一种构造新生儿出血性脑积水模型的方法

本发明涉及疾病动物模型，尤其是涉及一种构造新生儿出血性脑积水模型的方法。背景技术：1、脑积水是最常见的神经发育缺陷之一，每1000个新生儿中有1-3个发生。其特征是脑室内充满脑脊液，脑室增大，导致严重的智力迟钝和运动功能障碍。脑积水的已知病因包括感染、脑外伤和基因突变。根据脑脊液流动是否存在结构性阻塞，脑积水可分为通流型和非通流型。2、脑室系统结构完整性的破坏可引起非交通性脑积水；脑脊液从脉络膜丛分泌过多，蛛网膜下绒毛对脑脊液的重吸收效率低下，脑脊液的流动缺陷交通性脑积水。室管膜细胞来源于神经上皮，排列在脑室表面，与纤毛缺陷引起的脑积水密切相关。更严重的是，室管膜细胞不能正常生成、成熟和完整，可通过导水管狭窄导致早发性胎儿脑积水，而导水管狭窄阻塞了第三和第四脑室之间狭窄通道的脑脊液。目前，新生儿脑积水发病机制尚不清楚，动物模型可以为疾病的发病机制提供新的见解，为开发新的治疗手段打下基础。3、脑积水的一个明显原因是胎儿的脑室或脑组织出血，这表明血液中的因子或成分可能引发这种严重神经系统疾病的发展。溶血磷脂酸(lpa)，这是一种血源性信号脂质，血源性lpa水平在出血或创伤期间升高，在新生儿出血后脑积水小鼠模型中，脑室内递送lpa会破坏神经祖细胞。同时将小鼠的大脑暴露于lpa中会造成小鼠胎儿脑积水。但是目前尚无在斑马鱼上构造胎儿脑积水模型的方法。4、斑马鱼作为模式生物，由于体外受精、胚胎透明、养殖成本低、再生能力强等特性，在构造疾病模型上具有广泛的应用。本发明提出了一个利用lpa受体激活剂构造新生儿出血性脑积水动物模型的新方法。技术实现思路1、本发明的目的是提供一种构造新生儿出血性脑积水模型的方法，选用斑马鱼为实验动物，利用lpa受体激活剂构建新生儿出血性脑积水模型，稳定性、重复性好，客观简单，可操作性强，减少了其他可能的干扰因素。2、为实现上述目的，本发明提供了一种构造新生儿出血性脑积水模型的方法，包括如下步骤：3、(1)将lpa受体激活剂与naoh按照摩尔质量1：1进行反应，配置lpa受体激活剂盐溶液；4、(2)在适宜的饲养条件下，对实验动物进行lpa受体激活剂盐溶液给药；5、(3)实验动物使用lpa受体激活剂盐溶液处理后，通过病理形态学进行实验验证；6、(4)病理形态学与对照组相比，斑马鱼的脑室显著扩大，满足该条件，则新生儿出血后脑积水动物模型构建成功。7、优选的，所述步骤(2)中，实验动物为斑马鱼。8、优选的，所述步骤(2)中，lpa受体激活剂盐溶液的给药浓度为5ug/ml。9、优选的，所述步骤(2)中，所述lpa受体激活剂盐溶液采用浸泡给药的方式。10、优选的，所述步骤(2)中，饲养条件为：温度28.5℃，14小时光照/10小时黑暗。11、本发明所述的一种构造新生儿出血性脑积水模型的方法的优点和积极效果是：12、1、本发明采取无创方法构建新生儿出血性脑积水动物模型，将lpa受体激活剂应用到构建新生儿出血性脑积水动物模型，在减少动物模型进行伤害的情况下，通过给动物模型进行lpa受体激活剂浸泡给药，成功建立了新生儿出血性脑积水动物模型，稳定性、重复性好，客观简单，可操作性强，减少了其他可能的干扰因素，为研究新生儿出血后脑积水机制和治疗手段的开发提供了必要的实验基础。13、2、本发明选用斑马鱼构建新生儿出血性脑积水模型，斑马鱼作为模式动物，具有养殖成本低，胚胎透明，繁殖能力强等优势，随着斑马鱼全基因组测序的完成，斑马鱼作为模式动物被广泛的用于疾病模型的构建，疾病机制的探索和治疗药物的筛选，相对于小鼠，斑马鱼在繁殖和造模的简易程度上拥有绝对的优势，并且斑马鱼发育迅速，可以模拟胚胎和成年阶段人类疾病和药物治疗。14、下面通过附图和实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。技术特征：1.一种构造新生儿出血性脑积水模型的方法，其特征在于：包括如下步骤：2.根据权利要求1所述的一种构造新生儿出血性脑积水模型的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，实验动物为斑马鱼。3.根据权利要求1所述的一种构造新生儿出血性脑积水模型的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，lpa受体激活剂盐溶液的给药浓度为5ug/ml。4.根据权利要求1所述的一种构造新生儿出血性脑积水模型的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，所述lpa受体激活剂盐溶液采用浸泡给药的方式。5.根据权利要求1所述的一种构造新生儿出血性脑积水模型的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，饲养条件为：温度28.5℃，14小时光照/10小时黑暗。技术总结本发明公开了一种构造新生儿出血性脑积水模型的方法，包括如下步骤：(1)将LPA受体激活剂与NaOH按照摩尔质量1：1进行反应，配置LPA受体激活剂盐溶液；(2)在适宜的饲养条件下，对实验动物进行LPA受体激活剂盐溶液给药；(3)实验动物使用LPA受体激活剂盐溶液处理后，通过病理形态学进行实验验证；(4)病理形态学与对照组相比，斑马鱼的脑室显著扩大，满足该条件，则新生儿出血性脑积水动物模型构建成功。本发明采用上述一种构造新生儿出血性脑积水模型的方法，选用斑马鱼为实验动物，利用LPA受体激活剂构建新生儿出血性脑积水模型，稳定性、重复性好，客观简单，可操作性强，减少了其他可能的干扰因素。技术研发人员：刘秀云,彭瑞,庞美俊,明东,智慧,张阔,黄剑辉,何润南,王瑞琳受保护的技术使用者：天津大学技术研发日：技术公布日：2024/3/27