脐带间充质干细胞冻存液及其制备方法和冻存方

本申请涉及细胞冻存，具体而言，涉及一种脐带间充质干细胞冻存液及其制备方法和冻存方法。背景技术：1、脐带间充质干细胞(umbilical cord-derived mesenchymal stem cells，uc-mscs)是一种来源于新生儿脐带间充质组织的干细胞，具有多能分化、自我更新和免疫调节等功能。脐带间充质干细胞被广泛应用于以组织修复和再生为目标的干细胞治疗中，具有广阔的临床应用前景。2、细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一，起到了细胞保种的重要作用。3、对于脐带间充质干细胞进行冻存的冻存液，要求冻存复苏后的脐带间充质干细胞具有较高的细胞活力、增殖能力以及多向分化的潜能等能力，所以对于脐带间充质干细胞进行冻存时，需要尽可能避免脐带间充质干细胞在冻存时损伤。4、目前，为了有效保护脐带间充质干细胞，以尽可能避免脐带间充质干细胞在冻存时损伤，脐带间充质干细胞冻存液中往往添加多种添加剂，比如糖类或盐类物质等，脐带间充质干细胞复苏后，较多添加剂的存在不利于复苏后的脐带间充质干细胞的临床使用；且冻存液含有多种添加剂，也会导致脐带间充质干细胞冻存液的配制过程复杂，易引入外源因子，也不利于临床使用。5、因此，需要提供一种适于脐带间充质干细胞冻存、成分简单、配制过程容易且冻存复苏后细胞活力维持较好的冻存液。技术实现思路1、本申请的目的在于提供一种脐带间充质干细胞冻存液及其制备方法和冻存方法，该脐带间充质干细胞冻存液适于脐带间充质干细胞冻存，其成分简单、配制过程容易、冻存复苏后细胞活力维持较好且冻存复苏后的脐带间充质干细胞有利于直接进行临床使用。2、第一方面，本申请提供了一种脐带间充质干细胞冻存液，该脐带间充质干细胞冻存液包括：cs10以及人血白蛋白；其中，cs10的体积占脐带间充质干细胞冻存液的体积的40％～60％；人血白蛋白在脐带间充质干细胞冻存液中的质量浓度为0.01g/ml～0.08g/ml。3、本申请提供的脐带间充质干细胞冻存液中，通过cs10以及人血白蛋白的协同配合，并调控cs10以及人血白蛋白在脐带间充质干细胞冻存液至特定的占比，可使得采用该脐带间充质干细胞冻存液冻存复苏后的脐带间充质干细胞具有较高的细胞活力、良好的细胞形态、良好的细胞表面标志物表达情况、良好的成脂成骨成软骨的三分化能力以及良好的增殖能力；因此，该脐带间充质干细胞冻存液适于对脐带间充质干细胞进行冻存。此外，该脐带间充质干细胞冻存液的成分简单，可使得该脐带间充质干细胞冻存液的配制过程简单易行，不易引入外源因子，有利于脐带间充质干细胞冻存复苏后直接进行临床使用。4、结合第一方面，在本申请可选的实施方式中，cs10的体积占脐带间充质干细胞冻存液的体积的45％～55％。5、在上述技术方案中，有利于进一步提高采用该脐带间充质干细胞冻存液冻存复苏后的脐带间充质干细胞的细胞活力以及增殖能力。6、结合第一方面，在本申请可选的实施方式中，cs10的体积占脐带间充质干细胞冻存液的体积的48％～52％。7、在上述技术方案中，有利于进一步提高采用该脐带间充质干细胞冻存液冻存复苏后的脐带间充质干细胞的细胞活力以及增殖能力。8、结合第一方面，在本申请可选的实施方式中，人血白蛋白在脐带间充质干细胞冻存液中的质量浓度为0.04g/ml～0.06g/ml。9、在上述技术方案中，可进一步减少冻存造成的脐带间充质干细胞的凋亡率和死亡率，还可以较好地保持冻存复苏后的脐带间充质干细胞的细胞内外的渗透压，使得冻存复苏后的脐带间充质干细胞具有良好的细胞形态。10、结合第一方面，在本申请可选的实施方式中，脐带间充质干细胞冻存液还包括生理盐水。11、第二方面，本申请提供了上述第一方面任一项提供的脐带间充质干细胞冻存液的制备方法，该制备方法包括：将cs10以及人血白蛋白混合，制得脐带间充质干细胞冻存液。12、由于本申请上述第一方面任一项提供的脐带间充质干细胞冻存液的成分简单，各成分之间简单混合即可制得脐带间充质干细胞冻存液，可使得该脐带间充质干细胞冻存液的配制过程简单易行，不易引入外源因子，有利于脐带间充质干细胞冻存复苏后直接进行临床使用；且由于本申请上述第一方面任一项提供的脐带间充质干细胞冻存液中，通过cs10以及人血白蛋白的协同配合，并调控cs10以及人血白蛋白在脐带间充质干细胞冻存液至特定的占比，可使得采用该脐带间充质干细胞冻存液冻存复苏后的脐带间充质干细胞具有较高的细胞活力、良好的细胞形态、良好的细胞表面标志物表达情况、良好的成脂成骨成软骨的三分化能力以及良好的增殖能力；因此，该脐带间充质干细胞冻存液适于对脐带间充质干细胞进行冻存。13、第三方面，本申请提供了一种脐带间充质干细胞冻存方法，该冻存方法包括：采用上述第一方面任一项提供的脐带间充质干细胞冻存液冻存脐带间充质干细胞。14、采用本申请第一方面任一项提供的脐带间充质干细胞冻存液冻存脐带间充质干细胞，可使得冻存复苏后的脐带间充质干细胞具有较高的细胞活力、良好的细胞形态、良好的细胞表面标志物表达情况、良好的成脂成骨成软骨的三分化能力以及良好的增殖能力；且由于该脐带间充质干细胞冻存液的成分简单，可使得该脐带间充质干细胞冻存液的配制过程简单易行，不易引入外源因子，有利于脐带间充质干细胞冻存复苏后直接进行临床使用。15、结合第三方面，在本申请可选的实施方式中，脐带间充质干细胞为p1～p9代脐带间充质干细胞。16、结合第三方面，在本申请可选的实施方式中，冻存时，脐带间充质干细胞的密度为1×106细胞/ml～3×107细胞/ml。17、结合第三方面，在本申请可选的实施方式中，冻存的温度≤-80。技术特征：1.一种脐带间充质干细胞冻存液，其特征在于，所述脐带间充质干细胞冻存液包括：cs10以及人血白蛋白；2.根据权利要求1所述的脐带间充质干细胞冻存液，其特征在于，所述cs10的体积占所述脐带间充质干细胞冻存液的体积的45％～55％。3.根据权利要求1所述的脐带间充质干细胞冻存液，其特征在于，所述cs10的体积占所述脐带间充质干细胞冻存液的体积的48％～52％。4.根据权利要求1所述的脐带间充质干细胞冻存液，其特征在于，所述人血白蛋白在所述脐带间充质干细胞冻存液中的质量浓度为0.04g/ml～0.06g/ml。5.根据权利要求1～4任一项所述的脐带间充质干细胞冻存液，其特征在于，所述脐带间充质干细胞冻存液还包括生理盐水。6.一种如权利要求1～5任一项所述的脐带间充质干细胞冻存液的制备方法，其特征在于，包括：将所述cs10以及所述人血白蛋白混合，制得所述脐带间充质干细胞冻存液。7.一种脐带间充质干细胞冻存方法，其特征在于，采用如权利要求1～5任一项所述的脐带间充质干细胞冻存液冻存脐带间充质干细胞。8.根据权利要求7所述的脐带间充质干细胞冻存方法，其特征在于，所述脐带间充质干细胞为p1～p9代脐带间充质干细胞。9.根据权利要求7所述的脐带间充质干细胞冻存方法，其特征在于，所述冻存时，所述脐带间充质干细胞的密度为1×106细胞/ml～3×107细胞/ml。10.根据权利要求7～9任一项所述的脐带间充质干细胞冻存方法，其特征在于，所述冻存的温度≤-80。技术总结本申请提供一种脐带间充质干细胞冻存液及其制备方法和冻存方法，属于细胞冻存技术领域。脐带间充质干细胞冻存液包括CS10以及人血白蛋白；CS10的体积占脐带间充质干细胞冻存液的体积的40％～60％；人血白蛋白在脐带间充质干细胞冻存液中的质量浓度为0.01g/mL～0.08g/mL。采用本申请提供的脐带间充质干细胞冻存液冻存复苏后的脐带间充质干细胞具有较高的细胞活力、良好的细胞形态、良好的细胞表面标志物表达情况、良好的成脂成骨成软骨的三分化能力以及良好的增殖能力。本申请提供的脐带间充质干细胞冻存液的成分简单，有利于脐带间充质干细胞冻存复苏后直接进行临床使用。技术研发人员：孙晓燕,贺尚文,李好,张淼,程威,寇大莲受保护的技术使用者：成都康景生物科技有限公司技术研发日：技术公布日：2024/5/12