一种茄科作物伤根-浸泡TRV-VIGS接种方法

本发明涉及生物，特别是涉及一种茄科作物伤根-浸泡trv-vigs接种方法。背景技术：1、后基因组时代，病毒诱导基因沉默(vigs)技术在植物反向遗传研究中发挥了重要作用。目前vigs菌液常用的接种方法有摩擦法、注射渗透法、喷雾法和根部吸收法等，以上方法存在以下不足：耗时费力、侵染效率低、不同程度损伤叶片、专业设备条件要求高等。其中根部吸收法具有耗时长，操作繁琐和转染效率低的缺点。本发明拟提供一种适合茄科模式作物伤根-浸泡trv-vigs接种方法，从而达到简单、快速、批量处理茄科常用模式作物和主要蔬菜，并高效沉默目的基因的目的。技术实现思路1、本发明的目的是提供一种茄科作物伤根-浸泡trv-vigs接种方法，以解决上述现有技术存在的问题，该方法能够实现简单、快速、批量接种，并能够高效沉默目的基因。2、为实现上述目的，本发明提供了如下方案：3、本发明提供一种伤根-浸泡trv-vigs接种方法，包括以下步骤：4、将作物种子培养至2-3片真叶时，将幼苗根部拨出，切除1/4～1/3长度的根系，将其余根系置于vigs浸染液中浸泡后，移栽至培养基质中继续进行植株培养。5、优选地，切除1/3长度的根系。6、进一步地，所述浸泡的时间为30min。7、进一步地，移栽后的植株培养包括依次进行的暗黑培养和常规培养，所述暗黑培养的时间为2天，温度为22℃；所述常规培养的光照条件为16小时光照/8小时黑暗，相对湿度为30-40％。8、进一步地，所述vigs浸染液的od值为0.8。9、进一步地，所述作物种子在无土基质中进行培养，所述无土基质包括品氏基质和珍珠岩。10、进一步地，所述品氏基质和所述珍珠岩的体积比为6:4。11、进一步地，所述品氏基质的ph值为5.5-6.5，基质纤维长度为0-6毫米。12、本发明公开了以下技术效果：13、本发明提供了一种伤根-浸泡trv-vigs接种方法，该方法能够在茄科作物中使用，可以实现简单、快速、批量接种，并高效沉默目的基因。相对于传统根部吸收法，本发明的伤根-浸泡trv-vigs接种方法具有以下优势：14、(1)伤根-浸泡trv-vigs接种方法启动白化沉默表型的时间显著缩短；15、(2)伤根-浸泡trv-vigs接种方法能够显著降低目的基因的表达，表达量普遍降低80％以上；16、(3)伤根-浸泡trv-vigs接种方法能够高效利用侵染液，不用每棵幼苗单独配备一个离心管容器，而且，侵染液可以反复多次使用且效率不变；17、(4)使用伤根-浸泡trv-vigs接种方法，伤根后只需浸泡30分钟，即可重新移栽到育苗盘，不需要一直将根系泡在侵染液中，操作简单。技术特征：1.一种茄科作物伤根-浸泡trv-vigs接种方法，其特征在于，包括以下步骤：2.根据权利要求1所述的茄科作物伤根-浸泡trv-vigs接种方法，其特征在于，切除1/3长度的根系。3.根据权利要求1所述的茄科作物伤根-浸泡trv-vigs接种方法，其特征在于，所述浸泡的时间为30min。4.根据权利要求1所述的茄科作物伤根-浸泡trv-vigs接种方法，其特征在于，移栽后的植株培养包括依次进行的暗黑培养和常规培养，所述暗黑培养的时间为2天，温度为22℃；所述常规培养的光照条件为16小时光照/8小时黑暗，相对湿度为30-40％。5.根据权利要求1所述的茄科作物伤根-浸泡trv-vigs接种方法，其特征在于，所述vigs浸染液的od值为0.8。6.根据权利要求1所述的茄科作物伤根-浸泡trv-vigs接种方法，其特征在于，所述作物种子在无土基质中进行培养，所述无土基质包括品氏基质和珍珠岩。7.根据权利要求6所述的茄科作物伤根-浸泡trv-vigs接种方法，其特征在于，所述品氏基质和所述珍珠岩的体积比为6:4。8.根据权利要求6所述的茄科作物伤根-浸泡trv-vigs接种方法，其特征在于，所述品氏基质的ph值为5.5-6.5，基质纤维长度为0-6毫米。技术总结本发明公开了一种茄科作物伤根‑浸泡TRV‑VIGS接种方法，涉及生物技术领域。该接种方法包括以下步骤：将作物种子培养至2‑3片真叶时，将幼苗根部拨出，切除1/4～1/3长度的根系，将其余根系置于VIGS浸染液中浸泡后，移栽至培养基质中继续进行植株培养。该方法能够在茄科作物中使用，可以实现简单、快速、批量接种，并高效沉默目的基因。相对于传统根部吸收法，本发明的伤根‑浸泡TRV‑VIGS接种方法具有时间短，沉默效率高，对设备要求低，并且操作简单的优势。技术研发人员：赵凯,李信云,王岩岩,莫云容,吕俊恒,邓明华,许俊强,黄尧瑶,杨正安,范伟受保护的技术使用者：云南农业大学技术研发日：技术公布日：2024/4/7