一种鲤养殖功能性饲料及其制备方法

本发明属于鱼类养殖功能性饲料，具体涉及一种鲤养殖功能性饲料及其制备方法。背景技术：1、鲤(cyprinus carpio)是我国重要的淡水养殖品种之一，2022年我国鲤的产量达284.32万吨，居全国淡水养殖鱼类第5位(中国渔业统计年鉴，2023)。鲤也是河南省主养鱼类，具有较高的营养价值和研究价值。然而，随着水产养殖行业的快速发展，饲料中蛋白质类需求量不断增加，而生产中常用的鱼粉和豆粕等优质蛋白源又过度依赖进口，且价格不断增加(jiangetal.,2018)。为应对饲料成本增加，生产过程中不断开发并使用高脂、高糖饲料及新型植物蛋白源来降低饲料配方中鱼粉比例，以期起到降本增效的作用。然而，各类水产品种的适宜脂质水平不同，短期摄食高脂饲料可促进鱼类体重的增加，但这可能也是脂肪在肝脏蓄积的结果(wangetal.,2022)。长期饲喂高脂饲料容易诱导形成脂肪肝，进而导致鱼体肝脏脂质代谢紊乱、氧化应激及免疫力和生产力下降等问题(chenetal.,2023)。近年来，有关高脂饲料饲喂诱导鱼类肝损伤的研究发现，氧化应激可能是损伤脂肪肝的重要诱因。在罗非鱼(oreochromis niloticus)中的研究表明，过多脂肪诱导的肝损伤与nrf2(nuclear factor erythroid2-relatedfactor2)信号通路抑制、抗氧化防御系统的削弱有关(jiaetal.,2020)。其次，炎症反应也是长期高脂饲喂诱导鱼类肝损伤的常见病理特征。在团头鲂(megalobramaamblycephala)的研究中发现，高脂饲喂可诱导肝胰脏促炎细胞因子上调和抗炎细胞因子下调，并发现炎症细胞因子可能通过抑制食欲降低生长性能(daietal.,2018)。长期摄食高脂饲料被认为是导致鱼类脂肪肝损伤的主要因素，并主要表现为氧化应激、炎症反应、内质网应激和脂质过度沉积等。2、山茱萸提取物(cornusofficinalisextract，coe)是我国的传统药材，其主要活性成分包括环烯醚萜苷、黄酮类、多糖等(huang et al.,2018)。现代药理学研究发现coe具有括抗炎、抗氧化、抗糖尿病、免疫调节、神经和心血管保护等多种作用(badoni etal.,2024；dengetal.,2024；liuetal.,2023)。也有一些研究发现山茱萸提取物可显著抑制高脂饮食诱导的小鼠肝脏甘油三酯和总胆固醇含量的增加、降低肝脏空泡化程度及减轻脂肪细胞增大进而降低脂肪蓄积(parketal.,2021)；在细胞水平的研究发现，山茱萸乙醇提取物可降低3t3-l1脂肪细胞的脂滴积累，并显著下调pparγ、c/ebp-α及lipin-1的蛋白表达(kim etal.,2013)，还可改善高胆固醇饲喂的新西兰兔的血脂水平，除抑制脂合成关键转录因子pparγ、srebp-1的表达外，还通过上调肝细胞中lxr-α的蛋白表达水平降低脂质含量(danielewski et al.,2021)。上述表明在哺乳动物体内外山茱萸对高脂诱导的肥胖具有抵抗作用，但其作用的分子机制还不明晰。在水产动物领域，截止目前仅有研究发现coe改善了嗜水气单胞菌感染后的鲤血清免疫参数(ahmadifar et al.,2022)。其在水产动物上是否具有调节高脂饲料饲喂下机体的代谢能力及抗氧化等作用尚不可知，机理的探讨更是一片空白。因此，本发明旨在通过在养殖鲤的高脂饲料中添加适量coe，缓解高脂诱导的生长滞缓和代谢紊乱，提高鲤的抗氧化性能并抑制炎症和内质网应激，调节肝胰脏脂代谢能力，改善肠道菌群丰富度，这为coe作为饲料添加剂在鲤饲料中的应用奠定基础，目前尚没有该方面的相关报道。3、参考文献4、农业农村部渔业渔政管理局，全国水产技术推广总站，中国水产学会。2023中国渔业统计年鉴[m]。北京：中国农业出版社出版，2023。5、ahmadifar e,mohammadzadeh s,kalhor n,et al.cornelian cherry(cornusmas l.)fruit extract improves growth performance,disease resistance,and serumimmune-and antioxidant-related gene expression of common carp(cyprinuscarpio)[j].aquaculture,2022,558:738372。6、badoni s,rawat d,mahato ak,et al.therapeutic potential of cornusgenus:navigating phytochemistry,pharmacology,clinical studies,and advanceddelivery approaches[j].chemistry&biodiversity.2024:e202301888。7、chen j,zhuo mq,jiang jl,et al.effects of dietary lipid levels onfiber quality,lipidomic profiles,antioxidant and inflammation responses inmuscle of yellow catfish pelteobagrusfulvidraco[j].aquaculture reports,2023,33:101855。8、dai yj,jiang gz,yuan xy,et al.high-fat-diet-induced inflammationdepresses the appetite of blunt snout bream(megalobrama amblycephala)throughthe transcriptional regulation of leptin/mammalian target of rapamycin[j].british journal of nutrition,2018,120(12):1422-1431。9、danielewski m,kucharskaaz,matuszewskaa,et al.cornelian cherry(cornusmas l.)iridoid and anthocyanin extract enhances ppar-α,ppar-γexpression andreduces i/m ratio in aorta,increases lxr-αexpression and alters adipokinesand triglycerides levels in cholesterol-rich diet rabbit model[j].nutrients,2021,13(10):3621-3643。10、deng wh,liu yh,guo yd,et al.,a comprehensive review of cornusofficinalis:health benefits,phytochemistry,and pharmacological effects forfunctional drug and food development[j].frontiers in nutrition,2024,10:1309963。11、huang j,zhang y,dong l,et al.ethnopharmacology,phytochemistry,andpharmacology of cornus officinalis sieb.et zucc[j].journal ofethnopharmacology,2018,213:280-301。12、jia r,cao l p,du jl,et al.effects of high-fat diet on antioxidativestatus,apoptosis and inflammation in liver of tilapia(oreochromis niloticus)via nrf2,tlrs and jnk pathways[j].fish&shellfish immunology,2020,104:391-401。13、jiang y,zhao pf,lin sm,et al.partial substitution of soybean mealwith fermented soybean residue in diets forjuvenile largemouth bass,micropterus salmoides[j].aquaculture nutrition,2018,24(4):1213-1222。14、kim hl,jeon yd,park j,et al.corni fructus containing formulationattenuates weight gain in mice with diet-induced obesity and regulatesadipogenesis through ampk[j].evidence-based complementary andalternativemedicine,2013,(2013):1-11。15、liu z,liu y,man s,et al.functional factors,nutritional value anddevelopment strategies of cornus:a review[j].trends in food science&technology,2023,139:104121。16、park e,lee cg,jeon h,et al.anti-obesity effects of combined cornusofficinalis and ribes fasciculatum extract in high-fat diet-induced obesemale mice[j].animals,2021,11(11):3187-3199。17、wang c,zhang c,yu h b,et al.glycerol monolaurate and triglycerolmonolaurate alleviated high-fat diet induced lipid accumulation and damage ofliver in zebrafish(danio rerio)[j].aquaculture,2022,561:738616。技术实现思路1、本发明解决的技术问题是提供了一种鲤养殖功能性饲料及其制备方法，该功能性饲料用于缓解高脂诱导的鲤生长性能降低和肝胰脏的损伤，改善高脂诱导的鲤常规营养组分及脂肪酸组成、血脂紊乱和脂质蓄积，并降低高脂诱导的鲤肝胰脏氧化应激和炎症反应，进而提高鲤的营养成分和改善代谢性疾病的能力。2、本发明为解决上述技术问题采用如下技术方案，一种鲤养殖功能性饲料，其特征在于该鲤养殖功能性饲料的原料组成及重量份配比如下：鱼粉10～14份、豆粕20～24份、菜粕14～16份、棉籽粕16～18份、小麦粉9～12份、米糠8～10份、大豆油8.8～9份、山茱萸提取物0.5～0.6份、ca(h2po4)21～3份、微晶纤维素1～2份、预混料0.5～2份和膨润土0.5～2份，该鲤养殖功能性饲料用于激活nrf2信号通路相关基因表达和抑制炎症反应来减轻高脂饲喂诱导的肝损伤，通过促进脂分解、脂质转运及自噬来降低肝胰脏脂质过度蓄积，改善鲤肠道菌群失调，进而提高鲤的生长性能和免疫力。3、进一步地，所述鲤养殖功能性饲料的原料组成及重量份配比如下：鱼粉12份、豆粕22份、菜粕15份、棉籽粕17份、小麦粉10份、米糠9份、大豆油8.90份、山茱萸提取物0.6份、ca(h2po4)22份、微晶纤维素1.50份、预混料1份和膨润土1份。4、进一步地，所述预混料为含有1wt％多维多矿的预混料。5、进一步地，所述鲤养殖功能性饲料中山茱萸提取物作为功能成分用于缓解高脂诱导的鲤生长性能降低和肝胰脏的损伤，改善高脂诱导的鲤常规营养组分及脂肪酸组成、血脂紊乱和脂质蓄积，并降低高脂诱导的鲤肝胰脏氧化应激和炎症反应，通过调节鲤肝胰脏内质网应激和自噬相关基因的表达及改善鲤肠道菌群发挥作用。6、进一步地，所述鲤养殖功能性饲料中添加0.6wt％山茱萸提取物降低了高脂诱导的鲤形体指标vsi、hsi的升高，山茱萸提取物通过抑制血清肝功能ast和gst指标的异常升高及降低肝胰脏空泡化程度，从而改善高脂饲喂诱导的肝损伤；鲤养殖功能性饲料中添加山茱萸提取物明显降低了高脂诱导的鲤肝胰脏脂滴含量、tg含量、tc含量及ldl-c异常升高；肝胰脏中具有较高的营养价值、抗氧化及降脂作用的n-3pufa、c22:6n3、c20:3n3的含量显著增加，以及肝胰脏脂质含量较低；鲤养殖功能性饲料中添加山茱萸提取物能够显著增加高脂饲喂的鲤肝胰脏脂分解相关基因hsl、lpl、atgl和脂质转运相关基因fabp1b的表达，进而降低鲤肝胰脏脂质沉积。7、进一步地，所述鲤养殖功能性饲料中添加0.6wt％山茱萸提取物能够提高鲤cat活性和t-aoc并降低mda含量，同时提高了nrf2及其下游基因gpx、gst和抗氧化酶基因sod、cat的表达，从而改善高脂诱导的肝胰脏氧化应激；鲤养殖功能性饲料中添加山茱萸提取物抑制了il-1β以及增加了il-10、hsp70的表达进而抑制炎症；添加0.6wt％山茱萸提取物的鲤养殖功能性饲料饲喂显著增加了自噬相关基因beclin1、atg4、atg5、atg12的表达，进而表明山茱萸提取物通过改善氧化应激、抑制炎症以及促进自噬从而改善高脂诱导的肝损伤和脂质蓄积；山茱萸提取物能使鲤肠道菌群门水平和属水平恢复或接近对照组的水平，表明山茱萸提取物能具有调节肠道菌群结构的作用。8、本发明所述的鲤养殖功能性饲料的制备方法，其特征在于具体步骤为：9、步骤s1，预混料制备：准确称量ca(h2po4)2、预混料、膨润土、微晶纤维素和山茱萸提取物并混合均匀；10、步骤s2，大料预混：在步骤s1混合均匀的预混料中依次加入豆粕、鱼粉、小麦粉、菜粕、棉籽粕和米糠并混合均匀；11、步骤s3，加入油脂：将步骤s2混合均匀的原料倒入搅拌机中并加入豆油，在拌料盆中揉搓均匀；12、步骤s4，加水搅拌：将步骤s3揉搓均匀的饲料原料倒入搅拌机中搅拌，并匀速加入原料重量10wt％的纯净水，搅拌混合均匀后倒入制粒盆中再次揉搓均匀，揉搓均匀后的饲料颜色一致、无结块；13、步骤s5，制粒：在饲料机上装载直径为1mm的模具，将步骤s4揉搓均匀的饲料加入到饲料机中得到的条状饲料进一步抛光，挤压膨化成颗粒状饲料；14、步骤s6，干燥储存：将步骤s5得到的颗粒状饲料置于室温通风阴凉处干燥2～3天，晾干后得到鲤养殖功能性饲料并于-20℃备用。15、与现有技术相比，本发明具有以下优点和有益效果：16、1.本发明中使用制备的添加0.6wt％coe配合饲料饲喂鲤后发现能够缓解高脂诱导的鲤生长性能及肝胰脏的损伤。鲤养殖配合饲料中添加0.6wt％coe使肝胰脏空泡化均有所减少，coeh组的细胞核形态椭圆且位于细胞中央，coem组和coeh组ast活性及gst活性均显著下调，且coel组和coeh组ast活性显著下调(p<0.05)，表明饲喂含有coe的鲤养殖配合饲料后能够显著改善高脂饲喂鲤的肝胰脏健康状况。17、2.本发明中在高脂饲料中添加coe的配合饲料饲喂鲤，结果显示，coe可以改善高脂诱导的鲤常规营养组成及肝胰脏脂肪酸组成的影响。与hf组相比，coel组的肝胰脏中c18:2n6、c18:3n3及pufa含量均显著增加(p<0.05)，coem组肝胰脏的c20:3n3、c22:6n3及n-3pufa含量也均显著增加(p<0.05)，且添加coe的各组肌肉和肝胰脏粗脂肪含量均显著下降，而粗蛋白质含量显著增加(p<0.05)。这表明coe能降低鲤脂质蓄积、改善机体脂肪酸组成并提高机体蛋白质的合成。18、3.本发明在鲤养殖高脂饲料中添加coe发现，与hf组相比，添加coe组的血清tg、tc含量及肝胰脏tg含量均显著降低，coem组ldl-c及肝胰脏tc含量也显著降低(p<0.05)，这可能与添加coe后肝胰脏和脂肪组织的脂合成基因pparγ表达量显著降低，且coem组肝胰脏脂分解相关基因(lpl、hsl、atgl)、脂转运基因fabp1b及脂肪酸β氧化基因cpt1的表达量均显著上调(p<0.05)有关。19、4.本发明中在高脂饲料中添加coe的配合饲料饲喂鲤，结果显示，与hf组相比，添加coe后coem组血清t-aoc和肝胰脏cat活性显著上调，且添加coe各组的mda含量均显著下降(p<0.05)；与hf组相比，coel组和coem组的自噬相关基因beclin1、atg4、atg12的表达量显著上调，但coeh组xbp1、atf6、chop的表达显著下降(p<0.05)。表明coe可抑制高脂诱导的鲤肝胰脏氧化应激和炎症，这可能和coe可调节高脂诱导的鲤肝胰脏自噬和内质网应激相关基因的表达有关。20、5.本发明中在高脂饲料中添加coe的配合饲料饲喂鲤，结果显示，coe可调节高脂诱导的鲤肠道菌群失调。与c组相比，高脂饲喂增加了放线菌门和拟杆菌门的相对丰度，并降低了绿湾菌门、厚壁菌门及梭杆菌门的相对丰度；与hf组相比，饲料中coe增加了厚壁菌门和绿湾菌门的相对丰度，但降低了放线菌门的相对丰度。与hf组相比，添加coe可不同程度逆转高脂饲喂诱导的肠道菌群属水平的相对丰度变化，其中coeh组肠道微生物组成与对照组高度相似。21、6.本发明在鲤养殖饲料中添加coe可以缓解高脂胁迫诱导的鲤脂代谢紊乱、氧化应激以及炎症反应。