一种利用黑腹果蝇行为反应评价农膜微塑料与农

本发明属于毒性检测，尤其涉及一种利用黑腹果蝇行为反应评价农膜微塑料与农药戊唑醇的生长发育毒性的方法。背景技术：1、近年来，国际上对塑料垃圾和微塑料环境危害的关注日益增多。现已在全球233种海洋生物(包括100％海龟物种、36％海豹物种、59％鲸鱼物种、59％海鸟物种，以及92种海鱼和6种无脊椎动物)消化道内发现有微塑料颗粒的存在。据联合国环境规划署(unep)报道，到2050年，预计99％的鸟类都会食用塑料。当前对微塑料的研究大多集中在水域环境中，但是有研究表明进入陆地生态系统的微塑料是海洋的4-23倍，所以对土壤微塑料污染对生态环境带来的危害进行研究是迫切需要的。农药因其减少病虫害和提高农作物产量等特点而被广泛使用,并在农业生产中发挥着重要的作用。但多数农药具有高残留、剧毒、易迁移和难降解的特性,在生产与使用过程中会通过挥发、沉降等过程进入环境介质中。2、近些年来微塑料和农药在农业中的广泛使用，不可避免地导致了这两种残留物在农业土壤中的长期共存。同时塑料薄膜的表面倾向于积累更多的农药。因此，有必要研究微塑料和农药对生物的影响，研究结果将有助于更准确地评估污染物的环境风险。3、目前微塑料和农药的毒性作用的研究主要集中在植物、水生动物和哺乳动物，相对于陆生昆虫研究较少。4、果蝇的生命周期短，繁殖速度快，子代数量大，成本效益高，比哺乳动物模型更具优势。目前果蝇被广泛应用于疾病机理、药物测试、生理行为以及物质毒性等基础应用研究。在毒性检测时，果蝇模型可以在遗传效应、生长发育、生理生化、行为运动等方面可以进行毒理性研究，还可以全方面分析结果，具有更好的科学性。果蝇作为已经相对成熟的模式生物，无论是水、气或固废方面的污染物，都有其对应的实验指标与方法，能够做到既研究污染物的毒性作用，又可以研究污染物的毒性作用机制，且研究方法系统全面，适用范围广泛。目前，污染物毒理学研究已广泛采取果蝇模型作为研究对象，利用果蝇模型得到的毒性研究结果往往可以深入分析环境污染物毒性效应与机制，对环境生态风险的评估评价具有相对重大的意义。技术实现思路1、有鉴于此，本发明的目的在于一种利用黑腹果蝇行为反应评价农膜微塑料与农药戊唑醇的生长发育毒性的方法，采用本发明提供的方法能够准确地评价农膜微塑料与农药戊唑醇的生长发育毒性，为农业上合理使用的农膜微塑料与农药戊唑醇的剂量和浓度提供理论和实验数据支持。2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：3、本发明提供了一种利用黑腹果蝇行为反应评价农膜微塑料与农药戊唑醇的生长发育毒性的方法，包括以下步骤：4、1)将黑腹果蝇置于含有农膜微塑料与农药戊唑醇的染毒培养基上培养3-7d，统计黑腹果蝇在3h内爬入隔间的果蝇数量，得到果蝇比例；5、2)将黑腹果蝇置于标准玉米培养基上培养3-7d，统计黑腹果蝇在3h内爬入隔间的果蝇数量，得到果蝇比例；6、3)当所述步骤1)的黑腹果蝇的比例与步骤2)的黑腹果蝇的比例相比出现显著差异时，表明农膜微塑料与农药戊唑醇具有生长发育毒性。7、优选的，所述的染毒培养基包括农膜微塑料与农药戊唑醇，农膜微塑料包括聚乙烯微塑料、聚氯乙烯微塑料、聚苯乙烯微塑料。8、优选的，当所述污染物为农膜微塑料时，所述含有农膜微塑料的染毒培养基中农膜微塑料的浓度为10～200μg/ml。9、优选的，当所述污染物为农药戊唑醇时，所述含有农药戊唑醇的固体培养基中农药戊唑醇的浓度为1～100μg/ml。10、优选的，所述染毒培养基先将农膜微塑料和农药戊唑醇配置成一定浓度储备液，随后按一定比例加入普通玉米培养基中充分混合后配置成染毒培养基。11、优选的，所述觅食行为试验由两个隔间组成，第一个隔间不含食物，第二个隔间内含混合了草莓气味酸奶的食物。阴性对照是指第二隔间不放食物，第一隔间放不染毒果蝇。12、优选的，所述培养的条件包括：采集3～7d龄的果蝇，将果蝇转移到含水但不含食物的空试管中，使其饥饿但不干燥22-24h。13、本发明提供了一种利用黑腹果蝇行为反应评价农膜微塑料与农药戊唑醇的生长发育毒性的方法，包括以下步骤：1)将黑腹果蝇置于含有农膜微塑料与农药戊唑醇的染毒培养基上培养3-7d，统计黑腹果蝇在3h内爬入隔间的果蝇数量，得到果蝇比例；2)将黑腹果蝇置于标准玉米培养基上培养3-7d，统计黑腹果蝇在3h内爬入隔间的果蝇数量，得到果蝇比例；3)当所述步骤1)的黑腹果蝇的比例与步骤2)的黑腹果蝇的比例相比出现显著差异时，表明农膜微塑料与农药戊唑醇具有生长发育毒性。采用本发明提供的方法能够准确地评价农膜微塑料与农药戊唑醇的生长发育毒性，为农业上合理使用的农膜微塑料与农药戊唑醇的剂量和浓度提供理论和实验数据支持。技术特征：1.一种利用黑腹果蝇行为反应评价农膜微塑料与农药戊唑醇的生长发育毒性的方法，其特征在于，包括以下步骤：2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的染毒培养基包括农膜微塑料与农药戊唑醇，农膜微塑料包括聚乙烯微塑料、聚氯乙烯微塑料、聚苯乙烯微塑料。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，当所述污染物为农膜微塑料时，所述含有农膜微塑料的染毒培养基中农膜微塑料的浓度为10～200μg/ml。4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，当所述污染物为农药戊唑醇时，所述含有农药戊唑醇的固体培养基中农药戊唑醇的浓度为1～100μg/ml。5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述染毒培养基先将农膜微塑料和农药戊唑醇配置成一定浓度储备液，随后按一定比例加入普通玉米培养基中充分混合后配置成染毒培养基。6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述觅食行为试验由两个隔间组成，第一个隔间不含食物，第二个隔间内含混合了草莓气味酸奶的食物。阴性对照是指第二隔间不放食物，第一隔间放不染毒果蝇。7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养的条件包括：采集3～7d龄的果蝇，将果蝇转移到含水但不含食物的空试管中，使其饥饿但不干燥22-24h。技术总结本发明提供了一种利用黑腹果蝇行为反应评价农膜微塑料与农药戊唑醇的生长发育毒性的方法，属于毒性检测技术领域，包括以下步骤：1)将黑腹果蝇置于含有农膜微塑料与农药戊唑醇的染毒培养基上培养3‑7d，统计黑腹果蝇在3h内爬入隔间的果蝇数量，得到果蝇比例；2)将黑腹果蝇置于标准玉米培养基上培养3‑7d，统计黑腹果蝇在3h内爬入隔间的果蝇数量，得到果蝇比例；3)当所述步骤1)的黑腹果蝇的比例与步骤2)的黑腹果蝇的比例相比出现显著差异时，表明农膜微塑料与农药戊唑醇具有生长发育毒性。采用本发明提供的方法能够准确地评价农膜微塑料与农药戊唑醇的生长发育毒性，为农业上合理使用的农膜微塑料与农药戊唑醇的剂量和浓度提供理论和实验数据支持。技术研发人员：洪喻,张敏,齐瑾怡受保护的技术使用者：北京林业大学技术研发日：技术公布日：2024/5/10