具有增强免疫力功能的后生元及其制备方法和应

本发明属于微生物领域，具体涉及具有增强免疫力功能的后生元及其制备方法和应用。背景技术：1、后生元是益生菌经由热处理、物理性处理、高静水压处理、冷冻干燥、超声波震荡等加工方式处理后，仍保有与活菌相同活性成分的菌体成分的统称，包括菌体成分和代谢产物。2、乳酸菌胞外多糖(exopoly saccharides，eps)是乳酸菌在生长代谢过程中分泌到细胞壁外常渗于培养基的一类糖类化合物，有的依附于微生物细胞壁形成荚膜，称为荚膜多糖；有的进入培养基形成粘液，称为粘液多糖，它们都是微生物适应环境的产物。乳酸菌胞外多糖可赋予发酵乳制品特殊的质构和风味，起到安全的食品添加剂的作用，它还有可能成为食品级多糖的一个良好来源而广泛用于各种食品的增稠、稳定、乳化、胶凝及持水。同时，乳酸菌eps具有多种生理功能，包括增强人体免疫力、抑制有害菌黏附、降血压、抗氧化、抗肿瘤、抗溃疡、抗病毒和改善肠道微生态环境等。由于乳酸菌eps具有独特的理化及流变学特性，因此可作为增稠剂、稳定剂、乳化剂、胶凝剂、填充剂和持水剂应用到食品、医药、石油化工以及生化产品等领域。尤其在食品领域中，乳酸菌eps可作为新型天然的食品添加剂应用到发酵食品中，从而改善食品的质构、口感、流变学特性和风味等指标，同时赋予产品一定的营养保健功效。乳酸菌eps作为天然的大分子活性物质，在调节机体免疫过程中具有很好的免疫原性。更加值得注意的是乳酸菌eps的来源具有可追溯性，同时不会产生毒副作用，是理想的天然免疫佐剂。3、微生物胞外多糖在产品结构、性能及生产方面所具有的特别优势，如胞外多糖具有产生量大、易于与菌体分离、可通过深层发酵实现工业化生产。由于乳酸菌是食品级工业生产菌，与其他菌相比安全性高，实用性更强。4、虽然乳酸菌产生的胞外多糖的功能及应用广泛，但是现有的方法产量低，如何提高乳酸菌胞外多糖的产量是现在面临的主要问题。技术实现思路1、为了解决上述问题，本发明提供了一种混合菌发酵的方法，包括副干酪乳酪杆菌rh1729、乳酸片球菌rh2712、植物乳植杆菌hcs03-001、发酵粘液乳杆菌hcs08-005和鼠李糖乳酪杆菌rh0131，该方法能够有效提高乳酸菌eps的产量。2、一方面，本发明提供了一种增强免疫力的益生菌组合物，所述的益生菌组合物包括副干酪乳酪杆菌rh1729、乳酸片球菌rh2712、植物乳植杆菌hcs03-001、发酵粘液乳杆菌hcs08-005和鼠李糖乳酪杆菌rh0131；3、所述的副干酪乳酪杆菌rh1729的保藏编号为cgmcc no.28243；4、所述的乳酸片球菌rh2712的保藏编号为cgmcc no.25165；5、所述的植物乳植杆菌hcs03-001的保藏号为cgmcc no.16258；6、所述的发酵粘液乳杆菌hcs08-005的保藏编号号为cgmcc no.16259；7、所述的鼠李糖乳酪杆菌rh0131的保藏编号为cgmcc no.28242。8、又一方面，本发明提供了前述益生菌组合物后生元的制备方法，该制备方法包括以下步骤：9、s1、将菌株分别进行活化培养；10、s2、将步骤s1的发酵液接种于发酵罐进行混合菌株的一级发酵；11、s3、将步骤s2的发酵液接种于发酵罐进行混合菌株的二级发酵；12、s4、杀菌；13、s5、干燥；14、s6、粉体收集。15、具体地，步骤s1所述活化培养的接种量按体积比为3-8％；所述活化培养的条件为：32-35℃，静置培养。16、进一步具体地，所述的活化培养的终点od600为8.0-17.0。17、优选地，步骤s1所述活化培养的接种量按体积比为5％；所述活化培养的条件为：33±0.5℃，静置培养，副干酪乳酪杆菌rh1729、乳酸片球菌rh2712、植物乳植杆菌hcs03-001、发酵粘液乳杆菌hcs08-005、鼠李糖乳酪杆菌rh0131活化培养的终点od600分别为12.0-16.0、12.0-16.0、10.0-14.0、6.0-10.0、6.0-10.0。18、进一步优选地，副干酪乳酪杆菌rh1729、乳酸片球菌rh2712、植物乳植杆菌hcs03-001、发酵粘液乳杆菌hcs08-005、鼠李糖乳酪杆菌rh0131活化培养的终点od600分别为14.0、14.0、12.0、8.0、8.0。19、具体地，s2所述混合菌株的体积比为：副干酪乳酪杆菌rh1729：乳酸片球菌rh2712：植物乳植杆菌hcs03-001：发酵粘液乳杆菌hcs08-005：鼠李糖乳酪杆菌rh0131＝3-5:2-3:2-3:2-3:1-2。20、优选地，s2所述混合菌株的体积比为：副干酪乳酪杆菌rh1729：乳酸片球菌rh2712：植物乳植杆菌hcs03-001：发酵粘液乳杆菌hcs08-005：鼠李糖乳酪杆菌rh0131＝3:2:2:2:1。21、具体地，s2所述一级发酵中混合菌株的接种量按体积比为3-8％；所述发酵罐的装液量按体积计为40-80％；所述发酵的条件可以是：32-35℃搅拌发酵。22、优选地，s2所述一级发酵的接种量按体积比为5％；所述发酵罐的装液量按体积计为40-80％；所述发酵的条件为：33±0.2℃搅拌发酵。23、具体地，s3所述二级发酵的接种量按体积比为3-5％；所述发酵罐的装液量按体积计为40-80％；所述发酵的条件可以是：32-35℃搅拌发酵。24、优选地，s3所述二级发酵的接种量按体积比为5％；所述发酵罐的装液量按体积计为40-80％；所述发酵的条件为：33±0.2℃搅拌发酵，25、进一步具体地，步骤s3所述的二级发酵终点od600为9.5-12.026、优选地，步骤s3所述的二级发酵终点od600为11.0。27、具体地，步骤s4所述杀菌的条件可以是：90-100℃，30-40minn。28、优选地，步骤s4所述杀菌的条件为：95℃，30min。29、具体地，步骤s5所述干燥为喷雾干燥。30、进一步具体地，所述喷雾干燥的温度可以是195±5℃。31、优选地，所述喷雾干燥的温度为195℃。32、又一方面，本发明提供了前述的益生菌组合物或制备方法在制备增强免疫力的后生元中的应用。33、具体地，所述的增强免疫力包括担保不限于促进巨噬细胞吞噬功效。34、又一方面，本发明提供了一种后生元，所述的后生元是利用前述的益生菌组合物或制备方法获得的。35、本发明所取得的技术效果：36、(1)本发明制备的后生元乳酸菌eps的含量高，高达2303.18μg/ml。37、(2)本发明制备的后生元能够显著促进巨噬细胞吞噬功效。38、保藏说明1：39、菌株名称：rh1729；40、保藏编号：cgmcc no.28243；41、分类命名：副干酪乳酪杆菌(lacticaseibacillus paracasei)；42、保藏日期：2023年08月24日；43、保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；44、保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。45、保藏说明2：46、菌株名称：rh0131；47、保藏编号：cgmcc no.28242；48、分类命名：鼠李糖乳酪杆菌(lacticaseibacillus rhamnosus)；49、保藏日期：2023年08月24日；50、保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；51、保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。