一种透骨草缓释杀螨精油的制备技术及其评价方

本发明涉及生物医药，尤其涉及一种透骨草缓释杀螨精油的制备技术及其评价方法。背景技术：1、螨类(mites)是一种个体微小的节肢动物，普遍存在于人类的居住环境，储藏于粮食中或寄生于人和动物体内和体表，严重影响人类生活质量。目前国内外对农业螨类的研究比较深入，特别是对农业螨类的防控，化学防制、遗传防制和生物防制都有较系统的研究，但是对医学螨类的研究不够深入。医学螨类主要包括尘螨、疥螨、蠕形螨等。可对人体造成多种危害。其中危害最为严重的是尘螨，它广泛存在于家庭环境当中。尘螨的代谢产物是强烈的变应原，诱发ige介导的过敏反应，如螨性哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎和慢性荨麻疹等，与人类健康密切相关，对儿童尤甚。目前普遍认为尘螨是屋尘中的主要变应原，80％的过敏性患者对尘螨过敏。而降低环境中的尘螨数量可有效阻止和减少过敏性疾病的发生，所以对于尘螨的防制受到了普遍的重视，也开发出了许多防螨抑螨的产品。农业螨类和医学螨类的生存环境截然不同，导致对农业螨类的防制方法不能应用在医学螨类上，否则会导致严重的环境污染问题。现有对环境螨类的主要防制措施是研发天然植物除螨剂，该类制剂环境残留小，对人体无危害。2、然而，经实际检测，市场上各类除螨剂的使用效果都与宣传效果严重不符，且缺乏权威的质量检测证明。植物除螨剂的主要制作原料为植物精油，植物精油绿色、天然、环保、易挥发，可直接作用于人体。精油的优点还在于其抗菌、抗微生物及抗病毒的特性。我国药用植物资源广泛，从中筛选出有效的植物作为原材料生产除螨精油，不但可以保障生命健康，对发扬中医药也有重要意义。3、尽管除螨精油具备以上优点，且在日化、食品、医疗等领域有广泛应用，但是目前除螨精油行业仍面临得率低、浓度低、利用率低、贮存率低等痛点问题，中草药精油得率普遍低于2％且尚未有变革性提高得率的技术；提取到的中草药精油中有效成分含量难以突破95％；目前沿用的提取技术对原料的利用率仅为50％～60％，精油贮存阶段仍有较大的损失，损失率约为20％～30％，在生活中的长效利用受到限制。4、植物除螨精油往往由易挥发有机物组成，通过吸附、包埋等方法可以调节植物精油的释放。为了克服天然植物精油现存一系列问题，尤其高挥发性，目前普遍采用微胶囊技术对精油进行缓释处理，实现对精油的保护作用。在微胶囊的制备过程中，壁材和制备方法是两大关键影响因素。微胶囊由芯材与壁材两部分组成，通常将植物精油作为芯材包合在微胶囊内，外侧的壁材对精油形成保护层，精油缓释微胶囊通常采用多糖类或将多糖与蛋白质类混合使用作为壁材，如β–环糊精、海藻酸钠以及壳聚糖。根据精油的物理属性、使用方式等差异，所选择的壁材随之改变，所使用的微胶囊制备方法也随之而变化。传统的微胶囊制备方法分为物理法、化学法、物理化学法，包括包结络合法、喷雾干燥法、单凝聚法、复凝聚法、粉末床法等。壳聚糖是天然的聚阳离子多糖类物质，由于其成本低，无毒，具有良好的抑菌性、吸附螯合性、生物相容性、生物安全性和生物可降解性等独特的理化性质，表现出对黏膜表面的粘附作用，能够瞬时开启上皮细胞之间的紧密连接促进药物吸收等特点，包被精油后得到的微球产量高，包封率高，且能够有效延缓精油的释放，被广泛应用于生物医学和制药行业，故本发明选取壳聚糖作为包被透骨草精油的壁材。技术实现思路1、为解决背景技术中所提出的技术问题，本发明提供一种透骨草缓释杀螨精油的制备技术及其评价方法。2、本发明采用以下技术方案实现：一种透骨草缓释杀螨精油，包括质量比为19.8％壳聚糖微球溶液，0.2％的透骨草精油、26.2％的二氯甲烷、1％的乳化剂、51.1％的液体石蜡和1.7％的固化剂。3、优选的，所述壳聚糖微球溶液由壳聚糖微球和2％乙酸溶液混合而成。4、优选的，所述乳化剂由450μl司盘-80和50μl吐温-80构成，乳化剂在液体石蜡中的浓度为2％。5、优选的，所述固化剂为0.8ml且浓度为50％戊二醛。6、本发明还提出了壳聚糖微球包被透骨草精油的制备方法，包括如下步骤：7、步骤1、精密称定壳聚糖粉末0.2g，溶于9.8g的2％乙酸溶液中，形成2％的壳聚糖溶液，放置于磁力搅拌器中搅拌，使其充分溶解，作为水相；8、步骤2、量取450μl司盘-80和50μl吐温-80，混合均匀，形成乳化剂9、步骤3、将乳化剂缓慢加入步骤1中搅拌的水相中，滴加时需控制转速为2500rpm，搅拌60min；10、步骤4、精密称取0.1g精油，加入10ml二氯甲烷，作为油相11、步骤5、将油相逐滴、缓慢加入步骤3形成的混合溶液中，滴加时控制转速为2500rpm，搅拌90min后静置30min观察是否分层，如分层，视具体情况延长搅拌时间，制成o/w初乳。12、步骤6、重新量取450μl司盘-80和50μl吐温-80，混合成乳化剂，再量取24.5ml液体石蜡加入乳化剂中，混合均匀后搅拌，再逐滴加入制成的o/w初乳，继续搅拌，完成乳化；13、步骤7、乳化60min后仍以600rpm继续搅拌，逐滴缓慢加入0.8ml戊二醛进行固化；14、步骤8、固化一定时间后离心，离心后保留下层沉淀，将其先用石油醚冲洗3次，再用2％亚硫酸氢钠冲洗2次，然后用异丙醇冲洗1次，蒸馏水洗涤、抽滤,最后真空干燥，得到黄色粉末。15、优选的，所述步骤1中设置转速2500rpm，搅拌时间30min。16、优选的，所述步骤6中混合均匀后在600rpm下搅拌10min，加入制成的o/w初乳，600rpm继续搅拌60min，完成乳化。17、优选的，所述步骤8中，固化120min后，在4000r/min的条件下离心30min。18、本发明还提出了壳聚糖微球包被透骨草精油的评价方法，包括如下步骤：19、将壳聚糖粉末溶于2％乙酸溶液，以2％乙酸溶液为对照在200～400nm波长范围内进行紫外扫描，结果显示在287nm处有稳定且强的吸收峰，所以选择287nm为测定波长；20、精密称取透骨草精油0.02g用无水乙醇定容到25ml容量瓶中，再精密量取容量瓶中溶液5ml定容至25ml，作为储备液；21、分别量取储备液1、2、3、4、6ml用无水乙醇定容到10ml容量瓶中，摇匀，分别测定吸光度(a)；以a值为纵坐标，透骨草精油浓度c为横坐标，绘制标准曲线，得到回归方程a＝2.3763c-0.0083，r2＝0.9996，透骨草精油在0.0250～0.0980mg/ml之间线性良好；22、精密称取壳聚糖微球包被的透骨草精油，在287nm处测定精油的含量.计算透骨草精油微球的产率(y1)、包油率(y2)、载油率(y3)；23、24、以y1、y2、y3为指标，对透骨草精油壳聚糖微球的制备进行综合评分，其中：25、透骨草精油微球产率(y1)越高，壳聚糖包被挥发油效果越好，制剂越稳定；26、微球包油率(y2)说明精油得率越高，证明微球的包被效果越好；27、其中，y1、权重系数定为0.5，y2、y3权重系数均设定为0.25；28、综合评分(y)＝50％×y1+25％×y2+25％×y3。29、本发明提出的一种透骨草缓释杀螨精油的制备技术，结合透骨草精油的特性，以壳聚糖作为包载材料，采用复乳-乳化交联法制备透骨草精油壳聚糖微球，该技术实现了92.5％的微球产率，包油率达到了32.38％，载油率达到了9.07％，实现了精油长达200min的缓释作用。30、相比现有技术，本发明的有益效果在于：31、本发明将透骨草精油制备成壳聚糖微球，并对其理化性质进行了表征，考察并验证了透骨草精油壳聚糖微球的缓释作用良好，对尘螨的杀灭效果明显。本发明为天然植物除螨精油的缓释开发提供了新思路。32、本发明制得的壳聚糖微球包被透骨草精油能在保证杀螨效果的基础上延缓精油的释放时间且制备过程中乳化剂的添加量很高，o/w/o型乳液中还有大量的水，对环境及人体的危害极低。33、本发明制备的透骨草精油壳聚糖微球是由水相、油相和乳化剂、交联剂等组成的混合物干燥后的产物，其平均粒径在30-60um，可以提高精油的利用度，同时改善精油的稳定性并降低药物的挥发性，在保证杀螨率的同时达到缓释的效果。34、本发明以壳聚糖作为透骨草精油的载体，透骨草精油为油相制剂，通过加入乳化剂和固化剂提高体系乳化和交联的能力，制备出有效改善精油缓释作用的最佳配方，并对其进行了理化性质表征，考察其稳定性，证实其杀灭尘螨的效果，为透骨草精油和壳聚糖微球的广泛应用提供科学依据。