细胞外囊泡冻干保护剂

本发明涉及一种可以保留细胞外囊泡的功能及特性的细胞外囊泡冻干保护组合物以及利用其的细胞外囊泡冻干方法。背景技术：1、针对各种疾病已有报道利用干细胞，尤其是间充质干细胞(mesenchymal stemcells；msc)的治疗方法以及积极的临床结果。然而，干细胞治疗剂存在产生血管闭塞、形成肿块、凝血障碍等细胞相关副作用的风险，至今仍需通过临床试验来验证功效。众所周知，干细胞的旁分泌(paracrine)效果诱导周围皮肤细胞再生以及增强血管再生能力，尤其，已知细胞外囊泡(extracellular vesicles；ev)为旁分泌效果的主要功效因子。2、细胞外囊泡根据大小分为外泌体(exosome)以及微囊泡(microvesicle)，外泌体的直径为30～150nm，微囊泡的大小为100～1000nm。众所周知，细胞外囊泡是释放到血液中的细胞膜的一部分，由于包含蛋白质以及核成分而介导细胞之间的通讯。使用细胞外囊泡代替干细胞不仅使由于使用干细胞而导致的副作用最小化以提高稳定性，还有利于生物分布(biodistribution)以及生产工序。3、然而，即使细胞外囊泡有用，到目前为止仍然缺乏对用于将难以得到的细胞外囊泡分离后稳定地保持以及储存的方法的技术以及对稳定剂型的研究。4、因此，需要一种用于稳定地保持及储存可用作针对各种疾病的治疗物质的细胞外囊泡的新的保存方法。技术实现思路1、技术问题2、对此，本发明人在对用于稳定地保持以及储存细胞外囊泡的技术进行研究的过程中，确认到可以有效改善在冻干过程中可能出现的问题，并保持细胞外囊泡固有的性质以及功能的新型冻干保护剂，从而完成了本发明。3、因此，本发明涉及一种包含海藻糖以及蔗糖的细胞外囊泡冻干保护组合物以及利用其的细胞外囊泡冻干方法。4、解决问题的方案5、为了实现上述目的，本发明提供一种细胞外囊泡冻干保护组合物，其包含海藻糖以及蔗糖。6、并且，本发明提供一种细胞外囊泡冻干保护剂，其包含海藻糖以及蔗糖。7、并且，本发明提供一种细胞外囊泡冻干组合物，其包含海藻糖和蔗糖的混合物作为冻干保护剂；以及细胞外囊泡。8、并且，本发明提供一种细胞外囊泡的冻干方法，包括：步骤1)，将海藻糖和蔗糖的混合物作为冻干保护剂和细胞外囊泡混合；以及步骤2)，冻干上述步骤1)中的混合物。9、发明的效果10、本发明将海藻糖以及蔗糖添加到细胞外囊泡冻干工序中，从而可以解决现有冻干保护剂中存在的晶体形成以及复溶能力减少的问题，并保持细胞外囊泡固有的标志物、功能因子的表达以及治疗效果，因此可以以各种方式应用于生产利用细胞外囊泡的各种治疗剂。技术特征：1.一种细胞外囊泡冻干保护组合物，其特征在于，包含海藻糖以及蔗糖。2.根据权利要求1所述的细胞外囊泡冻干保护组合物，其特征在于，上述海藻糖以及蔗糖的浓度分别为1％(w/v)至10％(w/v)。3.根据权利要求1所述的细胞外囊泡冻干保护组合物，其特征在于，以1：0.05至5的体积比混合上述海藻糖和蔗糖。4.根据权利要求1所述的细胞外囊泡冻干保护组合物，其特征在于，上述海藻糖以及蔗糖减少细胞外囊泡冻干以及复水过程中的晶体形成。5.根据权利要求1所述的细胞外囊泡冻干保护组合物，其特征在于，以1：0.5至5的体积比混合上述组合物和细胞外囊泡。6.根据权利要求1所述的细胞外囊泡冻干保护组合物，其特征在于，上述细胞外囊泡为外泌体或微囊泡。7.根据权利要求1所述的细胞外囊泡冻干保护组合物，其特征在于，上述细胞外囊泡为来源于免疫细胞、肿瘤细胞或干细胞的细胞外囊泡。8.一种细胞外囊泡冻干保护剂，其特征在于，包含海藻糖以及蔗糖。9.一种细胞外囊泡冻干组合物，其特征在于，包含海藻糖和蔗糖的混合物作为冻干保护剂；以及细胞外囊泡。10.根据权利要求9所述的细胞外囊泡冻干组合物，其特征在于，上述细胞外囊泡具有血管再生能力。11.一种细胞外囊泡的冻干方法，其特征在于，包括：12.根据权利要求11所述的细胞外囊泡的冻干方法，其特征在于，上述步骤2)包括将步骤1)中的混合物在-70℃至-90℃的温度下冷冻后冻干3天至7天的步骤。技术总结本发明涉及一种可以保留细胞外囊泡的功能以及特性的细胞外囊泡冻干保护组合物以及利用其的细胞外囊泡冻干方法。本发明将海藻糖以及蔗糖添加到细胞外囊泡冻干工序中，从而可以解决现有冻干保护剂存在的结晶形成以及复溶能力减少的问题，同时保持细胞外囊泡固有的标志物、功能因子的表达以及治疗效果，因此可以以各种方式应用于生产利用细胞外囊泡的各种治疗剂。技术研发人员：车栽旼,姜又荣,金恩㜯,愼恩敬,潘在复受保护的技术使用者：仁川大学校产学协力团技术研发日：技术公布日：2024/3/27