SNRNP200作为靶点在制备治疗三阴性乳腺癌药物中的

本发明属于生物，具体涉及snrnp200作为靶点在制备治疗三阴性乳腺癌药物中的应用。背景技术：1、乳腺癌是全球女性发病率最高的恶性肿瘤，占女性恶性肿瘤的31％，严重危害女性的生命健康。根据美国癌症协会公布最新数据，2023年美国预计女性新发乳腺癌病例数为297790，预计乳腺癌死亡病例数为43170，约占总癌症死亡病例的15％。乳腺癌在具有高发病率的同时，也具有高肿瘤异质性的特征。2、目前通过免疫组织化学的方法，将乳腺癌按照雌激素受体(estrogen receptor，er)、孕激素受体(progesterone receptor，pr)、人表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor-2，her2)的表达情况与ki-67增殖指数可将乳腺癌分为luminala、luminal b型、her2阳性型以及三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,tnbc)。其中，tnbc由于均缺乏er、pr、her2表达，因此被划分同一亚型,是一组具有不同组织病理特征、基因特征和免疫特征的高度异质性疾病。与其他亚型相比，tnbc缺乏有效的治疗靶点，具有侵袭性强、转移潜能高、易复发、预后差等特点，因此一直是乳腺癌治疗领域亟需突破的一大难关。3、rna剪接由剪接体介导并受到精密的调控，在基因表达的过程中发挥着重要的作用。在真核生物中，由于基因结构的不连续性，前体mrna需要通过rna剪接将内含子去除并将外显子连接起来，进而形成成熟的mrna，作为模板参与蛋白质的翻译过程。在真核生物中，约95％的基因会通过可变剪接(alternative splicing，as)形成多种不同的成熟mrna异构体。这一过程极大地丰富了基因的多样性，满足了不同组织和器官对于蛋白质结构和功能多样性和复杂性的需求。剪接扰动在肿瘤中十分常见，被认为是多种肿瘤的关键驱动因素。在一项泛癌研究中，研究者探索了33种癌症共有的肿瘤驱动突变事件，其中119个为编码核心剪接因子的基因，约占所有核心剪接因子编码基因的60％。随着高通量测序的发展以及对转录本功能深入研究，越来越多的肿瘤特异性剪接事件被发现。这些肿瘤特异性剪接事件几乎影响了肿瘤基本特征的各个方面，不仅可以通过自身调节作用参与肿瘤的发生发展，还可通过影响部分基因的表达水平、生成新的剪接事件衍生蛋白而发挥多种生物学功能。4、在过去十年中，多项研究表明rna的剪接失调不仅作为多种肿瘤共有的基本分子特征，还常常在肿瘤发生中起着关键的驱动作用，甚者是肿瘤发生的启动作用。剪接失调可赋予肿瘤细胞更高的增殖能力、迁移和转移潜能，介导肿瘤的化疗耐药和免疫逃逸。多项研究指出，肿瘤剪接失调的主要原因是编码剪接因子的基因发生突变或其表达水平发生改变，尤其是编码剪接体核心蛋白的基因，会显著影响肿瘤的rna剪接。鉴于剪接失调在肿瘤发生中的关键作用，许多靶向关键剪接体蛋白的小分子药物正在进行临床前和临床开发。部分肿瘤(包括tnbc)，因其具有高度激活的转录特征，显示出对rna剪接的高度依赖和对剪接整体扰动的脆弱性，在这些肿瘤中靶向剪接过程可以更为有效的杀伤肿瘤。有趣的是，研究指出靶向部分剪接基因对乳腺癌具有肿瘤选择性杀伤和致死作用，在正常细胞中靶向这些剪接基因并不会导致细胞的死亡。5、因此，在tnbc中研究剪接特征和剪接因子具有重要的研究意义，靶向rna剪接失调具有与其他治疗方案相比不可替代的优势。技术实现思路1、本发明提供snrnp200作为靶点在制备治疗三阴性乳腺癌药物中的应用，本发明公开了snrnp200可以作为靶点进行三阴性乳腺癌的治疗，snrnp200抑制剂aso作为一种短rna寡核苷酸，可以通过碱基互补配对靶向snrnp200，促进其降解调控基因表达，从而抑制可变剪接造成的剪接失调，在体外和体内显著抑制三阴性乳腺癌细胞的生长，从而达到治疗三阴性乳腺癌的目的。2、本发明中涉及的术语：3、在本发明中，snrnp200为剪接体活性分子小核核糖核蛋白u5亚基200。4、在本发明中，aso为反义寡核苷酸，是snrnp200抑制剂，aso作为一种短rna寡核苷酸，可以通过碱基互补配对靶向snrnp200，促进其降解调控基因表达，从而抑制可变剪接造成的剪接失调。5、本发明为实现上述目的采用的技术方案是：snrnp200作为靶点在制备治疗三阴性乳腺癌药物中的应用，所述snrnp200的核苷酸靶向序列如seq id no.1-seq id no.3所示。6、进一步地，所述药物为靶向snrnp200的反义寡核苷酸。7、进一步地，所述反义寡核苷酸通过碱基互补配对靶向snrnp200。8、本发明还提供了一种诊断三阴性乳腺癌的试剂盒，包括能够检测上述snrnp200表达量的试剂。9、本发明还提供了一种治疗三阴性乳腺癌的试剂盒，包括上述的反义寡核苷酸。10、本发明还提供了一种表达载体，含有上述的反义寡核苷酸。11、本发明还提供了一种宿主细胞，含有上述的反义寡核苷酸或表达载体。12、与现有技术相比，本说明书实施例采用的上述至少一个技术方案能够达到的有益效果至少包括：13、本发明确立了剪接体活性分子snrnp200在三阴性乳腺癌发生发展中的重要作用，提供的snrnp200抑制剂aso具有抑制snrnp200蛋白表达作用，进而抑制其可变剪接功能；该抑制剂可以在体外和体内显著抑制三阴性乳腺癌细胞的生长，从而达到治疗三阴性乳腺癌的目的，并因此具有重要的医药开发价值。技术特征：1.snrnp200作为靶点在制备治疗三阴性乳腺癌药物中的应用，其特征在于，所述snrnp200的核苷酸靶向序列如seq id no.1-seq id no.3所示。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物为靶向snrnp200的反义寡核苷酸。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述反义寡核苷酸通过碱基互补配对靶向snrnp200。4.一种诊断三阴性乳腺癌的试剂盒，其特征在于，包括能够检测权利要求1-3任一项所述的snrnp200表达量的试剂。5.一种治疗三阴性乳腺癌的试剂盒，其特征在于，包括如权利要求2-3任一项所述的反义寡核苷酸。6.一种表达载体，其特征在于，含有如权利要求2-3任一项所述的反义寡核苷酸。7.一种宿主细胞，其特征在于，含有如权利要求2-3任一项所述的反义寡核苷酸或如权利要求6所述的表达载体。技术总结本发明提供了SNRNP200作为靶点在制备治疗三阴性乳腺癌药物中的应用，所述SNRNP200的核苷酸靶向序列如SEQ ID NO.1‑SEQ ID NO.3所示，SNRNP200主要在TNBC细胞系Hs‑578T、BT‑549和MDA‑MB‑231中表达较高，本发明以SNRNP200作为靶点，使用ASO靶向抑制SNRNP200，促进其降解调控基因表达，从而抑制可变剪接造成的剪接失调，在体外和体内显著抑制三阴性乳腺癌细胞的生长，从而达到治疗三阴性乳腺癌的目的。技术研发人员：胡欣,杨闻萧,骆红,韩香臣,韩博悦受保护的技术使用者：复旦大学附属肿瘤医院技术研发日：技术公布日：2024/8/15