一种甜苷含量可控的罗汉果提取物及其制备方法

本发明涉及罗汉果提取物，特别涉及一种口感滋味提升的罗汉果提取物及其制备方法。背景技术：1、罗汉果，葫芦科多年生藤本植物的果实，产于广西桂林、湖南邵阳、怀化、永州、贵州黔东南等地的山区，是我国名贵的土特产，也是国家首批批准的“药食两用”材料之一。罗汉果果实营养价值很高，含丰富的维生素c以及罗汉果甜苷、果糖、葡萄糖、蛋白质、果胶和脂类等。据《中药志》记载，罗汉果味甘性凉，归肺、大肠经，有润肺止咳，生津止渴的功效，适用于肺热或肺燥咳嗽，百日咳及暑热伤津口渴等，此外还有润肠通便的功效。现代医学研究证实，罗汉果含有的罗汉果甜苷，是一种比蔗糖甜400倍的天然甜味剂，但它不产生热量，所以是糖尿病、肥胖等不宜吃糖者的甜味替代品。罗汉果甜苷作为食品是安全无毒的，在国家强制标准《gb2760食品添加剂使用标准》中规定，罗汉果甜苷可不限量用于各类食品。由于其本身具有诸多的优良特性，罗汉果甜苷可以全部或部分替代蔗糖，因此在食品工业中得到广泛的应用。此外，罗汉果甜苷在医药品、化妆品以及保健食品领域也有着非常阔的应用前景及市场潜力。2、罗汉果甜苷并不是一种单独的天然化合物，而是多种拥有共同的葫芦烷型四环三萜结构的皂苷类的总称。截止目前，我国的科研学者们已经从罗汉果中分离并鉴定的罗汉果甜苷多达二十余种。其中，含量占比最高的甜苷是罗汉果苷v(在总甜苷中的含量占比高达80％左右)，罗汉果苷v以外的甜苷通常被称为罗汉果稀有甜苷；罗汉果稀有甜苷中，又以11-氧基-罗汉果苷v的含量为最高。市售的罗汉果提取物产品，通常是以罗汉果苷v的含量的高低来区分产品规格并计价，对各种稀有甜苷的含量和比例并没有明确的要求。3、研究发现，在罗汉果生长、成熟的过程中，在其本身特有的一系列生物酶的作用下，逐渐形成各种罗汉果甜苷共同的母核结构——罗汉果醇；随后在相关的糖基转移酶的作用下，在罗汉果醇分子的几个特定的c原子上转移一个或多个葡萄糖基，从而完成了罗汉果甜苷的生物合成。由于葡萄糖基在罗汉果醇分子上转移的位置和数量各不相同，从而造成了罗汉果甜苷种类的多样性。因此，各种罗汉果甜苷的含量的高低，除了后天的种植培育的影响，主要取决于先天的遗传基因表达。4、虽然各种甜苷在天然植物罗汉果中的含量高低不同，但是在相同的品种、相同的成熟度下，各种甜苷的含量比例相对稳定。因此，如果没有经过特殊的工艺处理，市场上常见的传统罗汉果提取物v50％中各种甜苷的含量比例，跟罗汉果原料中各种甜苷的含量比例基本一致。5、cn113461765a公开了一种罗汉果甜苷v及稀有甜苷物质的分离方法，将罗汉果甜苷溶解后脱气，获得上样液；将上样液上印迹聚合物层析柱和大孔吸附树脂层析柱串联的多级联层析柱后，依次以脱气的乙醇水溶液、和脱气水洗柱，然后释放真空至常压，以乙腈与乙醇的混合液分别对断开的印迹聚合物层析柱进行解吸，分别收集含有稀有甜苷物质的解吸液；以乙醇水溶液对大孔吸附树脂层析柱进行解吸，收集含有罗汉果甜苷v的解吸液。该方法收集获得的罗汉果甜苷收率高、纯度大，且层析柱可循环使用。该专利方法是分别得到罗汉果中的稀有甜苷，而不是得到和罗汉果稀有甜苷比例不同的提取物。6、目前暂无文献明确记载罗汉果提取物v50产品中，各种甜苷成分重新分配、重组的方法。与传统工艺生产的罗汉果提取物v50产品不同，本发明方法提供了一种或两种甜苷含量特殊的罗汉果提取物及其制备方法。技术实现思路1、为了解决现有技术中罗汉果提取工艺所得提取物中罗汉果甜甘含量和罗汉果原料基本一致，无法得到不同规格的罗汉果提取物，本发明提出了一种甜苷含量可控的罗汉果提取物及其制备方法，提供可连续处理大量原料、设备简单、生产成本低。2、本发明提供了以下技术方案：3、本发明提供了一种甜苷含量可控的罗汉果提取物，其是在罗汉果提取过程中，通过对大孔吸附树脂循环过饱和吸附，过饱和上柱流出液浓缩干燥得到罗汉果提取物产品i，大孔吸附树脂的醇洗脱液，浓缩干燥得到罗汉果提取物产品ii；4、罗汉果提取物产品i包括以下成分：10-18wt％11-氧基-罗汉果苷v、48-52wt％罗汉果苷v、0.05-1wt％罗汉果苷vi、0.05-1wt％赛门苷、0.5-2wt％罗汉果苷iv、0.5-2wt％罗汉果苷iii；5、罗汉果提取物产品ii包括以下成分：0.5-2wt％11-氧基-罗汉果苷v、48-52wt％罗汉果苷v、2-6wt％罗汉果苷vi、2-6wt％赛门苷、1-6wt％罗汉果苷iv、1-6wt％罗汉果苷iii。6、优选地，所述罗汉果提取物产品i包括以下成分：9-15wt％11-氧基-罗汉果苷v、49-51wt％罗汉果苷v、0.06-0.8wt％罗汉果苷vi、0.06-0.5wt％赛门苷、0.8-1.8wt％罗汉果苷iv、0.8-1.8wt％罗汉果苷iii；罗汉果提取物产品ii，包括以下成分：0.8-1.8wt％11-氧基-罗汉果苷v、49-52wt％罗汉果苷v、3-5wt％罗汉果苷vi、2.5-5wt％赛门苷、2-5wt％罗汉果苷iv、1.5-5wt％罗汉果苷iii。7、本发明还提供了一种口感滋味提升的罗汉果提取物，为上述罗汉果提取物产品ii，包括以下成分：0.5-2wt％11-氧基-罗汉果苷v、48-52wt％罗汉果苷v、2-6wt％罗汉果苷vi、2-6wt％赛门苷、1-6wt％罗汉果苷iv、1-6wt％罗汉果苷iii。8、优选地，所述罗汉果提取物产品ii，包括以下成分：0.8-1.8wt％11-氧基-罗汉果苷v、49-52wt％罗汉果苷v、3-5wt％罗汉果苷vi、2.5-5wt％赛门苷、2-5wt％罗汉果苷iv、1.5-5wt％罗汉果苷iii。9、罗汉果提取物产品ii是发明人在罗汉果提取过程中，通过对大孔吸附树脂循环过饱和吸附，过饱和上柱流出液浓缩干燥得到罗汉果提取物产品i，大孔吸附树脂的醇洗脱液，浓缩干燥得到罗汉果提取物产品ii。罗汉果提取物产品i和罗汉果提取物产品ii，与常规的罗汉果提取物v50(三者罗汉果甜苷v含量都接近50％)相比，稀有罗汉果甜苷含量显著不同。产品i中，11-氧基-罗汉果苷v会更加富集，产品ii中，罗汉果苷vi、赛门苷、罗汉果苷iv、罗汉果苷iii会更加富集。发明人预料不到发现，产品ii具有相对于v50口感滋味更加优异的主观评价。10、本发明还提供了上述甜苷含量可控的罗汉果提取物的制备方法，包括以下步骤：11、(1)罗汉果总甜苷的提取：12、1a、灭酶和破碎：取罗汉果原料，在破碎之前或者破碎之后进行灭酶；13、1b、提取：将灭酶和破碎处理的原料用溶剂提取，溶剂为水和/或醇；14、1c、过滤：将提取液过滤，得滤液；15、(2)罗汉果总甜苷的富集：16、2a、大孔树脂吸附层析：将滤液上柱大孔吸附树脂柱a，直至树脂吸附饱和；17、2b、大孔树脂柱的除杂与洗脱：上柱毕，树脂柱a先用酸液和/或碱液洗脱，再用水洗至流出液ph值呈中性，最后用乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液a；18、(3)罗汉果总甜苷的脱色：将乙醇洗脱液a浓缩至无醇，再用阴、阳离子交换树脂柱组合脱色，收集脱色液待用；19、(4)各种甜苷成分的重新富集和分配重组：20、4a、饱和吸附：取脱色液上柱，用大孔吸附树脂柱b吸附，直至树脂吸附饱和，弃去无甜味的未饱和上柱流出液；21、4b、过饱和吸附：大孔吸附树脂柱b吸附饱和之后，取脱色液继续上柱，直至所有脱色液都上柱完成，收集带甜味的过饱和上柱流出液；22、4c、循环过饱和吸附：此时上柱大孔吸附树脂柱b的物料不再是脱色液，而是上个步骤带甜味的过饱和上柱流出液，同样收集本步骤带甜味的过饱和上柱流出液，当作后续上柱的物料，如此反复循环上柱；23、4d、收集和洗脱：反复循环过饱和吸附完成之后，将收集到的过饱和上柱流出液浓缩、干燥，得到产品i；将大孔吸附树脂柱b用乙醇洗脱，收集洗脱液b，回收乙醇、浓缩，将浓缩液干燥，得到产品ii。24、优选地，步骤(1a)中，所述的灭酶方式包括但不局限于热水灭酶、蒸汽灭酶、热空气灭酶、酸碱灭酶、辐射灭酶、微波灭酶、射线灭酶、高能电子束灭酶、高压脉冲电场灭酶。25、优选地，步骤(1b)中，所述的提取方式包括但不局限于传统分次提取、回流提取、逆流提取、打浆提取、压榨提取、微波辅助提取、亚临界提取、超临界提取。26、优选地，步骤(1b)中，所述醇选自乙醇，溶剂用量是罗汉果原料质量的2-10倍，比如3倍、4倍、5倍、6倍、7倍、8倍。27、优选地，步骤(1c)中，所述的过滤方式包括但不限于筛网过滤、滤布过滤、板框过滤、离心过滤、沉降过滤、钛棒过滤、膜过滤、陶瓷膜过滤、超滤、纳滤，以及上述多种过滤方式的组合。28、优选地，步骤(2a)中，所述的大孔吸附树脂柱a中，所使用的大孔吸附树脂类型为非极性大孔吸附树脂、中极性大孔吸附树脂或弱极性大孔吸附树脂，或者以上两种或多种树脂的组合；所述大孔吸附树脂柱a的高径比为0.5：1-20：1，优选2-10：1，比如4:1，上柱流速为0.1-10bv/小时，优选0.5-4bv/小时，比如0.8bv/小时。29、优选地，步骤(2b)中，酸液选自0.5-5％wt％的盐酸、硫酸中的至少一种，碱液选自0.5-5wt％的naoh溶液、koh溶液中的至少一种；酸液/碱液的用量是1-2bv；30、优选地，步骤(3)中，所述的阴、阳离子交换树脂柱组合的方式和先后顺序，包括但不限于“先阴再阳”、“先阳再阴”、“阳+阴+阳”、“阴+阳+阴”、“阳+阴+阴”、“阴+阳+阳”、“阳+阳+阴”、“阴+阴+阳”、“阴+阳+阴+阳”、“阳+阴+阳+阴”、“阳+阴+阴+阳”、“阴+阳+阳+阴”。31、优选地，步骤(3)中，所述阴离子交换树脂选自lx-t5、d941中的至少一种；所述阳离子交换树脂选自001×16、732中的至少一种。阴、阳离子交换树脂的高径比为2-4：1，比如3.5:1，上柱流速1-2bv/小时。32、优选地，步骤(4)中，所述的大孔吸附树脂柱b中，所使用的大孔吸附树脂类型为非极性大孔吸附树脂、中极性大孔吸附树脂或弱极性大孔吸附树脂，或者以上两种或多种树脂的组合。33、优选地，步骤(4)中，所述大孔吸附树脂柱b的高径比为0.5：1-20：1，优选2-34、10：1，比如5:1，上柱流速为0.1-10bv/小时，优选0.3-3bv/小时，比如0.5bv/小时。35、优选地，步骤(4)中，所述大孔吸附树脂柱b中，大孔吸附树脂的用量为脱色液中固形物重量的0.5-20倍(v/m，l/kg)。36、优选地，步骤(4)中，所述循环过饱和吸附的次数为1-50次，优选5-10次。37、其中，将所有脱色液通过大孔吸附树脂柱b，弃去无甜味的未饱和上柱流出液(即完成步骤4a)，并收集所有的过饱和流出液(即完成步骤4b)，将该过饱和流出液再次上柱至大孔吸附树脂柱b，可称为循环过饱和吸附第1次。循环过饱和吸附第1次完成之后，收集第1次循环过饱和吸附的过饱和流出液，将该过饱和流出液再次重复上柱至大孔吸附树脂柱b，可称为循环过饱和吸附第2次。循环过饱和吸附次数的次数，以此方式类推。38、本发明申请中，1bv＝1个树脂装柱体积。39、本发明方法通过控制通过循环过饱和吸附的次数，进而调控产品i和ii中罗汉果稀有甜苷的含量。循环过饱和吸附次数越多，产品i中11-氧基-罗汉果苷v富集程度在减少，产品ii中，罗汉果苷vi、赛门苷、罗汉果苷iv、罗汉果苷iii的富集程度在增加。随着罗汉果苷vi、赛门苷、罗汉果苷iv、罗汉果苷iii富集程度的增加，控制在一定含量范围内，可以得到风味口感滋味比常规v50更佳的罗汉果提取物产品ii。40、本发明与其它现有技术相比较，具有以下特点：41、(1)本发明方法可连续处理大量原料、设备简单、生产成本低，可操作性强，适宜于工业化连续生产；本发明工艺与传统工艺制得的罗汉果传统v50％产品不同，本方法可同时获得两种甜苷含量特殊的罗汉果提取物产品，且稀有甜苷的含量有较大的差异。42、(2)本发明方法制得的两种甜苷含量特殊的罗汉果提取物产品，由于各种甜苷(尤其是除苷v以外的稀有甜苷)的含量以及所占比例各不相同，因此与传统v50％产品相比，具有以下优势：产品i中，甜感和风味最佳的两种稀有甜苷(罗汉果苷vi和赛门苷)的含量明显高于传统v50％产品，因此产品ii体现了比传统罗汉果甜苷产品v50更加好的风味和口感；产品ii中，总甜苷的含量(尤其是11-氧基-罗汉果苷v含量+罗汉果苷v的含量)明显高于传统v50％产品，因此产品ii的甜度倍数超过了传统v50％产品。两种产品的特征各有千秋，可满足不同的应用场景和市场需求。