一种滨梅离体快繁方法

本发明涉及滨梅离体快繁相关，具体为一种滨梅离体快繁方法。背景技术：1、滨梅属于蔷薇科李属海滩沙生灌木，在美国的纽芬兰州到北卡罗莱那州的北大西洋海岸均有分布，其树形挺廓饱满，早春先花后叶，满树繁花，花淡粉色。滨梅的果实富含多酚类物质，但也富含有机酸、可溶性糖、维生素a以及可以降低胆固醇的果胶类物质，有学者认为可以用于果冻、果酱、果酒；滨梅的根、茎及总生物量具有较好的对钠离子或氯离子的胁迫，国内学者在滨梅引种过程中也得出了相似的结论，认为通过增加体内含水量来降低过高的na+对植物体造成的伤害，滨梅可以耐5.85g/kgnacl的盐胁迫；王利民也得出相近的试验结果，滨梅耐盐性较强，在6g/lnacl处理下长势依然较好。国外学者通过对生长在贫瘠的沙丘中的滨梅的根研究认为，滨梅的根与真菌amf(丛枝菌根菌)形成的一种协助互生关系，国内学者通过这一结果，将真菌amf(丛枝菌根菌)侵染滨梅插条，改变了插条根系的激素代谢，强化了扦插基质中滨梅插条的磷素营养，能够显著提高滨梅插条生根诱导率，同时还可以促进滨梅扦插幼苗的生长，加快了滨梅在国内的引种应用；紧接着就有学者利用各种基质及条件调控，研究滨梅的田间扦插繁殖，试验筛选出滨梅嫩枝扦插适宜的基质是：珍珠岩：进口泥炭＝1:2的复合基质，同时用1000mg/labt生根粉浸泡插条基部8min，扦插40d后的生根率可达到89.1％。2、近几年，随着滨梅的耐盐碱特性的逐步揭开，很多学者致力于滨梅应用于沿海滩涂应用的产业化开发研究，逐步进入到组织培养各个环节的技术研究，在引种初期，南京大学团队对滨梅的组织培养进行了尝试性研究，并以滨梅种子为外植体，进行了种子的无菌萌发、子叶愈伤组织的诱导、不定芽的再生及瓶内诱导生根等环节进行了初步研究，初步建立了滨梅的无菌培养体系；燕志等以当年生滨梅茎段为试材，先用75％酒精消毒30秒，再用0.1％升汞消毒5分钟可以控制外生菌污染问题，同时在培养基中添加浓度为0.5％制霉菌素等抗生素可以控制好内生菌污染，而以滨梅的幼花托、新萌发的幼叶及新萌发的嫩茎段为外植体，75％乙醇灭菌30s后，升汞处理5分钟时，幼花托的无菌成活率达53.2％，幼叶的无菌成活率达90％，新萌发的嫩茎的无菌成活率达53.2％；付素静通过形成丛生苗的方式增殖，以丛生芽计数方式，获得茎段增殖培养基为ms+6-ba 1.0mg/l+naa 0.1mg/l上，增殖系数为8.8；生根培养基为1/2ms+iba 0.5mg/l+naa 0.2mg/l，15d时生根率为87.5％。但这些研究中，有的只研究了初代培养，有的只是简单的尝试性试验，有的影响因素设定还不够全面，有的研究方法较为单一，得出的结论是有条件的，对于工厂化育苗过程中的有效增殖研究更是缺乏，而植物的工厂化育苗技术是十分复杂而又十分系统的。近年来，中国学者已在草莓、观赏凤梨、蝴蝶兰等多个植物品种上，通过组织培养工厂化育苗。本文在前人的研究基础之上，重点考量增殖芽对于继代增殖的有效性，即有效增殖的概念，对滨梅的离体快繁关键技术及其优化做进一步的研究，进而为滨梅的工厂化生产和产业化开发奠定技术基础。技术实现思路1、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种滨梅离体快繁方法，包括基本培养基、6-ba、tdz、和naa，其中基本培养基的三个水平分别为1.0ms、1/2ms、wpm；6-ba的三个水平分别为0.5mg/l、1.0mg/l、1.5mg/l；tdz的三个水平分别为0.3mg/l、0.5mg/l、0.7mg/l；naa的三个水平分别为0.1mg/l、0.2mg/l、0.3mg/l。2、在一种可能的实现方式中，其试验材料选择步骤有：3、步骤一：四月中旬左右，待新生枝条长至7-10cm时，取生长于园艺站内的多年生滨梅植株上新萌发的枝条；4、步骤二：剪取当年生生长发育充实的茎段，并剪成每节含有2-3个生长点的小茎段；5、步骤三：用水冲洗掉茎段表面的灰尘等杂质；6、步骤四：筛选繁殖培养基；7、步骤五：优化繁殖培养基；8、步骤六：灭菌培养。9、在一种可能的实现方式中，其滨梅增殖影响因子的正交试验组合包括：10、(1)、基本培养基：a(1.0ms)，6-ba：a(0.5)，tdz：a(0.3)，naa：a(0.1)；11、(2)、基本培养基：a(1.0ms)，6-ba：b(1.0)，tdz：b(0.5)，naa：b(0.2)；12、(3)、基本培养基：a(1.0ms)，6-ba：c(1.5)，tdz：c(0.7)，naa：c(0.3)；13、(4)、基本培养基：b(1/2ms)，6-ba：a(0.5)，tdz：b(0.5)，naa：c(0.3)；14、(5)、基本培养基：b(1/2ms)，6-ba：b(1.0)，tdz：c(0.7)，naa：a(0.1)；15、(6)、基本培养基：b(1/2ms)，6-ba：c(1.5)，tdz：a(0.3)，naa：b(0.2)；16、(7)、基本培养基：c(wpm)，6-ba：a(0.5)，tdz：c(0.7)，naa：b(0.2)；17、(8)、基本培养基：c(wpm)，6-ba：b(1.0)，tdz：a(0.3)，naa：c(0.3)；18、(9)、基本培养基：c(wpm)，6-ba：c(1.5)，tdz：b(0.5)，naa：a(0.1)。19、在一种可能的实现方式中，其不同处理下的滨梅增殖效应包括：20、(1)、有效增殖系数：2.60±0.50cd，芽高：2.31±0.48ab，叶色：1.70±0.39c；21、(2)、有效增殖系数：1.70±0.39de，芽高：2.06±0.38b，叶色：1.40±0.18c；22、(3)、有效增殖系数：1.20±0.17e，芽高：2.09±0.58b，叶色：1.47±0.11c；23、(4)、有效增殖系数：3.00±0.40c，芽高：2.09±0.57b，叶色：2.33±0.12b；24、(5)、有效增殖系数：2.80±0.37cd，芽高：2.31±0.60ab，叶色：1.84±0.17c；25、(6)、有效增殖系数：4.56±0.53b，芽高：2.33±0.36ab，叶色：2.48±0.37b；26、(7)、有效增殖系数：4.56±0.37b，芽高：3.16±0.53a，叶色：3.96±0.28a；27、(8)、有效增殖系数：5.73±0.71a，芽高：2.40±0.42ab，叶色：3.83±0.50a；28、(9)、有效增殖系数：3.54±1.40bc，芽高：2.16±0.24b，叶色：4.00±0.14a。29、54±4.40bc，芽高：2.16±0.24b，叶色：4.00±0.14a。30、在一种可能的实现方式中，其不同因素及水准下的滨梅增殖苗高度包括：31、ka、基本培养基：2.15，6-ba：2.52，tdz：2.35，naa：2.26；32、kb、基本培养基：2.25，6-ba：2.26，tdz：2.10，naa：2.52；33、kc、基本培养基：2.57，6-ba：2.19，tdz：2.52，naa：2.20；34、r、基本培养基：0.42，6-ba：0.33，tdz：0.42，naa：0.32。35、在一种可能的实现方式中，其不同因素及水准下的对滨梅有效增殖系数包括：36、ka、基本培养基：1.83，6-ba：3.39，tdz：4.30，naa：2.98；37、kb、基本培养基：3.45，6-ba：3.41，tdz：2.75，naa：3.61；38、kc、基本培养基：4.61，6-ba：3.10，tdz：2.85，naa：3.31；39、r、基本培养基：2.78，6-ba：0.31，tdz：1.55，naa：0.63。40、在一种可能的实现方式中，其不同因素及水准下的滨梅增殖苗叶色影响包括：41、ka、基本培养基：1.52，6-ba：2.66，tdz：2.67，naa：2.51；42、kb、基本培养基：2.22，6-ba：2.36，tdz：2.58，naa：2.61；43、kc、基本培养基：3.93，6-ba：2.65，tdz：2.40，naa：2.54；44、r、基本培养基：2.41，6-ba：0.31，tdz：0.27，naa：0.10。45、在一种可能的实现方式中，其iba和6-ba对滨梅的有效增殖的影响包括：46、(1)、iba：0.1，6-ba：0.05，有效增殖系数：2.13d，芽高：3.52ab，叶色：深绿，叶片大小：大；47、(2)、iba：0.1，6-ba：0.15，有效增殖系数：3.92cd，芽高：3.58ab，叶色：深绿，叶片大小：大；48、(3)、iba：0.1，6-ba：0.25，有效增殖系数：5.25c，芽高：3.14abc，叶色：绿，叶片大小：中；49、(4)、iba：0.1，6-ba：0.35，有效增殖系数：8.15b，芽高：3.33abc，叶色：绿，叶片大小：中；50、(5)、iba：0.1，6-ba：0.45，有效增殖系数：11.4a，芽高：3.12a，叶色：浅绿，叶片大小：小；51、(6)、iba：0.3，6-ba：0.05，有效增殖系数：2.57d，芽高：3.23abc，叶色：绿，叶片大小：大；52、(7)、iba：0.3，6-ba：0.15，有效增殖系数：3.47cd，芽高：3.57ab，叶色：绿，叶片大小：大；53、(8)、iba：0.3，6-ba：0.25，有效增殖系数：4.63c，芽高：2.87bc，叶色：绿，叶片大小：中；54、(9)、iba：0.3，6-ba：0.35，有效增殖系数：5.43c，芽高：2.43bc，叶色：绿，叶片大小：中；55、(10)、iba：0.3，6-ba：0.45，有效增殖系数：4.83c，芽高：2.17c，叶色：浅绿，叶片大小：小。56、与现有技术相比，本发明的有益效果是：本文通过正交试验，筛选出对滨梅组织培养增殖影响较大的因素及水平，然后再对主要因素进行培养基组成的优化，最终以有效增殖为主要考量指标，筛选出滨梅最适宜的增殖培养基。关于有效增殖是建立在工厂化生产种苗的基础之上，在增殖生产过程中，增殖出来的单极性芽体(更多的以丛生芽为主)能够继续用于继代增殖培养或生根培养，根据生产要求，生长细弱、玻璃化、莲座化的芽体不再继续继代转接，自然也不纳入有效增殖。