一种封闭式胚胎冷冻载杆装置和使用方法与流程

本发明涉及胚胎冷冻，具体是一种封闭式胚胎冷冻载杆装置和使用方法。背景技术：1、我国每年约实施100万例体外受精-胚胎移植技术(试管婴儿)助孕病例，其中约80万例需要对胚胎进行冷冻保存。目前胚胎冷冻主要采用开放式玻璃化冷冻保存，所谓开放式的冷冻保存技术就是胚胎在玻璃化冷冻液中平衡好后，将含有胚胎的玻璃化冷冻液(约1-2ul)点样在一个载样片载体上，再将载样片直接投入液氮中冷冻保存。这种方法存在的一个问题是胚胎装载在这个载样片上，解冻时常常发生胚胎粘在载样片上，常需要外力拨动胚胎或弹动载样片发生振动的方式使胚胎从载样片脱落，这种拨动或振动会对胚胎造成一定损伤，从而影响胚胎发育潜能，降低妊娠成功率。开放式玻璃化胚胎冷冻存在的另一个弊端就是装载有患者胚胎的载杆直接接触液氮中冷冻形成玻璃化并长期存储在液氮罐内，不同患者的胚胎开放性存储在一个液氮罐中存在潜在的生物污染风险，特别是携带传染性病原体的患者之间存在相互交叉传染的风险。2、人类胚胎冷冻保存另一种方法是采用封闭胚胎冷冻方法，所谓封闭式冷冻胚胎就是将胚胎装载在冷冻载杆的载样片上，再用冷冻套管将冷冻载杆封闭，从而避免胚胎直接暴露在液氮中。封闭式胚胎冷冻方法可以规避这种潜在的相互交叉感染的风险。3、而现有封闭式冷冻技术的缺陷在于：4、胚胎易粘在载样片上，因此需要靠外力剥离胚胎，可能会造成胚胎的损伤，降低冷冻胚胎复苏的临床妊娠率。技术实现思路1、针对于此，本发明提供一种封闭式胚胎冷冻载杆装置和使用方法，以解决背景技术中提到的技术问题。2、为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：3、一种封闭式胚胎冷冻载杆装置，包括冷冻套管及冷冻载杆。4、所述冷冻套管开口端为喇叭口；5、所述冷冻载杆插入所述冷冻套管内部，其包括依次连接的头部、颈部、主体部、载样片；6、所述头部呈圆台状，其弧形侧面随着冷冻载杆本体插入冷冻套管内而与冷冻套管的喇叭口收缩端接触；7、所述载样片的两侧逐步向内部中心凹陷并形成贯通的空洞，且载样片上两侧的内凹区域为载样区。8、进一步的，所述冷冻套管采用透明材质制成。9、进一步的，所述主体部呈椭圆形柱状。10、一种封闭式胚胎冷冻载杆装置的使用方法，其特征在于:包括以下步骤：11、s1、装载胚胎：采用滴管，将含有胚胎的玻璃化冷冻液点样在载样片朝上的载样区内；12、s2、封闭冷冻载杆：将冷冻载杆水平插入冷冻套管内部内部，直至其头部20的弧形侧面与冷冻套管的喇叭口收缩端接触，然后随即在冷冻套管的喇叭口处滴入速冻液；13、s3、液氮冷冻：将冷冻套管连同插入其内部的冷冻载杆置于液氮中冷冻；14、s4、移出液氮：将冷冻套管连同插入其内部的冷冻载杆从液氮液中缓慢取出，致使冷冻载杆的头部、颈部露出液面以上；15、s5、切割冷冻套管：手握住冷冻套管的喇叭口位置，再采用切管钳在冷冻载杆的颈部这个位置剪切冷冻套管，冷冻套管被一分为二之后，握住冷冻套管的喇叭口位置，将冷冻载杆从被切断的冷冻套管内抽出；16、s6、胚胎解冻：将冷冻载杆从被切断的冷冻套管内抽出之后迅速置于预先准备好的解冻液中；17、s7、观察胚胎：冷冻载杆置于解冻液后，在体视镜下观察冷冻载杆的载样片上胚胎情况，当胚胎自载样片上载样区内的空洞处脱离后，即可将冷冻载杆移出解冻液，随后按常规胚胎解冻程序进行操作。18、进一步的，通过液体表面张力及毛细现象原理，液体分散，玻璃化冷冻液在载样区的空洞处形成液体薄膜，玻璃化冷冻液中含有的胚胎随液流分散悬挂在空洞处的液体薄膜中。19、进一步的，冷冻载杆的头部、颈部露出液面以上后，冷冻载杆的主体部、载样片仍保持浸没在液氮中。20、进一步的，冷冻套管的喇叭口处滴入的速冻液填充在冷冻套管喇叭口与头部之间的间隙，以及将整个喇叭口封闭住，然后在液氮中立即形成玻璃态。21、进一步的，所述解冻液为37℃。22、本发明的有益效果是：23、将含有胚胎的玻璃化冷冻液点样在载样片其中朝上的一侧载样区内，通过液体表面张力及毛细现象原理，液体分散，在空洞处形成液体薄膜，而胚胎随液流分散悬挂在载样区的空洞处的液体薄膜中，然后将冷冻载杆水平插入冷冻套管内，再进行液氮冷冻，在需要进行解冻时，将冷冻载杆从冷冻套管内移出，然后将冷冻载杆上的载样片部位置于解冻液中，载样片上两侧的载样区因向内部中心凹陷，因此所形成的载样区的壁厚较薄，所以载样区的热量传递快，从而载样区的液体薄膜可以迅速融化，且因胚胎随液流分散悬挂在载样区的空洞处的液体薄膜中，所以在融化过后，胚胎会自动从空洞处脱落到解冻液中，而不会黏贴在载样片的载样区内壁上，从而避免外力剥离胚胎的操作，减小了对胚胎的损伤。技术特征：1.一种封闭式胚胎冷冻载杆装置，包括冷冻套管(1)及冷冻载杆(2)，其特征在于：2.根据权利要求1所述的封闭式胚胎冷冻载杆装置，其特征在于：所述冷冻套管(1)采用透明材质制成。3.根据权利要求1所述的封闭式胚胎冷冻载杆装置，其特征在于:所述主体部(22)呈椭圆形柱状。4.一种封闭式胚胎冷冻载杆装置的使用方法，其特征在于:包括以下步骤：5.根据权利要求4所述的一种封闭式胚胎冷冻载杆装置的使用方法，其特征在于:通过液体表面张力及毛细现象原理，液体分散，玻璃化冷冻液在载样区(25)的空洞(24)处形成液体薄膜，玻璃化冷冻液中含有的胚胎随液流分散悬挂在空洞(24)处的液体薄膜中。6.根据权利要求4所述的一种封闭式胚胎冷冻载杆装置的使用方法，其特征在于:冷冻载杆(2)的头部(20)、颈部(21)露出液面以上后，冷冻载杆(2)的主体部(22)、载样片(23)仍保持浸没在液氮中。7.根据权利要求4所述的一种封闭式胚胎冷冻载杆装置的使用方法，其特征在于:冷冻套管(1)的喇叭口处滴入的速冻液填充在冷冻套管(1)喇叭口与头部(20)之间的间隙，以及将整个喇叭口封闭住，然后在液氮中立即形成玻璃态。8.根据权利要求4所述的一种封闭式胚胎冷冻载杆装置的使用方法，其特征在于:所述解冻液为37℃。技术总结本发明公开一种封闭式胚胎冷冻载杆装置和使用方法，涉及胚胎冷冻技术领域。封闭式胚胎冷冻载杆装置包括：冷冻套管及冷冻载杆。冷冻载杆插入冷冻套管内部，其包括依次连接的头部、颈部、主体部、载样片；载样片的两侧逐步向内部中心凹陷并形成贯通的空洞，且载样片上两侧的内凹区域为载样区。封闭式胚胎冷冻载杆装置的使用方法包括以下步骤：装载胚胎；封闭冷冻载杆；液氮冷冻；移出液氮；切割冷冻套管；胚胎解冻；观察胚胎。本发明可避免使用外力剥离胚胎的操作，减小了对胚胎的损伤。技术研发人员：李朝阳,朱丽珍,邹兵,马云武受保护的技术使用者：鼎体科技（广州）有限责任公司技术研发日：技术公布日：2024/3/27