用于治疗和/或预防弥漫性肺泡出血的方法与流程

背景技术：0、背景1、补体系统提供在人和其它脊椎动物中起始、扩大和协调对微生物感染和其它急性损伤的免疫反应的早期作用机制(m.k.liszewski和j.p.atkinson,1993,fundamentalimmunology,第三版,由w.e.paul编辑,raven press,ltd.,new york)。尽管补体活化对潜在的病原体提供重要的第一线防御，但促进防护性免疫反应的补体活性也可代表对宿主的潜在威胁(k.r.kalli等,springersemin.immunopathol.15:417-431,1994；b.p.morgan,eur.j.clinical investig.24:219-228,1994)。例如，c3和c5蛋白水解产物募集和激活中性粒细胞。尽管对宿主防御是必不可少的，但激活的中性粒细胞无差别地释放破坏性的酶并可导致器官损伤。另外，补体活化可引起溶解的补体组分沉积在邻近的宿主细胞上以及微生物靶上，导致宿主细胞溶解。2、补体系统还涉及许多急性和慢性疾病状态的发病机理，包括：心肌梗死、中风、ards、再灌注损伤、感染性休克、热烧伤后的毛细管渗漏、心肺分流术后的炎症、移植物排斥、类风湿性关节炎、多发性硬化、重症肌无力和阿尔茨海默氏病。在几乎所有的这些病况中，补体不是原因，而是涉及发病机理的数个因素之一。然而，补体活化可能是主要的病理机制和代表在许多这些疾病状态中临床控制的有效点。越来越承认在各种疾病状态中补体-介导的组织损伤的重要性，强调了对有效的补体抑制性药物的需求。迄今为止，艾库组单抗(eculizumab)一种针对c5的抗体，是唯一的补体-靶向药物，其已被批准用于人用。然而，c5是在补体系统中位于“下游”的数个效应分子之一，并且c5的阻断并不抑制补体系统的活化。因此，与“下游”补体抑制剂相比，补体活化的起始步骤的抑制剂将具有显著的优势。3、目前，广为接受的是，补体系统可通过三个不同的途径激活：经典途径、凝集素途径和替代途径。经典途径通常通过包含与外来颗粒(即，抗原)结合的宿主抗体的复合物触发，因此需要在先暴露于抗原以产生特异性抗体反应。因为经典途径的活化依赖于通过宿主的在先的适应性免疫反应，因此经典途径是获得性免疫系统的一部分。相比之下，凝集素和替代途径两者均不依赖于适应性免疫，并且是先天性免疫系统的一部分。4、补体系统的活化导致丝氨酸蛋白酶酶原的序贯活化。经典途径活化的第一步骤是特定的识别分子c1q与抗原-结合的igg和igm分子的结合。c1q与clr和cls丝氨酸蛋白酶酶原作为称为cl的复合物缔合。在c1q与免疫复合物结合后，clr的arg-ile位点的自体蛋白水解裂解之后是clr-介导的cls的裂解和活化，其由此需要裂解c4和c2的能力。c4被裂解成两个片段，称为c4a和c4b，并且类似地，c2被裂解成c2a和c2b。c4b片段能够与邻近的羟基或氨基形成共价键和通过与激活的c2的c2a片段的非共价相互作用产生c3转化酶(c4b2a)。c3转化酶(c4b2a)通过蛋白水解裂解成c3a和c3b亚组分来激活c3，导致产生c5转化酶(c4b2a3b)，其通过裂解c5导致形成膜攻击复合物(与c6、c7、c8和c-9组合的c5b，亦称为“mac”)，其可破坏细胞膜，导致细胞溶解。激活形式的c3和c4(c3b和c4b)共价地沉积在外来靶标表面上，其被多个吞噬细胞上的补体受体识别。5、独立地，通过凝集素途径的补体系统活化的第一步骤也是特定的识别分子的结合，其之后是缔合的丝氨酸蛋白酶酶原的活化。然而，不是通过c1q的免疫复合物的结合，凝集素途径中的识别分子包括一组糖-结合蛋白(甘露聚糖-结合凝集素(mbl)、h-纤维胶凝蛋白(h-ficolin)、m-纤维胶凝蛋白、l-纤维胶凝蛋白和c-型凝集素cl-11)，统称为凝集素。参见j.lu等,biochim.biophys.acta6、1572:387-400,(2002)；holmskov等,annu.rev.immunol.21:547-578(2003)；teh等,immunology 101:225-232(2000))。还参见j.luet等,biochim biophysacta 1572:387-400(2002)；holmskov等,annu rev immunol 21:547-578(2003)；teh等,immunology 101:225-232(2000)；hansen等,j.immunol 185(10):6096-6104(2010)。7、ikeda等首先证实，像c1q一样，在以c4-依赖性方式结合至酵母甘露聚糖-包被的红细胞时，mbl能够激活补体系统(ikeda等,j.biol.chem.262:7451-7454,(1987))。mbl，胶原凝集素蛋白家族的一个成员，是钙-依赖性凝集素，其结合具有位于吡喃糖环的赤道面中的3-和4-羟基的糖。因此，mbl的主要配体是d-甘露糖和n-乙酰基-d-葡糖胺，而不适应该立体要求的糖具有对mbl不可检出的亲和力(weis等,nature 360:127-134,(1992))。mbl和单价糖之间的相互作用非常弱，解离常数通常在单位数毫摩尔范围内。通过亲合力，即通过同时与彼此紧密靠近的多个单糖残基相互作用，mbl实现与聚糖配体紧密的特异性结合(lee等,archiv.biochem.biophys.299:129-136,(1992))。mbl识别通常装饰微生物例如细菌、酵母、寄生虫和某些病毒的糖模式。相比之下，mbl不识别d-半乳糖和唾液酸，次末端和末端的糖，其通常装饰在哺乳动物血浆和细胞表面糖蛋白上存在的"成熟的"复杂糖缀合物。认为该结合特异性促进“外来”表面的识别和有助于保护免于“自-活化”。然而，mbl以高亲和力结合至在哺乳动物细胞的内质网和高尔基体中隔离的n-连接的糖蛋白和糖脂上的高-甘露糖"前体"聚糖簇(maynard等,j.biol.chem.257:3788-3794,(1982))。因此，损坏的细胞是经过mbl结合的凝集素途径活化的潜在靶标。8、纤维胶凝蛋白具有与mbl不同类型的凝集素结构域，称为纤维蛋白原-样结构域。纤维胶凝蛋白以ca++-非依赖性的方式结合糖残基。在人中，已经鉴定了三类纤维胶凝蛋白(l-纤维胶凝蛋白、m-纤维胶凝蛋白和h-纤维胶凝蛋白)。两类血清纤维胶凝蛋白，l-纤维胶凝蛋白和h-纤维胶凝蛋白，共同具有对n-乙酰基-d-葡糖胺的特异性；然而，h-纤维胶凝蛋白还结合n-乙酰基-d-半乳糖按。l-纤维胶凝蛋白、h-纤维胶凝蛋白、cl-11和mbl的糖特异性的差异意味着通过交错的糖缀合物，不同的凝集素可以是互补的和靶标不同的。这一概念得到了最近报道的支持，即，在凝集素途径的已知凝集素中，仅l-纤维胶凝蛋白特异性结合至脂磷壁酸，一种在所有革兰氏阳性细菌上存在的细胞壁糖缀合物(lynch等,j.immunol.9、172:1198-1202,(2004))。胶原凝集素(即，mbl)和纤维胶凝蛋白在氨基酸序列中具有不显著的相似性。然而，这两类蛋白具有相似的结构域组织，并且像c1q一样，装配成寡聚体结构，其使多位点结合的可能性最大化。10、mbl的血清浓度在健康群体中高度可变，这在遗传上受到mbl基因的启动子和编码区中的多态性/突变控制。作为急性期蛋白，mbl的表达还在炎症期间被增量调节。l-纤维胶凝蛋白以类似于mbl的浓度存在于血清中。因此，凝集素途径的l-纤维胶凝蛋白分支在强度上潜在地与mbl臂相当。mbl和纤维胶凝蛋白也可作为调理素起作用，其允许吞噬细胞靶向mbl-和纤维胶凝蛋白-装饰的表面(参见jack等,jleukoc biol.,77(3):328-36(2004),matsushita和fujita,immunobiology,205(4-5):490-7(2002),aoyagi等,jimmunol,174(1):418-25(2005)。这种调理素作用需要这些蛋白与吞噬细胞受体的相互作用(kuhlman等,j.exp.med.169:1733,(1989)；matsushita等,j.biol.chem.271:2448-54,(1996))，其身份尚未确定。11、人mbl通过其胶原-样结构域与独特的c1r/cls-样丝氨酸蛋白酶(称为mbl-相关丝氨酸蛋白酶(masp))形成特异性和高-亲和力相互作用。迄今为止，描述了三种masp。首先，单一酶"masp"被鉴定和表征为负责补体级联起始(即，裂解c2和c4)的酶(matsushita等,jexp med 176(6):1497-1502(1992)；ji等,j.immunol.150:571-578,12、(1993))。随后确定masp活性事实上是两种蛋白酶的混合物：masp-1和masp-2(thiel等,nature 386:506-510,(1997))。然而，已证实mbl-masp-2复合物单独足以补体活化(vorup-jensen等,j.immunol.165:2093-2100,(2000))。此外，masp-2单独以高速裂解c2和c4(ambrus等,j.immunol.170:1374-1382,(2003))。因此，masp-2是负责活化c4和c2以产生c3转化酶c4b2a的蛋白酶。这与经典途径的c1复合物显著不同，在经典途径中两种特异性丝氨酸蛋白酶(c1r和c1s)的协调作用导致补体系统的活化。另外，第三种新的蛋白酶masp-3已经分离(dahl,m.r.等,immunity 15:127-35,2001)。masp-1和masp-3是相同基因的可变剪接产物。13、masp与cl复合物的酶组分clr和cls共有相同的结构域组织(sim等,biochem.soc.trans.28:545,(2000))。这些结构域包括n-末端clr/cls/海胆vegf/骨形态发生蛋白(cub)结构域、表皮生长因子-样结构域、第二cub结构域、串联的补体控制蛋白结构域和丝氨酸蛋白酶结构域。如在c1蛋白酶中，masp-2的活化通过裂解邻近丝氨酸蛋白酶结构域的arg-i1e键发生，这将所述酶分成二硫键连接的a和b链，后者由丝氨酸蛋白酶结构域组成。14、mbl还可与masp-2的可变剪接形式缔合，称为19kda的mbl-相关蛋白(map19)或小mbl-相关蛋白(smap)，其缺少催化活性masp2(stover,j.immunol.162:3481-90,(1999)；takahashi等,int.immunol.11:859-863,(1999))。map19包括masp-2的起始两个结构域，接着是四个独特氨基酸的额外序列。map19的功能尚不清楚(degn等,jimmunol.methods,2011)。masp-1和masp-2基因分别位于人第3和1号染色体上(schwaeble等,immunobiology15、205:455-466,(2002))。16、若干条证据表明，存在不同的mbl-masp复合物和在血清中大部分的masp不与mbl复合(thiel等,j.immunol.165:878-887,17、(2000))。h-和l-纤维胶凝蛋白两者均结合所有的masp和激活凝集素补体途径，如mbl一样(dahl等,immunity 15:127-35,(2001)；18、matsushita等,j.immunol.168:3502-3506,(2002))。凝集素和经典途径两者形成共同的c3转化酶(c4b2a)，这两个途径在该步骤处汇合。19、广泛认为在首次感染的宿主中，凝集素途径在宿主防御感染方面具有重要作用。mbl参与宿主防御的有力证据来自功能mbl的血清水平降低的患者的分析(kilpatrick,biochim.biophys.20、acta1572:401-413,(2002))。这样的患者显示对复发细菌和真菌感染的易感性。在生命的早期，因为母体来源的抗体滴度减弱，在易损性的表观窗口期间，但在抗体反应的完全库发展之前，这些症状通常是明显的。该综合征经常因为mbl的胶原部分的数个位点的突变导致，其干扰mbl寡聚体的正确形成。然而，因为mbl可起不依赖于补体的调理素的作用，尚不清楚对感染的易感性增加归因于受损的补体活化的程度。21、与经典和凝集素途径相反，未发现替代途径的引发剂实现c1q和凝集素在其它两个途径中进行的识别功能。目前广泛公认的是，替代途径自发地经历低水平的更新活化(turnover activation)，其可容易地在外来或其它异常表面(细菌、酵母、病毒感染的细胞或受损组织)上被放大，所述表面缺少控制自发补体活化的适当分子元件。存在四种血浆蛋白直接参与替代途径的活化：c3、因子b和d、和备解素。22、尽管广泛的证据表明在非感染性人类疾病的发病机理中牵涉到经典和替代补体途径两者，但凝集素途径的作用仅刚开始评估。最近的研究提供了凝集素途径的活化可能是在缺血/再灌注损伤中补体活化和相关炎症的原因的证据。collard等(2000)报道了经受氧化应激的培养的内皮细胞结合mbl和在暴露于人血清时显示c3沉积(collard等,am.j.pathol.156:1549-1556,(2000))。另外，用封闭性抗-mbl单克隆抗体处理人血清抑制mbl结合和补体活化。这些发现延伸到心肌缺血-再灌注的大鼠模型，其中与用对照抗体处理的大鼠相比，用针对大鼠mbl的封闭性抗体处理的大鼠显示在冠状动脉阻塞后显著较低的心肌损伤(jordan等,circulation 104:1413-1418,23、(2001))。在氧化应激后mbl与血管内皮结合的分子机制尚不清楚；最近的研究表明在氧化应激后凝集素途径的活化可通过mbl结合血管内皮细胞角蛋白和不结合糖缀合物而被介导(collard等,am.j.pathol.159:1045-1054,(2001))。其它研究在缺血/再灌注损伤的发病机理中牵涉到经典和替代途径，并且凝集素途径在该疾病中的作用仍有争议(riedermann,n.c.等,am.j.pathol.162:363-367,2003)。24、最近的研究表明，需要masp-1(和可能还有masp-3)以将替代途径活化酶因子d从其酶原形式转化成其酶活性形式(参见takahashi m.等,jexp med207(1):29-37(2010))。该过程的生理学重要性通过在masp-1/3-缺陷小鼠的血浆中缺少替代途径功能活性来说明。从天然c3蛋白水解产生c3b对于替代途径发挥功能是必需的。因为替代途径c3转化酶(c3bbb)包含c3b作为基本亚基，关于经过替代途径的第一c3b的来源的疑问提出了令人困扰的问题和引起了大量的研究。25、c3属于包含罕见的称为硫酯键的翻译后修饰的蛋白(以及c4和α-2巨球蛋白)的家族。硫酯基团包含谷氨酰胺，其末端羰基与远离三个氨基酸的半胱氨酸的巯基形成共价硫酯键。该键是不稳定的和亲电子谷氨酰基-硫酯可与亲核部分例如羟基或氨基反应，因此与其它分子形成共价键。当隔离在完整c3的疏水袋内时，硫酯键是相当稳定的。然而，c3蛋白水解裂解成c3a和c3b导致高反应性硫酯键暴露在c3b上，并且在包括羟基或氨基的邻近部分亲核攻击后，c3b变成与靶标共价地连接。除了其在c3b与补体靶标共价连接中的充分证明的作用之外，还认为c3硫酯在触发替代途径中具有关键的作用。根据广泛公认的"tick-over理论"，替代途径通过产生液相转化酶ic3bb而开始，其自具有水解的硫酯的c3(ic3；c3(h2o))和因子b形成(lachmann,p.j.等,springersemin.immunopathol.7:143-162,26、(1984))。c3b-样c3(h2o)通过蛋白的内部硫酯的缓慢自发水解，自天然c3产生(pangburn,m.k.等,j.exp.med.154:856-867,1981)。通过c3(h2o)bb转化酶的活性，c3b分子沉积在靶标表面上，从而引发替代途径。27、关于替代途径的活化的引发剂了解甚少。认为激活剂包括酵母细胞壁(酵母聚糖)、许多纯的多糖、兔红细胞、某些免疫球蛋白、病毒、真菌、细菌、动物肿瘤细胞、寄生虫和受损的细胞。这些激活剂共同的唯一特征是存在糖，但糖结构的复杂性和多样性使得其难以建立共有的被识别的分子决定簇。广泛公认的是，替代途径活化通过在该途径的抑制性调节组分(例如因子h、因子i、daf和cr1以及作为替代途径的唯一正调节剂的备解素)之间的精细平衡得到控制(参见schwaeble w.j.和reid k.b.,immunol today 20(1):17-21(1999))。28、除了上述明显未调节的活化机制之外，替代途径还可为凝集素/经典途径c3转化酶(c4b2a)提供有力的扩增环，因为产生的任何c3b可与因子b一起参与形成另外的替代途径c3转化酶(c3bbb)。替代途径c3转化酶通过结合备解素而稳定。备解素延长替代途径c3转化酶的半寿期6-10倍。将c3b添加至替代途径c3转化酶导致形成替代途径c5转化酶。29、认为所有三个途径(即，经典、凝集素和替代)在c5处汇合，其经裂解形成具有多种促炎效应的产物。汇合的途径被称为末端补体途径。c5a是最有效的过敏毒素，诱发平滑肌和血管紧张度以及血管通透性的改变。它也是有力的化学吸引素以及中性粒细胞和单核细胞的活化剂。c5a-介导的细胞活化可通过诱导释放多种另外的炎性介质，包括细胞因子、水解酶、花生四烯酸代谢物和活性氧物质，显著放大炎性反应。c5裂解导致形成c5b-9，亦称为膜攻击复合物(mac)。现在存在有力的证据表明，除了其作为溶解孔-形成复合物的作用之外，亚溶解的(sublytic)mac沉积还可在炎症中起重要作用。30、除了其在免疫防御中的基本作用之外，在许多临床条件下补体系统还有助于组织损伤。因此，对开发治疗上有效的补体抑制剂以预防这些不良作用存在迫切的需要。31、简述32、提供本简述，以简单的形式介绍所选择的概念，其在下文的详细描述中进一步描述。本简述不意欲鉴别所要求保护的主题的关键特征，也不意欲用作确定所要求保护的主题的范围的辅助。33、在一个方面，本发明提供在患有血栓性微血管病(tma)的受试者中抑制微血管内皮细胞损伤和/或血栓形成的方法，包括给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体的组合物。在一些实施方案中，所述受试者患有或有风险发生选自溶血性尿毒综合征(hus)、血栓性血小板减少性紫癜(ttp)和非典型溶血性尿毒综合征(ahus)的tma。在一些实施方案中，在给予组合物之前，所述受试者被确定显示选自以下的一个或多个症状：(i)贫血、(ii)血小板减少、(iii)肾机能不全和(iv)肌酸酐升高，和所述组合物以改进所述一个或多个症状的有效量和足够时间给予。在一些实施方案中，masp-2抑制剂是抗-masp-2抗体或其片段。在一些实施方案中，masp-2抑制剂是特异性结合seqid no:6的一部分的抗-masp-2单克隆抗体或其片段。在一些实施方案中，masp-2抑制剂抑制微血管内皮细胞损伤。34、在另一方面，本发明提供在患有或有风险发生非典型溶血性尿毒综合征(ahus)的受试者中抑制masp-2-依赖性补体活化的方法，包括给予所述受试者包含有效抑制masp-2依赖性补体活化的量的masp-2抑制剂的组合物。在一个实施方案中，在给予组合物之前，所述受试者被确定显示选自以下的一个或多个症状：(i)贫血、(ii)血小板减少、(iii)肾机能不全和(iv)肌酸酐升高，和所述组合物以改进所述一个或多个症状的有效量和足够时间给予。在一个实施方案中，所述受试者患有或有风险发生非-因子h依赖性ahus。在一个实施方案中，所述受试者患有与因子i、因子b或膜辅因子cd46相关的ahus。在一个实施方案中，masp-2抑制剂是特异性结合seq id no:6的一部分的抗-masp-2抗体或其片段，例如抗-masp-2单克隆抗体或其片段。在一个实施方案中，masp-2抑制剂抑制微血管内皮细胞损伤。在一个实施方案中，masp-2抑制剂抑制血栓形成。35、在另一方面，本发明提供减少有风险发生非典型溶血性尿毒综合征(ahus)的受试者将患有与ahus有关的临床症状的可能性的方法。根据本发明的该方面的方法包括：(a)在已知与ahus有关的受试者中确定遗传标记的存在；(b)定期监测所述受试者以确定选自贫血、血小板减少、肾机能不全和肌酸酐升高的至少一种症状的存在与否；和(c)在确定贫血、血小板减少、肾机能不全或肌酸酐升高的至少之一存在时，给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制剂的组合物，其中所述组合物以改进所述一个或多个症状的有效量和足够时间给予。在一个实施方案中，masp-2抑制剂是特异性结合seqid no:6的一部分的抗-masp-2抗体或其片段，例如抗-masp-2单克隆抗体或其片段。在所述方法的一个实施方案中，步骤(a)包括对获自所述受试者的样品进行遗传筛选试验和鉴定在选自补体因子h(cfh)、因子i(cfi)、因子b(cfb)、膜辅因子cd46、c3、补体因子h-相关蛋白(cfhr1)、抗凝血蛋白凝血调节蛋白(thbd)、补体因子h-相关蛋白3(cfhr3)和补体因子h-相关蛋白4(cfhr4)的基因中与ahus有关的至少一种遗传标记的存在。在一个实施方案中，所述方法进一步包括监测所述受试者已知与触发ahus临床症状有关的事件的发生，和在触发事件发生之前、期间或之后，给予所述受试者包含masp-2抑制剂的组合物。在一个实施方案中，与触发ahus临床症状有关的事件选自药物暴露、感染、恶性肿瘤、损伤、器官或组织移植和妊娠。在一个实施方案中，感染是细菌感染。在一个实施方案中，组合物经皮下给予。在一个实施方案中，masp-2抑制剂抑制微血管内皮细胞损伤。在一个实施方案中，masp-2抑制剂抑制血栓形成。36、在另一方面，本发明提供在患有或有风险发生感染继发的非典型溶血性尿毒综合征(ahus)的受试者中抑制masp-2-依赖性补体活化的方法，包括给予所述受试者包含有效抑制masp-2补体活化的量的masp-2抑制剂的组合物。在一个实施方案中，所述受试者患有或有风险发生与肺炎链球菌(s.pneumonia)感染有关的非肠道ahus。在一个实施方案中，masp-2抑制剂是特异性结合seq id no:6的一部分的抗-masp-2抗体或其片段，例如抗-masp-2单克隆抗体或其片段。在一个实施方案中，masp-2抑制剂抑制微血管内皮细胞损伤。在一个实施方案中，masp-2抑制剂抑制血栓形成。37、在另一方面，本发明提供治疗患有非典型溶血性尿毒综合征(ahus)的受试者的方法，包括给予所述受试者包含有效抑制masp-2依赖性补体活化的量的masp-2抑制剂的组合物，其中masp-2抑制剂通过静脉内导管或其它导管递送方法给予。在一个实施方案中，所述方法进一步包括用血浆去除术治疗患者。在一个实施方案中，在不存在血浆去除术时给予包含masp-2抑制剂的组合物。在一个实施方案中，包含masp-2抑制剂的组合物通过导管给予第一段时间，进一步包括给予包含masp-2抑制剂的组合物第二段时间，其中组合物在第二段时间期间经皮下给予。在一个实施方案中，所述方法进一步包括定期测定至少一种补体因子的水平，其中与标准值或健康受试者相比，测定至少一种补体因子的水平降低指示需要继续用组合物治疗。在一个实施方案中，masp-2抑制剂是特异性结合seq id no:6的一部分的抗-masp-2抗体或其片段，例如抗-masp-2单克隆抗体或其片段。在一个实施方案中，masp-2抑制剂抑制微血管内皮细胞损伤。在一个实施方案中，masp-2抑制剂抑制血栓形成。38、在另一方面，本发明提供治疗患有血栓性血小板减少性紫癜(ttp)或显示与ttp的诊断一致的症状的受试者的方法，包括给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制剂的组合物，其中masp-2抑制剂通过静脉内导管或其它导管递送方法给予所述受试者。在一个实施方案中，所述受试者显示选自中枢神经系统受累、血小板减少、严重的心脏受累、严重的肺受累、胃肠梗塞和坏疽的至少一个或多个症状。在一个实施方案中，所述受试者对adamts13的抑制剂的存在测试阳性，和所述方法进一步包括给予受试者免疫抑制剂。在一个实施方案中，在不存在血浆去除术时给予包含masp-2抑制剂的组合物第一段时间。在一个实施方案中，所述受试者对adamts-13的抑制剂的存在测试阳性，和所述方法进一步包括给予adamts-13。在一个实施方案中，所述方法进一步包括用血浆去除术治疗患者。在一个实施方案中，包含masp-2抑制剂的组合物在存在血浆去除术时给予。在一个实施方案中，包含masp-2抑制剂的组合物通过导管给予第一段时间，进一步包括给予包含masp-2抑制剂的组合物第二段时间，其中在第二段时间期间组合物经皮下给予。在一个实施方案中，所述方法进一步包括定期测定至少一种补体因子的水平，其中与标准值或健康受试者相比，测定至少一种补体因子的水平降低指示需要继续用组合物治疗。在一个实施方案中，masp-2抑制剂是特异性结合seq id no:6的一部分的抗-masp-2抗体或其片段，例如抗-masp-2单克隆抗体或其片段。在一个实施方案中，masp-2抑制剂抑制微血管内皮细胞损伤。在一个实施方案中，masp-2抑制剂抑制血栓形成。39、在另一方面，本发明提供治疗患有难治性血栓性血小板减少性紫癜(ttp)的受试者的方法，包括给予所述受试者包含有效抑制masp-2依赖性补体活化的量的masp-2抑制剂的组合物。在一个实施方案中，组合物经皮下给予。在一个实施方案中，所述方法进一步包括定期测定至少一种补体因子的水平，其中与标准值或健康受试者相比，测定至少一种补体因子的水平降低指示需要继续用组合物治疗。在一个实施方案中，masp-2抑制剂是特异性结合seq id no:6的一部分的抗-masp-2抗体或其片段，例如抗-masp-2单克隆抗体或其片段。在一个实施方案中，masp-2抑制剂抑制微血管内皮细胞损伤。在一个实施方案中，masp-2抑制剂抑制血栓形成。40、在另一个方面中，本发明提供在患有或有风险发生血栓性微血管病(tma)的受试者中抑制masp-2-依赖性补体活化的方法，其中tma是以下的至少一种：(i)癌症继发性tma；(ii)化学疗法继发性tma；或(iii)移植继发性tma，包括给予受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制剂的组合物。在一些实施方案中，所述受试者患有或有风险发生癌症继发性tma，和masp-2抑制剂以有效降低发生tma的风险或减少tma的严重性的量系统性给予所述受试者。在一些实施方案中，所述受试者患有或有风险发生化学疗法继发性tma，和masp-2抑制剂在化学疗法之前、期间或之后以有效降低发生tma的风险或减少tma的严重性的量系统性给予所述受试者。在一些实施方案中，所述受试者患有或有风险发生移植继发性tma，和masp-2抑制剂在移植程序之前、期间或之后以有效降低发生tma的风险或减少tma的严重性的量系统性给予所述受试者。在一些实施方案中移植程序是同种异体造血干细胞移植物。在一些实施方案中，所述受试者先前已经经历或目前正在经历用抑制补体蛋白c5的裂解的末端补体抑制剂的治疗。在一些实施方案中，所述方法还包括给予受试者抑制补体蛋白c5的裂解的末端补体抑制剂，例如人源化的抗-c5抗体或其抗原结合片段，例如艾库组单抗。41、在另一方面，本发明提供在患有或有风险发生upshaw-schulman综合征(uss)的受试者中抑制masp-2-依赖性补体活化的方法，包括给予受试者包含有效抑制masp-2依赖性补体活化的量的masp-2抑制剂的组合物。在一些实施方案中，所述方法包括治疗有风险发生uss的受试者，其中所述方法包括给予一定量的masp-2抑制剂一段时间，其有效改善或预防与ttp有关的一个或多个临床症状。在一些实施方案中，所述方法还包括周期性地监测所述受试者和在存在已知与触发ttp临床症状有关的事件时给予masp-2抑制剂。在一些实施方案中，所述方法还包括周期性地监测所述受试者和在确定存在贫血、血小板减少症或肌酸上升时给予masp-2抑制剂。在一些实施方案中，所述受试者先前已经经历或目前正在经历用抑制补体蛋白c5的裂解的末端补体抑制剂治疗。在一些实施方案中，所述方法还包括给予受试者抑制补体蛋白c5的裂解的末端补体抑制剂，例如人源化的抗-c5抗体或其抗原结合片段，例如艾库组单抗。42、在另一方面，本发明提供在患有德戈斯病(degos病)的受试者中抑制masp-2-依赖性补体活化的方法，包括给予受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制剂的组合物。在一些实施方案中，所述受试者先前已经经历或目前正在经历用抑制补体蛋白c5的裂解的末端补体抑制剂的治疗。在一些实施方案中，所述方法还包括给予受试者抑制补体蛋白c5的裂解的末端补体抑制剂，例如人源化的抗-c5抗体或其抗原结合片段，例如艾库组单抗。43、在另一方面，本发明提供在患有灾难性抗磷脂综合征(caps)的受试者中抑制masp-2-依赖性补体活化的方法，包括给予受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制剂的组合物。在一些实施方案中，所述受试者先前已经经历或目前正在经历用抑制补体蛋白c5的裂解的末端补体抑制剂的治疗。在一些实施方案中，所述方法还包括给予受试者抑制补体蛋白c5的裂解的末端补体抑制剂，例如人源化的抗-c5抗体或其抗原结合片段，例如艾库组单抗。44、在本发明公开的任何方法的一些实施方案中，masp-2抑制剂是masp-2抑制性抗体或其片段。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体具有减少的效应器功能。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体基本上不抑制经典途径。在一些实施方案中，masp-2抑制剂是抗-masp-2单克隆抗体或其片段，其特异性结合seq id no:6的一部分。在一些实施方案中，抗-masp-2抗体或其片段选自重组抗体、具有降低的效应器功能的抗体、嵌合抗体、人源化的抗体和人抗体。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体是选自fv、fab、fab'、f(ab)2和f(ab')2的抗体片段。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体是单链分子。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体选自igg1分子、igg2和igg4分子。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体是包括s228p突变的igg4分子。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体结合人masp-2的kd为10nm或更小。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体结合masp-2的ccp1结构域中的表位。在一些实施方案中，在体外测定法中在1％人血清中masp-2抑制性抗体以10nm或更小的ic50抑制c3b沉积。在一些实施方案中，在90％人血清中masp-2抑制性抗体以30nm或更小的ic50抑制c3b沉积。45、在本发明公开的任何方法的一些实施方案中，masp-2抑制性单克隆抗体或其抗原结合片段包括：(a)重链可变区，其包含：i)包含seq id no:67的31-35的氨基酸序列的重链cdr-h1；和ii)包含seq id no:67的50-65的氨基酸序列的重链cdr-h2；和iii)包含seq idno:67的95-102的氨基酸序列的重链cdr-h3；和(b)轻链可变区，其包含：i)包含seq id no:70的24-34的氨基酸序列的轻链cdr-l1；和ii)包含seq id no:70的50-56的氨基酸序列的轻链cdr-l2；和iii)包含seq id no:70的89-97的氨基酸序列的轻链cdr-l3。在一些实施方案中，masp-2抑制性单克隆抗体包含seq id no:67所示的重链可变区和seq id no:70所示的轻链可变区。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段特异性地识别由参考抗体所识别的表位的至少一部分，所述参考抗体包含seq id no:67所示的重链可变区和seq id no:70所示的轻链可变区。46、在本发明的另一方面，提供在患有非典型溶血性尿毒综合征(ahus)的受试者中抑制血栓形成的方法，包括给予受试者有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段。在一些实施方案中，与未处理的血清相比，masp-2抑制性抗体抑制在来自患有ahus的受试者的血清中的血栓形成达至少40％。47、在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体以比其对来自同一受试者的血清中的c5b-9沉积的抑制作用高至少20％(例如，高至少30％，高至少40％或高至少50％)的水平抑制在来自患有ahus的受试者的血清中的血栓形成。在一些实施方案中，所述受试者处于ahus的急性期。在一些实施方案中，所述受试者处于ahus的缓解期。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体是单克隆抗体或其片段，其特异性结合seq id no:6的一部分。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体或其片段选自重组抗体、具有降低的效应器功能的抗体、嵌合抗体、人源化的抗体和人抗体。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体是选自fv、fab、fab'、f(ab)2和f(ab')2的抗体片段。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体是单链分子。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体选自igg1分子、igg2和igg4分子。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体是包括s228p突变的igg4分子。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体结合人masp-2的kd是10nm或更小。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体结合masp-2的ccp1结构域中的表位。在一些实施方案中，在体外测定法中在1％人血清中masp-2抑制性抗体以10nm或更小的ic50抑制c3b沉积。在一些实施方案中，在90％人血清中masp-2抑制性抗体以30nm或更小的ic50抑制c3b沉积。在一些实施方案中masp-2抑制性单克隆抗体或其抗原结合片段包括：(a)重链可变区，其包含：i)包含seq id no:67的31-35的氨基酸序列的重链cdr-h1；和ii)包含seq id no:67的50-65的氨基酸序列的重链cdr-h2；和iii)包含seq id no:67的95-102的氨基酸序列的重链cdr-h3；和(b)轻链可变区，其包含：i)包含seq id no:70的24-34的氨基酸序列的轻链cdr-l1；和ii)包含seq id no:70的50-56的氨基酸序列的轻链cdr-l2；和iii)包含seq id no:70的89-97的氨基酸序列的轻链cdr-l3。在一些实施方案中，masp-2抑制性单克隆抗体包含seq id no:67所示的重链可变区和seq id no:70所示的轻链可变区。在一些实施方案中，masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段特异性地识别由参考抗体所识别的表位的至少一部分，所述参考抗体包含seq id no:67所示的重链可变区和seq id no:70所示的轻链可变区。48、在另一方面，本发明提供治疗患有血浆疗法抵抗性ahus的受试者的方法，包括给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体的组合物。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体是特异性结合人masp-2的抗-masp-2单克隆抗体或其片段。在一个实施方案中，抗体或其片段选自重组抗体、具有降低的效应器功能的抗体、嵌合抗体、人源化抗体和人抗体。在一个实施方案中，所述受试者之前已经历，或目前正经历用抑制补体蛋白c5的裂解的末端补体抑制剂治疗，例如其中末端补体抑制剂是人源化抗-c5抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中，所述方法进一步包括用血浆去除术治疗患者。在一个实施方案中，包含masp-2抑制性抗体的组合物在不存在血浆去除术时给予。49、在另一方面，本发明提供治疗患有与造血干细胞移植有关的tma的受试者的方法，包括给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体的组合物。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体是特异性结合人masp-2的抗-masp-2单克隆抗体或其片段。在一个实施方案中，抗体或其片段选自重组抗体、具有降低的效应器功能的抗体、嵌合抗体、人源化抗体和人抗体。在一个实施方案中，所述受试者之前已经历，或当前正经历用抑制补体蛋白c5的裂解的末端补体抑制剂治疗。在一个实施方案中，所述受试者正患有与造血干细胞移植有关的tma，其对用血小板输注的治疗有抵抗，和/或对用血浆去除术的治疗有抵抗。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体以有效改进与造血干细胞移植有关的tma相关的至少一个或多个临床参数的量给予，例如血小板计数增加(例如，治疗之前的血小板计数的至少2倍、至少3倍、至少4倍)、结合珠蛋白增加和/或乳酸脱氢酶减少。50、在另一方面，本发明提供治疗患有与造血干细胞移植有关的持续性tma(hsct-tma)的人受试者的方法，包括给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段的组合物。在一个实施方案中，所述方法进一步包括在给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段的组合物的步骤之前，鉴定具有与造血干细胞移植有关的持续性tma的人受试者。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体是特异性结合人masp-2的单克隆抗体或其片段。在一个实施方案中，抗体或其抗原结合片段选自重组抗体、具有降低的效应器功能的抗体、嵌合抗体、人源化抗体和人抗体。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体基本上不抑制经典途径。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体在90％人血清中以30nm或更小的ic50抑制c3b沉积。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段包含重链可变区，其包含seq id no:67所示的氨基酸序列的cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3；和轻链可变区，其包含seqid no:70所示的氨基酸序列的cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3。在一个实施方案中，在不存在血浆去除术时masp-2抑制性抗体给予患者。在一个实施方案中，所述受试者之前已经历，或当前正经历用人源化抗-c5抗体或其抗原结合片段治疗，例如其中末端补体抑制剂是人源化抗-c5抗体或其抗原结合片段。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体经全身递送至所述受试者。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段以有效改进与造血干细胞移植有关的持续性tma相关的至少一个或多个以下临床参数的量给予：(i)血小板计数增加(例如，治疗之前的血小板计数的至少2倍、至少3倍、至少4倍)；(ii)结合珠蛋白增加；(iii)乳酸脱氢酶(ldh)减少；和/或(iv)肌酸酐减少。51、在另一方面，本发明提供治疗患有或有风险发生移植物抗宿主病(gvhd)的人受试者的方法，包括给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段的组合物。在一个实施方案中，所述受试者之前已经历，或当前正经历，或将经历造血干细胞移植。在一个实施方案中，所述方法进一步包括在给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段的组合物的步骤之前，鉴定患有或有风险发生移植物抗宿主病的人受试者。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体是特异性结合人masp-2的单克隆抗体或其片段。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体或其片段选自重组抗体、具有降低的效应器功能的抗体、嵌合抗体、人源化抗体和人抗体。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体基本上不抑制经典途径。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体在90％人血清中以30nm或更小的ic50抑制c3b沉积。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体经全身递送至所述受试者。在一个实施方案中，所述受试者患有急性gvhd。在一个实施方案中，所述受试者患有类固醇抵抗性gvhd。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段包含重链可变区，其包含seq id no:67所示的氨基酸序列的cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3，和轻链可变区，其包含seq id no:70所示的氨基酸序列的cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3。52、在另一方面，本发明提供治疗、预防或改善与移植物抗宿主病或tma有关的一个或多个神经学症状的方法，包括给予有需要的受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段的组合物。在一个实施方案中，与移植物抗宿主病或tma有关的一个或多个神经学症状选自虚弱、感觉异常、四肢麻痹、感觉运动缺乏、植物神经功能不全性多神经病和/或神经源性膀胱。在一个实施方案中，所述受试者已接受造血干细胞移植和所述受试者正患有选自感觉异常、四肢麻痹和神经源性膀胱的一个或多个神经学症状。在一个实施方案中，所述受试者已接受造血干细胞移植和正患有移植物抗宿主病。在一个实施方案中，所述受试者已接受造血干细胞移植和正患有hsct-tma。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体是特异性结合人masp-2的单克隆抗体或其片段。在一个实施方案中，抗体或其片段选自重组抗体、具有降低的效应器功能的抗体、嵌合抗体、人源化抗体和人抗体。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体基本上不抑制经典途径。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体在90％人血清中以30nm或更小的ic50抑制c3b沉积。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体经全身递送至所述受试者。在一个实施方案中，所述方法进一步包括在给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段的组合物的步骤之前，鉴定患有与造血干细胞移植有关的一个或多个神经学症状的人受试者。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段包含重链可变区，其包含seq id no:67所示的氨基酸序列的cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3，和轻链可变区，其包含seq id no:70所示的氨基酸序列的cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3。53、在另一方面，本发明提供治疗患有或有风险发生与造血干细胞移植有关的弥漫性肺泡出血(dah)的人受试者的方法，包括给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段的组合物。在一个实施方案中，所述受试者之前已经历，或当前正经历，或将经历造血干细胞移植。在一个实施方案中，所述方法进一步包括在给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段的组合物的步骤之前，鉴定患有或有风险发生弥漫性肺泡出血(dah)的人受试者。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体是特异性结合人masp-2的单克隆抗体或其片段。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体或其片段选自重组抗体、具有降低的效应器功能的抗体、嵌合抗体、人源化抗体和人抗体。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体基本上不抑制经典途径。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体在90％人血清中以30nm或更小的ic50抑制c3b沉积。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体经全身递送至所述受试者。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段包含重链可变区，其包含seq idno:67所示的氨基酸序列的cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3，和轻链可变区，其包含seq id no:70所示的氨基酸序列的cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3。在另一方面，本发明提供用于抑制masp-2-依赖性补体活化的不良作用的组合物，包括治疗有效量的masp-2抑制剂，例如masp-2抑制性抗体和药学上可接受的载体。还提供了制备用于在有需要的活受试者中抑制masp-2-依赖性补体活化的不良作用的药物的方法，其包括在药用载体中的治疗有效量的masp-2抑制剂。还提供了制备用于抑制masp-2-依赖性补体活化的药物的方法，所述药物用于治疗下文描述的病况、疾病和病症的每一种。54、在另一方面，本发明提供治疗患有或有风险发生与造血干细胞移植有关的静脉闭塞性病(vod)的人受试者的方法，包括给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段的组合物。在一个实施方案中，所述受试者之前已经历，或当前正经历，或将经历造血干细胞移植。在一个实施方案中，所述方法进一步包括在给予所述受试者包含有效抑制masp-2-依赖性补体活化的量的masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段的组合物的步骤之前，鉴定患有或有风险发生静脉闭塞性病(vod)的人受试者。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体是特异性结合人masp-2的单克隆抗体或其片段。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体或其片段选自重组抗体、具有降低的效应器功能的抗体、嵌合抗体、人源化抗体和人抗体。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体基本上不抑制经典途径。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体在90％人血清中以30nm或更小的ic50抑制c3b沉积。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体经全身递送至所述受试者。在一个实施方案中，masp-2抑制性抗体或其抗原结合片段包含重链可变区，其包含seq id no:67所示的氨基酸序列的cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3，和轻链可变区，其包含seq id no:70所示的氨基酸序列的cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3。在另一方面，本发明提供用于抑制masp-2-依赖性补体活化的不良作用的组合物，其包含治疗有效量的masp-2抑制剂，例如masp-2抑制性抗体和药学上可接受的载体。还提供了制备用于在有需要的活受试者中抑制masp-2-依赖性补体活化的不良作用的药物的方法，其包含在药用载体中的治疗有效量的masp-2抑制剂。还提供了制备用于抑制masp-2-依赖性补体活化的药物的方法，所述药物用于治疗下文描述的病况、疾病和病症的每一种。55、本发明的方法、组合物和药物可用于在患有或有风险发生血栓性微血管病(tma)的哺乳动物受试者(包括人)，和/或患有或有风险发生gvhd的受试者，和/或患有或有风险发生干细胞移植后弥漫性肺泡出血的受试者，和/或患有或有风险发生静脉闭塞性病(vod)的受试者中体内抑制masp-2-依赖性补体活化的不良作用，如本文进一步描述的。技术实现思路