一种离子交联型复合蛋清微球、其制备方法和应

本发明属于医用植入材料，具体涉及一种离子交联型复合蛋清微球、其制备方法和应用。背景技术：1、口腔临床中，由先天畸形、肿瘤、外伤或其他因素导致的颌面骨组织损伤极为常见，严重影响患者的容貌外观及重要生理功能(如呼吸、咀嚼、语言等)，使其生活质量显著下降。2、其中牙槽骨损伤由先天性畸形、牙周炎或创伤等引起的一类临床疾病，影响患者的语言、咀嚼和吞咽等关键生理功能。及时干预治疗，能有效减少骨吸收及相关口腔疾病的发生，对于提高患者的生活质量、维持口腔健康至关重要。尽管自体移植物/同种异体移植物是修复牙槽骨缺损的“金标准”，但由于供体受限、供体部位发病率高等问题，限制了其实际应用。为了解决这些限制，现有技术中，已经开发了各种人工植入材料，如金属、陶瓷和聚合物基产。然而，由于牙槽骨复杂的解剖结构、丰富的血供和特殊的局部生理微环境(口腔菌群较多)，牙槽骨治疗面临着独特的挑战。延迟或不适当的治疗会导致局部应激水平升高和感染/炎症，进而引发不良的宿主防御反应，影响骨重塑过。3、因此，提供一种生物材料，可用于牙槽骨缺损修复，能精确地符合特定的缺损几何形状，并具有多种功能，包括提供机械支持、减轻炎症、促进血管生成和骨组织再生，成为了本领域技术人员亟待解决的技术问题。技术实现思路1、本发明的目的之一在于，提供一种离子交联型复合蛋清微球的制备方法，采用该方法制得的复合微球材料具有可注射性，可微创或手术填充缺损部位，具有良好的力学稳定性和生物相容性、生物活性、缓释特性及骨诱导性，能够达到多效促成骨的治疗效果。2、本发明的目的之二在于，提供采用该方法制得的离子交联型复合蛋清微球。3、本发明的目的之三在于，提供该离子交联型复合蛋清微球的应用。4、为实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：5、本发明公开的一种离子交联型复合蛋清微球的制备方法，包括如下步骤：6、步骤1.乳化：将蛋清液、液体石蜡、表面活性剂混合均匀，形成油包水乳化体系；7、步骤2.固化：向乳化液中滴加入碱液，搅拌，而后加入cacl2溶液，搅拌；8、步骤3.破乳：向步骤2中固化后的乳化体系中加入有机溶剂，搅拌，离心；9、步骤4.清洗干燥：将步骤3的离心沉淀清洗后，冻干，即得所述离子交联型复合蛋清微球。10、本发明的部分实施方案中，所述步骤1中，表面活性剂包括司盘类表面活性剂、吐温类表面活性剂中的至少一种；11、优选地，所述司盘类表面活性剂为司盘-80；12、优选地，所述吐温类表面活性剂为吐温-80；13、更优选地，所述表面活性剂为司班-80与吐温-80的混合物。14、本发明的部分实施方案中，所述步骤1中，油相为液体石蜡与表面活性剂，水相为蛋清，油水两相的质量比为3:1～6:1。15、本发明的部分实施方案，液体石蜡与表面活性剂的质量比为27～40:1；优选地，表面活性剂中吐温类表面活性剂与司盘类表面活性剂的质量比为0.5～1.5:1。16、本发明的部分实施方案中，所述步骤2中的碱包括有机碱、无机碱；优选为无机碱，更优选地，所述无机碱包括氢氧化钠、氢氧化钾中的至少一种；17、进一步优选地，无机碱液的浓度为1～3wt％，优选为2～2.5wt％，更优选为2.4wt％；18、进一步优选的，每10g蛋清中加入无机碱液的体积为1～3ml，优选为1～1.2ml，更优选为1.2ml。19、本发明的部分实施方案中，所述步骤2中的ca2+溶液包括cacl2溶液；20、优选地，所述cacl2溶液的浓度为15～20wt％，更优选18.6wt％；21、优选地，每10g蛋清中加入cacl2溶液加入量为1～3ml，优选1.2ml。22、本发明的部分实施方案中，所述步骤2中的搅拌速度为200-1000rpm，优选为400rpm，23、向乳化液中滴加入碱液后的搅拌时间为1～2h，优选为1.5h；24、加入cacl2溶液后的搅拌时间为0.5～2h，优选为1h。25、本发明的部分实施方案中，所述步骤3中，所述有机溶剂包括石油醚；26、优选地，石油醚与乳化体系的体积比为0.5～2:1，更优选为1:1；27、优选地，加入有机溶剂后搅拌10～60min，更优选为20min；28、优选地，搅拌速度为200-1000rpm，更优选为400rpm。29、本发明的部分实施方案中，所述步骤1中，还加入有纳米活性填料；将蛋清液、液体石蜡、表面活性剂、纳米活性填料混合均匀，形成油包水乳化体系；30、优选地，所述纳米活性填料包括纳米介孔二氧化硅、掺锌-介孔二氧化硅纳米颗粒、羟基磷灰石纳米颗粒中的至少一种；更优选为掺锌-介孔二氧化硅纳米颗粒；31、更优选地，所述纳米活性填料的用量为蛋清液质量的0.5～1.5wt％。32、本发明公开的一种离子交联型复合蛋清微球，采用上述的方法制备得到。33、本发明公开的离子交联型复合蛋清微球在制备骨缺损填充材料或/和骨缺损修复材料中的应用；34、优选地，所述骨缺损为牙槽骨或/和颅颌面骨的缺损。35、本发明所述掺锌-介孔二氧化硅纳米颗粒采用溶胶凝胶法制得。优选地，以六水合硝酸锌和正硅酸乙酯为原料，采用溶胶凝胶法制得；更优选地，每1ml正硅酸乙酯采用六水合硝酸锌0.2～2g，更优选为0.5g。36、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：37、本发明设计科学，构思巧妙，采用本发明方法制得的交联蛋清微球具有力学稳定性和可注射性、良好的力学性能和生物相容性、生物活性、缓释特性及骨诱导性，能够达到多效促成骨的治疗效果。38、本发明的交联蛋清微球具有可注射性，其精确地符合特定的缺损几何形状，且表现出较高的力学强度，硬度接近人颅颌面骨，适合用于非承重骨种植体。本发明的交联蛋清微球具有良好的矿化能力和降解能力，且降解速率能有效匹配骨组织长入的时间，还具有明显的促成骨分化作用效果。本发明的交联蛋清微球通过掺杂，可以提高微球抗炎作用效果，并且zn-sio2的掺入能有效促进血管生成。本发明的交联蛋清微球具有良好的生物相容性，植入大鼠牙槽骨缺损28天后，观察到大量骨长入，新生骨组织逐渐成熟。39、本发明以鸡蛋清为原料制备离子交联型复合蛋清微球，鸡蛋来源广、价格低且富含大量维生素、矿物质及蛋白质。蛋清所含蛋白质的氨基酸组成与人体组织蛋白质最为接近，具有良好的可降解吸收性和无毒无刺激性。40、本发明的离子交联型复合蛋清微球有望改善牙槽骨及颌面部骨缺损患者的治疗效果及生活质量，并大幅降低治疗费用支出，具有广阔的研究价值和市场应用前景。技术特征：1.一种离子交联型复合蛋清微球的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：2.根据权利要求1所述的一种离子交联型复合蛋清微球的制备方法，其特征在于，所述步骤1中，表面活性剂包括司盘类表面活性剂、吐温类表面活性剂中的至少一种；3.根据权利要求1所述的一种离子交联型复合蛋清微球的制备方法，其特征在于，所述步骤1中，油相为液体石蜡与表面活性剂，水相为蛋清，油水两相的质量比为3:1～6:1。4.根据权利要求1所述的一种离子交联型复合蛋清微球的制备方法，其特征在于，所述步骤2中的碱包括有机碱、无机碱；优选为无机碱，更优选地，所述无机碱包括氢氧化钠、氢氧化钾中的至少一种；5.根据权利要求1所述的一种离子交联型复合蛋清微球的制备方法，其特征在于，所述步骤2中的ca2+溶液包括cacl2溶液，6.根据权利要求1所述的一种离子交联型复合蛋清微球的制备方法，其特征在于，所述步骤2中的搅拌速度为200-1000rpm，优选为400rpm，7.根据权利要求1所述的一种离子交联型复合蛋清微球的制备方法，其特征在于，所述步骤3中，所述有机溶剂包括石油醚；8.根据权利要求1-7任意一项所述的一种离子交联型复合蛋清微球的制备方法，其特征在于，所述步骤1中，还加入有纳米活性填料；将蛋清液、液体石蜡、表面活性剂、纳米活性填料混合均匀，形成油包水乳化体系；9.一种离子交联型复合蛋清微球，其特征在于，采用权利要求1-8任意一项所述的方法制备得到。10.如权利要求9所述的一种离子交联型复合蛋清微球在制备骨缺损填充材料或/和骨缺损修复材料中的应用；优选地，所述骨缺损为牙槽骨或/和颅颌面骨的缺损。技术总结本发明公开了一种离子交联型复合蛋清微球、其制备方法和应用，属于医用植入材料技术领域。本发明公开制备方法包括：将蛋清液、液体石蜡、表面活性剂混合均匀，形成油包水乳化体系；向乳化液中滴加入碱液，搅拌，而后加入Ca