一种植物干细胞改良剂的制备方法及其应用与流

本发明属于植物干细胞改良剂制备和应用，尤其是涉及一种植物干细胞改良剂的制备方法。背景技术：1、植物干细胞是位于植物分生组织的未分化细胞。在植物的茎端分生组织和根尖分生组织中，存在一群特殊的细胞，它们具有自我更新能力，又能产生具有持续分裂能力的子细胞，这些特殊细胞是植物根、茎、叶和花等器官发生的源泉，因此被认为是植物干细胞。2、植物干细胞包含有原植物生长和发育的所有方式，是拥有永恒生命力的细胞，植物干细胞存在于分生组织内，在外植体培养过程中由分生组织产生，具有非常惊人的再生能力，使得植物可以在数百年间不断生长，并生成全新的器官。3、提取培养植物干细胞采用分离、生物培植及萃取工艺，识别并分离出植物细胞中最高质量的部分；然后进行生物培植，将所需的干细胞系植入生物反应堆以培植出数百万计相同的干细胞系，再萃取出干细胞的生物质并从生长溶液中过滤出最纯净的植物精华。4、受提取植物干细胞的原料的限制，以及施用的农作物本身生长特性的差异，某一种是不能满足所有农作物的需求。因此，针对烟叶种植生产的特点，需要有特定的植物干细胞产品。由于此方面的研究十分稀少，远不能满足生产需求，故亟需一种植物干细胞改良剂的制备方法以及应用方式的突破。技术实现思路1、本发明正是为了解决上述问题缺陷，提供一种植物干细胞改良剂的制备方法及其应用。2、本发明采用如下技术方案实现。3、一种植物干细胞改良剂的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：4、步骤1)原料选取；步骤2)识别隔离；步骤3)生物培养；步骤4)干细胞萃取；步骤5)植物干细胞母液培养；步骤6)植物干细胞产品生产。5、进一步为，本发明所述步骤1)原料选取为：在烟叶生长进入旺长期后，在田间选择生长发育健康的烟株，收取其顶部的鲜烟叶和茎；具体指烟花下的第一和第二片烟叶及茎。6、进一步为，本发明所述步骤2)识别隔离为：将收取到的鲜烟叶和茎，在常温常压下粉碎成浆，进行固液分离，保留液体，因植物干细胞存在于液体中；并向液体中加入表面活性剂(如丙三酮)，实现水与有机物分层，静止27-30小时，优选28小时；抽取含植物干细胞的有机物。7、进一步为，本发明所述步骤3)生物培养为：在常温常压下，以生物蛋白类的营养物质(如：黄豆浆、氨基酸)为培养基，在带有加温、搅拌设备的发酵池中进行培养，温度33-37℃、时间6-7天。8、进一步为，本发明所述步骤4)干细胞萃取为：釆用的萃取液是混合物，由乙醇、乙醚、乙烯乙酸按照一定体积比例(如2：1：5)混合而成；整个萃取过程是在常温常压下进行的，萃取时间72小时左右；通过过滤后即可获得较为纯净的植物干细胞精华混合物。9、进一步为，本发明所述步骤5)植物干细胞母液培养为：在常温常压下，以生物蛋白类的营养物质为培养液，在带有加温、搅拌设备的发酵池中进行培养，温度33-37℃、时间6-7天。10、进一步为，本发明所述步骤6)植物干细胞产品生产为：按照植物干细胞母液重量比为10-15％，在植物干细胞母液中添加pgpr菌群、活性肽、生物酶的微生物成分，形成以植物干细胞为核心的产品，即植物干细胞改良剂；微生物成分为已重量比计：pgpr菌群：活性肽：糖酶＝2：5：3；其中pgpr菌群含量37％；活性肽含量65％；糖酶含量70％。11、进一步为，本发明所述常温为温度参数25-45度；优选35度。12、使用上述的一种植物干细胞改良剂的制备方法获得的植物干细胞改良剂的应用，所述应用为：使用该植物干细胞改良剂以提高烤烟生长农艺参数；13、所述生长农艺参数应用包括：14、1)降低烤烟打顶期和采烤期气候斑点病的发病率和病情指数。15、2)降低烤烟打顶期和采烤期黑胫病的发病率和病情指数。16、3)增加烤烟打顶期和采烤期的叶长、叶宽、茎围、株高、叶片数、spad和生物量。17、使用上述的一种植物干细胞改良剂的制备方法获得的植物干细胞改良剂的应用，使用该植物干细胞改良剂以提高烤烟的经济性状指标；18、所述经济性状指标应用包括：19、1)提高烤烟植株全氮、全磷和全钾含量。20、2)提高烤烟产量、产值、均价、级指、产指、上等烟叶比例和中上等烟叶比例，改善烤烟经济性状。21、3)增加烤烟烟叶中总氮、总植物碱、总糖、还原糖、以k+计的钾、以k2o计的钾和氯的含量。22、本发明的有益效果为，1)本发明成功制备了以植物干细胞为主的改良剂；2、使用该植物干细胞改良剂应用到烤烟生产上，发现其在增加烤烟生长农艺参数和产量及经济性状指标上有显著效果。3)本发明应用方面发现，在200kg/亩植物干细胞改良剂处理下表现效果最优。本发明的技术内容可以在研究的基础上进行进一步地推广和应用。23、下面结合附图和具体实施方式对本发明做进一步解释。技术特征：1.一种植物干细胞改良剂的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：2.根据权利要求1所述的一种植物干细胞改良剂的制备方法，其特征在于，所述步骤1)原料选取为：在烟叶生长进入旺长期后，在田间选择生长发育健康的烟株，收取其顶部的鲜烟叶和茎；具体指烟花下的第一和第二片烟叶及茎。3.根据权利要求1所述的一种植物干细胞改良剂的制备方法，其特征在于，所述步骤2)识别隔离为：将收取到的鲜烟叶和茎，在常温常压下粉碎成浆，进行固液分离，保留液体，因植物干细胞存在于液体中；并向液体中加入表面活性剂，实现水与有机物分层，静止27-30小时，优选28小时；抽取含植物干细胞的有机物。4.根据权利要求1所述的一种植物干细胞改良剂的制备方法，其特征在于，所述步骤3)生物培养为：在常温常压下，以生物蛋白类的营养物质为培养基，在带有加温、搅拌设备的发酵池中进行培养，温度33-37℃、时间6-7天。5.根据权利要求1所述的一种植物干细胞改良剂的制备方法，其特征在于，所述步骤4)干细胞萃取为：釆用的萃取液是混合物，由乙醇、乙醚、乙烯乙酸按照一定体积比例混合而成；整个萃取过程是在常温常压下进行的，萃取时间72小时左右；通过过滤后即可获得较为纯净的植物干细胞精华混合物。6.根据权利要求1所述的一种植物干细胞改良剂的制备方法，其特征在于，所述步骤5)植物干细胞母液培养为：在常温常压下，以生物蛋白类的营养物质为培养液，在带有加温、搅拌设备的发酵池中进行培养，温度33-37℃、时间6-7天。7.根据权利要求1所述的一种植物干细胞改良剂的制备方法，其特征在于，所述步骤6)植物干细胞产品生产为：按照植物干细胞母液重量比为10-15％，在植物干细胞母液中添加pgpr菌群、活性肽、生物酶的微生物成分，形成以植物干细胞为核心的产品，即植物干细胞改良剂；微生物成分为已重量比计：pgpr菌群：活性肽：糖酶＝2：5：3；其中pgpr菌群含量37％；活性肽含量65％；糖酶含量70％。8.根据权利要求3或4或5或6所述的一种植物干细胞改良剂的制备方法，其特征在于，所述常温为温度参数25-45度；优选35度。9.使用权利要求1至8任一所述的一种植物干细胞改良剂的制备方法获得的植物干细胞改良剂的应用，其特征在于，所述应用为：使用该植物干细胞改良剂以提高烤烟生长农艺参数；10.使用权利要求1至8任一所述的一种植物干细胞改良剂的制备方法获得的植物干细胞改良剂的应用，其特征在于，使用该植物干细胞改良剂以提高烤烟的经济性状指标；技术总结本发明涉及一种植物干细胞改良剂的制备方法及其应用，所述制备方法包括以下步骤：步骤1)原料选取；步骤2)识别隔离；步骤3)生物培养；步骤4)干细胞萃取；步骤5)植物干细胞母液培养；步骤6)植物干细胞产品生产。本发明的有益效果为，1)本发明成功制备了以植物干细胞为主的改良剂；2、使用该植物干细胞改良剂应用到烤烟生产上，发现其在增加烤烟生长农艺参数和产量及经济性状指标上有显著效果。3)本发明应用方面发现，在200kg/亩植物干细胞改良剂处理下表现效果最优。技术研发人员：方亮,丁以纾,柴云霞,胡杨,耿少武,布云虹,汪华国,周任虎,王文伦受保护的技术使用者：云南省烟草公司楚雄州公司技术研发日：技术公布日：2024/7/18