一种H2O2处理抑制插条褐化并促进不定根发生的方
发布日期:2024-06-10 浏览次数: 专利申请、商标注册、软件著作权、资质办理快速响应热线:4006-054-001 微信:15998557370
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摘要: | 本发明涉及桃组织培养,尤其涉及一种ho处理抑制插条褐化并促进不定根发生的方法。、桃原产我国,是当下产业中最重要的果树作物之一。在实际生产中,桃树的扦插繁殖面临一些困难和挑战。其中,扦插生根率低会导致繁殖效率低下,生产成本和时间成本增加。同时,桃树不定根发育是一个受激素调控且多基因互作的复杂... | ||
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本发明涉及桃组织培养,尤其涉及一种h2o2处理抑制插条褐化并促进不定根发生的方法。背景技术:1、桃原产我国,是当下产业中最重要的果树作物之一。在实际生产中,桃树的扦插繁殖面临一些困难和挑战。其中,扦插生根率低会导致繁殖效率低下,生产成本和时间成本增加。同时,桃树不定根发育是一个受激素调控且多基因互作的复杂过程,容易被插条自身条件、环境条件以及植物生长调节剂等影响,因此需要综合考虑。尽管在果树扦插领域已经有一系列提高扦插成活率的措施,但在桃树实际生产中,这些技术手段和生产管理方法的运用实践较少,且理论背景和作用机制并不清晰。2、不定根发生是扦插成活的前提和关键步骤之一。在扦插过程中,一定的处理和环境条件会刺激插条的细胞分裂和分化,从而促进了不定根的发生。不定根的形成为插条提供了吸收水分和养分的能力,使其能够继续生长并最终成活为独立的植株。同时,桃树组织极易褐化,扦插时由于组织损伤、细菌或真菌感染、水分失衡等因素引起的插条褐化现象,较其他果树更容易发生,这也会阻碍不定根的发生和扦插成活。3、h2o2(过氧化氢)在植物生长和发育过程中扮演着重要的角色。h2o2在植物根系生长中作为信号分子,参与调节细胞分裂、伸长和形态建成。在植物的根尖细胞中,h2o2被发现参与调控细胞壁松弛和伸长过程,从而影响了根系的生长。其次,当植物受到逆境胁迫时,比如盐胁迫、干旱、病原菌感染等,h2o2还能够作为一种活性氧物质,参与清除自由基和调节抗氧化反应,起到保护细胞膜、蛋白质和dna免受损伤的作用。这些保护作用有助于植物根系在逆境条件下更好地生长和存活。4、h2o2既可以作为信号分子参与植物根系的正常生长发育过程,又在面对逆境时发挥了保护作用。因此,我们在实验室条件下探索了一种h2o2处理促进不定根的发生、同时抑制外植体褐化的方法,为实际生产中扦插生根和插条抗褐化打下研究基础。技术实现思路1、本发明的目的就在于克服现有技术存在的缺点和不足,提供一种h2o2处理抑制插条褐化并促进不定根发生的方法。2、本发明的目的是这样实现的:3、使用廉价且易获取的h2o2替代不定根再生培养基中的一些昂贵植物激素和维生素添加剂,对桃组培苗的不定根生长技术进行了优化,包括以下步骤:4、①取桃的实生种子进行播种培养,获得无菌组培苗;5、②将步骤①得到的无菌苗切分处理作为插条;6、③将步骤②处理所得插条转接到不定根再生常规培养基或不定根再生改良培养基中;7、④弱光照下无菌培养,进行不定根再生诱导;8、所述步骤①中的桃选用油桃;9、所述步骤①中的获得无菌组培苗是:10、a、取桃核消毒后干燥冷藏;11、b、敲核取出种子,消毒后,接种到播种培养基中培养25~40天获得无菌组培苗。12、所述步骤③中的不定根培养基是:13、不定根再生常规培养基,以1/2ms培养基为基础培养基,1/2ms培养基中包括以下浓度的组分:25g/l蔗糖、8g/l琼脂及2.0mg/l iba;14、不定根再生优化培养基,以1/2ms培养基为基础培养基,1/2ms培养基中包括以下浓度的组分:以下浓度的组分:25g/l蔗糖、8g/l琼脂、2.0mg/liba及0.3~1.5mmol/l h2o2;15、所述1mg/ml h2o2,于4℃保存;16、所述所有培养基都需在高压灭菌前将ph调整至5.65~5.95;17、以1/2ms培养基为基础培养基,1/2ms培养基中包括以下浓度的组分:25g/l蔗糖、8g/l琼脂;18、播种启动培养基以1/2ms为基础培养基,还包括以下浓度的组分:0.2~1.0mg/l6-ba、0.2~1.0mg/l iba、28~32g/l蔗糖、8~10g/l琼脂;19、所述播种培养获得无菌组培苗的条件为:培养温度为25℃,照度1500lux、每日大约16h光照、8h黑暗;20、所述不定根再生条件具体为:培养温度为25℃,照度1500lux、每日大约16h光照、8h黑暗,培养3-4周;21、所述不定根再生优化培养基中所添加h2o2浓度在0.3~1.5mmol/l。22、工作机理:23、在本发明中,所述不定根再生优化培养基以1/2ms培养基为基础,ms培养基含有植物生长和发育所需的营养物质,支持植物的生长、再生和增殖;此外,还可根据具体实验需要进行改良和调整,以适用于不同的植物种类的培养要求;1/2ms培养基相对于ms培养基来说,含有更低的盐类和植物生长调节剂浓度,广泛用于再生培养领域;iba(吲哚丁酸)是一种常用的生根促进剂,可以促进茎段、叶片或其他植物组织形成新根,使用2.0mg/l的iba可以增加桃组培生根的成功率;组织培养中合适范围内的ph值有利于培养基中各种营养物质的吸收和利用,也有利于细胞分裂和再生,对于桃的组织培养,一般来说,最适合的ph值范围也是在5.8到6.2左右。24、与现有桃不定根再生技术相比,本发明具有下列优点和积极效果:25、①针对实验室中桃不定根生根难、外植体容易褐化,以及实际生产中桃扦插生根困难、插条易褐化死亡的难题,使用廉价且易获取的h2o2替代不定根再生培养基中的一些昂贵植物激素和维生素添加剂,对桃组培苗的不定根生长技术进行了优化。26、②为减缓外植体褐化提供了新的解决途径。27、③可在桃优系工厂化试管育苗的生根阶段得到应用,并具有良好的实际开发和应用前景。技术特征:1.一种h2o2处理抑制插条褐化并促进不定根发生的方法,其特征在于:技术总结本发明公开了一种H
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