促进千里香不定芽伸长的培养基、方法及组培苗

本技术涉及药用植物繁殖，具体地，本技术涉及一种促进千里香不定芽伸长的培养基、方法及千里香组培苗培养方法。背景技术：1、千里香属芸香科(rutaceae)九里香属(murraya)，是中药九里香的基原植物之一，其入药部位为其干燥叶和带叶嫩枝。九里香之名最早出现于明代，因其花气味芳香而被岭南地区民间称“九里香”，植物分类学家将九里香与千里香均划分为芸香科九里香属九里香组。九里香性温，味辛、微苦，具有行气止痛、活血散瘀等功效，富含香豆素、黄酮、生物碱、挥发油等化学成分，现代药理研究显示九里香具有抗炎镇痛、抗肿瘤、降血糖、抗虫抑菌、预防骨质疏松、抗生育、抗氧化等作用，临床上多用于治疗慢性胃炎等炎症疾病，目前已上市的多种中成药如三九胃泰颗粒、九龙胃药、肤阴洁复方黄松洗液等均含有九里香。2、九里香或千里香雄蕊退化严重，产生种子有限，因此采用种子育苗的方法难以高效快速的大规模化种植栽培。植物组织培养技术具有生长周期短、繁殖倍率高、管理方便等优点，有利于工厂化生产和自动化控制。因此，利用植物组织培养技术可更好地实现千里香规模化种植栽培、优良品种的选育和快速繁殖。采用外植体-新梢-增殖-生根的方法，可以解决千里香组织培养技术中根短或生根率的缺陷，但是并没有解决不定芽伸长的问题。3、在千里香的组织培养研究中，存在千里香不定芽在继代过程中出现伸长生长慢，不定芽伸长效果差等问题，严重阻碍了千里香的组织培养快繁技术的推广应用。技术实现思路1、本技术的一个目的是提供一种促进千里香不定芽伸长的培养基，解决千里香不定芽在继代过程中出现伸长生长慢，不定芽有效芽率低的问题。2、本技术的另一个目的是提供一种促进千里香不定芽伸长的方法，解决千里香不定芽在继代过程中出现伸长生长慢，不定芽有效芽率低的问题。3、本技术的另一个目的是提供一种千里香组培苗培养方法，解决千里香组培苗培养过程中植株矮小、生长慢的问题。4、为了实现本技术的这些目的和其它优点，第一方面，本技术提供了一种促进千里香不定芽伸长的培养基，所述促进千里香不定芽伸长的培养基包括芽诱导培养基、增殖培养基和伸长培养基；5、所述芽诱导培养基在基础培养基中添加6-ba和iaa；6、所述增殖培养基在基础培养基中添加6-ba和iaa；7、所述伸长培养基在基础培养基中添加6-ba和iaa，或者，添加6-ba、ga3和naa，或者，添加6-ba和ga3。8、在一种可选的实施方式中，所述增殖培养基中6-ba的添加量为0.8mg/l-2.4mg/l，iaa的添加量为0.1mg/l-0.5mg/l；9、优选地，所述增殖培养基还包括kt，所述kt的添加量为0.5mg/l-1.0mg/l；10、更优选地，所述增殖培养基中6-ba的添加量为0.8mg/l；kt的添加量为0.5mg/l；iaa的添加量为0.3mg/l。11、在一种可选的实施方式中，所述芽诱导培养基中6-ba的添加量为0.6mg/l-1.0mg/l，iaa的添加量为0.05mg/l-0.15mg/l。12、在一种可选的实施方式中，若所述伸长培养基中添加6-ba和iaa，则6-ba的添加量为0.1mg/l-0.3mg/l，iaa的添加量为0.01mg/l-0.03mg/l；13、更优选地，6-ba的添加量为0.2mg/l，iaa的添加量为0.02mg/l。14、在一种可选的实施方式中，若所述伸长培养基中添加6-ba和ga3，则6-ba的添加量为0.1mg/l-0.5mg/l，ga3的添加量为0.4mg/l-0.6mg/l；15、优选地，6-ba的添加量为0.5mg/l或0.3mg/l，ga3的添加量为0.5mg/l。16、在一种可选的实施方式中，若所述伸长培养基中添加6-ba、ga3和naa，则6-ba的添加量为0.6mg/l-1.0mg/l，ga3的添加量为0.4mg/l-0.6mg/l；naa的添加量为1-3mg/l；17、优选地，6-ba的添加量为0.8mg/l，ga3的添加量为0.5mg/l；naa的添加量为2.0mg/l。18、在一种可选的实施方式中，所述促进千里香不定芽伸长的培养基的ph值在使用前均调至5.4-6.2；19、所述基础培养基包括ms培养基；20、优选地，所述基础培养基还包括蔗糖和琼脂粉；21、更优选地，所述蔗糖在基础培养基中的添加量为30g/l，所述琼脂粉在基础培养基中的添加量为4.5g/l。22、第二方面，本技术提供了一种促进千里香不定芽伸长的方法，包括以下步骤：23、1)千里香不定芽置于增殖培养基中增殖培养，继代培养得到千里香不定芽丛；24、2)千里香不定芽置于不定芽伸长培养基中伸长培养得到伸长的千里香不定芽；25、优选地，千里香不定芽通过将千里香外植体接种到芽诱导培养基中诱导培养得到。26、在一种可选的实施方式中，诱导培养、增殖培养、伸长培养的培养条件均为：培养温度为23℃-27℃，光照强度1500lux-2000lux，光照时间为14-18h/d。27、第二方面，本技术提供了一种千里香组培苗培养方法，包括以下步骤：28、经所述促进千里香不定芽伸长培养基培养或经所述促进千里香不定芽伸长的方法得到的千里香不定芽或千里香不定芽丛，接种至生根培养基中培养至生根，获得完整植株；29、所述生根培养基是以1/2ms、琼脂粉和蔗糖为基本培养基，添加iba、naa和iaa；30、所述iba在生根培养基中的添加量为1.0mg/l-2.0mg/l，所述naa在生根培养基中的添加量为1.0mg/l-3.0mg/l，所述iaa在生根培养基中的添加量为0.5mg/l-1.5mg/l；31、所述蔗糖在基础培养基中的添加量为30g/l，所述琼脂粉在基础培养基中的添加量为4.5g/l。32、在一种可选的实施方式中，生根培养的培养条件均为：培养温度为23℃-27℃，光照强度1500lux-2000lux，光照时间为14-18h/d。33、本技术至少包括以下有益效果：34、1、本技术促进千里香不定芽伸长的培养基，包括芽诱导培养基、增殖培养基和伸长培养基；芽诱导培养基在基础培养基中添加6-ba和iaa，增殖培养基在基础培养基中添加6-ba和iaa；伸长培养基在基础培养基中添加6-ba和iaa，或者，添加6-ba、ga3和naa，或者，添加6-ba和ga3。利用不同的植物生长调节剂，可以有效促进千里香不定芽的伸长，芽数多，有效芽率高；培养得到的植株健壮不矮小，有效促进千里香不定芽的生长，解决生长慢的技术问题，有效缩短了培养周期，以便更好地进行千里香组培苗后续的生根培养。35、2、本技术通过使用促进千里香不定芽伸长的方法，经40天培育，提高了有效芽率，有效促进千里香不定芽的生长有效缩短了培养周期，使得千里香组培苗快速繁殖培养成为可能。