一种基于内生菌调控的柠檬砂皮病防控技术方法

本发明涉及一种基于内生菌调控的柠檬砂皮病防控技术方法，属于农学/有害生物生态调控。背景技术：1、柠檬砂皮病，或称柠檬树脂病、沙皮病、黑点病，是间座壳属(diaporthe)真菌在柠檬类上引起的一系列病害症状的统称。在果园中比较常见的是在柠檬叶片、嫩梢和果实表面，为害后产生的散生或密集成片的褐色、黑褐色硬胶质小粒点；严重时，果面粗糙，隆起，很像粘附着许多细沙，称为沙皮病。树脂病还能够造成柠檬枝干的死亡，引起枝干皮部坏死，皮层组织松软，有小的裂纹，水渍状，并渗出褐色胶液，称为流胶型；引起枝干病部皮层红褐色干枯，略下陷，微有裂缝，不剥落，在病健部交界处有明显的隆起线，称为干枯型。在果实贮藏期，病菌从果实蒂部侵入，引起果实表面出现水渍状褐色病斑，内部白色菌丝迅速生长并形成穿心烂，称为褐色蒂腐病。虽然只有在病害发生较为严重的情况下，柠檬砂皮病才能对柠檬植株造成毁灭性的伤害，但是因为其轻微发生的情况下，能够在柠檬果实表面形成褐色或黑褐色硬质小粒点，严重影响了果实的外观，降低了消费者的购买欲，从而使其商品价值大为减损。目前全球范围内对柠檬砂皮病的控制措施以农业防治、物理防治、结合化学防治的方法，大多停留在最大限度降低其病原基数，控制砂皮病侵染率，但从根本上铲除砂皮病病菌目前尚无头绪。2、植物内生微生物是一类应用前景广阔的资源微生物，在与宿主植物共生过程中，植物内生微生物组对促进植物的生长、提高植物的抗逆能力等表现出巨大潜力。植物内生菌能够在所有可接触到的植物组织中定植，可通过气孔和水孔直接浸染植物组织内部，也可从受伤组织(包括刺吸式昆虫，大风引起枝叶、果实摩擦，农艺措施等引发的受伤组织)进入植物维管组织并形成生物被膜豁附在植物的木质部和韧皮部等不同部位。内生微生物对柠檬砂皮病间座壳属(diaporthe)真菌病原菌的生物防治涉及多种机制，如竞争排斥、抗菌和诱导寄主免疫反应等。具有群体淬灭活性的叶际微生物可通过降解广泛的群体感应信号分子抑制间座壳属真菌病原菌毒力基因表达，从而抑制病害发展。内生微生物产生的挥发性有机化合物(voc)能够帮助柠檬提高对病原菌的防御能力，也可启动植物抗病反应的信号。还可通过改变抗坏血酸过氧化物酶(apx)、过氧化氢酶(cat)、过氧化物酶(pod)、多酚氧化酶(ppo)和超氧化物歧化酶(sod)等抗氧化酶的水平维持柠檬的系统抗性。技术实现思路1、本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。2、为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种基于内生菌调控的柠檬砂皮病防控技术方法，包括以下步骤：3、步骤一、配制柠檬砂皮病防控内生菌复合菌液，复合菌液包括以下组分：萨拉曼卡假单胞菌(pseudomonas helmanticensis)、巴西固氮螺菌(azospirillam brasilense)、短小芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)、乳酸钾、硝酸钙和无菌水；4、步骤二、在柠檬开花期，将柠檬砂皮病防控内生菌复合菌液：水为1:1000的比例稀释，每亩400kg的复合菌稀释液用量均匀的喷施于柠檬树叶、枝、树干表面；5、步骤三、第一次喷施后，每间隔2个月后，重复进行相同处理，直至柠檬收获。6、优选的是，所述步骤一中，复合菌液中各组分的浓度为：萨拉曼卡假单胞菌(pseudomonas helmanticensis)108cfu/ml、巴西固氮螺菌(azospirillam brasilense)108cfu/ml、短小芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)108cfu/ml、乳酸钾500～1500mg/l、硝酸钙400～1000mg/l；无菌水1000ml。7、本发明至少包括以下有益效果：8、本发明中，喷施于柠檬树叶、枝、树干表面的复合菌液中的内生菌能够在所有可接触到的柠檬组织中定植，可通过气孔和水孔直接浸染柠檬组织内部，也可从受伤组织(包括刺吸式昆虫，大风引起枝叶、果实摩擦，农艺措施等引发的受伤组织)进入柠檬维管组织并形成生物被膜豁附在柠檬的木质部和韧皮部等不同部位。利用内生微生物诱导柠檬局部和系统反应的机制：包括对特定防御途径的重编程，如voc的产生、群体淬灭、柠檬抗氧化状态的激活等，促使柠檬及树体健壮、增强柠檬及树体的抗病性，实现环境友好、操作简单、低成本、效果显著的砂皮病防控；可降低柠檬砂皮病感病和发病90％以上，且增产10％以上。9、本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。技术特征：1.一种基于内生菌调控的柠檬砂皮病防控技术方法，其特征在于，包括以下步骤：2.如权利要求1所述的基于内生菌调控的柠檬砂皮病防控技术方法，其特征在于，所述步骤一中，复合菌液中各组分的浓度为：萨拉曼卡假单胞菌(pseudomonashelmanticensis)108cfu/ml、巴西固氮螺菌(azospirillam brasilense)108cfu/ml、短小芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)108cfu/ml、乳酸钾500～1500mg/l、硝酸钙400～1000mg/l；无菌水1000ml。技术总结本发明公开了一种基于内生菌调控的柠檬砂皮病防控技术方法，包括：配制柠檬砂皮病防控内生菌复合菌液，复合菌液包括以下组分：萨拉曼卡假单胞菌(Pseudomonas helmanticensis)、巴西固氮螺菌(Azospirillam brasilense)、短小芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)、乳酸钾、硝酸钙和无菌水；在柠檬开花期，将柠檬砂皮病防控内生菌复合菌液：水为1:1000的比例稀释，每亩400kg的复合菌稀释液用量均匀的喷施于柠檬树叶、枝、树干表面；第一次喷施后，每间隔2个月后，重复进行相同处理，直至柠檬收获。采用本发明的复合菌液可促使柠檬及树体健壮、增强柠檬及树体的抗病性，实现环境友好、操作简单、低成本、效果显著的砂皮病防控；可降低柠檬砂皮病感病和发病90％以上，且增产10％以上。技术研发人员：张宇,肖平安,罗学刚,田景华,张一铎,吴强,程承,马静华受保护的技术使用者：西南科技大学技术研发日：技术公布日：2024/3/31