1ml)中的混合物中添加edci(101.7mg，0.531mmol)。使所得黄色混合物在室温下反应10分钟。添加19b(162.7mg，0.54mmol)并在相同温度下再反应4小时并通过lcms进行监测。将混合物真空浓缩以去除大部分吡啶，接着用dmf(1ml)稀释并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到19c(112.0mg，27％产率)。868、ms(esi)m/z:766.6[m+h]+869、步骤4870、n2-((苄氧基)羰基)-n5-((3ar,6s,6as)-6-(((3ar,6r,6ar)-6-(羟甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)氨基甲酰基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)-l-谷氨酸甲酯(19d)871、向19c(112.0mg，0.15mmol)于thf(2ml)中的混合物中添加tbaf(1m于thf中，161ul，0.161mmol)。使混合物在室温下反应0.5小时。混合完成后，用10ml饱和nahco3淬灭反应物，并用etoac(10ml*2)萃取。分离后，将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将滤液真空浓缩，得到19d(95mg，粗物质)。872、ms(esi)m/z:674.5[m+na+]873、步骤5874、n2-((苄氧基)羰基)-n5-((2r,3r,5s)-5-(((2r,3r,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-l-谷氨酸甲酯(19e)875、将19d(112mg，粗物质)与tfa/h2o(4:1，1ml)的混合物在室温下反应0.5小时，并通过lcms进行监测。将混合物真空浓缩，得到19e(83.0mg，粗物质)。876、ms(esi)m/z:594.4[m+na+]877、步骤6878、n2-((苄氧基)羰基)-n5-((3r,4s,5s)-5-(((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-l-谷氨酰胺(19)879、向19e(83.0mg，粗物质)于meoh(1ml)中的混合物中添加氢氧化锂水溶液(1n，0.3ml)。使混合物在室温下反应0.5小时。将混合物酸化至ph＝6，过滤并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化滤液，得到19(55mg，67.9％产率)。880、ms(esi)m/z:580.4[m+na+]881、实施例20882、883、步骤1884、(((3ar,4r,6s,6as)-6-(2-氨基-2-氧代乙基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)氨基甲酸苄酯(20a)885、向8b(2.0g，5.47mmol)于dmf(20ml)中的悬浮液中添加pybop(3.42g，6.57mmol)、hobt(887.60mg，6.57mmol)和dipea(2.12g,16.42mmol)。使所得棕色悬浮液在50℃下反应过夜。混合物用水(20ml)淬灭，用etoac(30ml*3)萃取。分离后，将合并的有机物用盐水(30ml*3)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将滤液真空浓缩，得到残余物。将其通过硅胶柱色谱(a-dcm；b-meoh)纯化，得到20a(4.3g，粗物质)。886、ms(esi)m/z:365.4[m+h]+887、步骤2888、2-((3as,4s,6r,6ar)-6-(氨基甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)乙酰胺(20b)889、根据实施例19步骤2的合成程序合成化合物20b(1.9g，粗物质)。890、ms(esi)m/z:231.4[m+h]+891、步骤3892、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((3ar,4r,6s,6as)-6-(2-氨基-2-氧代乙基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)-l-谷氨酸苄酯(20d)893、向20b(900.0mg，粗物质)和20c[(1.74g，3.13mmol)；市售]于thf(20ml)中的混合物中添加饱和nahco3(5ml)。使混合物在室温下反应1小时。反应完成后，混合物用水(20ml)稀释，用etoac(20ml*2)萃取。将合并的有机物用盐水(30ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将滤液真空浓缩，得到20d(2.1g，粗物质)。894、ms(esi)m/z:672.6[m+h]+895、步骤4896、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((3ar,4r,6s,6as)-6-(2-氨基-2-氧代乙基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)-l-谷氨酰胺(20e)897、根据实施例19步骤2的合成程序合成化合物20e(1.87g，粗物质)。898、ms(esi)m/z:582.5[m+h]+899、步骤5900、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-l-谷氨酰胺(20)901、根据实施例19步骤5的合成程序合成化合物20(630.0g，42.5％产率)。902、ms(esi)m/z:542.5[m+h]+903、实施例21904、905、906、步骤1907、2-((3as,4s,6r,6ar)-6-(氨基甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)乙酸(21a)908、根据实施例19步骤2的合成程序合成化合物21a(480mg，75％产率)。909、ms(esi)m/z:232.4[m+h]+910、步骤2911、2-((3as,4s,6r,6ar)-6-(((s)-4-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(苄氧基)-5-氧代戊酰胺基)甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)乙酸(21b)912、根据实施例20步骤3的合成程序合成化合物21b(1.5g，粗物质)。913、ms(esi)m/z 673.4[m+h]+914、步骤3915、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((3ar,4r,6s,6as)-6-(2-((((3a r,4r,6s,6as)-6-(2-氨基-2-氧代乙基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)-l-谷氨酸苄酯(21c)916、向21b(410mg，0.609mmol)于dmf(6ml)中的混合物中添加hatu(231.73mg，0.609mmol)和dipea(236.3mg，1.828mmol)。使所得黄色混合物在室温下反应10分钟，接着添加20b(168.4mg，0.731mmol)。使混合物在室温下再反应1小时。反应完成后，混合物用20ml水淬灭，用etoac(30ml*2)萃取。分离后，将合并的有机层用盐水(30ml*3)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将滤液真空浓缩，得到残余物。将其通过c18柱快速色谱[流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈]纯化，得到21c(430.0mg，66.7％产率)。917、ms(esi)m/z:885.4[m+h]+918、步骤4919、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((3ar,4r,6s,6as)-6-(2-((((3a r,4r,6s,6as)-6-(2-氨基-2-氧代乙基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)-l-谷氨酰胺(21d)920、根据实施例19步骤2的合成程序合成化合物21d(377.5g，粗物质)。921、ms(esi)m/z:795.4[m+h]+922、步骤5923、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-((((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-l-谷氨酰胺(21)924、根据实施例19步骤5的合成程序合成化合物21(181.0mg，53.1％产率)。925、ms(esi)m/z:715.5[m+h]+926、实施例22927、928、步骤1929、(r)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-甲酸(22b)930、将22a(2g，12.49mmol)溶解于thf和h2o的混合溶剂(v/v＝1:1，40ml)中，然后添加lioh(449mg，18.73mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。反应完成后，用ea(30ml)萃取反应混合物。用hcl水溶液(1m)将剩余水层酸化至ph＝3并用ea(30ml*3)进一步萃取。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈透明油状的22b(1.51g，82.8％产率)，其未经纯化即直接用于下一步。931、1h nmr:δ11.15(br s,1h),4.63(dd,j＝7.6,4.8hz,1h),4.30(dd,j＝8.8,7.6hz,1h),4.19(dd,j＝8.8,4.8hz,1h),1.53(s,3h),1.42(s,3h)。932、步骤2933、(r)-2,2-二甲基-1,3-二氧戊环-4-甲酸苄酯(22c)934、将22b(3g，20.53mmol)溶解于dmf(21ml)中，然后添加bnbr(5.27g，30.79mmol)和k2co3(4.26g，30.79mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。反应完成后，将反应混合物用h2o(30ml)稀释并用ea(40ml*3)萃取。合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物形式的棕色油，其通过快速柱(pe/ea＝100/0至80/20)纯化，得到呈透明油状的22c(2.52g，52.0％产率)。935、1h nmr:δ7.38-7.31(m,5h),5.21(m,2h),4.62(dd,j＝7.2,5.2hz,1h),4.30(dd,j＝8.8,7.2hz,1h),4.19(dd,j＝8.8,5.2hz,1h),1.49(s,3h),1.40(s,3h)。936、步骤3937、(r)-2,3-二羟基丙酸苄酯(22d)938、将22c(1g,4.23mmol)溶解于dcm(13ml)中，然后在0℃下添加tfa和h2o的混合溶剂(v/v＝9:1，13ml)。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。反应完成后，将反应混合物减压浓缩并通过快速柱(pe/ea＝95/5至20/80)纯化，得到呈无色油状的22d(557mg，67.1％产率)。939、1h nmr:δ7.40-7.31(m,5h),5.25(d,j＝2.8hz,2h),4.31(t,j＝3.6hz,1h),3.93-3.85(m,2h),2.89(br s,2h)。940、步骤4941、(r)-3-((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)-2-羟基丙酸苄酯(22e)942、将22d(557mg，2.84mmol)溶解于无水dmf(8ml)中，然后添加咪唑(290mg，4.26mmol)和tbdpscl(858mg，3.12mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌4小时。反应完成后，将反应混合物用ea(50ml)稀释并用盐水(25ml*2)和水(25ml*3)洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物形式的黄色油，其通过快速柱(pe/ea＝100/0至75/25)纯化，得到呈透明油状的22e(705mg，57.1％产率)。943、ms(esi)m/z:457.6[m+na]+944、步骤5945、乙酸(s)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2-氧杂-4,7,10,13,16五氮杂十七-17-基酯(22g)946、将22f(市售，5g，8.12mmol)溶解于无水dmf(26ml)中，然后依次添加cu(oac)2(561mg，3.09mmol)、pb(oac)4(4.11g，9.26mmol)和hoac(1.11g，18.44mmol)。将所得混合物在n2气氛下在60℃下搅拌70分钟。反应完成后，将反应混合物用dcm(160ml)稀释并用盐水(40ml*3)和h2o(40ml*2)洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物形式的棕色油，其通过快速柱(dcm/meoh＝100/0至90/10)纯化，得到呈白色固体状的22g(4.19g，81.8％产率)。947、ms(esi)m/z:652.5[m+na]+948、步骤6949、(11s,19r)-11-苄基-19-(((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十-20-酸苄酯(22h)950、将22g(150mg，0.24mmol)、22e(207mg，0.48mmol)和分子筛(200mg)添加至无水thf(3ml)中。将所得混合物在25℃下搅拌30分钟，随后添加sc(otf)3(117mg，0.24mmol)。将混合物在25℃下进一步搅拌16小时。反应完成后，将反应混合物过滤，减压浓缩，得到粗产物形式的黄色油，其通过快速柱(dcm/meoh＝100/0至90/10)纯化，得到呈白色固体状的22h(174mg，72.6％产率)。951、ms(esi)m/z:1026.5[m+na]+952、步骤7953、(11s,19r)-11-苄基-19-(((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十-20-酸(22i)954、将22h(150mg，0.15mmol)溶解于thf(2.5ml)和h2o(2.5ml)的混合溶剂中，然后添加pd/c(湿式，10％，45mg)。将混合物在25℃下在h2(15psi)下搅拌4小时。反应完成后，将混合物过滤并减压浓缩，得到呈白色固体状的22i(136mg，定量)，其未经纯化即直接用于下一步。955、ms(esi)m/z:936.6[m+na]+956、步骤8957、((6r,14s)-14-苄基-6-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)-2,2-二甲基-10,13,16,19-四氧代-3,3-二苯基-4,7-二氧杂-9,12,15,18-四氮杂-3-硅二十烷-20-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(22k)958、将22i(85mg，0.09mmol)、hatu(42mg，0.11mmol)和diea(36mg，0.28mmol)溶解于dmf(2ml)中。将混合物在25℃下搅拌15分钟，随后添加甲磺酸依沙替康(22j，市售，59mg，0.11mmol)。将混合物在25℃下继续搅拌30分钟。反应完成后，将混合物过滤并通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到呈淡黄色固体状的22k(80mg，64.6％产率)。959、ms(esi)m/z:1355.0[m+na]+960、步骤9961、(r)-2-(((s)-13-氨基-7-苄基-3,6,9,12-四氧代-2,5,8,11-tetraazatridecyl)氧基)-n-((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)-3-羟基丙酰胺(22l)962、将22k(78mg，0.06mmol)溶解于无水thf(6ml)中，然后添加tbaf(1m thf溶液，70μl,0.07mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，并添加et2nh(60μl，0.58mmol)。将混合物在25℃下进一步搅拌1小时。反应完成后，反应混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridgeprep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到呈白色固体状的22l(26mg，51.0％产率)。963、ms(esi)m/z:871.6[m+h]+964、步骤10965、n-((2r,10s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-(羟甲基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺(22)966、将22l(24mg，0.028mmol)和22m(9.4mg，0.030mmol)溶解于dmf(0.5ml)中，然后添加tea(2.5mg，0.025mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌30分钟。反应完成后，反应混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到呈白色固体状的22(16.5mg，51.2％产率)。967、ms(esi)m/z:1064.7[m+h]+968、实施例23969、970、根据实施例22的合成程序合成化合物23。971、ms(esi)m/z:1064.7[m+h]+972、实施例24973、974、975、步骤1976、(s)-3-((11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2-氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂十七-17-基)氧基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸甲酯(24b)977、向22g(50mg，0.08mmol)、3-羟基双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸甲酯24a(23mg，0.16mmol)和干燥分子筛(140mg)于无水thf(1ml)中的混合物中添加三氟甲磺酸钪(47mg,0.1mmol)，在室温下搅拌过夜。将溶液通过硅藻土过滤，浓缩并通过快速柱色谱(dcm/meoh＝10/1)纯化，得到呈白色固体状的标题化合物24b(41mg，72.5％产率)。978、ms(esi)m/z:734.5[m+na]+979、步骤2980、(s)-3-((13-氨基-7-苄基-3,6,9,12-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三基)氧基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(24c)981、向24b(41mg，0.06mmol)于甲醇(1ml)和水(0.2ml)中的溶液中添加碳酸钾(83mg，0.6mmol)，在室温下搅拌2小时。用己烷(2ml*3)萃取反应溶液，并用2n hcl将水相的ph调节为6。将水溶液浓缩并冻干，得到标题化合物24c(230mg，粗物质)，其未经进一步纯化即直接使用。982、ms(esi)m/z:474.3[m-h]-983、步骤3984、(s)-3-((7-苄基-20-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,5,8,11,14-五氮杂二十基)氧基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(24d)985、向24c(230mg，粗物质，理论量27mg，0.06mmol)和2j(35mg，0.11mmol)于无水dmf(1ml)中的溶液中添加diea(47μl，0.28mmol)，在室温下搅拌15分钟。添加acoh(40μl)以淬灭反应物。所述溶液通过制备型hplc(含0.1％ fa的水/mecn)纯化，冻干，得到呈白色固体状的标题化合物24d(24mg，63.0％产率)。986、ms(esi)m/z:667.4[m-h]-987、步骤4988、3-(((s)-7-苄基-20-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,5,8,11,14-五氮杂二十基)氧基)-n-((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酰胺(24)989、向24d(24mg，35.9μmol)和nhs(6.2mg，53.8μmol)于无水dmf(0.3ml)中的溶液中添加dcc(11mg，53.8μmol)，在室温下搅拌过夜。将反应溶液缓慢添加至甲磺酸依沙替康(23mg，43.1μmol)和diea(8μl，43.1μmol)于无水dmf(0.3ml)中的溶液中，在室温下搅拌过夜。将反应溶液过滤并通过制备型hplc(含0.1％ fa的水/mecn)纯化，冻干，得到呈白色固体状的标题化合物24(2.6mg，10.7％产率)。990、ms(esi)m/z:1086.9[m+h]+991、实施例25992、993、步骤1994、(1r,3s)-3-(((s)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2-氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂十七-17-基)氧基)环丁烷-1-甲酸苄酯(25c)995、向25a(100mg，0.159mmol)和25b(31.76mg，0.318mmol)于thf(1.5ml)中的溶液中添加4a分子筛。将混合物在室温下搅拌10分钟，接着添加sc(otf)3(78.16mg，0.159mmol)，并在室温下再反应16小时。将悬浮混合物经由硅藻土垫过滤并用thf(30ml)洗涤滤饼，接着通过添加饱和nahco3(30ml)淬灭滤液，用etoac(30ml*2)萃取。分离后，将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将滤液真空浓缩，得到残余物。将其通过硅胶柱色谱(a-dcm；b-meoh)纯化，得到25c(115mg，93.3％产率)。996、ms(esi)m/z:798.5[m+na+]997、步骤2998、(1r,3s)-3-(((s)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2-氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂十七-17-基)氧基)环丁烷-1-甲酸(25d)999、向25c(115mg，0.183mmol)于meoh(2ml)中的溶液中添加湿pd/c(25mg)。将黑色悬浮液用h2气球吹扫三次，接着在h2气球下在室温下反应2小时。反应完成后，将黑色悬浮液经由硅藻土垫滤出并用meoh洗涤滤饼，将合并的有机层真空浓缩，得到25d(90mg，63.5％产率)。1000、ms(esi)m/z:708.5[m+na+]1001、步骤31002、((s)-7-苄基-1-((1r,3r)-3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)环丁氧基)-3,6,9,12-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三-13-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(25e)1003、向25d(80mg，0.117mmol)和tstu(35.15mg，0.117mmol)于dmf(2ml)中的混合物中添加dipea(30.18mg，0.233mmol)。使混合物在室温下反应10分钟，并且根据lcms，酸转化为活性酯。添加10a(68.1mg，0.128mmol)并在相同温度下再反应5小时。过滤反应混合物，且滤液使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到25e(55mg，42.6％产率)。1004、ms(esi)m/z:1125.7[m+na+]1005、步骤41006、(1r,3r)-3-(((s)-13-氨基-7-苄基-3,6,9,12-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三基)氧基)-n-((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)环丁烷-1-甲酰胺(25f)1007、向25e(55mg，0.050mmol)于dmf(1ml)中的溶液中添加哌啶(85.15mg，1.0mmol)。使混合物在室温下反应10分钟。过滤反应混合物，且滤液使用制备型hplc(方法：柱：xbridgeprep c18 obd 5um19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到25f(35mg，80％产率)。1008、ms(esi)m/z:903.7[m+na+]1009、步骤51010、(1r,3r)-3-(((s)-7-苄基-20-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,5,8,11,14-五氮杂二十基)氧基)-n-((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)环丁烷-1-甲酰胺(25)1011、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物25(12.5mg，68.2％产率)。1012、实施例261013、1014、步骤11015、(1s,3r)-3-(((s)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2-氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂十七-17-基)氧基)环丁烷-1-甲酸甲酯(26b)1016、根据实施例25步骤1的合成程序合成化合物26b(105mg，94.5％产率)。1017、ms(esi)m/z:722.5[m+na+]1018、步骤21019、(1s,3r)-3-(((s)-13-氨基-7-苄基-3,6,9,12-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三基)氧基)环丁烯1-甲酸(26c)1020、向26b(105mg，0.15mmol)于meoh(1ml)和h2o(0.2ml)中的溶液中添加k2co3(414.76mg，3.0mmol)。使所得白色悬浮液在室温下反应3小时。将白色悬浮液用1n hcl酸化至ph＝6，并将混合物冷冻干燥，得到26c(485mg，粗物质)。1021、ms(esi)m/z:486.4[m+na+]1022、步骤31023、(1s,3r)-3-(((s)-7-苄基-20-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,5,8,11,14-五氮杂二十基)氧基)环丁烷-1-甲酸(26d)1024、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物26d(23mg，24％产率)。1025、ms(esi)m/z:655.4[m-h]-1026、步骤41027、(1s,3s)-3-(((s)-7-苄基-20-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,5,8,11,14-五氮杂二十基)氧基)-n-((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)环丁烷-1-甲酰胺(26)1028、根据实施例25步骤3的合成程序合成化合物26(20.5mg，54.5％产率)。1029、ms(esi)m/z:1074.9[m+h]+1030、实施例271031、1032、步骤11033、乙酸(5s,8s)-1-(9h-芴-9-基)-5-异丙基-3,6,9-三氧代-8-(3-脲基丙基)-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十一-11-基酯(27b)1034、根据实施例22步骤5的合成程序合成27b(585mg，51.8％产率)。1035、ms(esi)m/z:590.6[m+h]+1036、步骤21037、(5s,8s)-1-(9h-芴-9-基)-5-异丙基-3,6,9-三氧代-8-(3-脲基丙基)-2,12-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四-14-酸苄酯(27d)1038、向27b(90mg，0.16mmol)和2-羟基乙酸苄酯(132mg，0.79mmol)于无水thf(5ml)中的溶液中添加干燥分子筛(600mg)，在室温下搅拌30分钟。向溶液中添加三氟甲磺酸钪(94mg，0.19mmol)，在室温下搅拌6小时。将溶液通过硅藻土过滤，浓缩并通过快速柱色谱(dcm/meoh＝10/1)纯化，得到呈白色固体状的27d(82mg，76.1％产率)。1039、ms(esi)m/z:696.7[m+na]+1040、步骤31041、(5s,8s)-1-(9h-芴-9-基)-5-异丙基-3,6,9-三氧代-8-(3-脲基丙基)-2,12-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四-14-酸(27e)1042、向27d(151mg，0.22mmol)于meoh(3ml)中的溶液中添加10％pd/c(35mg)并将悬浮液用h2气球吹扫三次，接着在h2压力下在室温下搅拌90分钟。反应完成后，滤出pd/c并减压去除甲醇，得到27e(125mg，96％产率)。1043、ms(esi)m/z:606.4[m+na]+1044、步骤41045、(s)-2-((s)-2-氨基-3-甲基丁酰胺基)-n-((2-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)-5-脲基戊酰胺(27f)1046、向27e(50mg，0.086mmol)和tstu(25.85mg，0.086mmol)于dmf(2ml)中的混合物中添加dipea(33.216mg，0.257mmol)。使混合物在室温下反应10分钟，并且根据lcms，酸转化为活性酯。添加10a(45.67mg，0.086mmol)并在相同温度下再反应5小时。反应完成后，添加哌啶(72.30mg，0.849mmol)并将混合物在室温下再放置10分钟。过滤混合物并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化滤液，得到27f(43mg，65.0％产率)。1047、ms(esi)m/z:779.6[m+h]+1048、步骤51049、(3s,4r,5r)-5-((7s,10s,13s)-13-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-10-异丙基-1,6,9,12-四氧代-7-(3-脲基丙基)-3-氧杂-5,8,11-三氮杂十六-16-酰胺基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-甲酸甲酯(27g)1050、将hatu(30.21mg，0.079mmol)和dipea(30.80mg，0.238mmol)添加至5(42mg，0.079mmol)于dmf(2ml)中的溶液中。使反应混合物在室温下反应10分钟。接着添加27f(30.94mg，0.040mmol)，在同一温度下再放置1小时。过滤混合物，且滤液使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到27g(21mg，41％产率)。1051、ms(esi)m/z:1311.8[m+na]+1052、步骤61053、(3s,4r,5r)-5-((7s,10s,13s)-13-氨基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-10-异丙基-1,6,9,12-四氧代-7-(3-脲基丙基)-3-氧杂-5,8,11-三氮杂十六-16-酰胺基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-甲酸(27h)1054、向27g(21.0mg，0.016mmol)于thf(2ml)中的溶液中添加氢氧化锂水溶液(1n，0.977ml，0.977mmol)。在室温下搅拌混合物2小时。反应完成后，用1n hcl将混合物酸化至ph＝6，过滤并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化滤液，得到27h(11.1mg，64.7％产率)。1055、ms(esi)m/z:1053.7[m+h]+1056、步骤71057、(3s,4r,5r)-5-((7s,10s,13s)-13-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-10-异丙基-1,6,9,12-四氧代-7-(3-脲基丙基)-3-氧杂-5,8,11-三氮杂十六-16-酰胺基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-甲酸(27)1058、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物27(5.7mg，48％产率)。1059、实施例281060、1061、1062、步骤11063、乙酸(s)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2-氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂十七-17-基酯(28b)1064、向28a(3.0g，4.873mmol)于dmf(26ml)中的溶液中添加催化cu(oac)2(336.33mmol)、pb(oac)4(2.46g，5.55mmol)和hoac(632.62ul，11.062mmol)。将所得蓝色混合物用n2吹扫三次，并在60℃下搅拌70分钟。反应完成后，将混合物冷却至室温并用水(100ml)淬灭，用etoac(100ml*3)萃取。分离后，将合并的有机层用盐水(150ml*3)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将滤液真空浓缩，得到残余物。用含10％甲醇的二氯甲烷作为洗脱剂，通过硅胶柱快速色谱纯化，得到28b(3.0g，97.8％产率)1065、ms(esi)m/z:652.5[m+na]+1066、步骤21067、(s)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十-20-酸苄酯(28d)1068、根据实施例25步骤1的合成程序合成化合物28c(995mg，77.4％产率)。1069、ms(esi)m/z:758.5[m+na+]1070、步骤31071、(s)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十-20-酸(28e)1072、向(995mg,1.352mmol)于meoh(5ml)中的溶液中添加10％pd/c(100mg)并将悬浮液用h2气球吹扫三次，接着在h2压力下在室温下搅拌90分钟。反应完成后，滤出pd/c并减压去除甲醇，得到28e(770mg，88.2％产率)。1073、ms(esi)m/z:668.5[m+na]+1074、步骤41075、((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(28f)1076、将hatu(453.447mg，1.193mmol)和dipea(462.38mg，3.578mmol)添加至28e(770mg，1.193mmol)于dmf(10ml)中的溶液中。使反应混合物在室温下反应10分钟。接着添加10a(639.3mg，1.204mmol)，在同一温度下再放置1小时。将混合物用etoac(50ml)稀释，用盐水(30ml*3)洗涤。有机层经na2so4干燥，过滤，并将滤液真空浓缩，得到28f(1.27g，粗物质)1077、ms(esi)m/z:1085.7[m+na]+1078、步骤51079、(s)-2-(2-(2-氨基乙酰胺基)乙酰胺基)-n-(2-(((2-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-3-苯基丙酰胺(28)1080、向28f(1.27g粗物质)于thf(20ml)中的混合物中添加et2n(1.74g，23.855mmol)。使混合物在室温下反应2小时。反应完成后，过滤反应混合物，且滤液通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到28(296mg，29.5％产率)。1081、ms(esi)m/z:841.6[m+h]+1082、实施例291083、1084、步骤11085、2-((3as,4s,6r,6ar)-6-(氨基甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)乙酸(29b)1086、将29a(购自wuxi apptec，450mg，1.23mmol)溶解于thf(9ml)和meoh(9ml)中，然后添加pd/c(湿式，10％，110mg)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。反应完成后，将反应混合物减压浓缩，得到呈透明油状的29b(284mg，定量)，其未经纯化即直接用于下一步。1087、ms(esi)m/z:230.2[m-h]-1088、步骤21089、2-((3as,4s,6r,6ar)-6-(((s)-4-(((苄氧基)羰基)氨基)-5-(叔丁氧基)-5-氧代戊酰胺基)甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)乙酸(29d)1090、根据实施例1步骤2的合成方法由29b和29c(市售)合成29d(520mg，76.8％产率)。1091、ms(esi)m/z:573.5[m+na]+1092、步骤31093、n5-(((3ar,4r,6s,6as)-6-(2-(苄氧基)-2-氧代乙基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)-n2-((苄氧基)羰基)-l-谷氨酸叔丁酯(29e)1094、根据实施例22步骤3的合成程序合成29e(573mg，80.5％产率)。1095、ms(esi)m/z:663.5[m+na]+1096、步骤41097、n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-(苄氧基)-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n2-((苄氧基)羰基)-l-谷氨酰胺(29f)1098、将29e(150mg,0.23mmol)溶解于dcm(2ml)中，然后在0℃下添加tfa/h2o混合溶剂(v/v＝9:1，2ml)。首先将混合物在0℃下搅拌1.5小时，且接着在20℃下进一步搅拌1小时。反应完全后，将反应混合物减压浓缩，得到粗产物形式的淡黄色油，将其通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到呈白色固体状的29f(27mg，21.2％产率)。1099、ms(esi)m/z:545.5[m+h]+1100、步骤51101、2-((2s,3r,4s,5r)-5-((6s,15s)-15-苄基-6-(((苄氧基)羰基)氨基)-24-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-3,7,10,13,16,19,24-七氧代-22-氧杂-2,8,11,14,17,20-六氮杂二十四基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)乙酸苄酯(29g)1102、根据实施例22步骤8的合成程序合成29g(26mg，41.4％产率)。1103、ms(esi)m/z:1389.7[m+na]+1104、步骤61105、2-((2s,3r,4s,5r)-5-((6s,15s)-6-氨基-15-苄基-24-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-3,7,10,13,16,19,24-七氧代-22-氧杂-2,8,11,14,17,20-六氮杂二十四基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)乙酸(29h)1106、根据实施例22步骤7的合成程序合成29h(22mg，粗物质)。1107、ms(esi)m/z:1143.7[m+h]+1108、步骤71109、2-((2s,3r,4s,5r)-5-((6s,15s)-6-氨基-15-苄基-24-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-3,7,10,13,16,19,24-七氧代-22-氧杂-2,8,11,14,17,20-六氮杂二十四基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)乙酸(29)1110、根据实施例22步骤10的合成程序合成29(4.5mg，77.0％产率)。1111、ms(esi)m/z:1358.8[m+na]+1112、实施例301113、1114、步骤11115、(s)-2-氨基-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)戊二酰胺(30a)1116、向20(20mg，0.037mmol)和hatu(14.05mg，0.037mmol)于dmf(1ml)中的混合物中添加dipea(14.33mg，0.111mmol)。使混合物在室温下反应10分钟。添加28(40.0mg，0.048mmol)并在相同温度下再反应15分钟。反应完成后，添加哌啶(139.34mg，0.366mmol)并在室温下再放置10分钟。将混合物过滤并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化滤液，得到30a(30.0mg，71.7％产率)。1117、ms(esi)m/z:1164.8[m+na]+1118、步骤21119、(s)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)戊二酰胺(30)1120、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物30(7.5mg,42.8％产率)。1121、ms(esi)m/z:1335.9[m+h]+1122、实施例311123、1124、步骤11125、2-((3as,4s,6r,6ar)-6-(羟甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)乙酸(31b)1126、根据实施例22步骤2的合成程序合成31b(231mg，粗物质，87.1％产率)。1127、步骤21128、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n6-(2-((3as,4s,6r,6ar)-6-(羟甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)乙酰基)-l-赖氨酸叔丁酯(31d)1129、根据实施例22步骤8的合成程序合成31d(393mg，64.9％产率)。1130、ms(esi)m/z:639.6[m+h]+1131、步骤31132、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n6-(2-((2s,3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)乙酰基)-l-赖氨酸(31e)1133、根据实施例29步骤4的合成程序合成31e(27mg，63.5％产率)。1134、ms(esi)m/z:543.5[m+h]+1135、步骤41136、((10s,19s)-10-苄基-26-((2s,3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15,18,25-七氧代-3-氧杂-5,8,11,14,17,24-六氮杂二十六-19-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(31f)1137、根据实施例22步骤8的合成程序合成31f(40mg，51.3％产率)。1138、ms(esi)m/z:1387.9[m+na]+1139、步骤51140、(s)-2-氨基-n-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-6-(2-((2s,3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)乙酰胺基)己酰胺(31g)1141、将31f(20mg，0.015mmol)溶解于dmf(1ml)中，然后添加et2nh(15μl，0.15mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。反应完成后，将反应混合物减压浓缩，得到呈灰色固体状的31g(19mg，定量)，其未经纯化即直接用于下一步。1142、ms(esi)m/z:1143.8[m+h]+1143、步骤61144、(s)-n-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-6-(2-((2s,3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)乙酰胺基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)己酰胺(31)1145、根据实施例22步骤8的合成程序合成31(13.9mg，70.4％产率)。1146、ms(esi)m/z:1358.9[m+na]+1147、实施例321148、1149、1150、步骤11151、((10s,19s)-10-苄基-22-(((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基)-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15,18,22-七氧代-3-氧杂-5,8,11,14,17-五氮杂二十二-19-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(32a)1152、向18(40mg，0.08mmol)、28(60mg，0.07mmol)和hatu(30mg，0.08mmol)于无水dmf(1ml)中的溶液中添加diea(36μl，0.21mmol)，在室温下搅拌1.5小时。将反应溶液过滤并通过制备型hplc(含0.1％ fa的水/mecn)纯化，冻干，得到呈米色固体状的标题化合物32a(52mg，55.1％产率)。1153、ms(esi)m/z:1345.8[m+na]+1154、步骤21155、(2s)-2-氨基-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-n5-((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)戊二酰胺(32b)1156、向32a(52mg，0.04mmol)于dmf(1ml)中的溶液中添加et2nh(81μl，0.79mmol)，在室温下搅拌1小时。溶液用石油醚(3ml*4)萃取，浓缩dmf相，得到呈米色固体状的标题化合物32b(44.4mg，102.6％)。1157、ms(esi)m/z:1101.8[m+h]+1158、步骤31159、(2s)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-n5-((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)戊二酰胺(32)1160、向32b(25mg，22.7μmol)、6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酸32c(5.3mg，25.0μmol)和hatu(9.5mg，25.0μmol)于无水dmf(1ml)中的溶液中添加diea(8μl，45.4μmol)，在室温下搅拌20分钟。过滤溶液并通过制备型hplc(含0.1％ fa的水/mecn)纯化，冻干，得到呈白色固体状的标题化合物32(10mg，34.0％产率)。1161、ms(esi)m/z:1316.8[m+na]+1162、实施例331163、1164、1165、步骤33-11166、((10s,19s)-10-苄基-22-(((3r,4s,5s)-5-(((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15,18,22-七氧代-3-氧杂-5,8,11,14,17-五氮杂二十二-19-基)氨基甲酸苄酯(33a)1167、向19(26mg，0.047mmol)和hatu(17.73mg，0.047mmol)于dmf(1ml)中的混合物中添加dipea(18.08mg，0.14mmol)。使混合物在室温下反应10分钟。添加28(39.21mg，0.047mmol)并在相同温度下再反应15分钟。反应完成后，将混合物过滤并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化滤液，得到33a(35.0mg，54.4％产率)。1168、ms(esi)m/z:1403.9[m+na]+1169、步骤33-21170、(2s)-2-氨基-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-n5-((3r,4s,5s)-5-(((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)戊二酰胺(33b)1171、向33a(35mg，0.025mmol)于meoh(1ml)中的溶液中添加10％pd/c(5.3mg)并将悬浮液用h2气球吹扫三次，接着在h2压力下在室温下搅拌4小时。反应完成后，滤出pd/c并减压去除甲醇，得到33b(28.3mg，89.6％产率)。1172、ms(esi)m/z:1246.8[m+h]+1173、步骤33-31174、(2s)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-n5-((3r,4s,5s)-5-(((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)戊二酰胺(33)1175、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物33(11.8mg，36.1％产率)。1176、ms(esi)m/z:1462.9[m+na]+1177、实施例341178、1179、步骤11180、n-甲基-n-(n-甲基-n-(n-甲基-n-(2-(甲基-l2-氮烷基)乙酰基)甘氨酰基)甘氨酰基)甘氨酸甲酯(34b)1181、向化合物34a(200mg，0.44mmol)于meoh(6ml)中的溶液中添加湿pd/c(20mg，10wt％)。将混合物在室温下在h2(15psi)气氛下搅拌2小时。将混合物经由硅藻土垫过滤，浓缩，得到粗产物。得到呈无色油状的化合物34b(180mg，粗物质)。1182、ms(esi)m/z:317.4[m+h]+。1183、步骤21184、1-((3as,6r,6ar)-6-((s)-4-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(苄氧基)-5-氧代戊酰胺基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)-2,5,8,11-四甲基-1,4,7,10-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三-13-酸甲酯(34d)1185、向化合物34c(368mg，0.57mmol)于吡啶(4ml)中的溶液中添加34b(180mg，0.63mmol)和edci(130mg，0.63mmol)。在室温下搅拌混合物6小时。浓缩混合物并通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化残余物。得到呈白色固体状的化合物34d(120mg，22.3％产率)。1186、ms(esi)m/z:943.7[m+h]+。1187、步骤31188、1-((3s,4r,5r)-5-((s)-4-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(苄氧基)-5-氧代戊酰胺基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-2,5,8,11-四甲基-1,4,7,10-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三-13-酸甲酯(34e)1189、向化合物34d(120mg，0.13mmol)于thf(1ml)中的溶液中添加thf-h2o(v:v＝4:1，5ml)。在室温下搅拌混合物4小时。将混合物浓缩，得到粗产物，其未经进一步纯化即用于下一步。得到呈白色固体状的化合物34e(115mg，粗物质)。1190、ms(esi)m/z:903.7[m+h]+。1191、步骤41192、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-((3r,4s,5s)-3,4-二羟基-5-(甲基(5,8,11-三甲基-3,6,9,12-四氧代-2-氧杂-5,8,11-三氮杂十三-13-基)氨基甲酰基)四氢呋喃-2-基)-l-谷氨酰胺(34f)1193、向化合物34e(115mg，0.13mmol)于meoh(4ml)中的溶液中添加湿pd/c(15mg，10％)。将混合物在室温下在h2(15psi)下搅拌5小时。将混合物经由硅藻土垫过滤，浓缩。粗物质通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈白色固体状的化合物34f(74mg，64.3％产率)。1194、ms(esi)m/z:813.6[m+h]+。1195、步骤51196、n5-((3r,4s,5s)-5-((2-((2-((2-((2-氨基-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-l-谷氨酰胺(34g)1197、将化合物34f(74mg，0.09mmol)于nh3-meoh(6ml，7m)中的溶液在40℃下在密封管中搅拌16小时。将混合物浓缩，用h2o(10ml)溶解，用ea(4*10ml)洗涤。将水溶液冻干，得到粗产物。得到呈白色固体状的化合物34g(68mg，粗物质)。1198、ms(esi)m/z:576.5[m+h]+。1199、步骤61200、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-((3r,4s,5s)-5-((2-((2-((2-((2-氨基-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-l-谷氨酰胺(34h)1201、向化合物34g(68mg，0.12mmol)于ch3cn(3ml)和h2o(1.5ml)中的溶液中添加fmoc-osu(30.8mg，0.09mmol)和na2co3(18.4mg，0.17mmol)。在室温下搅拌混合物2小时。混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈白色固体状的化合物34h(29mg，30.2％产率)。1202、ms(esi)m/z:798.6[m+h]+。1203、步骤71204、((10s,19s)-22-(((3r,4s,5s)-5-((2-((2-((2-((2-氨基-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15,18,22-七氧代-3-氧杂-5,8,11,14,17-五氮杂二十二-19-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(34j)1205、向化合物34i(29mg，0.036mmol)于dmf(2ml)中的溶液中添加34h(32.1mg，0.038mmol)、hatu(20.7mg，0.054mmol)和diea(7.1mg，0.054mmol)。将混合物在室温下搅拌20分钟。混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈白色固体状的化合物34j(32mg，54.0％)。1206、ms(esi)m/z:1644.0[m+na]+。1207、步骤81208、(s)-2-氨基-n5-((3r,4s,5s)-5-((2-((2-((2-((2-氨基-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)戊二酰胺(34k)1209、向化合物34j(32mg，0.02mmol)于dmf(2ml)中的溶液中添加et2nh(28.9mg，0.395mmol)。在室温下搅拌混合物1小时。将混合物浓缩并与甲苯(3*2ml)共蒸发。粗物质不经进一步纯化即用于下一步骤。获得呈灰白色固体状的化合物34k(34mg，粗物质)。1210、ms(esi)m/z:1400.1[m+h]+。1211、步骤91212、(s)-n5-((3r,4s,5s)-5-((2-((2-((2-((2-氨基-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基)-2-氧代乙基)(甲基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)戊二酰胺(34)1213、向化合物34i(6.3mg，0.03mmol)于dmf(2ml)中的溶液中添加hatu(11.3mg，0.03mmol)和diea(3.8mg，0.03mmol)。将混合物在室温下搅拌15分钟。将化合物34k(27.6mg，0.02mmol)添加至混合物中。将混合物在室温下搅拌15分钟。混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈白色固体状的化合物34(21mg，66.8％产率)。1214、ms(esi)m/z:1614.1[m+na]+。1215、实施例351216、1217、步骤11218、n-(2-氨基-2-氧代乙基)-2-(n,5,8,11,14,17,20,23,26,29-十甲基-4,7,10,13,16,19,22,25,28-九氧代-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29-十氮杂三十一-31-酰胺基)-n-甲基乙酰胺(35b)1219、向化合物35a(200mg，0.196mmol)于meoh(4ml)中的溶液中添加湿pd/c(20mg，10wt％)。将混合物在室温下在h2(15psi)气氛下搅拌2小时。将混合物经由硅藻土垫过滤，浓缩，得到粗产物。得到呈无色油状的化合物35b(185mg，粗物质)。1220、步骤21221、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-((3ar,6s,6as)-6-((35-氨基-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一甲基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧代-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一氮杂三十五基)(甲基)氨基甲酰基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)-l-谷氨酸苄酯(35d)1222、向化合物35c(134mg，0.208mmol)于吡啶(4ml)中的溶液中添加35b(185mg，0.208mmol)和edci(47mg，0.01mmol)。在室温下搅拌混合物6小时。浓缩混合物并通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化残余物。得到呈白色固体状的化合物35d(305mg，98.1％产率)。1223、ms(esi)m/z:1535.0[m+na]+。1224、步骤31225、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-((3r,4s,5s)-5-((35-氨基-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一甲基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧代-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一氮杂三十五基)(甲基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-l-谷氨酸苄酯(35e)1226、向化合物35d(305mg，0.202mmol)于thf(2ml)中的溶液中添加thf-h2o(v:v＝4:1，10ml)。在室温下搅拌混合物4小时。将混合物浓缩，得到粗产物，其未经进一步纯化即用于下一步。得到呈白色固体状的化合物35e(295mg，粗物质)。1227、ms(esi)m/z:1495.0[m+na]+。1228、步骤41229、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-((3r,4s,5s)-5-((35-氨基-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一甲基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧代-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一氮杂三十五基)(甲基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-l-谷氨酰胺(35f)1230、向化合物35e(295mg，0.2mmol)于meoh(6ml)中的溶液中添加湿pd/c(30mg，10％)。将混合物在室温下在h2(15psi)下搅拌5小时。将混合物经由硅藻土垫过滤，浓缩。粗物质通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈白色固体状的化合物35f(162mg，58.5％产率)。1231、ms(esi)m/z:1404.9[m+na]+。1232、步骤51233、n5-((3r,4s,5s)-5-((35-氨基-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一甲基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧代-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一氮杂三十五基)(甲基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-l-谷氨酰胺(35g)1234、将化合物35f(162mg，0.117mmol)于nh3-meoh(6ml，7m)中的溶液在40℃下在密封管中搅拌16小时。将混合物浓缩，用h2o(15ml)溶解，用ea(4*10ml)洗涤。将水溶液冻干，得到粗产物。得到呈白色固体状的化合物35g(142mg，粗物质)。1235、ms(esi)m/z:1145.9[m+h]+。1236、步骤61237、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-((3r,4s,5s)-5-((35-氨基-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一甲基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧代-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一氮杂三十五基)(甲基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-l-谷氨酰胺(35h)1238、向化合物35g(126mg，0.11mmol)于ch3cn(3ml)和h2o(1.5ml)中的溶液中添加fmocosu(40.9mg，0.121mmol)和na2co3(23.3mg，0.22mmol)。在室温下搅拌混合物2小时。混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈白色固体状的化合物35h(62mg，41.1％产率)。1239、ms(esi)m/z:1388.9[m+na]+。1240、步骤71241、((10s,19s)-22-(((3r,4s,5s)-5-((35-氨基-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一甲基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧代-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一氮杂三十五基)(甲基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15,18,22-七氧代-3-氧杂-5,8,11,14,17-五氮杂二十二-19-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(35j)1242、向化合物35i(20mg，0.024mmol)于dmf(2ml)中的溶液中添加35h(35.8mg，0.026mmol)、hatu(13.6mg，0.04mmol)和diea(6.2mg，0.05mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈白色固体状的化合物35j(33mg，63.5％)。1243、ms(esi)m/z:2189.7[m+h]+。1244、步骤81245、(s)-2-氨基-n5-((3r,4s,5s)-5-((35-氨基-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一甲基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧代-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一氮杂三十五基)(甲基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)戊二酰胺(35k)1246、向化合物35j(33mg，0.015mmol)于dmf(2ml)中的溶液中添加et2nh(22mg，0.30mmol)。将混合物在室温下搅拌45分钟。将混合物浓缩并与甲苯(3*2ml)共蒸发。粗物质不经进一步纯化即用于下一步骤。得到呈灰白色固体状的化合物35k(35mg，粗物质)。1247、ms(esi)m/z:1968.1[m+h]+。1248、步骤91249、(s)-n5-((3r,4s,5s)-5-((35-氨基-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一甲基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35-十二氧代-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30,33-十一氮杂三十五基)(甲基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)戊二酰胺(35)1250、向化合物35i(4.8mg，0.023mmol)于dmf(2ml)中的溶液中添加hatu(8.7mg，0.023mmol)和diea(2.96mg，0.023mmol)。将混合物在室温下搅拌15分钟。将化合物35k(30mg，0.015mmol)添加至混合物中。将混合物在室温下搅拌15分钟。混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈白色固体状的化合物35(19.8mg，60.09％产率)。1251、ms(esi)m/z:2161.4[m+h]+。1252、实施例361253、1254、步骤11255、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((5s,8s,11s)-5-(3-(((3r,4s,5s)-5-(((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-8-异丙基-3,6,9-三氧代-1-苯基-11-(3-脲基丙基)-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十二-12-酰胺基)苄酯(36a)1256、根据实施例33步骤1的合成程序合成化合物36a(34.7mg，36.5％产率)。1257、ms(esi)m/z:1664.4[m+h]+1258、步骤21259、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((2s)-2-((2s)-2-((2s)-2-氨基-5-(((3r,4s,5s)-5-(((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(36b)1260、根据实施例33步骤2的合成程序合成化合物36b(19.2mg，60.2％产率)。1261、ms(esi)m/z:1529.2[m+h]+1262、步骤31263、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((2s)-2-((2s)-2-((2s)-5-(((3r,4s,5s)-5-(((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-5-氧代戊酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(36)1264、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物36(10.7mg，49.5％产率)。1265、ms(esi)m/z:1722.9[m+h]+1266、实施例371267、1268、步骤11269、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((5s,8s,11s)-5-(3-(((3r,4s,5s)-5-(((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-8-异丙基-3,6,9-三氧代-1-苯基-11-(3-脲基丙基)-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十二-12-酰胺基)苄酯(37a)1270、根据实施例33步骤1的合成程序合成化合物37a(15.0mg，24.0％产率)。1271、ms(esi)m/z:1381.8[m+h]+1272、步骤21273、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((2s)-2-((2s)-2-((2s)-2-氨基-5-(((3r,4s,5s)-5-(((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(37b)1274、根据实施例33步骤2的合成程序合成化合物37b(12.5mg，90.9％产率)。1275、ms(esi)m/z:1268.9[m+na]+1276、步骤31277、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((2s)-2-((2s)-2-((2s)-5-(((3r,4s,5s)-5-(((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基甲酰基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)氨基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-5-氧代戊酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(37)1278、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物37(7.3mg，50.6％产率)。1279、ms(esi)m/z:1441.0[m+h]+1280、实施例381281、1282、步骤11283、(s)-n4-((2r,3r,4r,5s,6r)-3-乙酰胺基-4,5-二羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)-2-氨基-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)琥珀酰亚胺(38b)1284、向38a(30mg，0.044mmol)和tstu(13.21mg，0.044mmol)于dmf(1ml)中的混合物中添加dipea(17.01mg，0.132mmol)。使混合物在室温下反应10分钟，并且根据lcms，酸转化为活性酯。添加28(29.52mg，0.035mmol)并在相同温度下再反应1小时。反应完成后，添加哌啶nh2nh2.h2o(200ul,80％)并将混合物在室温下再放置10分钟。过滤混合物并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化滤液，得到38b(6.9mg，17.2％产率)。1285、ms(esi)m/z:1158.9[m+h]+1286、步骤21287、(s)-n4-((2r,3r,4r,5s,6r)-3-乙酰胺基-4,5-二羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)琥珀酰亚胺(38)1288、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物38(4.5mg，55.9％产率)。1289、ms(esi)m/z:1373.8[m+na]+1290、实施例391291、1292、步骤11293、2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酸2,5-二氧代吡咯烷-1-基酯(39b)1294、向化合物39a(600mg，3.87mmol)于dmf(8ml)中的溶液中添加dcc(958mg，4.64mmol)和hosu(534mg，4.64mmol)。在室温下搅拌混合物4小时。过滤混合物以去除固体，浓缩滤液，得到粗产物。得到呈灰白色固体状的化合物39b(855mg，粗物质)。1295、ms(esi)m/z:275.2[m+na]+。1296、步骤21297、3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酸(39d)1298、向化合物39b(855mg，粗物质)于dmso(8ml)中的溶液中添加3-氨基丙酸(379mg，4.26mmol)。在40℃下搅拌混合物4小时。将混合物用h2o(20ml)稀释，用mtbe(3*20ml)洗涤。用ea(6*100ml)萃取水溶液。将有机层合并，经无水na2so4干燥，过滤且浓缩。得到化合物39d(875mg，理论量)于dmso中的溶液，其未经进一步纯化即直接用于下一步。1299、ms(esi)m/z:227.2[m+h]+。1300、步骤31301、3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酸2,5-二氧代吡咯烷-1-基酯1302、向化合物(875mg，理论产率)于dcm(10ml)中的溶液中添加dcc(958mg，4.64mmol)和hosu(534mg，4.64mmol)。在室温下搅拌混合物3小时。过滤混合物且浓缩。混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈无色胶状的化合物39e(195mg，15.6％产率)。1303、ms(esi)m/z:346.3[m+na]+。1304、步骤41305、(s)-2-(2-(2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)乙酰胺基)乙酰胺基)-n-(2-(((2-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-3-苯基丙酰胺(39)1306、向化合物39f(25mg，0.03mmol)于dmf(0.8ml)中的溶液中添加39e(12.5mg，0.04mmol)和diea(2.2mg，0.03mmol)。在室温下搅拌混合物2小时。用0.1％ tfa溶液将ph调节为6。混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈白色固体状的化合物39(8.0mg，25.6％产率)。1307、ms(esi)m/z:1071.7[m+na]+。1308、实施例401309、1310、步骤11311、(2s)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-n5-((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)戊二酰胺(40)1312、向32b(20mg，18.2μmol)于无水dmf(1ml)中的溶液中添加7a(8.8mg，27.2μmol)，在室温下搅拌1.5小时。将溶液过滤并通过制备型hplc(含0.1％ fa的水/mecn)纯化，冻干，得到呈白色固体状的标题化合物40(9.5mg，39.9％产率)。1313、ms(esi)m/z:1331.8[m+na]+1314、实施例411315、1316、(s)-2-(2-(2-(2-(4-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)苯基)乙酰胺基)乙酰胺基)乙酰胺基)-n-(2-(((2-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-3-苯基丙酰胺(41)1317、将28(根据实施例28的合成程序合成，5.0mg，0.022mmol)、41a(市售，18mg，0.022mmol)和hatu(9.0mg，0.024mmol)溶解于dmf(0.5ml)中，然后添加diea(11.5μl，0.065mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌15分钟。反应完成后，将反应混合物用含0.1％tfa的h2o酸化至ph＝6并通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到呈白色固体状的41(11mg，48.2％产率)。1318、ms(esi)m/z:1076.5[m+na]+1319、实施例421320、1321、步骤11322、((10s,19s)-10-苄基-19-(3-(((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15,18,21-七氧代-3-氧杂-5,8,11,14,17,20-六氮杂二十三-23-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(42b)1323、向32b(24mg，21.8μmol)、fmoc-甘氨酸42a(7.5mg，24.0μmol)和hatu(9.1mg，24.0μmol)于无水dmf(1.5ml)中的溶液中添加diea(7μl，43.6μmol)，在室温下搅拌25分钟。过滤溶液，并通过制备型hplc(含0.1％ fa的水/mecn)纯化，冻干，得到呈白色固体状的标题化合物42b(16.5mg，54.3％产率)。1324、ms(esi)m/z:1416.8[m+na]+1325、步骤21326、(2s)-2-(3-氨基丙酰胺基)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-n5-((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)戊二酰胺(42c)1327、向42b(16.5mg，11.8μmol)于无水dmf(1ml)中的溶液中添加et2nh(24μl，0.24mmol)，在室温下搅拌30分钟。真空浓缩溶液。将残余物与mtbe(5ml)一起湿磨，过滤并用mtbe(1ml*3)洗涤。收集滤饼，得到呈浅棕色固体状的标题化合物42c(15mg，108.4％产率)，其未经进一步纯化即直接用于下一步。1328、ms(esi)m/z:1172.8[m+h]+1329、步骤31330、(2s)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-n5-((3r,4s,5r)-3,4-二羟基-5-(羟甲基)四氢呋喃-2-基)-2-(3-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)丙酰胺基)戊二酰胺(42)1331、根据实施例40步骤1所述的程序得到标题化合物42(9.1mg，55.2％产率)。1332、ms(esi)m/z:1402.8[m+na]+1333、实施例431334、1335、步骤11336、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((5s,8s,11s)-5-(3-((((2s,3r,4s,5r)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(9h-芴-9-基)-8-异丙基-3,6,9-三氧代-11-(3-脲基丙基)-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十二-12-酰胺基)苄酯(43a)1337、向20(25mg，0.046mmol)和hatu(17.55mg，0.046mmol)于dmf(1ml)中的混合物中添加dipea(17.90mg，0.138mmol)。使混合物在室温下反应10分钟。添加9b(51.86mg，0.046mmol)并在相同温度下再反应15分钟。反应完成后，将混合物过滤并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化滤液，得到43a(55.9mg，73.5％产率)。1338、ms(esi)m/z:824.6[m+2h]2+1339、步骤21340、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((s)-2-((s)-2-((s)-2-氨基-5-((((2s,3r,4s,5r)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-5-氧代戊酰胺基)-3-甲基丁酰胺基)-5-脲基戊酰胺基)苄酯(43b)1341、向43a(55.9mg，0.034mmol)于dmf(1ml)中的混合物中添加et2n(49.65mg，0.479mmol)。使混合物在室温下反应30分钟。反应完成后，减压浓缩混合物，得到43b(59mg，粗物质)。1342、ms(esi)m/z:713.5[m+2h]2+1343、步骤31344、((s)-1-(((s)-1-(((3r,4s,5s)-1-((s)-2-((1r,2r)-3-(((1s,2r)-1-羟基-1-苯基丙-2-基)氨基)-1-甲氧基-2-甲基-3-氧代丙基)吡咯烷-1-基)-3-甲氧基-5-甲基-1-氧代庚-4-基)(甲基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)(甲基)氨基甲酸4-((21s,24s,27s)-21-(3-((((2s,3r,4s,5r)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-3-氧代丙基)-1-((1r,8s,9s)-双环[6.1.0]壬-4-炔-9-基)-24-异丙基-3,19,22,25-四氧代-27-(3-脲基丙基)-2,7,10,13,16-五氧杂-4,20,23,26-四氮杂二十八-28-酰胺基)苄酯(43)1345、向43c(10.0mg，0.023mmol)和hatu(8.61mg，0.023mmol)于dmf(0.3ml)中的混合物中添加dipea(8.78mg，0.068mmol)。使混合物在室温下反应10分钟。添加43b(32.27mg，粗物质)并在相同温度下再反应15分钟。反应完成后，将混合物过滤并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化滤液，得到43(22.2mg，53.0％产率)。1346、ms(esi)m/z:1849.2[m+h]+1347、实施例441348、1349、步骤11350、((2r,10s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-(羟甲基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(44a)1351、将22k(125mg，0.094mmol)溶解于thf(3ml)中，然后添加tbaf(1m thf储备溶液，113μl，0.11mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。添加et2nh(97μl，0.94mmol)并将混合物在25℃下进一步搅拌1小时。反应完成后，反应混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到呈白色固体状的44a(38mg，46.4％产率)。1352、ms(esi)m/z:871.7[m+h]+1353、步骤21354、((6s,15s,23r)-1-((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-15-苄基-24-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-23-(羟甲基)-3,7,10,13,16,19,24-七氧代-22-氧杂-2,8,11,14,17,20-六氮杂二十四-6-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(44b)1355、根据实施例22步骤8的合成程序合成44b(14.5mg，50.3％产率)。1356、ms(esi)m/z:1416.9[m+na]+1357、步骤31358、(s)-2-氨基-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((2r,10s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-(羟甲基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)戊二酰胺(44c)1359、根据实施例22步骤9的合成程序合成44c(15.2mg，粗物质)。1360、ms(esi)m/z:1173.8[m+h]+1361、步骤41362、(s)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((2r,10s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-(羟甲基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)戊二酰胺(44c)1363、根据实施例22步骤10的合成程序合成44(5.3mg，36.9％产率)。1364、ms(esi)m/z:1402.9[m+na]+1365、实施例451366、1367、步骤11368、3-(((5s,14s)-5-(3-((((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-3-氧代丙基)-14-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15,18-六氧代-2-氧杂-4,7,10,13,16,19-六氮杂二十-20-基)氧基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(45a)1369、向20(68mg，0.12mmol)和tstu(37mg，0.12mmol)于无水dmf(1ml)中的溶液中添加diea(56μl，0.34mmol)，在室温下搅拌10分钟。添加24c(53mg，0.11mmol)，在室温下搅拌1小时。将溶液过滤并通过制备型hplc(含0.1％ fa的水/mecn)纯化，冻干，得到呈白色固体状的标题化合物45a(52mg，46.3％产率)。1370、ms(esi)m/z:997.7[m-h]-1371、步骤21372、((7s,16s)-21-((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-7-苄基-1-((3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氧基)-3,6,9,12,15,19-六氧代-2,5,8,11,14,20-六氮杂二十一-16-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(45b)1373、向45a(52mg，52.0μmol)、甲磺酸依沙替康(29mg，54.7μmol)和hatu(21mg，54.7μmol)于无水dmf(2ml)中的溶液中添加diea(17μl，0.1mmol)，在室温下搅拌30分钟。过滤溶液并通过制备型hplc(含0.1％ fa的水/mecn)纯化，冻干，得到呈灰白色固体状的标题化合物45b(62mg，84.2％产率)。1374、ms(esi)m/z:1438.9[m+na]+1375、步骤31376、(s)-2-氨基-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-7-苄基-1-((3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氧基)-3,6,9,12-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三-13-基)戊二酰胺(45c)1377、向45b(60mg，42.4μmol)于无水dmf(1ml)中的溶液中添加et2nh(88μl，0.85mmol)，在室温下搅拌2小时。将溶液真空浓缩。将残余物与mtbe(5ml)一起湿磨，过滤并用mtbe(1ml*3)洗涤。收集滤饼，得到呈浅棕色固体状的标题化合物45c(56mg，110.6％产率)，其未经进一步纯化即直接用于下一步。1378、ms(esi)m/z:1194.9[m+h]+1379、步骤41380、(s)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-7-苄基-1-((3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氧基)-3,6,9,12-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三-13-基)-2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)戊二酰胺(45)1381、根据实施例40步骤1所述的程序得到标题化合物45(13mg，44.1％产率)。1382、ms(esi)m/z:1424.8[m+na]+1383、实施例461384、1385、使用与实施例44类似的合成程序合成46(5.6mg，44.1％产率)(中间物21的合成请参考实施例21)。1386、ms(esi)m/z:1575.9[m+na]+1387、实施例471388、1389、1390、步骤11391、3-(((5s,14s)-5-(3-((((2r,3s,4r,5s)-5-(2-((((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-3-氧代丙基)-14-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15,18-六氧代-2-氧杂-4,7,10,13,16,19-六氮杂二十-20-基)氧基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(38b)1392、向21(95.0mg，0.133mmol)和tstu(40.02mg，0.133mmol)于dmf(2ml)中的混合物中添加dipea(51.54mg，0.399mmol)。使混合物在室温下反应10分钟，并且根据lcms，酸转化为活性酯。添加47a(385mg，粗物质)并在相同温度下再反应1小时。反应完成后。过滤混合物，且滤液使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到47b(66.5mg，42.9％产率)。1393、ms(esi)m/z:1170.8[m-h]-1394、步骤21395、((7s,16s)-21-((2r,3s,4r,5s)-5-(2-((((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-7-苄基-1-((3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氧基)-3,6,9,12,15,19-六氧代-2,5,8,11,14,20-六氮杂二十一-16-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(47c)1396、根据实施例28步骤4的合成程序合成化合物47c(29.5mg，90.5％产率)。1397、ms(esi)m/z:1613.0[m+na]+1398、步骤31399、(s)-2-氨基-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-((((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-7-苄基-1-((3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氧基)-3,6,9,12-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三-13-基)戊二酰胺(47d)1400、根据实施例43步骤2的合成程序合成化合物47d(29.6mg，粗物质)。1401、ms(esi)m/z:1368.1[m+h]+1402、步骤41403、(s)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-((((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-7-苄基-1-((3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氧基)-3,6,9,12-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三-13-基)-2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)戊二酰胺(47)1404、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物47(19.9mg，58.3％产率)。1405、ms(esi)m/z:1598.9[m+na]+1406、实施例481407、1408、步骤11409、(s)-2-氨基-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)戊二酰胺(30a)1410、根据实施例30步骤1的合成程序合成化合物30a(20mg，36.8％产率)。1411、ms(esi)m/z:1142.8[m+h+]1412、步骤21413、(s)-2-氨基-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)戊二酰胺(48)1414、向48a(5mg，0.021mmol)和hatu(8mg，0.021mmol)于dmf(1ml)中的混合物中添加dipea(5mg，0.035mmol)。使混合物在室温下反应10分钟。添加30a(20mg，0.018mmol)并在相同温度下再反应15分钟。将混合物过滤并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化滤液，得到48(4mg，16.9％产率)。1415、ms(esi)m/z:1372.8[m+na]+1416、实施例491417、1418、1419、步骤11420、2-((3as,4s,6r,6ar)-2,2-二甲基-6-((((z)-2-氧代-2-苯基亚乙基)氨基)甲基)四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)乙酸2,5-二氧代吡咯烷-1-基酯(49b)1421、根据实施例39b步骤1的合成程序合成49f(215mg，理论产率)。1422、步骤21423、14-((3as,4s,6r,6ar)-6-((((苄氧基)羰基)氨基)甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)-3,6,9,12-四甲基-4,7,10,13-四氧代-3,6,9,12-四氮杂十四酸(49d)1424、向化合物49c(156mg，0.37mmol)于dmf(3ml)中的溶液中添加49b(215.16mg，0.47mmol)和diea(289mg，2.24mmol)。在室温下搅拌混合物16小时。混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈白色固体状的化合物49d(115mg，47.3％产率)。1425、ms(esi)m/z:650.6[m+h]+。1426、步骤31427、(((3ar,4r,6s,6as)-6-(14-氨基-3,6,9,12-四甲基-2,5,8,11,14-五氧代-3,6,9,12-四氮杂十四基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)氨基甲酸苄酯(49e)1428、向化合物49d(105mg，0.16mmol)于dmf(1ml)中的溶液中添加pybop(127mg，0.24mmol)、hobt(33mg，0.24mmol)、diea(105mg，0.81mmol)和nh3-meoh(230ul，7m)。在室温下搅拌混合物1小时。混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈白色固体状的化合物49e(87mg，83.0％产率)。1429、ms(esi)m/z:649.6[m+h]+。1430、步骤41431、n-(2-氨基-2-氧代乙基)-2-(2-(2-(2-((3as,4s,6r,6ar)-6-(氨基甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)-n-甲基乙酰胺基)-n-甲基乙酰胺基)-n-甲基乙酰胺基)-n-甲基乙酰胺(49f)1432、根据实施例34b步骤1的合成程序合成49f(85.0mg，粗物质)。1433、ms(esi)m/z:515.6[m+h]+。1434、步骤51435、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((3ar,4r,6s,6as)-6-(14-氨基-3,6,9,12-四甲基-2,5,8,11,14-五氧代-3,6,9,12-四氮杂十四基)-2,2二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)-l-谷氨酸苄酯(49h)1436、向化合物49g(83.5mg，0.18mmol)于dmf(2ml)中的溶液中添加hatu(94.2mg，0.25mmol)和diea(64mg，0.5mmol)。将混合物在室温下搅拌15分钟。将化合物49f(85.0mg，0.165mmol)添加至混合物中并在室温下搅拌2小时。混合物通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化。得到呈白色固体状的化合物49h(83.0mg，52.5％产率)。1437、ms(esi)m/z:956.8[m+h]+。1438、步骤61439、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(14-氨基-3,6,9,12-四甲基-2,5,8,11,14-五氧代-3,6,9,12-四氮杂十四基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-l-谷氨酸苄酯(49i)1440、根据实施例34e步骤3的合成程序合成49i(79.0mg，粗物质)。1441、ms(esi)m/z:916.7[m+h]+。1442、步骤71443、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(14-氨基-3,6,9,12四甲基-2,5,8,11,14-五氧代-3,6,9,12-四氮杂十四基)-3,4二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-l-谷氨酰胺(49j)1444、按照实施例34f步骤4的合成程序合成49j(42.0mg，59.2％产率)。1445、ms(esi)m/z:826.7[m+h]+。1446、步骤81447、((6s,15s)-1-((2r,3s,4r,5s)-5-(14-氨基-3,6,9,12-四甲基-2,5,8,11,14-五氧代-3,6,9,12-四氮杂十四基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-15-苄基-24-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-3,7,10,13,16,19,24-七氧代-22-氧杂-2,8,11,14,17,20-六氮杂二十四-6-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(49l)1448、根据实施例34j步骤7的合成程序合成49l(55.0mg，理论产率)。1449、ms(esi)m/z:1672.0[m+na]+。1450、步骤91451、(s)-2-氨基-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(14-氨基-3,6,9,12-四甲基-2,5,8,11,14-五氧代-3,6,9,12-四氮杂十四基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)戊二酰胺(49m)1452、根据实施例34k步骤8的合成程序合成49m(30.28mg，理论产率)。1453、ms(esi)m/z:1428.1[m+h]+1454、步骤101455、(s)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(14-氨基-3,6,9,12-四甲基-2,5,8,11,14-五氧代-3,6,9,12-四氮杂十四基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)戊二酰胺(49)1456、根据实施例39步骤4的合成程序合成49(11.2mg，31.5％产率)。1457、ms(esi)m/z:1658.0[m+na]+1458、实施例501459、1460、步骤11461、(2s,3r,4r,5s,6r)-2-(氨基甲基)-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-3,4,5-三醇(50b)1462、向50a(200mg，0.896mmol)于meoh/h2o(v/v＝1:1，4ml)中的混合物中添加湿pd/c(35mg，10％纯度)。将黑色悬浮液用h2气球吹扫三次，并在室温下搅拌2小时。lcms显示50a完全耗尽。将黑色悬浮液经由硅藻土垫过滤并浓缩滤液，得到50b(173mg，粗物质)。1463、ms(esi)m/z:194.2[m+h]+1464、步骤21465、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)-l-谷氨酸苄酯(50c)1466、向50b(173mg，粗物质)和20c(431.43mg，0.775mmol)于meoh/h2o(8ml)中的混合物中添加饱和nahco3(3ml)，并在室温下搅拌2小时。lcms显示50b完全耗尽。将混合物真空浓缩以去除大部分meoh，并用1n hcl将水相酸化至ph＝6，过滤并通过制备型hplc(fa)柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化滤液，得到50c(35mg，7.1％产率)。1467、ms(esi)m/z:635.5[m+h]+1468、步骤31469、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)-l-谷氨酰胺(50d)1470、根据实施例19步骤2的合成程序合成化合物50d(30mg，粗物质)。1471、ms(esi)m/z:545.5[m+h]+1472、步骤41473、((6s,15s)-15-苄基-24-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-3,7,10,13,16,19,24-七氧代-1-((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)-22-氧杂-2,8,11,14,17,20-六氮杂二十四-6-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(50e)1474、根据实施例38步骤1的合成程序合成化合物50e(32.5mg，43.1％产率)。1475、ms(esi)m/z:1389.9[m+na]+1476、步骤51477、(s)-2-氨基-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)戊二酰胺(50f)1478、根据实施例42步骤3的合成程序合成化合物50f(29.5mg，粗物质)。1479、ms(esi)m/z:1145.8[m+h]+1480、步骤61481、(s)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)戊二酰胺(50)1482、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物50(9.5mg，34.2％产率)。1483、ms(esi)m/z:1354.4[m+h]+1484、实施例511485、1486、步骤11487、(s)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)戊二酰胺(51)1488、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物51(24.2mg，34.5％产率)。1489、ms(esi)m/z:1339.2[m+h]+1490、实施例521491、1492、步骤11493、(2s,3r,4r,5s,6r)-2-(氨基甲基)-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-3,4,5-三醇(52b)1494、向化合物52a(200mg，0.89mmol)于meoh(3ml)中的溶液中添加hcoonh4(226mg，3.58mmol)和pd/c(20mg，10％)。在68℃下搅拌混合物1小时。将h2o(10ml)添加至混合物中并过滤。浓缩滤液，得到粗产物。得到呈白色固体状的化合物52b(210mg，粗物质)。1495、ms(esi)m/z:194.3[m+h]+。1496、步骤21497、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((3ar,4r,6s,6as)-2,2-二甲基-6-(2-氧代-2-((((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)氨基)ethyl)四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)-l-谷氨酸苄酯(52d)1498、根据实施例45a步骤1的合成程序合成52d(152mg，48.2％产率)。1499、ms(esi)m/z:848.7[m+h]+。1500、步骤31501、(2s,3s,4r,5r,6s)-6-((2-((3ar,4r,6s,6as)-6-(((s)-4-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(苄氧基)-5-氧代戊酰胺基)甲基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)乙酰胺基)甲基)-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-甲酸(52e)1502、向化合物52d(152mg，0.18mmol)于thf(4ml)和h2o(2ml)中的溶液中添加tempo(2.8mg，0.018mmol)、kbr(2.1mg，0.018mmol)和nahco3(151mg，1.79mmol)。在0℃下将naclo(953mg，0.90mmol，7％)滴加至混合物中。在室温下搅拌混合物1小时。将混合物调节至ph5。使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化混合物。得到呈白色固体状的化合物52e(115mg，74.7％产率)。1503、ms(esi)m/z:862.6[m+na]+。1504、步骤41505、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((3ar,4r,6s,6as)-6-(2-((((2s,3r,4r,5s,6s)-6-氨基甲酰基-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)-l-谷氨酸苄酯(52f)1506、根据实施例49e步骤3的合成程序合成52f(52mg，45.2％产率)。1507、ms(esi)m/z:861.7[m+h]+。1508、步骤51509、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((3ar,4r,6s,6as)-6-(2-((((2s,3r,4r,5s,6s)-6-氨基甲酰基-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)-l-谷氨酰胺(52g)1510、根据实施例49j步骤7的合成程序合成52g(45mg，粗物质)。1511、ms(esi)m/z:771.6[m+h]+。1512、步骤61513、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((3ar,4r,6s,6as)-6-(2-((((2s,3r,4r,5s,6s)-6-氨基甲酰基-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-2,2-二甲基四氢呋喃并[3,4-d][1,3]间二氧杂环戊烯-4-基)甲基)-l-谷氨酰胺(52h)1514、根据实施例49i步骤6的合成程序合成52h(32mg，71.7％产率)。1515、ms(esi)m/z:731.5[m+h]+。1516、步骤71517、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-((((2s,3r,4r,5s,6s)-6-氨基甲酰基-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-l-谷氨酰胺(52i)1518、根据实施例49l步骤8的合成程序合成52i(24mg，35.3％产率)。1519、ms(esi)m/z:1575.9[m+na]+。1520、步骤81521、((6s,15s)-15-苄基-1-((2r,3s,4r,5s)-5-(2-((((2s,3r,4r,5s,6s)-6-氨基甲酰基-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-24-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-3,7,10,13,16,19,24-七氧代-22-氧杂-2,8,11,14,17,20-六氮杂二十四-6-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(52j)1522、根据实施例49m步骤9的合成程序合成52j(20.6mg，理论产率)。1523、ms(esi)m/z:1354.8[m+na]+。1524、步骤91525、(s)-2-氨基-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-((((2s,3r,4r,5s,6s)-6-氨基甲酰基-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)氨基)-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)戊二酰胺(52)1526、根据实施例34k步骤8的合成程序合成52(7.8mg，32.7％产率)。1527、ms(esi)m/z:1561.9[m+na]+1528、实施例531529、1530、步骤11531、(2s,3s,4r,5r,6s)-6-(((s)-4-((((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-5-(苄氧基)-5-氧代戊酰胺基)甲基)-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-甲酸(53a)1532、向50c(200mg，0.32mmol)于thf(1ml)和水(1ml)中的混合物中添加碳酸氢钠(158.84mg，1.89mmol)。向混合物中添加tempo(9.85mg，0.06mmol)和溴化钾(11.25mg，0.09mmol)。将混合物用冰浴冷却至0℃，滴加次氯酸钠溶液(水溶液，3％～6％氯)(1.03g，0.69mmol)。添加后，将反应混合物真空浓缩(无需加热)以去除有机挥发物。水层用1n hcl酸化直至ph达到2，过滤并通过制备型hplc(fa)柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化滤液，得到53a(137.7mg，67％产率)。1533、ms(esi)m/z:649.8[m+h]+1534、步骤21535、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6s)-6-氨基甲酰基-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)-l-谷氨酸苄酯(53b)1536、向53a(137.7mg，0.21mmol)、pybop(113.78mg，0.22mmol)和hobt(29.55mg，0.22mmol)于dmf(1ml)中的混合物中添加dipea(27.44mg，0.21mmol)和nh3.meoh(7m，0.42mmol，60ul)。使所得黄色混合物在室温下反应1小时。lcms显示53b完全耗尽。通过制备型hplc(fa)柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化混合物，得到53b(61.7mg，45％产率)。1537、ms(esi)m/z:648.5[m+h]+1538、步骤31539、n2-(((9h-芴-9-基)甲氧基)羰基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6s)-6-氨基甲酰基-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)-l-谷氨酰胺(53c)1540、根据实施例19步骤2的合成程序合成化合物53c(30mg，粗物质)。1541、ms(esi)m/z:558.5[m+h]+1542、步骤41543、((6s,15s)-15-苄基-1-((2s,3r,4r,5s,6s)-6-氨基甲酰基-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基)-24-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-3,7,10,13,16,19,24-七氧代-22-氧杂-2,8,11,14,17,20-六氮杂二十四-6-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(53d)1544、根据实施例38步骤1的合成程序合成化合物53d(66.7mg，50.9％产率)。1545、ms(esi)m/z:1402.8[m+na]+1546、步骤51547、(s)-2-氨基-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6s)-6-氨基甲酰基-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)戊二酰胺(53e)1548、根据实施例42步骤3的合成程序合成化合物53e(55.5mg，粗物质)。1549、ms(esi)m/z:1158.9[m+h]+1550、步骤61551、(s)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6s)-6-氨基甲酰基-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)-2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)戊二酰胺(53)1552、向53f(7.91mg，0.035mmol)和hatu(13.30mg，0.035mmol)于dmf(2ml)中的混合物中添加dipea(3.01mg，0.023mmol)。使混合物在室温下反应5分钟。添加53e(27.7mg，粗物质)并在室温下反应10分钟。lcms显示53e完全耗尽。通过制备型hplc(fa)柱：xbridge prepc18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化混合物，得到53(23.9mg，50.0％产率)。1553、ms(esi)m/z:1367.1[m+h]+1554、实施例541555、1556、(s)-n1-((s)-10-苄基-1-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-1,6,9,12,15-五氧代-3-氧杂-5,8,11,14-四氮杂十六-16-基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6s)-6-氨基甲酰基-3,4,5-三羟基四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)-2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)戊二酰胺(54)1557、根据实施例53步骤6的合成程序合成化合物54(21.5mg，45.5％产率)。1558、ms(esi)m/z:1352.3[m+h]+1559、实施例551560、1561、(s)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-7-苄基-1-((3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氧基)-3,6,9,12-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三-13-基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)戊二酰胺(55)1562、根据实施例34步骤9的合成程序合成55(12.5mg，59.8％产率)。1563、ms(esi)m/z:1388.3[m+h]+1564、实施例561565、1566、1567、(11s,19r)-11-苄基-19-(((叔丁基二苯基硅烷基)氧基)甲基)-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十-20-酸苄酯(22h)1568、22h的合成请参考实施例22。1569、ms(esi)m/z:1026.5[m+na]+1570、步骤11571、三乙酸(2r,3s,4s,5r,6r)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((11s,19r)-11-苄基-19-((苄氧基)羰基)-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十-20-基)氧基)四氢-2h-吡喃-3,4,5-三基酯(56a)1572、将22h(127mg，0.17mmol)、56b(62mg，0.15mmol)和分子筛(300mg)溶解于无水dce(20ml)中，并将混合物在25℃下搅拌1小时，随后添加agotf(46mg，0.18mmol)和nis(41mg，0.18mmol)。将所得混合物首先在0℃下搅拌2小时，并进一步在25℃下搅拌16小时。反应完成后，将混合物经由硅藻土过滤，并用饱和na2s2o3水溶液(20ml)和盐水(20ml*2)洗涤滤液。有机层经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物形式的棕色油，其通过快速柱(dcm/meoh＝100/0至85/15)纯化，得到呈白色固体状的56c(32mg，21.1％产率)。1573、ms(esi)m/z:788.6[m+na]+1574、步骤21575、三乙酸(2r,3s,4s,5r,6r)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((11s,19r)-11-苄基-19-((苄氧基)羰基)-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十-20-基)氧基)四氢-2h-吡喃-3,4,5-三基酯(56c)1576、将22h(127mg，0.17mmol)、56b(62mg，0.15mmol)和分子筛(300mg)溶解于无水dce(20ml)中，并将混合物在25℃下搅拌1小时，随后添加agotf(46mg，0.18mmol)和nis(41mg，0.18mmol)。将所得混合物首先在0℃下搅拌2小时，并进一步在25℃下搅拌16小时。反应完成后，将混合物经由硅藻土过滤，并用饱和na2s2o3水溶液(20ml)和盐水(20ml*2)洗涤滤液。有机层经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物形式的棕色油，其通过快速柱(dcm/meoh＝100/0至85/15)纯化，得到呈白色固体状的56c(32mg，21.1％产率)。1577、ms(esi)m/z:1118.7[m+na]+1578、步骤31579、(11s,19r)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-19-((((2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-三乙酰氧基-6-(乙酰氧基甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)甲基)-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十-20-酸(56d)1580、根据实施例22步骤7的合成程序合成56d(30mg，粗物质)。1581、ms(esi)m/z:1028.8[m+na]+1582、步骤41583、三乙酸(2r,3s,4s,5r,6r)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(((11s,19r)-11-苄基-19-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十-20-基)氧基)四氢-2h-吡喃-3,4,5-三基酯(56f)1584、根据实施例22步骤8的合成程序合成56f(33mg，77.7％产率)。1585、ms(esi)m/z:1446.8[m+na]+1586、步骤51587、(r)-2-(((s)-13-氨基-7-苄基-3,6,9,12-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三基)氧基)-n-((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)-3-(((2r,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)丙酰胺(56g)1588、将56f(30mg，0.021mmol)溶解于无水meoh(7ml)中，然后添加meona水溶液(1m于meoh中，0.011mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3小时。反应完成后，将反应混合物用阳离子交换树脂中和并通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到呈白色固体状的56g(9mg，41.3％产率)。1589、ms(esi)m/z:1033.7[m+h]+1590、步骤61591、(r)-2-(((s)-7-苄基-20-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)-3,6,9,12,15,19-六氧代-2,5,8,11,14,18-六氮杂二十基)氧基)-n-((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)-3-(((2r,3r,4s,5r,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)氧基)丙酰胺(56)1592、将56g(8mg，0.0077mmol)溶解于dmf(0.5ml)中，然后添加56h(13mg，0.039mmol)。将混合物在25℃下搅拌15分钟并通过制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化，得到呈白色固体状的56(6.5mg，67.6％产率)。1593、ms(esi)m/z:1263.8[m+na]+1594、实施例571595、1596、步骤11597、((6s,9s,12s)-1-((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-18-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-9-异丙基-3,7,10,13,18-五氧代-12-(3-脲基丙基)-16-氧杂-2,8,11,14-四氮杂十八-6-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(57a)1598、根据实施例38步骤1的合成程序合成化合物57a(64.0mg，44.4％产率)。1599、ms(esi)m/z:1325.0[m+na]+1600、步骤21601、(s)-2-氨基-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-1-(((s)-1-(((2-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)戊二酰胺(57b)1602、根据实施例42步骤3的合成程序合成化合物57b(60.0mg，粗物质)。1603、ms(esi)m/z:1080.8[m+h]+1604、步骤31605、(s)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)-n1-((s)-1-(((s)-1-(((2-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)戊二酰胺(50)1606、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物57(16.1mg，45.0％产率)。1607、ms(esi)m/z:1289.4[m+h]+1608、实施例581609、1610、步骤11611、乙酸(5s,8s)-1-(9h-芴-9-基)-5-异丙基-8-甲基-3,6,9-三氧代-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十一-11-基酯(58b)1612、根据实施例22g步骤5的合成程序合成58b(850mg，82.5％产率)。1613、步骤21614、(5s,8s)-1-(9h-芴-9-基)-5-异丙基-8-甲基-3,6,9-三氧代-2,12-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四-14-酸苄酯(58d)1615、根据实施例22h步骤6的合成程序合成58d(450mg，92％产率)。1616、ms(esi)m/z:610.5[m+na]+。1617、步骤31618、(5s,8s)-1-(9h-芴-9-基)-5-异丙基-8-甲基-3,6,9-三氧代-2,12-二氧杂-4,7,10-三氮杂十四-14-酸(58e)1619、根据实施例34f步骤4的合成程序合成58e(215mg，理论产率)。1620、ms(esi)m/z:521.5[m+na]+。1621、步骤41622、((s)-1-(((s)-1-(((2-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(58g)1623、根据实施例22k步骤8的合成程序合成58g(72mg，理论产率)。1624、ms(esi)m/z:937.7[m+na]+。1625、步骤51626、(s)-2-氨基-n-((s)-1-(((2-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)-3-甲基丁酰胺(58h)1627、根据实施例34k步骤8的合成程序合成58h(54.5mg，理论产率)。1628、ms(esi)m/z:693.6[m+h]+。1629、步骤61630、((6s,9s,12s)-1-((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-18-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-9-异丙基-12-甲基-3,7,10,13,18-五氧代-16-氧杂-2,8,11,14-四氮杂十八-6-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(58j)1631、根据实施例34j步骤7的合成程序合成58j(42mg，43.9％产率)。1632、ms(esi)m/z:1239.0[m+na]+。1633、步骤71634、(s)-2-氨基-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-1-(((s)-1-(((2-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)戊二酰胺(58k)1635、根据实施例34k步骤8的合成程序合成58k(34.3mg，理论产率)。1636、ms(esi)m/z:994.9[m+h]+。1637、步骤81638、(s)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)-n1-((s)-1-(((s)-1-(((2-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)戊二酰胺(58)1639、根据实施例39步骤4的合成程序合成58(22.1mg，53.1％产率)。1640、ms(esi)m/z:1225.2[m+na]+。1641、实施例591642、1643、步骤11644、3-(((5s,8s)-1-(9h-芴-9-基)-5-异丙基-3,6,9-三氧代-8-(3-脲基丙基)-2-氧杂-4,7,10-三氮杂十一-11-基)氧基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸甲酯(59a)1645、向27b(300mg，0.53mmol)、24a(188mg，1.32mmol)和干燥分子筛(1.2g)于无水thf(6ml)中的混合物中添加三氟甲磺酸钪(392mg，0.79mmol)。将所得混合物在室温下搅拌过夜。将溶液经由硅藻土过滤并用饱和nahco3水溶液(15ml)淬灭。水相用乙酸乙酯(20ml*3)萃取。合并的有机层经无水硫酸钠干燥。过滤和蒸发后，残余物通过快速柱(洗脱剂：dcm/meoh，100/0至10/1(v/v))纯化，得到59a(250mg，72.8％产率)。1646、ms(esi)m/z:672.6[m+na]+1647、步骤21648、3-(((s)-2-((s)-2-氨基-3-甲基丁酰胺基)-5ureido戊酰胺基)甲氧基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸甲酯(59b)1649、向59a(120mg，0.18mmol)于dmf(3ml)中的溶液中添加二乙胺(203mg，2.77mmol)。在室温下搅拌反应物1小时。将反应溶液用石油醚(3ml*3)萃取。将水溶液浓缩，得到标题化合物59b(77mg，粗物质)，其未经进一步纯化即直接使用。1650、ms(esi)m/z:450.2[m+na]+1651、步骤31652、3-(((5s,8s,11s)-5-(3-((((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(9h-芴-9-基)-8-异丙基-3,6,9,12-四氧代-11-(3-脲基丙基)-2-氧杂-4,7,10,13-四氮杂十四-14-基)氧基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸甲酯(59c)1653、向20(107mg，0.20mmol)和tstu(60mg，0.20mmol)于无水dmf(3ml)中的溶液中添加diea(90μl，0.54mmol)。将所得混合物在室温下搅拌10分钟。添加59b(77mg，0.18mmol)。在室温下搅拌反应物1小时。将溶液过滤并通过制备型hplc(含0.1％ fa的水/mecn)纯化，冻干，得到呈白色固体状的标题化合物59c(50mg，29.2％产率)。1654、ms(esi)m/z:973.8[m+na]+1655、步骤41656、3-(((5s,8s,11s)-5-(3-((((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(9h-芴-9-基)-8-异丙基-3,6,9,12-四氧代-11-(3-脲基丙基)-2-氧杂-4,7,10,13-四氮杂十四-14-基)氧基)双环[1.1.1]戊烷-1-甲酸(59d)1657、向59c(50mg，0.05mmol)于thf(1ml)和水(1ml)中的溶液中添加氢氧化锂(1n水溶液)(0.75ml，0.75mmol)。在0℃下搅拌反应物5小时。将水溶液浓缩，得到标题化合物59d(46mg，粗物质)，其未经进一步纯化即直接使用。1658、ms(esi)m/z:959.7[m+na]+1659、步骤51660、((6s,9s,12s)-1-氨基-17-((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-6-((((3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氧基)甲基)氨基甲酰基)-9-异丙基-1,8,11,15-四氧代-2,7,10,16-四氮杂十七-12-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(59e)1661、向59d(46mg，0.05mmol)、甲磺酸依沙替康(29mg，0.05mmol)和hatu(19.6mg，0.05mmol)于无水dmf(2ml)中的溶液中添加diea(30μl，0.15mmol)。将反应物在室温下搅拌1分钟。将溶液过滤并通过制备型hplc(含0.1％ fa的水/mecn)纯化，冻干，得到呈白色固体状的标题化合物59e(40mg，60.2％产率)。1662、ms(esi)m/z:1377.9[m+na]+1663、步骤61664、(s)-2-氨基-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-1-(((s)-1-((((3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氧基)甲基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)戊二酰胺(59f)1665、向59e(40mg，0.03mmol)于dmf(2ml)中的溶液中添加二乙胺(202.8mg，2.77mmol)。在室温下搅拌反应物1小时。将反应溶液用石油醚(3ml*3)萃取。将水溶液浓缩，得到标题化合物59f(31mg，粗物质)，其未经进一步纯化即直接使用。1666、ms(esi)m/z:1132.8[m+h]+1667、步骤71668、(s)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)-n1-((s)-1-(((s)-1-((((3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基甲酰基)双环[1.1.1]戊-1-基)氧基)甲基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)戊二酰胺(59)1669、向59f(31mg，0.05mmol)、甲磺酸依沙替康(6.8mg，0.03mmol)和hatu(10.94mg，0.03mmol)于无水dmf(1ml)中的溶液中添加diea(10μl，0.04mmol)。将反应物在室温下搅拌15分钟。将溶液过滤并通过制备型hplc(含0.1％ fa的水/mecn)纯化，冻干，得到呈白色固体状的标题化合物59(12.6mg，34.3％产率)。1670、ms(esi)m/z:1362.8[m+na]+1671、实施例601672、1673、步骤11674、(s)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-n1-((s)-1-(((s)-1-(((2-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2-氧代乙氧基)甲基)氨基)-1-氧代-5-脲基戊-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)戊二酰胺(67)1675、根据实施例2步骤8的合成程序合成化合物60(18.0mg，33.9％产率)。1676、ms(esi)m/z:1274.3[m+h]+1677、实施例611678、1679、根据实施例34步骤9的合成程序合成61(56.4mg，79.1％产率)。ms(esi)m/z:1209.9[m+na]+。1680、实施例621681、1682、实施例621683、根据实施例9的合成程序合成62(18.8mg，45.1％产率)。1684、ms(esi)m/z:1918.0[m+h]+。1685、实施例631686、1687、实施例631688、根据实施例9的合成程序合成63(24.3mg，58.1％产率)。1689、ms(esi)m/z:2486.5[m+h]+。1690、实施例641691、1692、实施例641693、根据实施例9的合成程序合成化合物64(9.8mg，35.2％产率)。ms(esi)m/z:2771.1[m+h]+。1694、实施例651695、1696、按照实施例9和50的合成程序合成化合物65(22.8mg，41.8％产率)。ms(esi)m/z:2502.9[m+h]+。1697、实施例661698、1699、步骤11700、n-((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)-3-羟基-2,2-二甲基丙酰胺(66)1701、向66a(5mg，0.042mmol)和hatu(16mg，0.042mmol)于d mf(1ml)中的混合物中添加dipea(21μl，16mg，0.13mmol)和66b(购自shanghai haoyuan medchemexpress co.ltd,23mg,0.043mmol)。将所得棕色混合物在室温下搅拌2小时。反应完成后，混合物通过制备型hplc(tfa)(方法：柱：xbridge prep c18obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％ tfa)：b-乙腈；流速：20ml/min纯化，将洗脱份冻干，得到呈白色粉末状的66(15mg，65.5％产率)。1702、1h nmr(400mhz,dmso):δ8.00(d,j＝8.4hz,1h),7.79(d,j＝11.2hz,1h),7.31(s,1h),6.52(s,1h),5.59-5.54(m,1h),5.42(s,2h),5.18(q,j＝19.2hz,2h),4.87(t,j＝5.2hz,1h),3.45(dd,j＝10.2,4.8hz,1h),3.41-3.28(m,1h),3.15(t,j＝5.6hz,2h),2.40(s,3h),2.24-2.07(m,2h),1.92-1.80(m,2h),1.11(d,j＝7.6hz,6h),0.87(t,j＝7.2hz,3h)。ms(esi)m/z:536.4[m+h]+1703、实施例671704、1705、步骤11706、(s)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-20,20-二甲基-3,6,9,12,15-五氧代-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十一-21-酸苄酯(67c)1707、向67a(250mg，0.40mmol)和67b(83mg，0.40mmol)于thf(5ml)中的溶液中添加分子筛。将混合物在室温下搅拌10分钟，接着添加sc(otf)3(195mg，0.40mmol)，并在室温下再反应16小时。将悬浮混合物经由硅藻土垫过滤，并将滤饼用thf(10ml)洗涤，接着通过添加饱和nahco3(10ml)将滤液淬灭，用etoac(30ml*2)萃取。分离后，将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并将滤液真空浓缩，得到残余物。将其通过硅胶柱色谱(a-dcm；b-meoh，meoh/dcm＝0/100至95/5)纯化，得到67c(90mg，29.2％产率)。1708、ms(esi)m/z:800.5[m+na]+1709、步骤21710、(s)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-20,20-二甲基-3,6,9,12,15-五氧代-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十一-21-酸(67d)1711、向67c(80mg，0.10mmol)于meoh(3ml)中的溶液中添加湿pd/c(20mg)。将黑色悬浮液用h2气球吹扫三次，接着在h2气球下在室温下反应2小时。反应完成后，将黑色悬浮液经由硅藻土垫滤出并用meoh洗涤滤饼，将合并的有机层真空浓缩，得到67d(61mg，84.8％产率)。1712、ms(esi)m/z:710.4[m+na]+1713、步骤31714、((s)-7-苄基-17-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-16,16-二甲基-2,5,8,11,17-五氧代-14-氧杂-3,6,9,12-四氮杂十七基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(67f)1715、向67d(60mg，0.087mmol)和hatu(33mg，0.087mmol)于dmf(2ml)中的混合物中添加dipea(43μl，34mg，0.26mmol)。使混合物在室温下反应10分钟。添加67e(46mg，0.087mmol)并在相同温度下再反应1小时。反应完成后，过滤混合物并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min)纯化滤液，得到67f(85mg，88.2％产率)。1716、ms(esi)m/z:1105.5[m+h]+1717、步骤41718、3-(((s)-13-氨基-7-苄基-3,6,9,12-四氧代-2,5,8,11-四氮杂十三基)氧基)-n-((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)-2,2-二甲基丙酰胺(67g)1719、向67f(85mg，0.062mmol)于dmf(2ml)中的溶液中添加et2n(64μl，46mg，0.62mmol)。在室温下搅拌混合物0.5小时。反应完成后。将混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的67g(86mg，粗物质)。1720、ms(esi)m/z:883.5[m+h]+1721、步骤61722、((6s,15s)-15-苄基-25-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-24,24-二甲基-3,7,10,13,16,19,25-七氧代-1-((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)-22-氧杂-2,8,11,14,17,20-六氮杂二十五-6-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(67i)1723、向67g(86mg，粗物质)和67h(43mg，0.079mmol)于dmf(1.5ml)中的溶液中添加dipea(26μl，21mg，0.16mmol)。在室温下搅拌混合物1.5小时。反应完成后。混合物通过制备型hplc(fa)(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min纯化，将洗脱份冻干，得到呈白色粉末状的67i(70mg，62.6％产率)。1724、ms(esi)m/z:1410.7[m+h]+1725、步骤71726、(s)-2-氨基-n1-((s)-7-苄基-17-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-16,16-二甲基-2,5,8,11,17-五氧代-14-氧杂-3,6,9,12-四氮杂十七基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)戊二酰胺(67j)1727、向67i(70mg，0.050mmol)于dmf(1ml)中的溶液中添加et2n(51μl，36mg，0.50mmol)。在室温下搅拌混合物0.5小时。反应完成后。将混合物真空浓缩，得到呈黄色固体状的67j(71mg，粗物质)。1728、ms(esi)m/z:1188.2[m+h]+1729、步骤81730、(s)-n1-((s)-7-苄基-17-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-16,16-二甲基-2,5,8,11,17-五氧代-14-氧杂-3,6,9,12-四氮杂十七基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)戊二酰胺(67)1731、向67k(19mg)于dmf(3ml)中的溶液中添加hatu(34mg，0.088mmol)和dipea(10μl，7.6mg，0.059mmol)。将所得黄色溶液在室温下搅拌5分钟，接着添加67j(71mg，粗物质)。将混合物在室温下搅拌60分钟。反应完成后。混合物通过制备型hplc(fa)(方法：柱：xbridgeprep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min纯化，将洗脱份冻干，得到呈白色粉末状的67(32mg，26.3％产率)。1732、ms(esi)m/z:1381.1[m+h]+1733、实施例68和691734、1735、步骤12-氟-2-甲基丙二酸二乙酯(68b)1736、将化合物68a(10.0g，57.4mmol)于thf(200ml)中的溶液冷却至0℃。将60％ nah油溶液(3.21g，80.37mmol)逐份添加至混合物中，在0℃下搅拌30分钟。接着在0℃下将n-氟-n-(苯磺酰基)苯磺酰胺(nsfi，19.91g，63.2mmol)逐份添加至混合物中。接着升温至室温并搅拌16小时。反应完成后，过滤悬浮液并浓缩滤液。将pe(100ml)添加至残余物中，过滤沉淀物并浓缩滤液，得到呈淡黄色油状的化合物68b(12.5g，粗物质)。1737、1h nmr(400mhz,cdcl3)δ4.30(q,j＝7.2hz,4h),1.79(d,j＝22.0hz,3h),1.31(t,j＝7.2hz,6h)；19f nmr(376mhz,cdcl3)δ-157.50。1738、步骤23-乙氧基-2-氟-2-甲基-3-氧代丙酸(68c)1739、在0℃下向化合物68b(1.0g，5.2mmol)于etoh(5ml)中的溶液中滴加koh(321mg)于h2o(50ul)和etoh(2ml)中的溶液。将混合物在室温下搅拌2小时。将混合物用20(ml)稀释，用dcm(20ml*3)洗涤。用1n hcl将水溶液调节至ph＝3。用ea(50ml*3)萃取。将有机层干燥合并且经无水na2so4干燥，过滤并浓缩，得到呈无色油状的化合物68c(470mg，55.0％产率)。1740、1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.31(br s,1h),4.32(q,j＝7.2hz,2h),1.83(d,j＝22.0hz,3h),1.33(t,j＝7.2hz,3h)；19f nmr(376mhz,cdcl3)δ-157.59。1741、步骤32-氟-3-羟基-2-甲基丙酸(68d)1742、在0℃下向化合物68c(200mg，1.22mmol)于异丙醇(4ml)中的溶液中添加2m libh4(1.22ml，2.44mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时。在0℃下用2n hcl(1.22ml)逐滴淬灭混合物。用h2o(10ml)稀释，用ea(50ml*3)萃取。将有机层合并且经无水na2so4干燥，过滤并浓缩，得到呈无色油状的化合物68d(92mg，61.7％产率)。1743、1h nmr(400mhz,cdcl3)δ4.01-3.81(m,2h),1.58(d,j＝21.2hz,3h)；19f nmr(376mhz,cdcl3)δ-163.98。1744、步骤41745、n-((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)-2-氟-3-羟基-2-甲基丙酰胺(68和69)1746、向化合物68d(23mg，0.19mmol)于dmf(2ml)中的溶液中添加化合物68e(50mg，0.094mmol)、hatu(54mg，141mmol)和diea(36mg，0.28mmol)。在室温下搅拌混合物1小时。混合物通过制备型hplc(fa)(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min纯化，将洗脱份冻干，得到两种异构体。1747、异构体1：白色固体，68(11mg，21.9％产率)。uplc-ms，rt＝3.52min。1748、1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ9.06(dd,j＝9.0,2.8hz,1h),8.00(d,j＝10.9hz,1h),7.54(s,1h),6.75(s,1h),5.82(d,j＝8.0hz,1h),5.65(s,2h),5.43(dt,j＝77.8,12.4hz,3h),4.17-3.91(m,1h),3.83(ddd,j＝18.0,12.4,5.6hz,1h),3.40-3.27(m,1h),2.62(s,3h),2.50-2.34(m,2h),2.22-1.98(m,2h),1.81(d,j＝21.4hz,3h),1.11(t,j＝7.2hz,3h)；ms(esi)m/z:540.3[m+h]+。1749、异构体2：白色固体，69(8.4mg，16.6％产率)。uplc-ms，rt＝3.86min。1750、1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.72(dd,j＝8.4,2.4hz,1h),7.78(d,j＝11.2hz,1h),7.31(s,1h),6.52(s,1h),5.58(d,j＝8.0hz,1h),5.42(s,2h),5.32-5.05(m,3h),3.83(dd,j＝26.8,12.0hz,1h),3.61(dd,j＝21.6,12.0hz,1h),3.22-3.07(m,2h),2.46-2.30(m,3h),2.28-2.05(m,2h),2.02-1.74(m,2h),1.45(d,j＝21.4hz,3h),0.87(t,j＝7.2hz,3h)；ms(esi)m/z:540.3[m+h]+。1751、实施例70和711752、1753、步骤12-氟-3-羟基-2-甲基丙酸苄酯(70b)1754、向化合物70a(450mg，3.69mmol)于dmf(10ml)中的溶液中添加k2co3(1.02g，7.37mmol)和bnbr(945mg，5.53mmol)。将混合物在35℃下搅拌16小时。将混合物用ea(200ml)稀释，用盐水(50ml*4)洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱(洗脱剂：pe/ea＝100/0至30/70)纯化，得到呈无色油状的70b(270mg，34.5％产率)。1755、1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.42-7.33(m,5h),5.26(s,2h),4.06-3.61(m,2h),2.08(br s,1h),1.55(d,j＝21.2hz,3h)。1756、步骤21757、乙酸(s)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2-氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂十七-17-基酯(70d)1758、向化合物70c(5.00g，8.12mmol)于dmf(65ml)中的溶液中添加cu(oac)2(560mg，3.09mmol)、pb(oac)4(4.11g，9.25mmol)和hoac(1.11g，18.44mmol)。将混合物载65℃下在n2气氛下搅拌2小时。将混合物浓缩至原体积的1/4，倒入冰水(150ml)中并搅拌30分钟。过滤固体并与甲苯(20ml*4)共蒸发，得到呈灰白色固体状的化合物70d(5.20g，粗物质)。1759、ms(esi)m/z:652.3[m+na]+1760、步骤31761、(11s)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-20-氟-20-甲基-3,6,9,12,15-五氧代-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十一-21-酸苄酯(70e)1762、向70d(250mg，0.40mmol)、70b(253mg，1.19mmol)和干燥分子筛(500mg)于无水thf(8ml)中的混合物中添加三氟甲磺酸钪(293mg，0.60mmol)，并在室温下在n2气氛下搅拌过夜。将溶液经由硅藻土过滤，用ea(100ml)稀释，用饱和nahco3(40ml*3)洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱(洗脱剂：pe/ea＝100/0至50/50)纯化，得到70e(210mg，67.7％产率)。1763、ms(esi)m/z:652.3[m+na]+1764、步骤41765、(7s)-1-氨基-7-苄基-16-氟-16-甲基-2,5,8,11-四氧代-14-氧杂-3,6,9,12-四氮杂十七-17-酸苄酯(70f)1766、向化合物70e(210mg，0.27mmol)于dmf(4ml)中的溶液中添加et2nh(392mg，5.37mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物在高真空下浓缩并与甲苯(3ml*3)共蒸发，得到呈棕色固体状的70f(210mg，粗物质)。1767、ms(esi)m/z:582.3[m+na]+1768、步骤51769、(5s,14s)-14-苄基-1-(9h-芴-9-基)-23-氟-23-甲基-3,6,9,12,15,18-六氧代-5-(3-氧代-3-((((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)氨基)丙基)-2,21-二氧杂-4,7,10,13,16,19-六氮杂二十四-24-酸苄酯(70h)1770、向化合物70f(210mg，粗物质)于dmf(4ml)中的溶液中添加70g(161mg，0.29mol)、hatu(153mg，0.40mmol)和diea(69mg，0.63mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。过滤混合物并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min纯化滤液，得到呈白色固体状的70h(154mg，52.9％产率)。1771、ms(esi)m/z:1108.7[m+na]+1772、步骤61773、(5s,14s)-14-苄基-1-(9h-芴-9-基)-23-氟-23-甲基-3,6,9,12,15,18-六氧代-5-(3-氧代-3-((((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)氨基)丙基)-2,21-二氧杂-4,7,10,13,16,19-六氮杂二十四-24-酸(70i)1774、向化合物70h(154mg，0.14mmol)于meoh(6ml)中的溶液中添加pd/c(10％，30mg)。将混合物在h2气氛(15psi)下搅拌4小时。将混合物经由硅藻土垫过滤，浓缩，得到呈白色固体状的化合物70i(141mg，100％产率)。1775、ms(esi)m/z:1018.6[m+na]+1776、步骤71777、((6s,15s)-15-苄基-25-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-24-氟-24-甲基-3,7,10,13,16,19,25-七氧代-1-((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)-22-氧杂-2,8,11,14,17,20-六氮杂二十五-6-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(70j和70k)1778、向化合物70i(141mg，0.15)于dmf(4ml)中的溶液中添加68e(86mg，0.16mol)、hatu(88mg，0.23mmol)和diea(100mg，0.77mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。过滤混合物并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％三氟乙酸)：b-乙腈；流速：20ml/min纯化滤液，得到两种异构体。1779、得到呈白色固体状的化合物70j(62mg，28.3％产率)。1780、ms(esi)m/z:1436.7[m+na]+1781、得到呈白色固体状的化合物70k(64mg，29.7％产率)。1782、ms(esi)m/z:1436.7[m+na]+1783、步骤81784、(2s)-2-氨基-n1-((7s)-7-苄基-17-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-16-氟-16-甲基-2,5,8,11,17-五氧代-14-氧杂-3,6,9,12-四氮杂十七基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)戊二酰胺(70l)1785、向化合物70j(62mg，0.44mmol)于dmf(4ml)中的溶液中添加et2nh(64mg，0.88mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物在高真空下浓缩并与甲苯(3ml*3)共蒸发，得到呈棕色固体状的70l(62mg，粗物质)。1786、ms(esi)m/z:1191.7[m+na]+1787、步骤91788、(2s)-n1-((7s)-7-苄基-17-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-16-氟-16-甲基-2,5,8,11,17-五氧代-14-氧杂-3,6,9,12-四氮杂十七基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)戊二酰胺(70)1789、向化合物70l(52mg，0.44mmol)于dmf(3ml)中的溶液中添加70m(19mg，0.088mol)、hatu(33mg，0.088mmol)和diea(11mg，0.088mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。过滤混合物并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％三氟乙酸)：b-乙腈；流速：20ml/min纯化滤液，得到呈白色固体状的化合物70(18.4mg，36.2％产率)。1790、1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.91(d,j＝9.2hz,1h),8.59(t,j＝6.8hz,1h),8.33(t,j＝5.8hz,1h),8.12(d,j＝7.2hz,2h),8.03(t,j＝7.6hz,2h),7.77(d,j＝10.8hz,2h),7.30(s,1h),7.27-7.21(m,4h),7.20-7.11(m,1h),7.00(d,j＝8.4hz,2h),6.52(s,1h),5.58(d,j＝7.8hz,1h),5.41(s,2h),5.15(dd,j＝63.4,18.8hz,2h),4.99(d,j＝5.4hz,1h),4.89(dd,j＝6.4,5.2hz,2h),4.62(d,j＝6.8hz,2h),4.51(dd,j＝12.8,9.2hz,1h),4.38(dd,j＝7.6,4.6hz,1h),4.20(d,j＝6.0hz,1h),3.37(dt,j＝13.8,6.8hz,4h),3.25(d,j＝18.0hz,2h),3.09(ddd,j＝20.8,13.6,9.2hz,5h),3.00-2.64(m,5h),2.35(d,j＝18.8hz,4h),2.26-1.94(m,7h),1.87(dt,j＝15.6,7.2hz,3h),1.73(d,j＝8.0hz,1h),1.61(d,j＝21.8hz,3h),1.52-1.35(m,4h),1.31-1.09(m,3h),0.87(t,j＝7.2hz,3h)；ms(esi)m/z:1406.7[m+na]+；uplc-ms保留时间:3.99min。1791、步骤101792、(2s)-2-氨基-n1-((7s)-7-苄基-17-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-16-氟-16-甲基-2,5,8,11,17-五氧代-14-氧杂-3,6,9,12-四氮杂十七基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)戊二酰胺(70n)1793、向化合物70k(65mg，0.46mmol)于dmf(4ml)中的溶液中添加et2nh(67mg，0.92mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物在高真空下浓缩并与甲苯(3ml*3)共蒸发，得到呈棕色固体状的70n(65mg，粗物质)。1794、ms(esi)m/z:1191.8[m+na]+1795、步骤111796、(2s)-n1-((7s)-7-苄基-17-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-16-氟-16-甲基-2,5,8,11,17-五氧代-14-氧杂-3,6,9,12-四氮杂十七基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)戊二酰胺(71)1797、向化合物70n(55mg，0.46mmol)于dmf(3ml)中的溶液中添加70m(19mg，0.092mol)、hatu(35mg，0.092mmol)和diea(12mg，0.092mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。过滤混合物并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％三氟乙酸)：b-乙腈；流速：20ml/min纯化滤液，得到呈白色固体状的化合物71(21mg，42.2％产率)。1798、1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.87(d,j＝6.4hz,1h),8.57(t,j＝6.8hz,1h),8.34(t,j＝6.0hz,1h),8.13(t,j＝7.2hz,2h),8.03(d,j＝7.6hz,2h),7.79(t,j＝9.6hz,2h),7.35(s,1h),7.30-7.18(m,4h),7.18-7.10(m,1h),7.00(d,j＝1.6hz,2h),6.55(s,1h),5.58(d,j＝8.0hz,1h),5.46(q,j＝16.4hz,2h),5.23(q,j＝19.2hz,2h),5.01(d,j＝5.4hz,1h),4.91(dd,j＝6.4,5.2hz,2h),4.74(ddd,j＝29.2,10.3,6.8hz,2h),4.54(dd,j＝13.2,8.8hz,1h),4.40(dd,j＝7.6,4.4hz,1h),4.28-4.12(m,1h),3.90(dd,j＝30.0,11.2hz,1h),3.80-3.55(m,8h),3.28-2.95(m,8h),2.89(td,j＝9.0,5.2hz,2h),2.78(dd,j＝13.8,9.8hz,1h),2.37(d,j＝24.2hz,4h),2.25-2.04(m,6h),1.99-1.80(m,3h),1.80-1.68(m,1h),1.58-1.37(m,8h),1.36-1.08(m,3h),0.89(t,j＝7.2hz,3h)；ms(esi)m/z:1406.7[m+na]+；uplc-ms保留时间:4.25min。1799、实施例721800、1801、步骤11802、向化合物72b(50mg，0.094mmol)于meoh(2ml)中的溶液中添加72a(85mg，0.28mmol，30％水溶液)、dmt-mm(78mg，0.28mmol)和diea(36mg，0.28mmol)。在室温下搅拌混合物2小时。过滤混合物并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um19*250mm；流动相：a-水(0.1％三氟乙酸)：b-乙腈；流速：20ml/min纯化滤液，得到呈白色固体状的化合物72(28.3mg，59.3％产率)。1803、1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.45(d,j＝8.8hz,1h),7.80(d,j＝11.2hz,1h),7.31(s,1h),6.53(s,1h),5.65-5.51(m,1h),5.43(s,2h),5.29-5.09(m,2h),4.60(t,j＝5.2hz,1h),3.67(dd,j＝11.2,5.6hz,1h),3.18(s,1h),2.40(s,2h),2.32(t,j＝6.4hz,1h),2.22-2.04(m,1h),1.95-1.71(m,1h),0.87(t,j＝7.2hz,2h)；ms(esi)m/z:508.3[m+h]+；uplc-ms保留时间:3.28min。1804、实施例731805、1806、1807、步骤13-羟基丙酸苄酯(73b)1808、将化合物73a(1g，3.3mmol，30％的h2o溶液)和koh(187mg，3.3mmol)在室温下搅拌30分钟，将混合物真空浓缩，得到白色固体。将固体悬浮于dmf(10ml)中，在室温下经由注射器添加bnbr(570mg，3.3mmol)。在80℃下搅拌5小时后，将反应混合物真空浓缩。残余物通过硅胶柱色谱(洗脱剂：pe/ea＝100/0至30/70)纯化，得到呈无色油状的标题化合物73b(420mg，70％产率)。1809、1h nmr(400mhz,cdcl3)δ7.39-7.33(m,5h),5.16(s,2h),3.88(t,j＝5.6h,2h),2.66(t,j＝5.6h,2h),2.38(br s,1h)。1810、步骤21811、(s)-11-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15-五氧代-2,18-二氧杂-4,7,10,13,16-五氮杂二十一-21-酸苄酯(73c)1812、根据实施例70步骤3的合成程序合成化合物73c(1.2g，83.9％产率)。1813、ms(esi)m/z:773.5[m+na]+1814、步骤31815、(s)-1-氨基-7-苄基-2,5,8,11-四氧代-14-氧杂-3,6,9,12-四氮杂十七-17-酸苄酯(73d)1816、根据实施例70步骤4的合成程序合成化合物73d(150mg，粗物质)。1817、ms(esi)m/z:528.3[m+h]+1818、步骤41819、(5s,14s)-14-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15,18-六氧代-5-(3-氧代-3-((((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)氨基)丙基)-2,21-二氧杂-4,7,10,13,16,19-六氮杂二十四-24-酸苄酯(73e)1820、根据实施例70步骤5的合成程序合成化合物73e(170mg，80.9％产率)。1821、ms(esi)m/z:1076.6[m+na]+1822、步骤51823、(5s,14s)-14-苄基-1-(9h-芴-9-基)-3,6,9,12,15,18-六氧代-5-(3-氧代-3-((((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)氨基)丙基)-2,21-二氧杂-4,7,10,13,16,19-六氮杂二十四-24-酸(73f)1824、根据实施例70步骤6的合成程序合成化合物73f(150mg，粗物质)。1825、ms(esi)m/z:986.5[m+na]+1826、步骤61827、((6s,15s)-15-苄基-25-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-3,7,10,13,16,19,25-七氧代-1-((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)-22-氧杂-2,8,11,14,17,20-六氮杂二十五-6-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(73g)1828、根据实施例70步骤7的合成程序合成化合物73g(190mg，88.4％产率)。1829、ms(esi)m/z:1404.5[m+na]+1830、步骤71831、(s)-2-氨基-n1-((s)-7-苄基-17-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2,5,8,11,17-五氧代-14-氧杂-3,6,9,12-四氮杂十七基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)戊二酰胺(73h)1832、根据实施例70步骤8的合成程序合成化合物73g(190mg，粗物质)。1833、步骤81834、(s)-n1-((s)-7-苄基-17-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-2,5,8,11,17-五氧代-14-氧杂-3,6,9,12-四氮杂十七基)-2-(6-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)己酰胺基)-n5-(((2s,3r,4r,5s,6r)-3,4,5-三羟基-6-(羟甲基)四氢-2h-吡喃-2-基)甲基)戊二酰胺(73)1835、根据实施例70步骤9的合成程序合成化合物73(50.3mg，54.1％产率)。1836、1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.51(d,j＝9.2hz,2h),8.32(s,1h),8.13(d,j＝8.0hz,2h),8.03(d,j＝7.2hz,2h),7.80(d,j＝11.2hz,2h),7.32(s,1h),7.28-7.19(m,4h),7.17(d,j＝6.6hz,1h),7.00(d,j＝8.0hz,2h),6.54(s,1h),5.56(d,j＝8.4hz,1h),5.43(s,2h),5.22(d,j＝4.8hz,2h),5.01(d,j＝5.2hz,1h),4.94-4.84(m,2h),4.65-4.44(m,3h),4.43-4.33(m,1h),4.19(d,j＝6.0hz,1h),3.84-3.51(m,10h),3.22-2.93(m,8h),2.88(s,2h),2.83-2.70(m,1h),2.37(d,j＝29.2hz,6h),2.10(dd,j＝14.6,7.3hz,7h),1.97-1.78(m,3h),1.72(d,j＝8.0hz,1h),1.59-1.37(m,4h),1.22-1.10(m,2h),0.87(t,j＝7.2hz,3h)。1837、ms(esi)m/z:1374.9[m+na]+；uplc-ms保留时间:3.84min。1838、实施例741839、1840、步骤11841、(5s,8s)-1-(9h-芴-9-基)-5-异丙基-8-甲基-3,6,9-三氧代-2,12-二氧杂-4,7,10-三氮杂十五-15-酸苄酯(74b)1842、向58b(750mg，1.59mmol)、74a(842mg，4.68mmol)和干燥分子筛(2000mg)于无水thf(25ml)中的混合物中添加三氟甲磺酸钪(938mg，1.91mmol)，在室温下在n2气氛下搅拌过夜。将溶液经由硅藻土过滤，用ea(100ml)稀释，用饱和nahco3(60ml*3)洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤并浓缩。残余物通过硅胶柱色谱(洗脱剂：dcm/meoh＝100/0至50/50)纯化，得到74b(720mg，75.3％产率)。1843、ms(esi)m/z:624.2[m+na]+1844、步骤21845、3-(((s)-2-((s)-2-氨基-3-甲基丁酰胺基)丙酰胺基)甲氧基)丙酸苄酯(74c)1846、向化合物74b(140mg，0.23mmol)于dmf(2ml)中的溶液中添加et2nh(252mg，3.45mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物在高真空下浓缩并与甲苯(3ml*3)共蒸发，得到呈棕色固体状的74c(87mg，粗物质)。1847、ms(esi)m/z:402.2[m+na]+1848、步骤31849、(5s,8s,11s)-5-(3-((((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(9h-芴-9-基)-8-异丙基-11-甲基-3,6,9,12-四氧代-2,15-二氧杂-4,7,10,13-四氮杂十八-18-酸苄酯(74d)1850、向化合物74c(87mg，粗物质)于dmf(3ml)中的溶液中添加20(124mg，0.23mol)、hatu(96mg，0.27mmol)和diea(59mg，0.46mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。过滤混合物并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min纯化滤液，得到呈白色固体状的74d(95mg，45.7％产率)。1851、ms(esi)m/z:925.3[m+na]+1852、步骤41853、(5s,8s,11s)-5-(3-((((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)氨基)-3-氧代丙基)-1-(9h-芴-9-基)-8-异丙基-11-甲基-3,6,9,12-四氧代-2,15-二氧杂-4,7,10,13-四氮杂十八-18-酸(74e)1854、向化合物74d(95mg，0.11mmol)于meoh(15ml)和dmf(3ml)中的溶液中添加pd/c(10％，15mg)。将混合物在h2气氛(15psi)下搅拌4小时。将混合物经由硅藻土垫过滤，浓缩，得到呈白色固体状的化合物74e(85mg，粗物质)。1855、ms(esi)m/z:835.3[m+na]+1856、步骤51857、((6s,9s,12s)-1-((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)-19-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-9-异丙基-12-甲基-3,7,10,13,19-五氧代-16-氧杂-2,8,11,14-四氮杂十九-6-基)氨基甲酸(9h-芴-9-基)甲酯(74g)1858、向化合物74e(85mg，粗物质)于dmf(3ml)中的溶液中添加74f(61mg，0.12mol)、hatu(47.4mg，0.13mmol)和diea(27mg，0.21mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。过滤混合物并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％甲酸)：b-乙腈；流速：20ml/min纯化滤液，得到呈黄色固体状的74g(50mg，39.1％产率)。1859、ms(esi)m/z:1252.5[m+na]+1860、步骤61861、(s)-2-氨基-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-n1-((s)-1-(((s)-1-(((3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-3-氧代丙氧基)甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)戊二酰胺(74h)1862、向化合物74g(50mg，0.04mmol)于dmf(2ml)中的溶液中添加et2nh(45mg，0.61mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物在高真空下浓缩并与甲苯(3ml*3)共蒸发，得到呈棕色固体状的74h(40mg，粗物质)。1863、ms(esi)m/z:1030.4[m+na]+1864、步骤71865、(s)-n5-(((2r,3s,4r,5s)-5-(2-氨基-2-氧代乙基)-3,4-二羟基四氢呋喃-2-基)甲基)-2-(3-(2-(2,5-二氧代-2,5-二氢-1h-吡咯-1-基)乙酰胺基)丙酰胺基)-n1-((s)-1-(((s)-1-(((3-(((1s,9s)-9-乙基-5-氟-9-羟基-4-甲基-10,13-二氧代-2,3,9,10,13,15-六氢-1h,12h-苯并[de]吡喃并[3',4':6,7]吲嗪并[1,2-b]喹啉-1-基)氨基)-3-氧代丙氧基)甲基)氨基)-1-氧代丙-2-基)氨基)-3-甲基-1-氧代丁-2-基)戊二酰胺(74)1866、向化合物74h(40mg，粗物质)于dmf(2ml)中的溶液中添加74i(11.7mg，0.05mol)、hatu(19mg，0.05mmol)和diea(12mg，0.09mmol)。将混合物在室温下搅拌30分钟。过滤混合物并使用制备型hplc(方法：柱：xbridge prep c18 obd 5um 19*250mm；流动相：a-水(0.1％三氟乙酸)：b-乙腈；流速：20ml/min纯化滤液，得到741867、(29mg，59.6％产率)，以白色固体形式得到。1868、ms(esi)m/z:1238.7[m+na]+；uplc-ms保留时间:3.39min。1869、adc制备和表征1870、抗体药物结合物制备1871、dar8抗体药物结合物制备1872、将含抗体的结合缓冲液(浓度0.5-25mg/ml，pbs缓冲液ph6.0-8.5)在还原温度(0-40℃)下培育10分钟，并将8-15当量tecp溶液(pbs缓冲液中的5mm储备液)添加至反应混合物中，在还原温度下进行还原反应1-8小时。将还原混合物冷却至0-25℃后，逐步添加有机溶剂(例如：dmso、dmf、dma、pg、乙腈，0-25％v/v)和接头-有效负载储备液(10-25当量，有机溶剂中的10mm储备液)。将结合溶液在0-25℃下放置1-3小时，并且可用n-乙酰半胱氨酸(1mm储备液)淬灭反应物。将溶液进行缓冲液交换(旋转脱盐柱、超滤和透析)至储存缓冲液(例如：ph 5.5-6.5组氨酸乙酸盐缓冲液，含有任选的添加剂，例如蔗糖、海藻糖、tween 20、60、80)中。1873、adc表征1874、本发明中的adc实例是通过遵循上述程序用dar 8概况制备的。本发明中的所有adc均通过以下分析方法进行表征。1875、本发明中的adc的药物与抗体的比率(dar)是通过lcms方法或hic方法测定的。1876、本发明制备的adc的sec纯度均为>95％纯度。1877、药物与抗体比率(dar)测定1878、lcms方法1879、lc-ms分析在以下测量条件下进行：1880、lc-ms系统：vanquish flex uhplc和orbitrap exploris 240质谱仪1881、柱：mabpactmrp，2.1*50mm，4μm，thermo scientifictm1882、柱温：80℃1883、流动相a：0.1％甲酸(fa)水溶液1884、流动相b：含0.1％甲酸(fa)的乙腈溶液1885、梯度程序：25％b-25％b(0min-2min)、25％b-50％b(2min-18min),50％b-90％b(18min-18.1min)、90％b-90％b(18.1min-20min)、90％b-25％b(20min-20.1min)、25％b-25％b(20.1min-25min)1886、进样量：1μg1887、ms参数：在r＝15k的设置下以hmr模式获取完整和变性ms数据，并使用thermoscientifictm biopharma findertm 4.0软件中的respecttm算法和滑动窗口积分进行解卷积。1888、hic方法1889、hplc分析在以下测量条件下进行：1890、hplc系统：waters acquity arc hplc系统1891、检测器：测量波长：280nm1892、柱：tosoh bioscience 4.6μm id×3.5cm,2.5μm丁基无孔树脂柱柱温：25℃1893、流动相a：1.5m硫酸铵，50mm磷酸盐缓冲液，ph 7.01894、流动相b：50mm磷酸盐缓冲液，25％(v/v)异丙醇，ph 7.01895、梯度程序：0％b-0％b(0min-2min)、0％b-100％b(2min-15min)、100％b-100％b(15min-16min)、100％b-0％b(16min-17min)、0％b-0％b(17min-20min)1896、进样量：20μg1897、adc纯度1898、sec方法1899、hplc分析在以下测量条件下进行：1900、hplc系统：waters h-class uplc系统1901、检测器：测量波长：280nm1902、柱：acquity uplc beh200 sec 1.7um 4.6×150mm，waters1903、柱温：室温1904、流动相a：200mm磷酸盐缓冲液，250mm氯化钾，15％异丙醇，ph 7.01905、梯度程序：10min等度洗脱，流速0.3ml/min1906、进样量：20μg1907、adc疏水性评估1908、在hic(疏水性相互作用柱)色谱中，在更晚的保留时间会出现疏水性更强的adc。在本发明中，实例adc的dar8(载药量为8的抗体)峰用于此比较。1909、通过比较hic d8 rt，可以清楚的看出adc亲水性的排序为adc-c4>adc-c5>adc-c2>adc-c3>adc-c1。adc-c1是此组中疏水性最强的。1910、hic方法1911、方法11912、hplc分析在以下测量条件下进行：1913、hplc系统：waters acquity arc hplc系统1914、检测器：测量波长：280nm1915、柱：tosoh bioscience 4.6μm id×3.5cm,2.5μm丁基无孔树脂柱1916、柱温：25℃1917、流动相a：1.5m硫酸铵，50mm磷酸盐缓冲液，ph 7.01918、流动相b：50mm磷酸盐缓冲液，25％(v/v)异丙醇，ph 7.01919、梯度程序：0％b-0％b(0min-2min)、0％b-100％b(2min-15min)、100％b-100％b(15min-16min)、100％b-0％b(16min-17min)、0％b-0％b(17min-20min)1920、进样量：20μg1921、方法21922、hplc分析在以下测量条件下进行：1923、hplc系统：waters acquity arc hplc系统1924、检测器：测量波长：280nm1925、柱：mabpac hic-10，5μm，4.6×10mm(thermo)1926、柱温：25℃1927、流动相a：1.5m硫酸铵，50mm磷酸钠，ph 7.01928、流动相b：50mm磷酸钠，ph 7.01929、梯度程序：20％b-20％b(0min-1min)、0％b-0％b(1min-35min)、20％b-20％b(35min-40min)1930、流动速率：0.5ml/min1931、样品制备：用初始流动相将样品稀释至0.5mg/ml。1932、下表提供了接头加有效负载的实例：1933、表11934、1935、1936、1937、1938、1939、1940、1941、1942、1943、1944、1945、表2带有效负载的封端接头1946、1947、抗体药物结合物制备1948、dar 4抗体药物结合物制备1949、将含抗体的结合缓冲液(浓度0.5-25mg/ml，pbs缓冲液ph6.0-8.5)在还原温度(0-40℃)下培育10分钟，并将2-10当量tecp溶液(pbs缓冲液中的5mm储备液)添加至反应混合物中，在还原温度下进行还原反应1-8小时。将还原混合物冷却至0-25℃后，逐步添加有机溶剂(例如：dmso、dmf、dma、pg、乙腈，5-25％v/v)和接头-有效负载储备液(3-10当量，有机溶剂中的10mm储备液)。将结合溶液在0-25℃下放置1-3小时，且反应物可用n-乙酰半胱氨酸(1mm储备液)淬灭。将溶液进行缓冲液交换(旋转脱盐柱、超滤和透析)至储存缓冲液(例如：ph 5.5-6.5组氨酸乙酸盐缓冲液，含有任选的添加剂，例如蔗糖、海藻糖、tween 20、60、80)中。1950、dar8抗体药物结合物制备1951、将含抗体的结合缓冲液(浓度0.5-25mg/ml，pbs缓冲液ph6.0-8.5)在还原温度(0-40℃)下培育10分钟，并将8-15当量tecp溶液(pbs缓冲液中的5mm储备液)添加至反应混合物中，在还原温度下进行还原反应1-8小时。将还原混合物冷却至0-25℃后，逐步添加有机溶剂(例如：dmso、dmf、dma、pg、乙腈，0-25％v/v)和接头-有效负载储备液(10-25当量，有机溶剂中的10mm储备液)。将结合溶液在0-25℃下放置1-3小时，且反应物可用n-乙酰半胱氨酸(1mm储备液)淬灭。将溶液进行缓冲液交换(旋转脱盐柱、超滤和透析)至储存缓冲液(例如：ph 5.5-6.5组氨酸乙酸盐缓冲液，含有任选的添加剂，例如蔗糖、海藻糖、tween 20、60、80)中。1952、dar8 adc的无有机溶剂结合1953、将含抗体的结合缓冲液(浓度0.5-25mg/ml，pbs缓冲液ph6.0-8.5)在还原温度(0-40℃)下培育10分钟，并将8-15当量tecp溶液(pbs缓冲液中的5mm储备液)添加至反应混合物中，在还原温度下进行还原反应1-8小时。将还原混合物冷却至0-25℃后，添加接头-有效负载储备液(10-25当量，10-200mm结合缓冲液)。将结合溶液在0-25℃下放置1-3小时，且反应物可用n-乙酰半胱氨酸(1mm储备液)淬灭。将溶液进行缓冲液交换(旋转脱盐柱、超滤和透析)至储存缓冲液(例如：ph 5.5-6.5组氨酸乙酸盐缓冲液，含有任选的添加剂，例如蔗糖、海藻糖、tween 20、60、80)中。adc2-35、adc2-57、adc2-58和adc3-20均在无有机条件下生成。令人惊奇且出乎意料地发现，在无有机条件下的结合效率与在涉及有机溶剂的过程中的结合效率保持相似。无有机结合过程比有机溶剂结合过程更节省成本。其可降低制造成本。无有机结合过程可在一次性使用的袋中完成。此外，无有机结合过程不需要进行清洁验证和确认。1954、马来酰亚胺开环程序1955、图1、图2、图3和图4说明开环adc的人血浆稳定性与相应抗体一致。图5表明，在人血浆中，环打开的adc的自由有效负载释放低于未经开环处理的adc。图7说明在大鼠中，开环的adc的清除速度比未开环的adc的清除速度慢。马来酰亚胺环通过以下程序打开。1956、结合步骤后，将adc缓冲液交换至开环缓冲液(ph 8.0～9.0，硼酸盐或tris缓冲液)中，并将溶液在22或37℃下放置5-48小时。通过还原lcms监测开环过程。一旦开环完成，将所得adc通过透析缓冲交换到碱性tris ph 8.0-8.5缓冲液或酸性组氨酸-乙酸盐ph5.0-6.5缓冲液中。1957、聚糖工程化位点特异性结合1958、两个聚糖工程化步骤(修剪和聚糖转移)均遵循文献报道的程序(2015bioconju.chem.doi.org/10.1021/acs.bioconjchem.5b00224；2018antibodiesdoi.org/10.3390/antib7010012)。[3+2]点击化学结合步骤是通过2015bioconju.chem.doi.org/10.1021/acs.bioconjchem.5b00224中报道的方法来应用。1959、adc表征：1960、本发明中的adc实例是通过遵循上述程序用dar 2、4和8概况制备的。本发明中的所有adc均通过以下分析方法进行表征。1961、药物与抗体比率(dar)测定1962、lcms方法1963、lc-ms分析在以下测量条件下进行：1964、lc-ms系统：vanquish flex uhplc和orbitrap exploris 240质谱仪1965、柱：mabpactmrp，2.1*50mm，4μm，thermo scientifictm1966、柱温：80℃1967、流动相a：0.1％甲酸(fa)水溶液1968、流动相b：含0.1％甲酸(fa)的乙腈溶液1969、梯度程序：25％b-25％b(0min-2min)、25％b-50％b(2min-18min),50％b-90％b(18min-18.1min)、90％b-90％b(18.1min-20min)、90％b-25％b(20min-20.1min)、25％b-25％b(20.1min-25min)1970、进样量：1μg1971、ms参数：在r＝15k的设置下以hmr模式获取完整和变性ms数据，并使用thermoscientifictm biopharma findertm 4.0软件中的respecttm算法和滑动窗口积分进行解卷积。1972、hic方法1973、hplc分析在以下测量条件下进行：1974、hplc系统：waters acquity arc hplc系统1975、检测器：测量波长：280nm1976、柱：tosoh bioscience 4.6μm id×3.5cm,2.5μm丁基无孔树脂柱1977、柱温：25℃1978、流动相a：1.5m硫酸铵，50mm磷酸盐缓冲液，ph 7.01979、流动相b：50mm磷酸盐缓冲液，25％(v/v)异丙醇，ph 7.01980、梯度程序：0％b-0％b(0min-2min)、0％b-100％b(2min-15min)、100％b-100％b(15min-16min)、100％b-0％b(16min-17min)、0％b-0％b(17min-20min)1981、进样量：20μg1982、adc纯度1983、sec方法1984、hplc分析在以下测量条件下进行：1985、hplc系统：waters h-class uplc系统1986、检测器：测量波长：280nm1987、柱：acquity uplc beh200 sec 1.7um 4.6×150mm，waters1988、柱温：室温1989、流动相a：200mm磷酸盐缓冲液，250mm氯化钾，15％异丙醇，ph 7.01990、梯度程序：10min等度洗脱，流速0.3ml/min1991、进样量：20μg1992、adc疏水性评估1993、hic方法1994、hplc分析在以下测量条件下进行：1995、hplc系统：waters acquity arc hplc系统1996、检测器：测量波长：280nm1997、柱：mabpac hic-10，5μm，4.6×10mm(thermo)1998、柱温：25℃1999、流动相a：1.5m硫酸铵，50mm磷酸钠，ph 7.02000、流动相b：50mm磷酸钠，ph 7.02001、梯度程序：20％b-20％b(0min-1min)、0％b-0％b(1min-35min)、20％b-20％b(35min-40min)2002、流动速率：0.5ml/min2003、样品制备：用初始流动相将样品稀释至0.5mg/ml。2004、sec纯度2005、hplc分析在以下测量条件下进行：2006、hplc系统：waters h-class uplc系统2007、检测器：测量波长：280nm2008、柱：acquity uplc beh200 sec 1.7um 4.6×150mm，waters2009、柱温：室温2010、流动相a：200mm磷酸盐缓冲液，250mm氯化钾，15％异丙醇，ph 7.02011、梯度程序：10min等度洗脱，流速0.3ml/min2012、进样量：20μg2013、表3adc实例2014、2015、2016、2017、2018、2019、2020、2021、2022、2023、2024、2025、2026、2027、*上表中的dar8种类(min)通过hic方法以异丙醇为流动相进行测定。2028、表4 adc化合物所用的参考2029、2030、2031、hic保留时间(hic rt，此处在表中仅列出dar8种类的hic rt)可被视为评估adc疏水性的量度。hic rt越短，表明adc的亲水性越强。如本文所提供，p5修饰ggfg-动物-dxd基础adc与一般mc-ggfg-动物-dxd adc相比具有更短的hic rt。此外，p3-修饰-va/vc/vag-动物-dxd adc似乎具有比一般mc-ggfg-动物-dxd adc短得多的hic rt。对于高度疏水性的mmae基础adc，p3-修饰-vc-pab-mmae adc似乎具有比一般mc-vc-pab-mmae adc更短的dar8hic rt。据广泛报道，在具有较高dar的抗体上结合的疏水性接头-有效负载有时会导致adc聚集(低sec纯度)。此特性将进一步影响抗体与其靶标的结合，并且adc的聚集趋势也会导致其在动物模型中被快速清除((1)clin cancer res 2004,10,7063-7070.(2)mol.pharmaceutics2021,18,3,889-897)。因此，令人惊奇且出乎意料地发现p3和p5修饰改善了adc的亲水性，从而防止了adc聚集(尤其是mmae dar8 adc)和快速清除。2032、p3和p5上经本发明修饰的adc显示出对dar8种类的保留时间更早，表明其具有更好的亲水性。mmae基础adc(adc2-6-2、adc2-9-2、adc2-36-2、adc2-62-2、adc2-63-2、adc2-64-2和adc2-65-2)可实现8种药物负载概况，而在结合后不会引起明显的聚集体形成(图15至图20和图62至图69)。2033、adc 2-6-2hic概况(hic dar 8.0)说明于图15中。2034、纯度>98％的adc 2-6-2 sec概况说明于图16中。2035、adc 2-9-2hic概况(hic dar 8.0)说明于图17中。2036、adc 2-9-2sec概况(纯度>99％)说明于图18中。2037、adc2-36-2 hic概况(hic dar7.8)说明于图19中。2038、纯度>99％的adc2-36-2 sec概况说明于图20中。2039、adc2-62-2 hic概况(hic dar 7.7)说明于图62中。2040、纯度>99％的adc2-62-2 sec概况说明于图63中。2041、adc2-63-2 hic概况(hic dar 8.0)说明于图64中。2042、纯度>99％的adc2-63-2 sec概况说明于图65中。2043、adc2-64-2 hic概况(hic dar 7.7)说明于图66中。2044、纯度>99％的adc2-64-2 sec概况说明于图67中。2045、adc2-65-2 hic概况(hic dar 7.5)说明于图68中。2046、纯度>99％的adc2-65-2 sec概况说明于图69中。2047、组织蛋白酶b介导的释放2048、方法2049、组织蛋白酶b稀释制剂2050、ctsb通过与30mm二硫苏糖醇和15mm edta(ph5.5)在环境温度下培育15分钟而活化。2051、反应缓冲液制备：25mm乙酸钠和1mm edta，ph5.5。2052、根据实验模板添加150nm naccys-13和naccys-14和naccys-15和naccys-16和naccys-17以及0.3单位活化组织蛋白酶b混合物。2053、将反应混合物立即在37℃下在读取器中培育，接着使用所述的动力学装置开始读取。(tecan spark：激发/发射：485/520nm)(120个循环，每隔一分钟)增益手动：77％2054、graphpad prism 9的数据分析说明于图21中。2055、ptk7细胞系的细胞杀伤2056、将细胞以每孔1×103的密度接种至96孔板中的含有10％ fbs的rpmi-1640培养基中。接着用10点滴定的化合物(9个浓度组：0.000512、0.00256、0.0128、0.064、0.32、1.6、8、40、200nm以及含有0.1％ dmso的培养基的空对照组)处理细胞，包括adc1-1、adc1-11、adc1-4、adc1-2和adc1-12。将板在37℃、5％ co2下培育7天。接下来，向每个孔中添加50μlcell-titer-glo试剂。将混合物在轨道振荡器上混合10分钟，以使细胞裂解。接着，使用bmgpherastar与发光方案测量发光信号。对ovcar3和a549细胞系的抑制分别说明于图22和图23中。ovcar3和a549抑制的数据提供于表5中。2057、表52058、2059、adc-mmae(dar4/dar8)对her2细胞系的细胞杀伤2060、方法2061、将细胞(nci-n87)以每孔2e3个细胞(100μl/孔)接种至96孔板(greiner：655090)中。过夜培育。2062、添加含有不同浓度(从100nm开始，4倍稀释)的adc的新鲜生长培养基，50μl/孔。2063、在37℃下培育6天。2064、通过cell titer-glo(promega，g7573)检测细胞存活率。每孔添加70μl/孔的celltiter-glo试剂。2065、使板在室温下培育10分钟以稳定发光信号。2066、使用微孔板读取器对样品进行分析。2067、nci-n87细胞存活率检测的数据说明于图24和图25中。nci-n87细胞存活率检测的数据提供于表6中。2068、表62069、2070、2071、adc-dxd类似物(dar8)细胞杀伤2072、方法2073、将细胞(nci-n87)以每孔2e3个细胞(100μl/孔)接种至96孔板(greiner：655090)中。过夜培育。添加含有不同浓度(从100nm开始，4倍稀释)的adc的新鲜生长培养基，50μl/孔。2074、在37℃下培育6天。2075、通过cell titer-glo(promega，g7573)检测细胞存活率。每孔添加70μl/孔的celltiter-glo试剂。2076、使板在室温下培育10分钟以稳定发光信号。2077、使用微孔板读取器进行分析。nci-n87细胞存活率检测的数据提供于表7中。nci-n87细胞存活率检测的数据说明于图26中。2078、表72079、2080、adc-p5mod-ggfg-dxd(dar8)细胞杀伤2081、方法2082、将细胞(nci-n87和mda-mb-468)以每孔2e3个细胞(100μl/孔)接种至96孔板(greiner：655090)中。过夜培育。2083、添加含有不同浓度(从100nm开始，4倍稀释)的adc的新鲜生长培养基，50μl/孔。2084、在37℃下培育6天。2085、通过cell titer-glo(promega，g7573)检测细胞存活率。每孔添加70μl/孔的celltiter-glo试剂。2086、使板在室温下培育10分钟以稳定发光信号。2087、使用微孔板读取器进行分析。2088、nci-n87细胞存活率检测的数据提供于表8中。nci-n87细胞存活率检测的数据说明于图27和图28中。2089、表82090、2091、adc-p5mod-ggfg-dxd(dar8)(ro)细胞杀伤2092、方法2093、将细胞(nci-n87和mda-mb-468)以每孔2e3个细胞(100μl/孔)接种至96孔板(greiner：655090)中。过夜培育。2094、添加含有不同浓度(从100nm开始，4倍稀释)的adc的新鲜生长培养基，50μl/孔。2095、在37℃下培育6天。2096、通过cell titer-glo(promega，g7573)检测细胞存活率。每孔添加70μl/孔的celltiter-glo试剂。2097、使板在室温下培育10分钟以稳定发光信号。2098、使用微孔板读取器进行分析。2099、nci-n87细胞存活率检测的数据提供于表9中。nci-n87细胞存活率检测的数据说明于图29和图30中。2100、表92101、2102、adc-p3mod-vc/va-动物-dxd(dar8)细胞杀伤2103、方法2104、将细胞(nci-n87和mda-mb-468)以每孔2e3个细胞(100μl/孔)接种至96孔板(greiner：655090)中。过夜培育。2105、添加含有不同浓度(从100nm开始，4倍稀释)的adc的新鲜生长培养基，50μl/孔。2106、在37℃下培育6天。2107、通过cell titer-glo(promega，g7573)检测细胞存活率。每孔添加70μl/孔的celltiter-glo试剂。2108、使板在室温下培育10分钟以稳定发光信号。2109、使用微孔板读取器进行分析。2110、nci-n87细胞存活率检测的数据提供于2111、表10中。nci-n87细胞存活率检测的数据说明于图31和图32中。2112、表102113、2114、adc-p5mod-ggfg-动物-dxd(dar8)细胞杀伤2115、将细胞(hcc1569)以每孔2e3个细胞(80μl/孔)接种至96孔板(corning 3d板或sarstedt板)中。培育过夜。2116、添加含有不同浓度(从100nm开始，4倍稀释)的adc的新鲜生长培养基，40μl/孔。2117、在37℃下培育6天。2118、通过3d试剂(promega，g9683)检测细胞存活率。每孔添加100μl/孔的3d试剂。2119、使板在室温下培育30分钟以稳定发光信号。2120、使用微孔板读取器进行分析。2121、adc(p5mod-ggfg-动物-dxd adc)具有与参考adc(adc3-1)相似的杀伤效率，如表11和表12以及图38(a)和(b)中所提供。2122、表112123、2124、表122125、2126、adc-p3mod-va/va-动物-dxd(dar8)细胞杀伤2127、将细胞(hcc1569)以每孔2e3个细胞(80μl/孔)接种至96孔板(corning 3d板或sarstedt板)中。过夜培育。2128、添加含有不同浓度(从100nm开始，4倍稀释)的adc的新鲜生长培养基，40μl/孔。2129、在37℃下培育6天。2130、通过3d试剂(promega，g9683)检测细胞存活率。每孔添加100μl/孔的3d试剂。2131、使板在室温下培育30分钟以稳定发光信号。2132、使用微孔板读取器进行分析。2133、adc(p3mod-vc/va-动物-dxd adc)具有与参考adc(adc3-1)相似的杀伤效率，如表13和表14以及图39(a)和(b)中所提供。2134、表132135、2136、表142137、2138、mmae基础adc细胞测定2139、方法2140、将细胞(jimt-1，2e3个细胞/孔或capan-1，4e3个细胞/孔)接种至96孔板(greiner：#655090)中，100μl/孔。过夜培育。添加含有不同浓度(从100nm开始，4倍稀释)的adc的新鲜生长培养基，50μl/孔。在37℃下培育6天。通过cell-titer glo(promega，g7573)检测细胞存活率。每孔添加70μl/孔的试剂。使板在室温下培育10分钟以稳定发光信号。用微孔板读取器进行分析。2141、结果2142、令人惊奇且出乎意料的是，adc在jimt-1(her2中等表达水平)中具有与参考adc(adc2-a)相当的细胞杀伤活性，并且adc2-62-2(dar8)甚至在capan-1(her2低表达水平)中具有比参考adc更好的细胞杀伤活性。数据提供于表15、表16、图54和图55中。2143、表152144、2145、表162146、2147、方法2148、将细胞(jimt-1，2e3个细胞/孔或capan-1，4e3个细胞/孔)接种至96孔板(greiner：#655090)中，100μl/孔。过夜培育。添加含有不同浓度(从100nm开始，4倍稀释)的adc的新鲜生长培养基，50μl/孔。在37℃下培育6天。通过cell-titer glo(promega，g7573)检测细胞存活率。每孔添加70μl/孔的试剂。使板在室温下培育10分钟以稳定发光信号。用微孔板读取器进行分析。2149、结果2150、adc2-63-1(dar4)在jimt-1(her2中等表达水平)和capan-1(her2低表达水平)中具有与参考adc(具有dar4的adc2-a)相当的细胞杀伤活性。adc2-63-2(dar8)在jimt-1(her2中等表达水平)和capan-1(her2低表达水平)中具有比参考adc更好的细胞杀伤活性，如表17、表18以及图56和图57中所提供。2151、表172152、2153、表182154、2155、方法2156、将细胞(jimt-1，2e3个细胞/孔或capan-1，4e3个细胞/孔)接种至96孔板(greiner：#655090)中，100μl/孔。培育过夜。以50μl/孔添加含有不同浓度(从100nm开始，4倍稀释)的adc的新鲜生长培养基。在37℃下培育6天。通过cell-titer glo(promega，g7573)检测细胞存活率。每孔添加70μl/孔的试剂。使板在室温下培育10分钟以稳定发光信号。用微孔板读取器进行分析。2157、结果2158、adc2-64-1(dar4)在jimt-1(her2中等表达水平)和capan-1(her2低表达水平)中具有与参考adc(具有dar4的adc2-a)相当的细胞杀伤活性。具有dar8的adc2-64-2在jimt-1(her2中等表达水平)和capan-1(her2低表达水平)中具有比参考adc(具有dar4的adc2-a)更好的细胞杀伤活性，如表19、表20、图58和图59中所提供。2159、表192160、2161、表202162、2163、adc血浆稳定性评估2164、adc与血浆的培育2165、将adc稀释至小鼠或人血浆中，得到血浆中100μg/ml adc的最终溶液。将样品在37℃下培育。在四个时间点(0、4、24、72、96或168小时)取等分试样(100μl)。样品在-80℃下冷冻直至分析。血浆有效负载浓度是在以下测量条件下进行的：2166、仪器：lc-ms/ms(triple quad 5500)2167、监测：mrm2168、柱：advanced materials technology，halo aq-c18 2.7μm50*2.1mm2169、柱温：40℃2170、流动相a：h2o-0.1％fa2171、流动相b：acn-0.1％fa2172、mmae的梯度程序：20％b-20％b(0min-0.2min)、20％b-80％b(0.2min-1.5min)、80％b-80％b(1.5min-2.2min)、80％b-20％b(2.20min-2.21min)、20％b-20％b(2.21min-3.0min)；dxd的梯度程序：2％b-2％b(0min-0.2min)、2％b-98％b(0.2min-1.2min)、98％b-98％b(1.2min-2.0min)、98％b-2％b(2.0min-2.01min)、2％b-2％b(2.01min-4.0min)；2173、进样量：2μl(mmae)、10μl(dxd)2174、血浆adc和总ab(tab)浓度是在以下测量条件下进行的：2175、测定：配体结合测定(elisa)2176、捕获试剂：her2ecd2177、检测试剂：adc的抗有效负载抗体和总抗体的抗人igg多克隆抗体。2178、人/小鼠血浆稳定性研究样品中的adc dar变化2179、方法2180、将人her2胞外域(ecd)生物素化并固定至dynabeads m-280链霉亲和素上，且接着在室温下持续2小时用ecd-珠系统从血浆样品中捕获adc。接着用hbs-ep缓冲液(10mmhepes[ph 7.4]、150mm nacl、3.4mm乙二胺四乙酸[edta]、0.005％表面活性剂p20)洗涤捕获的adc，并在37℃下使用ides酶消化1小时。用hbs-ep、水和10％乙腈对珠进行彻底洗涤后，使用含1％甲酸的30％乙腈洗脱adc分析物。使用液相色谱-串联质谱(lc-ms/ms)法进行adc dar分析。2181、adc大鼠药物动力学研究2182、方法2183、所有动物研究均根据机构动物护理和使用委员会(iacuc)的规定进行。6-8周龄雌性balb/c裸小鼠购自beijing vital river laboratory animal technology co.,ltd.，而6周龄带颈静脉导管的雄性sprague dawley大鼠购自skills model animal researchtechnology co.,ltd.(beijing,china)。所有动物均在无特定病原体(spf)条件下饲养，并可自由获取食物和水。将含adc的20mm组氨酸乙酸盐(ph 5.5)以3mg/kg静脉内施用至小鼠或大鼠。施用后0、4、8、24、48、72、168、240和336小时收集血液样品，然后离心(4℃，3000×g，7分钟)以分离血浆。2184、通过内部meso scale discovery(msd)配体结合方法测量adc和总抗体的浓度。简而言之，his标记的her2胞外域融合蛋白被用作捕获试剂，生物素标记的抗dxd ab、或抗mmae ab或山羊抗人κab分别被用作基于dxd的adc、或基于mmae的adc或总ab测定的检测试剂。使用液相色谱-串联质谱(lc-ms/ms)法对dxd或mmae进行定量。2185、血浆adc和总ab(tab)浓度是在以下测量条件下进行的：2186、测定：配体结合测定(elisa)2187、捕获试剂：her2ecd2188、检测试剂：adc的抗有效负载抗体和总抗体的抗人igg多克隆抗体。2189、adc小鼠药物动力学研究-过早有效负载释放研究2190、血浆有效负载浓度是在以下测量条件下进行的：2191、(1)仪器：lc-ms/ms(triple quad 5500)2192、(2)监测：mrm2193、(3)柱：advanced materials technology，halo aq-c18 2.7μm50*2.1mm2194、(4)柱温：40℃2195、(5)流动相a：h2o-0.1％fa2196、(6)流动相b：acn-0.1％fa2197、(7)梯度程序：20％b-20％b(0min-0.2min)、20％b-80％b(0.2min-1.5min)、80％b-80％b(1.5min-2.2min)、80％b-20％b(2.20min-2.21min)、20％b-20％b(2.21min-3.0min)2198、(8)进样量：2μl2199、pk研究样品中的adc dar变化。2200、将山羊抗人igg/f(ab')2片段特异性生物素化并固定至dynabeads m-280链霉亲和素上，且接着在室温下持续2小时用ecd-珠系统从血浆样品中捕获adc。接着用hbs-ep缓冲液(10mm hepes[ph 7.4]、150mm nacl、3.4mm乙二胺四乙酸[edta]、0.005％表面活性剂p20)洗涤捕获的adc，并在37℃下使用ides酶消化1小时。用hbs-ep、水和10％乙腈对珠进行彻底洗涤后，使用含1％甲酸的30％乙腈洗脱adc分析物。使用液相色谱-串联质谱(lc-ms/ms)法进行adc dar分析。2201、功效研究2202、图46和图47的方法2203、向雌性balb/c裸小鼠右侧腹皮下植入每200μl pbs/基质胶1×107个mx-1细胞。接种后，每周两次使用卡尺在二维上测定肿瘤体积，并使用下式以mm3表示：v＝0.5(a×b2)，其中a和b分别为肿瘤的长径和短径。当肿瘤大小达到大约230mm3的平均体积时，将小鼠随机分成4组，每组8只动物，且分别于第1天和第11天用10mg/kg的媒剂、adc3-1、adc3-3或adc3-4进行静脉内治疗。部分消退(pr)定义为连续三次测量中肿瘤体积小于给药第一天的起始肿瘤体积的50％，且完全消退(cr)定义为连续三次测量中肿瘤体积小于14mm3。数据表示为平均肿瘤体积±平均值标准误差(sem)。使用式(tgi)计算肿瘤生长抑制(tgi)：2204、2205、治疗t＝时间t时治疗的肿瘤体积2206、治疗t0＝时间0时治疗的肿瘤体积2207、安慰剂t＝时间t时的安慰剂肿瘤体积2208、安慰剂t0＝时间0时的安慰剂肿瘤体积2209、图46和图47的结果2210、在balb/c裸小鼠皮下生长的mx-1乳腺癌异种移植物中比较了不同adc的体内功效。结果在图47中示出。用10mg/kg的adc3-1、adc3-3或adc3-4治疗在第35天分别产生101％、94％或86％的肿瘤生长抑制(tgi)(图47)。对于个体动物肿瘤生长抑制，adc3-3也诱导了1/8pr，而adc3-1未诱导pr(图47)。同时，所有三种adc均具有良好的耐受性，而无任何毒性迹象或明显的体重下降。综合起来，adc3-3和adc3-4表现出与adc3-1相当的功效。2211、图48和图49的功效研究方法2212、向雌性balb/c裸小鼠右侧腹皮下植入每200μl pbs 3×106个a375细胞。当肿瘤大小达到大约280mm3的平均体积时，将小鼠随机分成3组，每组8只动物，且分别于第1天静脉内注射10mg/kg的媒剂、adc3-1或adc3-7。2213、图48和图49的结果2214、在balb/c裸小鼠皮下生长的a375黑色素瘤异种移植物中比较了不同adc的体内功效。用10mg/kg的adc3-1或adc3-7治疗在第16天分别产生77％或85％的tgi(图49)。adc3-7在a375异种移植物模型中表现出比adc3-1更优异的功效。两种adc均具有良好的耐受性，而无任何毒性迹象或明显的体重下降。2215、图61和62的功效研究方法2216、向雌性balb/c裸小鼠右侧腹皮下植入每200μl pbs 3×106个a375细胞。当肿瘤大小达到大约280mm3的平均体积时，将小鼠随机分成4组，每组8只动物，且分别于第1天静脉内注射10mg/kg的媒剂、adc3-1、adc3-12或adc3-15。2217、图50和图51的结果2218、在balb/c裸小鼠皮下生长的a375黑色素瘤异种移植物中比较了不同adc的体内功效。结果在图8中示出。用10mg/kg的adc3-1、adc3-12或adc3-15治疗在第16天分别产生77％、81％或82％的tgi(图8a)。对于个体动物肿瘤生长抑制，adc3-12也诱导了2/8pr和1/8cr，且adc3-15诱导了1/8pr，而adc3-1未诱导pr(图8b)。综合起来，adc3-12和adc3-15在a375异种移植物模型中均表现出比adc3-1更好的抗肿瘤功效。另外，所有adc均具有良好的耐受性，而无任何毒性迹象或明显的体重下降。2219、图52的pk研究方法2220、在静脉内施用10mg/kg的adc3-1、adc3-3或adc3-4后0、2、4、8、24、72、168小时从携带mx-1肿瘤的小鼠收集血液样品，然后离心(4℃，3000×g，7分钟)以分离血浆。通过内部开发的meso scale discovery(msd)配体结合方法测量adc和总抗体的浓度。简而言之，his标记的her3胞外域融合蛋白被用作捕获试剂，生物素标记的抗dxd ab或山羊抗人κab分别被用作adc或总ab测量的检测试剂。2221、图52的结果2222、重合的adc和总ab浓度曲线表明这三种adc在小鼠血浆中具有非常好的接头稳定性。adc3-3和adc3-4展现与adc3-1相当的adc或总ab暴露和清除率。2223、图53的pk研究方法2224、在静脉内施用10mg/kg的adc3-1、adc3-7、adc3-12或adc3-15后0、2、4、8、24、72和168小时从携带a375肿瘤的小鼠收集血浆样品。通过所描述的内部开发的meso scalediscovery(msd)配体结合方法测量adc和总抗体的浓度。2225、图53的结果2226、重合的adc和总ab浓度曲线表明这三种adc在小鼠血浆中具有非常好的接头稳定性。adc3-7、adc3-12和adc3-15展现与adc3-1相当的adc或总ab暴露和清除率。2227、功效测试方法和adc pk研究2228、方法-jimt-12229、向nod.scid小鼠右侧腹皮下植入每200μl pbs/基质胶3×106个jimt-1细胞。2230、方法—capan-12231、向雌性balb/c裸小鼠右侧腹皮下植入每200μl pbs/基质胶1×107个capan-1细胞。2232、方法-pk研究2233、静脉内施用后0、2、4、8、24、72和168小时收集血清样品。通过所描述的内部开发的meso scale discovery(msd)配体结合方法测量adc和总抗体的浓度。简而言之，his标记的her2胞外域融合蛋白被用作捕获试剂，生物素标记的抗dxd ab、或抗mmae ab或山羊抗人κab分别被用作基于dxd的adc、或基于mmae的adc或总ab测定的检测试剂。2234、方法cfpac-12235、向雌性balb/c裸小鼠右侧腹皮下植入每200μl pbs/基质胶1×107个cfpac-1细胞。接种后，每周两次使用卡尺在二维上测定肿瘤体积，并使用下式以mm3表示：v＝0.5(a×b2)，其中a和b分别为肿瘤的长径和短径。2236、当肿瘤大小达到大约250mm3的平均体积时(接种7天后)，将小鼠随机分组，且分别用10mg/kg的adc进行静脉内治疗。部分消退(pr)定义为连续三次测量中肿瘤体积小于给药第一天的起始肿瘤体积的50％，且完全消退(cr)定义为连续三次测量中肿瘤体积小于14mm3。数据表示为平均肿瘤体积±平均值标准误差(sem)。使用式(tgi)计算肿瘤生长抑制(tgi)：2237、图1描述了人血浆中adc2-b的adc2-b t/t0和有效负载释放％。2238、图2描述了人血浆中adc2-40的t/t0和有效负载释放％。2239、图3描述了人血浆中adc2-32的t/t0和有效负载释放％。2240、图4描述了人血浆中adc2-42的adc2-b t/t0和有效负载释放％。2241、图6描述了iv 3mpk adc之后的总抗体大鼠pk概况。2242、图7描述了iv 3mpk adc之后的结合抗体大鼠pk概况。2243、图8描述了iv 3mpk adc2-b之后的结合抗体和总抗体大鼠pk概况(所有pk样品中的自由有效负载浓度均低于检测限)。2244、图10描述了iv 3mpk adc2-32之后的结合抗体和总抗体大鼠pk概况(所有pk样品中的自由有效负载浓度均低于检测限)。2245、图9描述了iv 3mpk adc2-40之后的结合抗体和总抗体大鼠pk概况(所有pk样品中的自由有效负载浓度均低于检测限)。2246、图10描述了iv 3mpk adc2-32之后的结合抗体和总抗体大鼠pk概况(所有pk样品中的自由有效负载浓度均低于检测限)。2247、图11描述了iv 3mpk adc2-42之后的结合抗体和总抗体大鼠pk概况(所有pk样品中的自由有效负载浓度均低于检测限)。2248、图12描述了人血浆中adc的有效负载释放％。2249、图13描述了小鼠血浆中adc的有效负载释放％。2250、图14描述了iv 3mpk adc之后的小鼠pk研究中的自由mmae释放。2251、图33描述了人血浆中adc的有效负载释放％。2252、图34描述了小鼠pk研究中的自由mmae释放。2253、图35说明了人血浆中adc2-b、adc2-32和adc2-42的adc dar变化。2254、图36说明了人血浆中adc2-b和adc2-42的adc dar变化。2255、图37说明了大鼠pk中adc2-b、adc2-32和adc2-40以及adc2-42的adc dar变化。2256、化合物对a375和calu-6癌细胞系中的细胞杀伤2257、a375(atcc，crl-1619)2258、a375是从一名54岁女性恶性黑色素瘤患者的皮肤中分离出来的具有上皮形态的细胞系，且a375购自atcc。a375的基础培养基是dmem、高葡萄糖、glutamaxtm补充剂(gibco，10566024)。为了制备完全生长培养基，将以下组分添加至基础培养基中：胎牛血清，最终浓度为10％(gibco，10099-141c)。所述细胞系在37℃的加湿5％co2气氛中生长，并定期使用mycoalerttm plus支原体检测试剂盒(lonza，lt07-710)检测是否存在支原体。2259、calu-6(atcc，htb-56)2260、calu-6是从癌和间变性瘤中分离出来的具有上皮形态的细胞系，且calu-6购自atcc。calu-6的基础培养基是伊戈尔氏(eagle's)最低必需培养基(atcc，30-2003)。为了制备完全生长培养基，将以下组分添加至基础培养基中：胎牛血清，最终浓度为10％(gibco，10099-141c)。所述细胞系在37℃的加湿5％ co2气氛中生长，并定期使用mycoalerttmplus支原体检测试剂盒(lonza，lt07-710)检测是否存在支原体。2261、mda-mb-453(sibs)2262、mda-mb-453源自一名48岁女性患者的乳腺转移性癌渗出液，涉及淋巴结、脑以及胸膜腔和心包腔两者，且mda-mb-453购自si bs。mda-mb-453的基础培养基是rpmi 1640培养基，hepes(gi bco，22400105)。为了制备完全生长培养基，将以下组分添加至基础培养基中：胎牛血清，最终浓度为10％(gibco，10099-141c)。所述细胞系在37℃的加湿5％ co2气氛中生长，并定期使用mycoalertt m plus支原体检测试剂盒(lonza，lt07-710)检测是否存在支原体。2263、方法：化合物细胞杀伤2264、将细胞a375(1e3/孔)或calu-6(2e3/孔)接种至96孔板(greiner：655090)中，100μl/孔。在37℃，5％ co2下培育过夜。2265、添加含有不同浓度的化合物的新鲜生长培养基，50μl/孔。2266、在37℃，5％ co2下培育6天。2267、通过cell titer-glo(promega，g7573)检测细胞存活率。每孔添加70μl/孔的试剂。2268、使板在室温下培育10分钟以稳定发光信号。2269、使用微孔板读取器进行分析。2270、结果2271、图70和图71说明了实施例66和实施例69在a375和calu-6癌细胞系中表现出比dxd更强的细胞杀伤活性，并且实施例68和实施例72在a375和calu-6癌细胞系中的效力低于dxd。表21提供了dxd和实施例66、68、69、72的相应数据。2272、表212273、2274、mda-mb-453、a375和calu-6癌细胞系中的adc直接杀伤方法：adc直接杀伤2275、将细胞mda-mb-453或a375(1e3/孔)接种至3d-96孔板(corni ng：4520)中，80μl/孔。并将calu-6(2e3/孔)接种至2d-96孔板(grei ner：655090)中，100μl/孔。在37℃，5％co2下培育过夜。2276、将含有不同浓度的adc的新鲜生长培养基以40μl/孔添加至mda-mb-453或a375中，且以50μl/孔添加至calu-6中。2277、在37℃，5％ co2下培育6天。2278、用3d试剂(promega，g9683)检测mda-mb-453或a375细胞存活率，3d试剂100μl/孔。calu-6细胞存活率通过cell titer-glo(pro mega，g7573)进行检测，70μl/孔cell试剂。2279、使3d板在室温下培育30分钟以稳定发光信号，且使2d板在室温下培育10分钟以稳定发光信号。2280、使用微孔板读取器进行分析。2281、结果2282、图72、图73和图74说明了adc-c2在mda-mb-453中具有比adc-c1更强的杀伤效力，并且adc-c3和adc-c5在a375中表现出比adc-c1更好的细胞杀伤活性。表22提供了adc-c1、adc-c2、adc-c3、adc-c4和adc-c5的相应数据。2283、表222284、2285、adc旁观者杀伤mda-mb-453或a375与calu-6-nanoluc的共培养物2286、方法：calu-6-nanoluc细胞系构建2287、pt67-nanoluc细胞培养，接着收集细胞培养基(含有病毒_nano-luc基因)并进行过滤。2288、将calu-6接种于6孔板中，1e5个细胞/孔。在37℃，5％ co2下培育过夜。2289、添加pt67-nanoluc细胞培养基和8μg/ml聚凝胺。2290、感染重复3次，每天一次。2291、接着培养calu-6-nanoluc细胞，添加1mg/ml遗传霉素，持续5天。2292、收集calu-6-nanoluc细胞，添加nano-glo试剂(promega：n1120)以测试nano-luc的转染效率。2293、方法：adc旁观者杀伤2294、将mda-mb-453和calu-6-nanoluc(10:1)、a375和calu-6-nan oluc(10:1)或仅calu-6-nanoluc在3d-96孔板(corning：4520)中以80μl/孔共培养，在37℃、5％co2下培育过夜。2295、将含有不同浓度的adc的新鲜生长培养基以40μl/孔添加至细胞中。2296、在37℃，5％ co2下培育6天。2297、将3d板在1500rpm、25℃下离心5分钟，接着丢弃上清液。2298、用nano-glo试剂(promega：n1120)检测calu-6-nanoluc细胞存活率，150μl/孔。2299、使3d-板在室温下培育10分钟以稳定发光信号。2300、使用微孔板读取器进行分析。2301、结果2302、图75、图76和图77说明了adc-c3在mda-mb-453和calu-6-nanoluc系统中具有比adc-c1更强的旁观者细胞杀伤活性，并且adc-c3和adc-c5在a375和calu-6-nanoluc系统中表现出比adc-c1更好的旁观者杀伤效力。表23提供了adc-c1、adc-c2、adc-c3、adc-c4和adc-c5的相应数据。2303、表232304、2305、adc血浆稳定性2306、adc与血浆的培育2307、将adc稀释至小鼠或人血浆中，得到血浆中100μg/ml adc的最终溶液2308、将样品在37℃下培育2309、在四个时间点(0、4、24、72、96或168小时)取等分试样(100μl)2310、样品在-80℃下冷冻直至分析。2311、血浆有效负载浓度是在以下测量条件下进行的：2312、仪器：lc-ms/ms(triple quad 5500)2313、监测：mrm2314、柱：advanced materials technology，halo aq-c18 2.7μm50*2.1mm2315、柱温：40℃2316、流动相a：h2o-0.1％fa2317、流动相b：acn-0.1％fa2318、mmae的梯度程序：20％b-20％b(0min-0.2min)、20％b-80％b(0.2min-1.5min)、80％b-80％b(1.5min-2.2min)、80％b-20％b(2.20min-2.21min)、20％b-20％b(2.21min-3.0min)；dxd的梯度程序：2％b-2％b(0min-0.2min)、2％b-98％b(0.2min-1.2min)、98％b-98％b(1.2min-2.0min)、98％b-2％b(2.0min-2.01min)、2％b-2％b(2.01min-4.0min)；2319、进样量：10μl(dxd或dxd类似物)2320、血浆adc和总ab(tab)浓度是在以下测量条件下进行的：2321、测定：配体结合测定(elisa)2322、捕获试剂：her3ecd2323、检测试剂：adc的抗有效负载抗体和总抗体的抗人igg多克隆抗体。2324、小鼠中的功效实验2325、向雌性balb/c裸小鼠右侧腹皮下植入每200μl pbs/基质胶1×107个mx-1细胞。接种后，每周两次使用卡尺在二维上测定肿瘤体积，并使用下式以mm3表示：v＝0.5(a×b2)，其中a和b分别为肿瘤的长径和短径。当肿瘤大小达到大约230mm3的平均体积时，将小鼠随机分成4组，每组8只动物，且分别于第1天和第11天用10mg/kg的媒剂、adc3-1、adc3-3或adc3-4进行静脉内治疗。部分消退(pr)定义为连续三次测量中肿瘤体积小于给药第一天的起始肿瘤体积的50％，且完全消退(cr)定义为连续三次测量中肿瘤体积小于14mm3。数据表示为平均肿瘤体积±平均值标准误差(sem)。使用式(tgi)计算肿瘤生长抑制(tgi)。2326、小鼠中的pk研究2327、在静脉内施用10mg/kg的adc-c1、adc-c3、adc-c4和adc-c5后0、2、4、8、24、72、168小时从携带a375肿瘤的小鼠收集血液样品，然后离心(4℃，3000×g，7分钟)以分离血浆。通过内部开发的meso scale discovery(msd)配体结合方法测量adc和总抗体的浓度。简而言之，his标记的her3胞外域融合蛋白被用作捕获试剂，生物素标记的抗dxd ab或山羊抗人κab分别被用作adc或总ab测量的检测试剂。2328、方法2329、向雌性balb/c裸小鼠右侧腹皮下植入每200μl pbs 3×106个a-375细胞。接种后，每周两次使用卡尺在二维上测定肿瘤体积，并使用下式以mm3表示：v＝0.5(a×b2)，其中a和b分别为肿瘤的长径和短径。当肿瘤大小达到大约290mm3的平均体积时，将小鼠随机分成4组，每组7只动物，且于第1天用10mg/kg的媒剂、adc-c1、adc-c3或adc-c5进行静脉内治疗。部分消退(pr)定义为在连续三次测量中肿瘤体积小于给药第一天的起始肿瘤体积的50％，且完全消退(cr)定义为在连续三次测量中肿瘤体积小于14mm3。数据表示为平均肿瘤体积±平均值标准误差(sem)。使用式(tgi)计算肿瘤生长抑制(tgi)。2330、结果2331、在balb/c裸小鼠皮下生长的a-375黑色素瘤异种移植物中比较了不同adc的体内功效。结果在图79中示出。用10mg/kg的adc-c1、adc-c3或adc-c5治疗在第14天分别产生75％、99％或100％的肿瘤生长抑制(tgi)(图79a)。对于个体动物肿瘤生长抑制，adc-c1未诱导肿瘤pr或cr，而adc-c3诱导了2/7cr和4/7pr，且adc-c5诱导了4/7pr(图79b)。同时，所有三种adc均具有良好的耐受性，而无任何毒性迹象或明显的体重下降。综合起来，adc-c3和adc-c5表现出比adc-c1更好的pr和cr率。2332、方法2333、向雌性balb/c裸小鼠右侧腹皮下植入每200μl pbs 3×106个a-375细胞。当肿瘤大小达到大约280mm3的平均体积时，将小鼠随机分成3组，每组8只动物，且分别于第1天静脉内注射10mg/kg的媒剂、adc-c1或adc-c2。2334、结果2335、在balb/c裸小鼠皮下生长的a-375黑色素瘤异种移植物中比较了不同adc的体内功效。结果在图80中示出。adc-c2治疗产生的抗肿瘤功效与10mg/kg的adc-c1相当，无论是平均肿瘤体积还是个体肿瘤体积。数据提供于图80(图80a和80b)中。同时，两种adc均具有良好的耐受性，而无任何毒性迹象或明显的体重下降。2336、表24：adc实例2337、2338、2339、表25：接头-有效负载实例2340、2341、2342、表26毒素实例2343、2344、表272345、2346、表282347、2348、2349、表292350、2351、2352、本文所用的抗体是根据常规方法制备，例如载体构建，真核细胞转染如hek293细胞(life technologies目录号11625019)转染、纯化和表达。本文中使用的抗体的序列可见于图78中。2353、本文一般性地公开了本发明，并使用肯定性语言描述了众多实施方案。本发明还特别包括全部或部分排除特定主题，例如物质或材料、方法步骤和条件、方案、程序、测定或分析的实施方案。因此，尽管本文通常未表达本发明不包括的内容，但本文仍公开了本发明中未明确包括的方面。2354、尽管为了清楚理解的目的已经通过说明和实例的方式对前述发明进行了一些详细的描述，但对本领域技术人员显而易见的是，将实施某些微小的改变和修改。因此，描述和实例不应被理解为限制本发明的范围。2355、应理解，如果在本文提及任何现有技术的出版物，则此类提及并不构成承认该出版物形成任何国家的本领域公知常识的一部分。2356、本文通过识别引用而参考的所有出版物、专利、专利申请和公布专利申请的公开内容均以引用的方式整体并入本文中。技术实现思路当前第1页12当前第1页12