一种动物精子液态保存稀释液及制备方法

本发明属于精子保藏，尤其涉及一种动物精子液态保存稀释液及制备方法。背景技术：1、目前，鹿、狐貉、狗、羊等动物养殖场不具备动物精液冷冻条件，而且除了牛细管冻精已是商业化、专业化外，其他动物现有技术都是现采精现输精，或保存2-3天进行鲜精输精，养殖场之间为避免近亲配种想倒换一下公畜血统，如果距离远，为确保发情季节受胎率，需要把公畜拉到另一养殖场进行交配，这样费钱费力，对公畜造成一定应激，影响养殖场经济效益。养殖场急需一种动物精子液态保存时间长、存活力高的稀释液保护液。2、名称为一种冷藏保存动物精子的方法的发明专利(申请号为cn201910990863，公开号为cn111066775a)公开了一种冷藏保存动物精子的方法。该方法中采用的动物精子稀释液，含有丙三醇、脱脂小麦蛋白粉、脱脂豌豆蛋白粉、脱脂花生蛋白粉、脱脂大豆蛋白粉等，在该方法中通过超声波裂解大分子蛋白、细菌和病毒，利用该方法冷藏保存的狗的精子，狗的精子活力为0.6。但在具体应用中发现，该方法使用超声波灭菌、灭微生物，破碎后的菌体或微生物仍保留在稀释液中，在破碎的过程中需要一直保持低温环境。并且该方法对破碎时间也有严格的要求，但实际操作时由于人为操作难免产生误差，从而影响最终的效果。如果破碎时间不足会导致灭菌不充分，超声灭菌时间过长则容易导致温度升高、破坏稀释液中的营养因子活性。技术实现思路1、鉴于现有技术存在的问题，本发明提供一种动物精子液态保存稀释液及制备方法，具有应用范围广、受胎率高、动物精子液态保存时间长、保存活力好等优点。2、本发明解决上述技术问题的技术方案如下：3、本发明提供一种动物精子液态保存稀释液，制备动物精子液态保存稀释液的组分包括葡萄糖、果糖、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸、食用多种植物调和油；食用多种植物调和油与葡萄糖、果糖、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸的体积质量比为50ml：(10-20)g：(10-20)g：(20-30)g：(10-20)g。4、进一步，制备动物精子液态保存稀释液的组分还包括水，葡萄糖与水的质量体积比为(10-20)g：(50-100)ml。5、进一步，制备动物精子液态保存稀释液的组分还包括稀释用水。6、例如，稀释用水的体积可以为混合物的体积的9倍，混合物为葡萄糖、果糖、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸、食用多种植物调和油、水混合后弃上层油脂后的产物。7、采取上述技术方案的有益效果包括：本发明采用食用多种植物调和油替代植物蛋白，制备的动物精子液态保存稀释液可以通过过滤膜，配制和使用方法简单。食用多种植物调和油含有的不饱和脂肪酸可以作为低温保护剂，其含有的多种营养成分可以有效增加抗氧化能力，减少精子氧化应激。本发明提供的稀释液的配方中不合有丙三醇，可以避免丙三醇对精子有弱毒性。本发明具有制备方法简单、适用范围广、受胎率高、保存时间长、保存活力好等优点。8、本发明提供一种动物精子液态保存稀释液的制备方法，包括以下步骤：将各组分混合。9、采取上述技术方案的有益效果包括：采用上述方法配制的动物精子液态保存稀释液具有适用范围广、受胎率高、保存时间长、保存活力好等优点。10、进一步，可以包括以下步骤：11、(1)将葡萄糖、果糖、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸和水混合，得到混合物1；12、(2)将食用多种植物调和油与步骤(1)的混合物混合，得到混合物2。13、采取上述技术方案的有益效果包括：更有利于混合充分。14、进一步，步骤(1)中，葡萄糖、果糖、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸和水的质量体积比为(10-20)g：(10-20)g：(20-30)g：(10-20)g：(50-100)ml。15、步骤(2)中，食用多种植物调和油与水的体积比50：(50-100)。16、采取上述技术方案的有益效果包括：上述制备方法操作简单、材料经济，采用上述方法制备的动物精子液态保存稀释液具有适用范围广、受胎率高、保质期时间长、有利于提高精子活力等优点。17、进一步，在步骤(2)混合后，还包括弃上层油脂的步骤。18、采取上述技术方案的有益效果包括：本发明制备的动物精子液态保存稀释液易通过过滤菌膜、显微镜下清晰度高、动物配种更安全。相比九三非转基因大豆油、花生油、冷榨橄榄油，本发明使用的多种植物调和油效果最佳。19、进一步，还包括用稀释用水稀释的步骤。20、采取上述技术方案的有益效果包括：使动物精子保存液稀释到合适的浓度，以利于使用。21、本发明还提供上述动物精子液态保存稀释液在保存动物精子中的应用。例如，可以用于保存牛、鹿、狐貉、狗、羊等动物的精子，适用范围广、受胎率高、保存时间长、保存活力好等优点。22、本发明提供一种保存精子的方法，包括以下步骤：23、(1)将上述动物精子液态保存稀释液过滤，将采集到的精子用过滤后的液体稀释，得到含有精子的溶液，将其装入容器封口；24、(2)降温后保存。25、采取上述技术方案的有益效果包括：利用上述保存精子可以显著提高精子的保存时间和活力。26、进一步，采用0.25um滤膜过滤。27、进一步，精子在采集到以后至保存之前，温度保持在20-35℃。28、进一步，步骤(1)中，将采集到的精子按精子数300万/ml-1000万/ml用过滤后的液体稀释。29、进一步，步骤(2)中，以0.1-0.5℃/min的速度降温。30、进一步，步骤(2)中，降到0-17℃保存。31、采取上述技术方案的有益效果包括：采取0.25um滤膜过滤，解决了过滤效果差的问题。将动物精子液态保存稀释液经过0.25um针头过滤器过滤，可以除去微生物等，过滤后的动物精子液态保存稀释液在保存精子过程中不易长菌。技术特征：1.一种动物精子液态保存稀释液，其特征在于，制备动物精子液态保存稀释液的组分包括葡萄糖、果糖、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸、食用多种植物调和油；食用多种植物调和油与葡萄糖、果糖、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸的体积质量比为50ml∶(10-20)g∶(10-20)g∶(20-30)g∶(10-20)g。2.根据权利要求1所述一种动物精子液态保存稀释液，其特征在于，制备动物精子液态保存稀释液的组分还包括水，葡萄糖与水的质量体积比为(10-20)g∶(50-100)ml。3.根据权利要求2所述一种动物精子液态保存稀释液，其特征在于，制备动物精子液态保存稀释液的组分还包括稀释用水。4.一种动物精子液态保存稀释液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将各组分混合。5.根据权利要求4所述一种动物精子液态保存稀释液的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：6.根据权利要求5所述一种动物精子液态保存稀释液的制备方法，其特征在于，在步骤(2)混合后，还包括弃上层油脂的步骤。7.根据权利要求4至6任一项所述一种动物精子液态保存稀释液的制备方法，其特征在于，还包括用稀释用水稀释的步骤。8.一种保存精子的方法，其特征在于，包括以下步骤：9.根据权利要求8所述一种保存精子的方法，其特征在于，步骤(1)中，采用0.25um滤膜过滤。10.根据权利要求8或9所述一种保存精子的方法，其特征在于，精子在采集到以后至保存之前，温度保持在20-35℃；步骤(1)中，将采集到的精子按精子数300万/ml-1000万/ml用过滤后的液体稀释；步骤(2)中，以0.1-0.5℃/min的速度降温，降到0-17℃保存。技术总结本发明涉及一种动物精子液态保存稀释液及制备方法。制备动物精子液态保存稀释液的组分包括葡萄糖、果糖、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸和食用多种植物调和油；食用多种植物调和油与葡萄糖、果糖、三羟甲基氨基甲烷、柠檬酸的体积质量比为50ml∶(10‑20)g∶(10‑20)g∶(20‑30)g∶(10‑20)g。动物精子液态保存稀释液制备方法包括以下步骤：将各组分混合。本发明具有应用范围广、受胎率高、动物精子液态保存时间长、保存活力好等优点。技术研发人员：许红喜,韩欢胜,张宏亮,陈国福,吴成狄,叶超群,王蒙,李培德,周玉龙,赵德睿,张金友,赵晓静,朱梅梅,韩志强,闫德光受保护的技术使用者：温州科技职业学院技术研发日：技术公布日：2024/3/27