一种STZ诱发糖尿病视网膜病变动物模型的建模方

本发明属于糖尿病视网膜病变动物模型，特别涉及一种stz诱发糖尿病视网膜病变动物模型的建模方法。背景技术：1、糖尿病（diabetesmellitus，dm）是胰岛素缺乏和（或）胰岛素抵抗导致的以高血糖为主要特征表现的代谢紊乱综合征，易发生心、脑、肾等多个并发症；糖尿病视网膜病变是糖尿病最常见的微血管并发症之一，主要是视网膜血管出现病变，进而出现视网膜出血、水肿、缺血，视网膜增殖膜形成和视网膜脱离等；早期糖尿病视网膜病变患者没有临床症状，随着病情的加重，视力会逐渐下降直至失明。2、目前，临床前模拟人类dm的动物模型构建，最常用的动物是大鼠和小鼠，而动物的性别不同对stz的敏感性也不同，对于大鼠和小鼠而言，雄性比雌性更敏感；dm建模常用试剂是链脲佐菌素(streptozotocin，stz)和四氧嘧啶(alloxan，alx)，alx是通过氧化应激破坏胰腺β细胞，但和stz比，alx有效性低、副作用大，会引起肝、肾毒性。stz对其它组织器官毒性相对较小，造模成功率高。3、故而本发明通过stz诱发动物产生糖尿病，并摸索糖尿病小鼠视网膜病变过程，从而为该领域提供有效数据案例。4、因此，鉴于上述方案于实际制作及实施使用上的缺失之处，而加以修正、改良，同时本着求好的精神及理念，并由专业的知识、经验的辅助，以及在多方巧思、试验后，方创设出本发明，特再提供一种stz诱发糖尿病视网膜病变动物模型的建模方法，用于解决上述的问题。技术实现思路1、本发明提出一种stz诱发糖尿病视网膜病变动物模型的建模方法，解决了现有技术中的问题。2、本发明的技术方案是这样实现的：一种stz诱发糖尿病视网膜病变动物模型的建模方法，包括：使用6-8周大的雄性小鼠以及柠檬酸缓冲液的配置，雄性小鼠体重为17-22g，柠檬酸缓冲液的ph范围为4.2-4.5，注射浓度为60mg/kg；3、雄性小鼠模型前需要禁食、不禁水12h。4、作为优选的实施方式，所述柠檬酸缓冲液制备方法步骤如下：5、称取2.1g 柠檬酸（mw: 210.14）加入双蒸水100ml充分溶解配成a液；6、称取2.94g 柠檬酸钠（mw: 294.10）加入双蒸水100ml充分溶解配成b液；7、将a、b液按1:1混合配比，ph计测定并调节ph=4.2-4.5，用0.22µm膜过滤除杂，得到配置stz的柠檬酸缓冲液。8、作为优选的实施方式，所述柠檬酸缓冲液制备方法可等比缩放配制。9、进一步的，柠檬酸缓冲液现配现用可防止氧化引起的ph漂移。10、作为优选的实施方式，所述根据雄性小鼠建模准备步骤如下：11、按动物数目和注射剂量来计算，称取所需的stz（冻干粉），放置干燥的无菌瓶内，并用铝箔或锡箔纸包好；12、将柠檬酸缓冲液和载有stz的瓶子提前置于冰浴中，再一同带入动物房中。13、作为优选的实施方式，所述根据雄性小鼠建模准备完成后的注射步骤如下：14、按1%（w/v）浓度加入适量的柠檬酸缓冲液溶解stz，充分溶解；15、按动物空腹体重注射相应体积的stz，并在5min内注射完毕。16、作为优选的实施方式，所述stz注射过程需连续5d，连续注射完成后的3d后禁食12h，对动物测空腹血糖，建模成功的标准为血糖值16.7mmol/l以上，低于标准的动物需要在禁食12h后补打30mg/kg的stz。17、进一步的，血糖值16.7mmol/l以上的雄性小鼠仅为糖尿病建模成功，距离糖尿病视网膜病变还有20周，其次糖尿病雄性小鼠会越来越瘦，体重明显降低。对部分雄性小鼠的解剖，通过胰腺切片，可获悉雄性小鼠的病变情况。18、采用了上述技术方案后，本发明的有益效果是：通过对雄性小鼠注射stz以诱导糖尿病建模，试验周期达到16周后的雄性小鼠视力开始下降，通过眼动仪以实现雄性小鼠的视力追踪，达到20周前后，视力明显下降，通过眼动仪的筛选视力较差的糖尿病视网膜病变雄性小鼠，解剖视网膜并切片，能明显获知糖尿病视网膜病变雄性小鼠视网膜的结构变薄，说明了糖尿病视网膜病变造模的成功，从而为该领域提供有效数据案例。技术特征：1.一种stz诱发糖尿病视网膜病变动物模型的建模方法，其特征在于，包括：使用6-8周大的雄性小鼠以及柠檬酸缓冲液的配置，雄性小鼠体重为17-22g，柠檬酸缓冲液的ph范围为4.2-4.5，注射浓度为60mg/kg；2.根据权利要求1所述的一种stz诱发糖尿病视网膜病变动物模型的建模方法，其特征在于，所述柠檬酸缓冲液制备方法步骤如下：3.根据权利要求2所述的一种stz诱发糖尿病视网膜病变动物模型的建模方法，其特征在于，所述柠檬酸缓冲液制备方法可等比缩放配制。4.根据权利要求1所述的一种stz诱发糖尿病视网膜病变动物模型的建模方法，其特征在于，所述根据雄性小鼠建模准备步骤如下：5.根据权利要求4所述的一种stz诱发糖尿病视网膜病变动物模型的建模方法，其特征在于，所述根据雄性小鼠建模准备完成后的注射步骤如下：6.根据权利要求5所述的一种stz诱发糖尿病视网膜病变动物模型的建模方法，其特征在于，所述stz注射过程需连续5d，连续注射完成后的3d后禁食12h，对动物测空腹血糖，建模成功的标准为血糖值16.7mmol/l以上，低于标准的动物需要在禁食12h后补打30mg/kg的stz。技术总结本发明提出了一种STZ诱发糖尿病视网膜病变动物模型的建模方法，涉及糖尿病动物模型技术领域，包括：使用6‑8周大的雄性小鼠以及柠檬酸缓冲液的配置，柠檬酸缓冲液制备方法步骤如下：称取2.1g柠檬酸（Mw:210.14）加入双蒸水100mL充分溶解配成A液；称取2.94g柠檬酸钠（Mw:294.10）加入双蒸水100mL充分溶解配成B液；将A、B液按1:1混合配比，pH计测定并调节pH=4.2，用0.22µm膜过滤除杂，得到配置STZ的柠檬酸缓冲液，柠檬酸缓冲液溶解STZ后注射至雄性小鼠内实现建模，在诱导下实现糖尿病模型，并在实验后期引发糖尿病视网膜病变，借此，本发明具有的优点为，建模的成功率较高，并且死亡率较少，完全探索了糖尿病小鼠视网膜病变的过程，从而为该领域提供有效数据案例。技术研发人员：赵雅琴,左专,姚凯受保护的技术使用者：武汉科技大学技术研发日：技术公布日：2024/5/16